マウスにおけるリントレブレブロナートキシンと疼痛検査によるイントレーブレブロナーチキュラー治療

この前処理の全体的な目標は、マウスを生成することであり、TRPV1チャネルは、脊髄領域の上に脱感作される。この方法は、神経薬理学的分野の主要な質問に答えることができます。.この技術の主な利点は、上脊髄選択的TRPV1脱感作が非常に簡単な方法で誘導できることである。

この手順を開始するには、ペントバルビタールナトリウム腹腔内でマウスを麻酔し、右反射の喪失をチェックします。皮下治療の場合は、体重10グラムあたり0.1ミリリットルの体積で首の後ろに20マイクログラム/ミリリットルでRTXを注入します。コントロールグループの場合は、同じ方法で車両を注入します。

使い捨ての27ゲージ針を金属管に通し、針の3〜3.5ミリメートルの先端を露出させる。次に、マウスの扁壁の骨を指でしっかりと保持します。頭皮の上で針を横に動かし、針の先端が縫合糸に引っ掛かるように矢状縫合を見つける。

先端を1ミリメートルほど右に動かし、その先端をロストラリーに動かして、冠状縫合を見つけます。その後、針をゆっくりと垂直に挿入します。RTX溶液を10秒間注入し、その後さらに10秒間保持します。

その後、針をゆっくり引き出し、マウスを自宅のケージに戻します。RTX注射の1週間後、試験の少なくとも60分前に、マウスを試験室に移す。試験の30分前に、環境に順応できるようにプレキシガラスケージにマウスを入れる。

そして、試験の20分前に、1キログラム当たり300ミリグラムでアセトアミノフェンをマウス腹腔内に投与する。小さな布袋にマウスをゆるく持ち、右後足のかかとに30ゲージの針を挿入します。ニードルを歩行パッドの近くに皮下に進め、1ミリリットル当たり0.05マイクログラムで20マイクロリットルのRTX溶液を注入します。

続いて、各5分間のブロックで、罹患した足のグラブログア領域における舐めと噛み付き行動の期間を測定する。RTX注射の1週間後、マウスを試験室に移します。プレキシガラスケージにマウスを置きます。

尾の基部から 1.5 センチメートルと 2.5 センチメートルでスポットをマークします。次に、マウスを小さな布袋にゆるく持ち、鈍いプローブでスポットに圧力を加えます。250グラムのカットオフ圧力は、組織の損傷を避けるために課されることに注意してください。

エスケープ動作を引き出すために必要な圧力を決定し、2つのスポットで決定された圧力を平均化することによって、ノシケイプ閾値を計算します。15 分ごとに手順を繰り返します。ベースラインを得た後、1キログラム当たり300マイクログラムのアセトアミノフェンを腹腔内にマウスに投与し、90分に達するまで15分ごとに尾圧試験を繰り返す。

これら2つの図は、RTXの板腔内注射に対するSCまたはICV処理マウスの応答性を示す。車両処理マウスの舐めと噛み付き行動は、最初の10分間で顕著であった。SC前処理マウスは舐めや噛み付きの挙動を全く示さなかったが、ICV前処理マウスは通常RTXの足底注入に反応した。

さらに、アセトアミノフェンの腹腔内投与は、ICV処置マウスの車両ICV処置の舐めおよび噛み付き行動を減少させたが、RTX ICV処置マウスでは減少しなかった。このグラフは、尾圧試験で1キログラムあたり300マイクログラムでアセトアミノフェンの鎮痛効果を示しています。アセトアミノフェンは、両方の試験で前処理マウスの車両の聴薬応答を減少させたが、RTXでICVを前処理したマウスではアセトアミノフェンの鎮痛効果が阻害された。

一度習得, この ICV 注射技術は、他の薬を適用することができます。.Resiniferatoxinを使用すると非常に危険であり、取扱い時に保護のためにゴム手袋とメガネを使用することを忘れないでください。