交差神経移植手術のための脊髄前ルートを介した直接吻合のマウスモデル

このプロトコルは、この手術の根底にある内部神経メカニズムを研究するのに役立つ、交差C7神経移植手術を受けるマウスモデルを確立することができます。したがって、このプロトコルの主な利点は、直接神経の成功率を向上させ、滑らかにすることができ、臨床手術を非常によくシミュレートできることです。このプロトコルは、研究に適した質量モデルを提供します。

もちろん、神経移植と研究結果は、手術後の患者の回復を早めるために応用できます。鎖骨の上縁を横切開し、鎖骨上窩と胸骨を露出させた後、胸膜、心臓、血管を傷つけずに胸骨を頭から尾まで中央線に沿って切開します。鍼で作られた2つの小さなカスタマイズされたリトラクターの助けを借りて、胸骨を静かに引っ張ってから、胸骨の舌骨筋を気管と食道の上に引っ込めます。

左内頸静脈の外側の端で、筋膜と脂肪組織を外側に引っ張り、左腕神経叢を露出させます。次に、3つの枝を持つC5神経とC6神経で構成される上幹を探します。C7神経と下体幹からなる中幹を、上半身からマウスの尾までに沿って特定します。

鎖骨の下のコードレベルまで、中央の幹の前方および後方の分割を解剖します。バンナススプリングシザーズを使用して、外側索および後索との合流点でC7神経を切除し、次にC7神経をトリミングして、各分割の長さが同じになるようにします。次に、C6節のレベルで横隔神経を傷つけずに前斜角筋を切断し、C7神経根を露出させます。

次に、C7神経を抜いて、左のC6層腹側を切除します。前述したように、右のC7神経を採取します。左C7神経を移植する前に、両側の椎体の横にある筋長大腸菌を部分的に除去します。

次に、気管、食道、椎体の間のスペースを分離して拡張します。完了したら、7-0ナイロン縫合糸で作られたループを椎体の右側から脊髄前歯根を通って左側に送り、ナイロン縫合糸ループで左のC7神経をつなぎ、脊髄前根を介して神経を右側に導きます。気管と食道を引っ込めた後、12-0ナイロン縫合糸を使用して、左C7神経の前部と後部を右C7神経根に張らずに適合させます。

神経の周りの神経上膜を4〜5針縫合して、神経を強くコーティングします。縫合が完了したら、滅菌生理食塩水で創傷を灌漑し、続いて滅菌ガーゼで乾燥させ、次に胸骨を縫合し、5-0モノフィラメント縫合糸を使用して皮膚を閉じます。代表的な解析では、再生に成功したC7神経が表示されています。

CC7手術後4週間から、転移したC7神経のミエリン鞘の厚さは徐々に増加し、CC7手術後8週間の対照群とほぼ同等であった。対側C7神経移植後の筋電図解析では、大胸筋に記録された活動電位と指伸筋の筋電図による神経再生が認められた。手術後3週間で、上腕三頭筋に複合筋活動電位またはCMAPが出現し、4週目と8週目で増加しました。

大胸筋の平均振幅は4週間から8週間に有意に増加した。同様に、上腕三頭筋、上腕二頭筋、および指伸筋の平均振幅は、8週間で有意な改善を示しました。コレラ毒素サブユニットBまたはCTB逆行性標識は、転移したC7神経が腹角からの運動線維と脊髄の後根神経節からの感覚線維を含むことを示しました。

さらに、CC7手術後の動物の行動変化をモニターしました。シリンダー試験では、TBIとCC7の併用群は、CC7手術後4週間と8週間の両方で、TBI群よりも障害のある前肢の使用率が有意に高いことを示しました。グリッド歩行試験では、CC7手術後4週間で、TBIとCC7の併用群はTBI群よりも低いエラー率を示しました。

8週目時点で、TBIとCC7の併用群のエラー率はTBI群よりも有意に低く、CC7手術により患肢の運動機能が改善したことが示された。C7神経をできるだけ軽く分離して十分な神経長を得ることが、両側C7神経の直接吻合を実現するための鍵となります。この技術は、中枢神経系および末梢神経系損傷後の神経伝達を強制する場合の神経メカニズムと層状リハビリテーションの図解に貢献します。