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요약

상당한 간 기증자 부족 이며 간 기증자에 대 한 기준을 확대 했습니다. Normothermic ex vivo 간 관류 (NEVLP)를 평가 하 고 장기의 기능을 수정 개발 되었습니다. 이 연구 NEVLP의 쥐 모델을 보여 줍니다 고 간 보존 부상 완화 pegylated catalase의 능력을 테스트 합니다.

초록

간 이식의 중요 한 부족, 이식에 사용할 수 있는 이며 응답에서 기증자 기준을 확대 했습니다. 그 결과, normothermic 비보 전 간 관류 (NEVLP)를 평가 하 고 장기의 기능을 수정 하는 방법으로 도입 되었습니다. NEVLP에는 저체온증에 비해 많은 이점이 있다 고 보존 부상, 정상 장기의 기능 생리 조건 평가 기관 성능, 그리고 오르간 수리에 대 한 플랫폼으로의 복원 감소 subnormothermic 관류 등 리 모델링, 그리고 수정. Murine 및 돼지 NEVLP 모델 설명 되었습니다. 우리는 NEVLP의 쥐 모델을 설명 하 고이 모델을 사용 하 여 중요 한 응용 프로그램 중 하나를 보여-치료 분자 간 perfusate에 추가 사용 하 여. 카 탈 라 제 생 반응성 산소 종 (선생님) 폐품 이며 눈, 뇌, 그리고 폐에 국 소 빈 혈 reperfusion 감소 입증 되었습니다. Pegylation은 endothelium에 catalase를 대상으로 표시 되었습니다. 여기, 우리는 기본 perfusate pegylated catalase (못-고양이) 추가 간 보존 상해를 완화 하는 기능을 시연 했다. 우리의 설치류 NEVLP 모델의 장점은 큰 동물 모델에 비해 비싼 아니에요입니다. 이 연구의 한계는 그것은 현재 간 이식 후 관류는 포함 하지 않습니다. 따라서, 확실 하 게 예측 후 장기 이식의 함수를 만들 수 없습니다. 그러나, 쥐 간 이식 모델은 잘 설립 하 고 확실히이 모델과 함께에서 사용 될 수 있습니다. 결론적으로, 우리는 저렴, 간단 하 고, 쉽게 복제 가능한 NEVLP 모델을 쥐를 사용 하 여 설명 했다. 이 모델의 응용 프로그램 테스트 소설 perfusates 및 perfusate 첨가제, 테스트 기관 평가 위한 소프트웨어 및 장기를 복구 하도록 설계 된 실험을 포함할 수 있습니다.

서문

14,578 환자 간 이식 대기자 명단에 있으며 약 7000 이식 당 년1,2수행 됩니다. 이 중요 한 기증자 부족에 대응, 간 기증자에 대 한 기준을 확장 했다; 이 종종 한계 장기 또는 확장된 기준 기증자 하며 기본 이식 부전 및 지연된 이식 함수3의 더 높은 속도와 표준 기준 이식 보다 이식 후 덜 잘 수행할 것으로 예상 된다 4,,56. 그 결과, NEVLP 평가 기관 기능6,7을 수정 하는 방법으로 도입 되었습니다. 우리 NEVLP의 쥐 모델을 설계 하 고이 모델을 사용 하는 그것의 중요 한 잠재적인 응용 프로그램-간 perfusate에 비 발한 분자 첨가제의 테스트 중 하나를 보여 줍니다.

NEVLP (쥐) murine 및 돼지 모델 뿐만 아니라 폐기 인간의 장기6,,89평가 하고있다. NEVLP의 첫 인체 실험의 결과 또한 최근 게시10있다. 저체온증이 기계 관류 명확 하 게 신장 보존을 위한 표준 되고있다, 관류는 간 기계에서 발생 하는 온도 여전히 논란. NEVLP는 저체온증에 비해 많은 제안된 이점 및 subnormothermic 관류. 이들은 감소 보전 부상, 정상 장기의 기능 생리 조건, 장기 성능을 평가 하는 능력 및 기관 수리, 개조, 및 수정7,11를 위한 플랫폼으로의 복원 12,13,14,15,,1617.

연구의 상당수 돼지 NEVLP 모델을 사용 하 여 완료 되었습니다. 때 고려 모델을 사용 하 여 삭제 인간 장기 또는 인간 임상 시험이이 모델은 비교적 비싼 되지 않습니다, 하지만 그들은 우리의 작은 동물 NEVLP 모델에 비해 매우 비쌉니다. 중요 한 구성 요소는 실험 당 비용은 perfusate 이다. 우리는 상대적으로 저렴 한 비용에 perfusate의 300 mL와 4 h 관류를 완료할 수 있습니다. 또한, 쥐를 포함 하 여 작은 동물의 비용 돼지의 비용에 비해 매우 낮습니다.

