ネズミ尾リンパ浮腫モデル

要約

リンパ浮腫はリンパ機能障害によって引き起こされる四肢腫脹である。リンパ浮腫の慢性マウステールモデルと、尾部への遺伝的貨物輸送のための組織ナノトランスフェクション技術(TNT)の新しい使用について述べています。

要約

リンパ浮腫はリンパ機能障害によって引き起こされる四肢腫脹である。影響を受けた四肢は、体液、脂肪、線維症の蓄積のために拡大する。この病気の治療法はありません。尾のベース付近での皮膚の焦点全体の切除を用いたマウステールモデルは、尾の腫脹をもたらし、リンパ浮腫を研究するために使用されてきた。しかし、このモデルは、血管を含み、結果的に尾壊死および早期の尾の腫脹分解能をもたらし、その臨床的翻訳性を制限する。慢性マウス尾リンパ浮腫モデルは、15週間にわたって持続的なリンパ浮腫と尾部への信頼性の高い灌流を誘発する。従来のマウス尾リンパ浮腫モデルの強化には、1)外科顕微鏡を用いた正確な全厚切除およびリンパ切開、2)高分解能レーザースペックルを用いた術後動脈および静脈灌流の確認、および3)インドシアニングリーン近赤外レーザーリンパ管造影を用いた機能評価が含まれる。また、新しい非ウイルス、経皮的、マウス尾脈管構造への遺伝的貨物の焦点送達のために組織ナノトランスフェクション技術(TNT)を使用しています。

概要

リンパ浮腫はリンパ機能障害によって引き起こされる四肢腫脹である。影響を受けた四肢は、体液、脂肪、線維症^の蓄積のために拡大する。リンパ浮腫は、世界中で2億5000万人の人々に影響^を与えます^2,3,⁴.乳癌、黒色腫、婦人科/泌尿器腫瘍、肉腫などの固形悪性腫瘍の治療を受ける患者の20〜40%がリンパ浮腫^2、4、5を発症すると推定される。リンパ浮腫による罹患率は、再発性感染、疼痛、および変形⁶を含む。この進行性の生涯にわたる病気の治療法はありません。現在の治療法はvariaby有効⁷であり、理学療法士による完全な鬱血療法、切除処置、および血管導入リンパ節移移およびリンパバイパス7、8、9、10、11、12、13、14を含む微小手術を含む。

プロトコル

このプロトコルは、施設の動物研究倫理委員会のガイドラインに従っています。すべての動物実験は、インディアナ大学医学部の施設動物のケアと使用委員会によって承認されました。動物は、食べ物と水のアドリビタムと12時間の明暗サイクルの下で収容されました。

1. マウスの尾リンパ球の外科的破壊

1. 男女分布の8週齢のC57BL/6マウスを使用してください。
2. 100%酸素中の3-4%のイオブルランを有する誘導室の全身麻酔下にマウスを置き、その後、処置中に1〜3%で維持沈下した。
3. 0.5 mg/kg 持続放出(SR)ブプレノルフィンを皮下に投与して疼痛制御を行う。
   注: ポストオペで投与された追加の鎮痛薬: Carprofen 1回 24 時間ごとに少なくとも 48 時間とブピバカインは、切開が行われた後、または切開を閉じる前に一度, 皮膚の端に滴下することによって適用されます (4 – 6 時間まで続きます).
4. マウスをドーサリーに置き、70%イソプロピルアルコールで尾を準備します。
5. キャリパーを使用して、尾部のベースから20mmから始まる5mm増分で手順の前に尾の直径を測定します。これらの測定値は、切り捨てられたコーン方程式³⁷を使用して体積を計算するために使用されます。
6. ベースから尾部20mmに3mmの円周切除をマーク....

結果

持続的なリンパ浮腫のマウス尾モデルの技術を 図1に示す。この図は、マウスの尾型モデルの関連する解剖学を示しています。 図2 は、リンパ浮腫誘導後のマウス尾部における進行性の腫脹および持続性持続性リンパ浮腫を示す。マウスの尾部の体積は、切り捨てられたコーン方程式で計算されるように、第4週でピークを?.......

ディスカッション

リンパ浮腫は、原発(先天性)または二次(気中原性リンパ)傷害^38、39に分類される。二次リンパ浮腫は、症例の99%を含む^39.二次リンパ浮腫は、最も一般的に感染(フィラリア症)またはリンパ節切術または放射線による事後の治療^によって引き起こされる^4,39.翻訳動物モデルは、リンパ12次16>?.......

資料

Name	Company	Catalog Number	Comments
Surgical Microscope	Leica, Wetzlar, Germany	MSV266
Adherent Dressing (Tegaderm)	3M, St. Paul, Minn.	1626W
Laser speckle (Pericam PSI System )	Perimed AB, Stockholm, Sweden)	PSIZ
Near-infrared laser (LUNA)	Stryker (Formerly Novadaq Technologies, Toronto, Canada)	LU3000
C57BL/6 mice	Jackson Laboratories	000664
Micro-Adson Forceps - 1x2 Teeth	Fine Science Tools (USA) Inc.	11019-12
V-Hook	Fine Science Tools (USA) Inc.	18052-12
Scalpel SS NO15	Fischer Scientific	29556
Disposable Needle 30GX1	Fischer Scientific	305128
Operating Scissors	Fischer Scientific	12-460-796
Surgi-Or Jeweler's Forceps, Sklar 4-1/2 in	Fischer Scientific	50-118-4255
Spring Scissors - Straight/Sharp-Sharp/8mm Cutting Edge	Fine Science Tools (USA) Inc.	15024-10
Cardiogreen	Sigma	I2633-25MG
IsosulfanBlue (Lymphazurin)  50 mg/5ml	Mylan	67457-220-05