複合ニキビのラットモデル

要約

このプロトコルは、オレイン酸と Cutibacterium acnesを使用してラットの皮膚ににきびの炎症を誘発する手順を概説しています。

要約

尋常性ざ瘡は、顔、首、胸に面皰、丘疹、膿疱が存在することを特徴とする一般的な慢性皮膚疾患です。尋常性ざ瘡の炎症をシミュレートするために、このプロトコルでは、オレイン酸と Cutibacterium acnes (C.acnes)を使用してラットの耳ににきびの炎症を誘発することにより、複合にきびげっ歯類モデルを確立するアプローチについて詳しく説明します。ラットを4つのグループにランダムに分けました:正常対照群(NC)、オレイン酸群(OA)で治療された耳、 アクネス菌 グループ(C.アクネス)で治療された耳、オレイン酸と アクネ菌 (OA+ アクネス)で治療された耳。過剰な皮脂産生を模倣するために、オレイン酸をOAおよびOA+ C.acnes グループのラットの耳に25日間塗りました。

21日目から25日目にかけて、 アクネ菌 懸濁液を アクネ菌 群およびOA+ アクネス 菌群のラットの耳に皮内注射し、ニキビの炎症を悪化させた。耳の厚さは、炎症の重症度の尺度として毎週測定されました。肉眼観察、ヘマトキシリンとエオシンの染色、免疫組織化学(IHC)を行った結果、OA群と OA+アクネス菌 群の耳が肥厚して硬直し、紅斑や面皰の存在を伴ったことが示された。さらに、丘疹は C.acnes およびOA+ C.acnes グループで観察されました。組織病理学は、OAおよびOA+ C.アクネス 群の毛包の角質増殖および拡張を示した。炎症細胞および膿瘍の浸潤は 、アクネ菌 およびOA+ アクネス菌 群の真皮に認められた。IHCの結果により、 C.acnes およびOA+ C.acnes グループの真皮における腫瘍壊死因子(TNF)-αのレベルの増加が確認されました。上記のすべての結果は、複合にきびげっ歯類モデルの成功した確立をまとめて示しています。

概要

尋常性ざ瘡は、顔面、首、胸部に面皰、丘疹、膿疱が存在することを特徴とする一般的な慢性皮膚疾患であり、重症の場合、結節、嚢胞、永久的な瘢痕に進行する可能性があります¹。疫学研究によると、にきびは世界人口の9.4%に影響を及ぼし、その結果生じる症状は深刻な身体的および心理社会的課題をもたらします^2,3。

にきびの病因は多因子性であり、皮脂の過剰産生、面皰形成、皮膚微生物叢による卵胞のコロニー形成、および毛様皮脂腺ユニット^の周囲の炎症性メディエーターの放出という4つの重要なプロセスが含まれます^4,5。皮脂分泌の増加により、過剰な不飽和遊離脂肪酸(UFA)が蓄積すると、^{ゲノム研究で示され}ているように、皮膚微生物叢(その1つがアクネ菌)の異常な繁殖に寄与します6。一方、皮膚微生物叢は皮脂を分解し、UFFAの濃度を高めることで、悪循環に陥ります⁷。さらに、過剰なUFFAは毛包の角質増殖を引き起こし、それが次ににきび

プロトコル

このプロトコールは、北京中医薬大学(No.2023033103-1183)から倫理承認を受けています。このプロトコルでは、12匹の雄のSprague-Dawleyラット(体重、208g±5g)を使用し、NC群(n = 3)、OA群(n = 3)、 C.acnes 群(n = 3)およびOA+ C.acnes 群(n = 3)の4つのグループに分けました。

1. ニキビモデルの開発

1. モデリングの前に、電子ノギス( 材料の表を参照)を使用してラットの耳の厚さを測定し、記録します。
   1. 電子ノギスの外側の顎を耳の外縁の中点に置き、外耳道に伸ばします。線に沿って 2/3 ポイントの太さと 1/2 ポイントの太さを記録します。各ポイントを3回測定し、耳の厚さと見なされる2つのポイントの厚さの平均値を計算します。
2. ラットの頭を片側に傾け、耳を上に向けて、50μLのオレイン酸( 材料の表を参照)を耳の腹側と背側に1日1回、25日間均等に塗布します。
3. 21日目から25日目まで、オレイン酸を塗布する毎日前に、4%イソフルランを使用してラットに麻酔をかけ、次に50μLの1×10⁷....

ディスカッション

にきびモデルの方法論と評価基準が明確ではなかったため、このプロトコルはにきびを研究する研究者に参照を提供することを目的としていました。マウスの耳のサイズが小さいことと、背中の毛の成長、脱毛クリームとシェーバーの使用によって引き起こされる干渉のために、ラットの耳はにきびのげっ歯類モデルを確立するためのより良い代替手段かもしれませ.......

資料

Name	Company	Catalog Number	Comments
Anaero-indicator	Mitsubishi, Japan	C-22
AnaeroPack	Mitsubishi, Japan	C-11, C-41
Columbia blood agar plate	BeNa Cuture Collection, China	BNCC330605
Constant temperature incubator	SHANGCHENG, China	303-0
Cotton swab	HYNAUT, China	_
Cutibacterium acnes	BeNa Cuture Collection, China	BNCC330605
Dako REAL EnVision Detection System, Peroxidase/DAB+, Rabbit/Mouse	DAKO, Denmark	K5007
disposable sterile injection needle	Zhejiang Oujian Medical Apparatus, China	_
Electronic scale	JINXUAN, China	A017
Electronic vernier caliper	Deli, China	DL90150
Oleic acid (Analytical reagent, AR)	Fangzheng, China	_
Sodium chloride injection	CR Double CRANE, China	Y2212241
SPSS Statistics	IBM, USA	26.0
sterile hypodermic syringes	Shandong weigao group medical polymer, China	_
TNF Alpha Monoclonal antibody	Proteintech Group,int, USA	60291-1-lg