Fare Tails Genomik DNA izolasyonu

Özet

Özet

Protokol

1. Kuyruk parçaları (3mm) ve işareti kulakları kesin.
2. 720 m l STE ve 30 m l Proteinaz K (10 mg / ml stok) ekleyin.
3. 55 inkübe ° C ısıtma bloğu ve vorteks her saat 3 saat için 10 saniye boyunca en yüksek hızda.
4. 70 ° C'de 5 dakika proteinaz K inaktive.
5. 5 dakika boyunca buz üzerinde Quench.
6. Tam hızda 10 dakika kuyruk DNA santrifüjleyin.
7. 720 m l Isopropanol içeren yeni bir tüp içine süzün .  
8. Çökelme DNA tersini tüp veya vorteks.
9. 5 dakika tam hızda DNA aşağı spin. Süpernatantı.
10. Pelet% 70 etanol ile yıkayın.
11. Genomik DNA 5 dakika tam hızda dönerler. Süpernatantı.
12. DNA 1-2 dakika kurumasını bekleyin.
13. Pelet boyutuna bağlı olarak 100-200 m l DNA süspanse edin.
14. Yeri tüp 55 ° C 'de 1 saat süreyle DNA çözülme kolaylaştırmak.  

Malzemeler

Name	Company	Catalog Number	Comments
STE	Buffer			100 mm Tris; pH 8.5 /5 mM EDTA /0.2% SDS /200 mM NaCl / in H2O
TE	Buffer			100 mM Tris; pH 5.0 /1 mM EDTA /10 mM NaCl