まず、孵化したばかりの成虫ショウジョウバエ200匹をプラスチック製の円筒形のケージに入れます。ケージの片側を通気のために多孔質の金属メッシュで密封し、もう一方をフルーツジュースと酵母ペーストの寒天プレートで密封します。注射当日は、ケージの寒天プレートを最小限の酵母ペーストを含むフルーツジュースプレートに交換します。
プレートを摂氏25度で1時間インキュベートして、胚を採取します。次に、プレートをケージから取り出して産卵を停止し、摂氏25度でさらに2時間インキュベートして、2〜3時間齢の胚を取得します。胚から卵殻を取り除くには、2ミリリットルの50%漂白剤溶液をフルーツジュースプレートに導入します。
絵筆を使用して、プレートから胚をそっと取り除き、30秒ごとに回転させながらプレートを2分間インキュベートすると、卵殻の除去効率が高まります。次に、胚と漂白剤の混合物を70マイクロメートルのナイロンセルストレーナーに注ぎます。胚を水筒で徹底的にすすぎ、残った漂白剤や酵母ペーストを取り除きます。
清潔なカミソリの刃を使用して、長方形のアガロースブロックを切断し、ブロックをスライドガラスの上に置きます。絵筆で、胚をストレーナーからゲルブロックに移し、優しくブラッシングしてブロックの中心線に沿って均一に分配します。次に、2本の脚をしっかりとテープで固定して1つの鋭い点を形成したピンセットを準備します。
解剖顕微鏡で、ピンセットを使用して個々の胚を摘み取り、ゲルブロックの延長されたエッジに沿って整列させます。10マイクロリットルのヘプタン接着剤を24 x 50 mmのカバースリップの中間点にピペットで固定します。ピペットチップを使用して、接着剤を0.5 x 3センチメートルの長方形の領域に広げます。
先端が平らなピンセットを使用して、接着剤でコーティングされたカバースリップを持ち上げ、胚の上にしっかりと保持し、接着剤側が約45度で胚に面するようにします。カバースリップをゲルブロックにそっと押し付け、胚が接着剤に触れるようにします。すばやく圧力を解放し、カバースリップを持ち上げます。
次に、新鮮なスライドガラスの中央に10マイクロリットルの水を分配します。胚ベアリングカバースリップをその上に置き、胚側が上を向くようにします。その後、胚ストリップの片方の端に40マイクロリットルのハローカーボンオイルを塗布します。
ハローカーボンオイルが胚の表面を覆うまでスライドに角度をつけます。
