Un modèle de lymphœdème de la queue murine

Résumé

Le lymphœdème est un gonflement des extrémités causé par un dysfonctionnement lymphatique. Nous décrivons un modèle chronique de la queue murine du lymphœdème et la nouvelle utilisation de la technologie de nanotransfection tissulaire (TNT) pour l’administration de cargaisons génétiques à la queue.

Résumé

Le lymphœdème est un gonflement des extrémités causé par un dysfonctionnement lymphatique. Le membre affecté s’agrandit en raison de l’accumulation de liquide, d’adipeux et de fibrose. Il n’y a pas de remède pour cette maladie. Un modèle de queue de souris qui utilise une excision focale de la peau de pleine épaisseur près de la base de la queue, entraînant un gonflement de la queue, a été utilisé pour étudier le lymphœdème. Cependant, ce modèle peut entraîner une nécrose vasculaire de la queue et une résolution précoce de l’enflure de la queue, limitant sa traductibilité clinique. Le modèle de lymphœdème chronique murin de la queue induit un lymphœdème soutenu sur 15 semaines et une perfusion fiable à la queue. Les améliorations apportées au modèle traditionnel de lymphœdème murin de la queue comprennent 1) une excision précise de pleine épaisseur et une coupure lymphatique à l’aide d’un microscope chirurgical, 2) la confirmation de la perfusion artérielle et veineuse postopératoire à l’aide de mouchetures laser à haute résolution et 3) une évaluation fonctionnelle à l’aide d’une lymphangiographie laser proche infrarouge vert indocyanine. Nous utilisons également la technologie de nanotransfection tissulaire (TNT) pour une nouvelle livraison focale non virale, transcutanée et focale de cargaison génétique au système vasculaire de la queue de souris.

Introduction

Le lymphœdème est un gonflement des extrémités causé par un dysfonctionnement lymphatique. Le membre affecté s’agrandit en raison de l’accumulation de liquide, d’adipeux et de fibrose¹. Le lymphœdème touche 250 millions de personnes dans le monde^2,3,4. On estime que 20 à 40% des patientes qui subissent un traitement pour des tumeurs malignes solides, telles que le cancer du sein, le mélanome, les tumeurs gynécologiques / urologiques ou les sarcomes, développent un lymphœdème^2,4,

Protocole

Le protocole suit les lignes directrices du comité d’éthique de la recherche animale de l’établissement. Toutes les expériences sur les animaux ont été approuvées par le comité institutionnel de soins et d’utilisation des animaux de l’École de médecine de l’Indiana. Les animaux étaient logés sous un cycle lumière-obscurité de 12 heures avec de la nourriture et de l’eau ad libitum.

1. Perturbation chirurgicale des lymphatiques de la queue de souris

1. Utilisez des souris C57BL/6 âgées de huit semaines de répartition égale entre les sexes.
2. Placer une souris sous anesthésie générale dans une chambre d’induction avec 3-4% d’iso....

Résultats

La technique du modèle de queue de souris pour le lymphœdème soutenu est illustrée à la figure 1. La figure montre l’anatomie pertinente du modèle de queue de souris. La figure 2 montre l’enflure progressive et le lymphœdème persistant soutenu dans la queue de la souris après l’induction du lymphœdème. Le volume de la queue de souris, tel que calculé par l’équation du cône tronqué, culmine à la semaine 4 e.......

Discussion

Le lymphœdème est classé comme une lésion primaire (congénitale) ou secondaire (lymphatique iatrogène)^38,39. Le lymphœdème secondaire représente 99% des cas³⁹. Le lymphœdème secondaire est le plus souvent causé par une infection (filariose) ou un traitement post-oncologique par lymphadénectomie ou radiothérapie^4,39. Un modèle animal translationnel est difficile pour .......

matériels

Name	Company	Catalog Number	Comments
Surgical Microscope	Leica, Wetzlar, Germany	MSV266
Adherent Dressing (Tegaderm)	3M, St. Paul, Minn.	1626W
Laser speckle (Pericam PSI System )	Perimed AB, Stockholm, Sweden)	PSIZ
Near-infrared laser (LUNA)	Stryker (Formerly Novadaq Technologies, Toronto, Canada)	LU3000
C57BL/6 mice	Jackson Laboratories	000664
Micro-Adson Forceps - 1x2 Teeth	Fine Science Tools (USA) Inc.	11019-12
V-Hook	Fine Science Tools (USA) Inc.	18052-12
Scalpel SS NO15	Fischer Scientific	29556
Disposable Needle 30GX1	Fischer Scientific	305128
Operating Scissors	Fischer Scientific	12-460-796
Surgi-Or Jeweler's Forceps, Sklar 4-1/2 in	Fischer Scientific	50-118-4255
Spring Scissors - Straight/Sharp-Sharp/8mm Cutting Edge	Fine Science Tools (USA) Inc.	15024-10
Cardiogreen	Sigma	I2633-25MG
IsosulfanBlue (Lymphazurin)  50 mg/5ml	Mylan	67457-220-05