쥐에서 NEVLP의 다른 모델에 비해 여기 모델 구현에 상대적으로 간단한 이며 광범위 한 응용 프로그램 있다. 관류 회로 그림 1에서 볼 수 있습니다. perfusate perfusate 저수지 (1), 물 외피 컨테이너에서 시작 합니다. Perfusate 롤러 펌프 (2) 저수지에서 가져온 이며 windkessel (3) 그리고 oxygenator (4)에 밀어. oxygenator 최대 가스 교환을 제공 역류 가스 및 perfusate 흐름에 대 한 설정 됩니다. Perfusate 다음 수익금으로 난방 코일 (5) 내부 생리 온도에, 그것을 보장 하기 위해 관류 챔버는 그리고 거기 공기 방울의 관류를 방지 하기 위해 거품 트랩 (6) 사전 (7) 및 후 기관 (8) 수를 perfusate 수 있는 샘플 포트 샘플링. perfusate 다음 문맥 정 맥을 통해 간을 입력합니다. 문맥 정 맥 압력 모니터 데이터 수집 소프트웨어에 있는 값을 차트에 첨부 됩니다. perfusate IVC 정 맥을 통해 간 종료 그리고 압력 이퀄라이저 블록 (9)으로 흐른다. 마지막으로, perfusate는 롤러 펌프를 통해 다시 압력 블록에서 가져온 이며 저수지에 비운. 이 모델 포함 하는 문맥에 지속적인 관류 및 간 동맥 및 투 석 다른 모델에 사용 되는 별도 고 추가 회로 필요, 타악기 흐름 밖으로 나뭇잎 하지만 이전 하지 입증 되었습니다. 필요한9,13.

perfusate에 새로운 치료 분자의 추가 탐험, 우리 효소 카 탈 라 제를 선택 했다. 카 탈 라 제는 생 선생님 폐품 선생님18의 효과 완화 하는 셀 내부 방어 메커니즘의 일부입니다. 카 탈 라 제 식 간 국 소 빈 혈 reperfusion 상해19에서 증가 된다. Catalase의 실험 또한 눈, 뇌, 그리고 폐20,,2122,,2324에 국 소 빈 혈 reperfusion 감소 입증 되었습니다. Pegylation 내 피 세포25에 피 catalase 이해에 원조 하는 catalase를 대상으로 표시 되었습니다. 못-고양이 되어 관리 체계적으로 간 국 소 빈 혈 reperfusion 상해; 감소에 제한 된 효능 그러나, 우리는26,,2728결과 추가 말뚝-고양이 격리 된 장기 관류 회로 개선 이어질 것을 가정 했다. 여기, 우리가 우리의 기본 perfusate 말뚝-고양이 추가 및 그것의 능력을 간 보존 부상 완화.

프로토콜

모든 절차는 기관 동물 관리의 지침에 따라 수행 했다 국가 연구 위원회의 자비 롭 배려 그리고 사용의 실험실 동물 (IACUC)에 대 한 가이드 하 고 오하이오 주립 대학 IACUC 위원회에 의해 승인을 받은.

1. 초기 설정

  1. 다음 결합 하 여 관류 솔루션 준비: 25% 알 부 민 86 mL, 윌리엄스 미디어의 184 mL, 페니실린/스 (10 U/mL 페니실린과 0.01 mg/mL 스), 인슐린 (50 U/L), 헤 파 린 (0.01 U/mL), L-글루타민 (0.292 g/L), 30 mL 및 300 mL의 총 볼륨을 날린 (0.010 g/L). 기본 perfusate를 못 고양이 그룹, 페그-고양이의 625 U/mL를 추가 합니다.
    1. PH 7.4에 트리 (hydroxymethyl) aminomethane (THAM)를 사용 하 여 perfusate 솔루션을 버퍼링 합니다. 동맥 혈액 가스 기계를 사용 하 여 perfusate pH를 확인.
  2. 회로 (그림 1)을 설정 합니다.
    1. 따뜻한 물 욕조에 설정 하 고 37 ° c.에 설정 워밍업을 기관 실을 수 있습니다.
    2. 저수지에 혼합 및 버퍼 된 perfusate를 부 어 하 고 순환을 시작 합니다.
      참고:이 단계에서 언급 한 perfusate 단계 1.1.1에서에서 준비 되었다.
    3. 인라인 oxygenator 통해 흐름 카운터에 의하여 가스 (95% 산소와 5% 이산화탄소)를 켭니다.
    4. 데이터 수집 소프트웨어를 켜고 클릭 "시작" 실험의 기간에 대 한 기록.
  3. 수술 현미경과 수술 실 (그림 2)를 설정 합니다.
    1. 지구 온난화 보드, electrocautery, 마 취 및 생체 신호 (심장 박동과 산소 포화) 장비를 모니터링을 포함 하 여 모든 장비를 켜십시오.
      참고: 현미경 설정을 사용 하는 현미경에 따라 달라 집니다 및 사용자의 편안 하 게 조정 될 수 있다.
    2. 흡입 (분자량 184.5 g/mol)에 대 한 액체 isoflurane의 10 mL와 10 mL 마 취 주사기와 마 취 단위에.
    3. 헤 파 린 (50 U), 외과 악기의 0.5 mL 주사기를 위치, 4-0와 7-0 비단 봉합, 멸 균 면봉, 및 4 cm x 4 cm 직 거 즈 스폰지 적절 하 게 (그림 2).
  4. Isoflurane 챔버를 준비 합니다.

