現在の研究範囲は、腸管上皮細胞の増殖と分化における概日リズムの役割を調べることです。私たちは、概日時計が細胞の増殖や腸管幹細胞からの分化を制御しているのかどうかを調べようとしています。このプロトコールは、生物発光アッセイを用いた三次元オルガノイドの概日研究のためのリアルタイムモニタリング法を示しています。
従来の二次元細胞培養で生物発光アッセイを行うのとは異なり、このアプローチにより、より生理学的に関連性の高いオルガノイドモデルで概日リズムとその機能を調べることができます。私たちの発見は、幹細胞が豊富な条件で概日リズムが乱れていることを示し、分化したヒト腸オルガノイドでは強い概日振動を示しており、概日時計機構が幹細胞から分化細胞にリモデリングされていることを示唆しています。患者由来のオルガノイドと概日生物発光レポーターの使用は、末梢臓器の概日リズムやさまざまな病状の理解を深めるのに役立ちます。