癌切除手術時の静脈内麻酔の in vivo マウスモデル

要約

本稿では、マウスの癌切除手術中の全静脈麻酔(TIVA)をモデル化する方法について説明しています。目標は、がん患者への麻酔送達の重要な特徴を再現することです。本手法により、切除術後のがん再発に麻酔技術がどのように影響するかを調べることができます。

要約

麻酔は、診断および治療手順に使用される癌治療の日常的な要素です。麻酔技術は最近、おそらく癌細胞の挙動と免疫細胞機能に影響を与えるアドレナリン作動性炎症反応の調節を通じて、長期的な癌転帰に影響を与えることに関与しています。新たな証拠は、プロポフォールベースの全静脈麻酔(TIVA)が、吸入揮発性麻酔と比較した場合、長期的な癌転帰に有益である可能性があることを示唆しています。ただし、入手可能な臨床所見には一貫性がありません。関与する根本的なメカニズムを特定する前臨床試験は、洞察を促進する臨床試験の設計を導くために非常に重要です。麻酔のほとんどの前臨床モデルは、 in vivo 研究における麻酔の使用から外挿されており、主要評価項目としての麻酔自体の影響を研究するように最適に設計されていません。.この論文では、がん患者における臨床送達の重要な側面を再現する乳がん切除のマウスモデルでプロポフォール-TIVA麻酔を送達する方法について説明しています。このモデルは、さまざまな種類のがんのがん転帰に対する麻酔の作用機序を研究するために使用でき、前臨床麻酔研究の他の非がん領域に外挿することができます。

概要

がん患者の60%以上が外科的切除のために麻酔を受けています¹。現在、癌患者に使用される麻酔の選択を決定する特定の臨床ガイドラインはありません。麻酔科医の調査では、がん手術中を含め、揮発性ベースの麻酔を好むことが示されています^2,3。しかし、がん手術中にプロポフォールベースの全静脈麻酔(TIVA)を使用すると、揮発性麻酔と比較して術後転帰(無増悪生存期間、全生存期間)の改善と関連している可能性があるという証拠が増えています⁴。その後の臨床試験では、矛盾する結果を報告し続けています⁵、^6、7、8。これらの知見は、がん関連アウトカムに対するさまざまな麻酔薬の機構的効果をよりよく理解するための前臨床試験の必要性を裏付けている。

ただし、がん手術をモデル化した in vivo 研究では、麻酔が手順の付随的な部分であることがよくあります。麻酔の選択の理論的根拠は、多くの場合、実験デザインの焦点ではなく、がん....

プロトコル

すべての動物実験は、モナッシュ大学の施設内動物管理および使用委員会の承認の下で実施されました。この研究では、6〜8週齢の雌のBalb / cマウスを使用しました。

1.がん細胞を準備する

1. 腫瘍細胞を培地で培養する。66cl4マウス乳がん細胞を、10%FBSと200 mMグルタミンを含むα-MEMで培養します。細胞はマイコプラズマに対して陰性のテキストを送るべきです。オプション:生物発光イメージングにホタルルシフェラーゼを発現するように安定に形質導入された細胞を使用して、切除手術後の癌再発モニタリングを可能にします¹¹ (ステップ4を参照)。
   注:上記の細胞株と培地は、この研究で使用されました。
2. 5%_CO2で37°Cで細胞を増殖させる。細胞をフード内で<80%のコンフルエントで無菌的に継代する。最適な in vivo 結果を得るために、対数増殖期に低継代細胞を使用してください。
3. 接着細胞を 10 mM EDTA を含む PBS 中の 0.5 mg/mL トリプシンで持ち上げます。T75フラスコの場合は2 mL。持ち上げたら、トリプシンを不活性化する培地を加え、PBSで細胞を洗浄します。
4. 血球計算盤を使用して細胞をカウントします。注射のために細胞をPBSで希釈する。66cl4乳がん細胞の場合、マウスあたり20....

結果

この方法は、マウスにおける癌切除手術中のプロポフォールによる全静脈麻酔(TIVA)のモデルを記載する。このマウスモデルでは、シリンジポンプ(図1A、B)を使用して静脈内カテーテルを介してプロポフォールを送達し、癌手術の麻酔の臨床現場でTIVAの送達を再現します。シリンジポンプの使用は、吸入麻酔による最初の誘導から静脈内送達への迅速な変換?.......

ディスカッション

この研究では、全静脈麻酔(TIVA)を投与するためのプロトコルについて報告します 乳がんのマウスモデルでプロポフォールを使用して、がん手術を必要とする患者におけるTIVAの臨床診療の重要な側面を再現します。このプロトコルにより、サイトカインレベルとがん再発の測定を含む、がん進行のマウスモデルにおけるがん手術後の短期および長期の両方の臨床的に関連する転帰の調査が可?.......

資料

Name	Company	Catalog Number	Comments
0.9% saline	Fresnius Kabi	AUST R 197198
Artery forceps	Proscitech	TS1322-140
Buprenorphine	Temgesic	TEMG I
Heated surgical mat	Custom	-
Hypodermic needle (30 G, 1 mL insulin syringe)	Terumo	NN3013R
IVIS Lumina	PerkinElmer	126274
Luciferin	Promega	P1041/2/3
Polyurethane catheter	Intramedic	427401
Povidone Iodine	Betadine	AUST R 29562
Propofol Lipuro, 2%	Braun	3521490
Sevoflurane	Baxter	ANZ2L9117
Sevoflurane vaporiser	Vetquip	VQ1334
Sterile gauze	Multigate Medical Products	11-600A
Surgical scissors	Proscitech	TS1044
Sutures, 5-0 nylon	Dynek	V504
Syringe pump	Harvard Apparatus	70-4500
Syringes (1 mL)	Terumo	SS+01T