ניטור תנודות צירקדיות עם כתב ביולומינסנציה באורגנואידים

היקף המחקר הנוכחי שלנו הוא לחקור את תפקידם של מקצבים צירקדיים בהתרבות ובהתמיינות של תאי אפיתל במעי. אנו מנסים לקבוע אם השעון הביולוגי מווסת את התרבות התאים ואת התמיינותם מתאי גזע במעי. פרוטוקול זה מציג שיטת ניטור בזמן אמת למחקרים צירקדיים באורגנואידים תלת ממדיים באמצעות בדיקת ביולומינסנציה.

שלא כמו ביצוע בדיקות ביולומינסנציה בתרבית תאים דו-ממדית קונבנציונלית, גישה זו מאפשרת לנו לחקור מקצבים צירקדיים ותפקודיהם במודל אורגנואידים רלוונטי יותר מבחינה פיזיולוגית. הממצאים שלנו מראים שיבושים בשעון הביולוגי בתנאים מועשרים בתאי גזע תוך הדגמת תנודות צירקדיות חזקות באורגנואידים ממוינים של מעיים אנושיים, מה שמרמז על עיצוב מחדש של מנגנון השעון הביולוגי מתאי גזע לתאים ממוינים. שימוש באורגנואידים שמקורם במטופלים עם כתבים ביו-לומינסנטיים צירקדיים יעזור לנו לקדם את הבנתנו את השעון הביולוגי באיברים היקפיים ובמצבי מחלה שונים.