このコンテンツを視聴するには、JoVE 購読が必要です。 サインイン又は無料トライアルを申し込む。

この記事について

  • 要約
  • 要約
  • 概要
  • プロトコル
  • 代表的な結果
  • ディスカッション
  • 開示事項
  • 謝辞
  • 資料
  • 参考文献
  • 転載および許可

要約

ここでは、涙腺機能障害のラットモデルを確立し、水欠損ドライアイの研究の基礎を提供します。

要約

水欠乏性ドライアイ(ADDE)は、涙液分泌の量と質が低下するドライアイ疾患の一種です。異常な涙液の分泌が長引くと、角膜の損傷や炎症など、眼の表面環境が乱れる可能性があります。重症の場合、ADDEは視力低下や失明を引き起こす可能性があります。現在、ドライアイの治療は点眼薬や理学療法に限られており、目の不快感の症状を緩和するだけで、ドライアイ症候群を根本的に治すことはできません。ドライアイにおける涙腺の機能を回復させるため、スコポラミンを誘発したラットの涙腺機能障害の動物モデルを作成しました。涙腺、角膜、結膜などの総合的な評価を通じて、ADDEの病態変化の全体像の解明を目指します。現在のドライアイマウスモデルと比較して、このADDE動物モデルには涙腺の機能評価が含まれており、ADDEの涙腺機能障害を研究するためのより良いプラットフォームを提供します。

概要

2021年までに、約12%の人がドライアイ1に罹患し、最も一般的な慢性眼疾患の1つとなっています。ドライアイは、病気に影響を与えるさまざまな要因に応じて、水欠乏ドライアイ(ADDE)と蒸発性ドライアイ(EDE)2の2つのタイプに分けることができます。ADDEはさらにシェーグレン症候群(SS)と非SSに分けられますが、臨床3ではドライアイ患者の大半が非SS患者です。慢性ドライアイの症状は、患者の視覚の質に深刻な影響を及ぼします。現在、DEDの従来の治療には、眼表面を滑らかにするための人工涙液の適用とまぶたの理学療法が含まれます。しかし、ドライアイ症候群は、多くの場合、完治しない可能性があります。したがって、ドライアイ疾患の病因を研究することは、新しい治療法や薬の開発にとって非常に重要です。ドライアイ症候群の動物モデルは、さらなる研究の基礎となる。

ドライアイ症候群4の動物モデルを構築するには、ホルモンレベルを変化させることで涙液分泌量を変化させるなど、さまざまな方法があります。例えば、ラットの精巣を摘出すると、アンドロゲン分泌が減少し、涙液分泌が増加し、涙液中の遊離分泌成分(SC)とIgAの濃度が低下する可能性があります

プロトコル

このプロトコルに従って実施されるすべての動物実験は、動物実験委員会(IACUC)の承認の下で実施されます。

1.動物の調製

  1. 体重160g±20gの健康な6週齢のSPF Wistar雌ラット12匹を調製します。
  2. 細隙灯と検眼鏡を使用して、すべてのラットの眼の状態を調べ、前眼部や網膜の病気がないことを確認します。
  3. 十分な餌と水源ですべてのラットを1週間飼育します。
  4. すべてのラットを正常なスコポラミン薬物濃度2.5mg/mL、スコポラミン薬物濃度5mg/mL、スコポラミン薬物濃度7.5mg/mLに無作為に割り分け、各群に3匹ずつ配置した。

2. 溶液調製

  1. スコポラミン臭化水素酸塩を0.9%塩化ナトリウム溶液に溶解して調製し、7.5 mg/mL、5 mg/mL、および2.5 mg/mLの濃度の溶液を作成します。
  2. スコポラミン臭化水素酸塩を含まない0.9%塩化ナトリウム溶液を調製し、ラットの対照群の注射として使用します。

3.機器と材料の準備

  1. 小動物顕微鏡を用意します。
  2. 針付き使い捨てシリンジ1....

代表的な結果

シルマーIテスト、SIT I
ラットの涙液量は、実験開始後0、3、5、7、11、15、19日目に測定した。実験結果から、対照群(0群)と比較してスコポラミン群(2.5群、5群、7.5群)の涙液分泌が有意に減少し、その差は統計学的に有意であった(P < 0.01)。2.5群、5群、7.5群の間に統計的有意性は認められなかった(P > 0.05)。日数(P > 0.05)に関して、異なるグループ間で有意差は観察されませんでし?.......

ディスカッション

水欠乏ドライアイ(ADDE)はドライアイの重要な種類であり、ドライアイ全体の人口の約1/3を占め17、ADDEの主な原因は涙腺の病理学的損傷と炎症です13。このタイプのドライアイの場合、最も一般的な臨床治療法は、症状を緩和するための人工涙液またはステロイドまたはシクロスポリン18の局所塗布ですが、涙腺の損傷に対する治療オプショ.......

開示事項

著者らは、この手順で使用される薬物および材料に関連する潜在的な利益相反を有していません。

謝辞

この研究は、広東省高レベル臨床重点専門分野(SZGSP014)および深セン自然科学基金会(JCYJ20210324125805012)の支援を受けました。

....

資料

NameCompanyCatalog NumberComments
0.9% sodium chloride solutionSJZ No.4 PharmaceuticalH13023201
4% paraformaldehydeWuhan Servicebio Technology Co., LtdG1113
Absolute ethanolSinopharm Chemical Reagent Co., Ltd.10009218
Fluorescein sodium ophthalmic stripsTianjin Yinuoxinkang Medical Device Tech Co., LtdYN-YG-I
Hematoxylin and eosinNanjing Jiancheng Bioengineering InstituteD006
Neutral balsamBeijing Solarbio Science & Technology Co., Ltd. G8590
ParaffinBeijing Solarbio Science & Technology Co., Ltd.YA0012
Periodic Acid-Schiff Staining KitBeyotime BiotechnologyC0142S
Schirmer tear test stripsTianjin Yinuoxinkang Medical Device Tech Co., LtdYN-LZ-I
Scopolamine hydrobromideShanghai Macklin Biochemical Co., LtdS860151
Small animal microscopeHead Biotechnology Co,. LtdZM191
XyleneSinopharm Chemical Reagent Co., Ltd.10023418

参考文献

転載および許可

このJoVE論文のテキスト又は図を再利用するための許可を申請します

許可を申請

さらに記事を探す

204

This article has been published

Video Coming Soon

JoVE Logo

個人情報保護方針

利用規約

一般データ保護規則

研究

教育

JoVEについて

Copyright © 2023 MyJoVE Corporation. All rights reserved