2입니다. 마 취의 유도

  1. 다음과 같은 개인 보호 장비 (PPE) 착용: 수술 용 마스크, 수술 용 장갑, 일회용 가운.
  2. 쥐의 무게.
    참고: 우리는 250-350 g 사이 Sprague-Dawley 쥐를 사용합니다.
  3. 산소 압축기 및 isoflurane 켭니다. Isoflurane 챔버에 무게 되 고 후는 쥐를 놓고 뚜껑을 확보 합니다. 6% isoflurane 2 L/min의 산소 전달 사용 하 여 마 취를 유도.
    참고: 사용 하는 정확한 isoflurane 복용량 사용 되 고 특정 마 취 시스템에 따라 달라 집니다.
  4. 전자 면도기를 사용 하 여 동물의 복 부 머리. 클립
  5. 동물 isoflurane 챔버에 장착.
  6. 수술 실에서 마 취 장치를 켭니다.
  7. 마 취 유도 완전히 isoflurane 상공에서 쥐를 제거. 발가락 핀치를 사용 하 여 마 취의 깊이 확인 합니다.

3. 조달 절차

  1. 16 G 포털 갑 (그림 3)를 준비 합니다.
    1. 16 G angiocatheter로 시작 합니다. 튜빙의 7mm 섹션을 잘라. 3.5. 절 개를 중간 지점에서 측정 하 여 7 mm 섹션의 중간점을 확인 하 고 튜브의 앞쪽 절반을 제거.
    2. 이 지금은 평평한 부분을 분쇄 하는 hemostat를 사용 합니다. 라이터를 사용 하 여 입술을 만드는 angiocatheter의 다른 쪽 끝을 녹기. 불꽃에 직접 팁을 배치 하지 마십시오 또는 그것은 점화 하는 것입니다.
  2. 담 관 정을 준비 합니다.
    1. 27 G angiocath 고만 카 테 터를 떠나 주입 포트 차단. 27 G cannular 튜브의 10 cm 섹션에이 연결 합니다.
  3. 그것의 코를 가진 쥐를 마 취 코 콘에 놓고 그것의 4 개의 사지를 움직일 수 있습니다. 왼쪽된 뒷 끝에 모니터를 연결 하 여 생체 신호를 모니터링 합니다. 마 취의 적절 한 깊이 확인 하는 발가락 핀치를 수행 합니다. 4 %isoflurane 마 취를 계속 (무게 동물 > 250 g).
  4. 70% 이소프로필 알코올로 동물의 복 부를 스프레이. 건조를 허용 합니다. 동물 살 균 드 레이프를 놓습니다.
  5. 중간 절 개를 고 칼에서 사용 하 여 액을 날카로운가 위 (그림 4) 피부를 통해 확장을 확인 합니다. 부드럽게 복을 입력 하 고 근육을 incise. 이 절 개의 열 등 한 측면에서 방광과 간이 절이 개의 우수한 측면에서 손상 되지 않도록 주의 하십시오.
  6. 간 열 등 한 국경의 수준에서 크로스를 오른쪽과 왼쪽에 옆으로 절 개를 확장 합니다.
  7. 2%까지 마 취를 설정 (동물 무게 > 250 g).
  8. 곡선된 모기 클램프와 갈비뼈 늑 골 견인 기 (그림 5)를 사용 하 여 사용 하 여 칼 과정을 철회.
  9. falciform 인할지, 컷과 날카로운가 위 gastrohepatic 인 대.
  10. 찾아서 타이-오프 인할지 정 맥 누출을 방지 하기 위해 가능한 그것의 근원에 가까운로 7-0 봉합을 합니다.
  11. 쥐 살 균 moistened 목화 제보 주걱을 사용 하 여 내장을 들어낸 고 창 0.9% 정상적인 염 분을 적신 거 즈에 포장. 알아서 하지 작은 창 자의 맥 관 구조를 스트레칭.
  12. 열 등 한 베 나 정 맥 (IVC) 초과 조직을 제거를 통해 해 부. 그냥 분기점을 우수한 IVC 뒤에 dissect 그리고 나중에 사용 (그림 6)에 대 한 4-0 비단 봉합의 루프를 전달 합니다.
  13. 바로 부 신 정 맥에 노출을 제공 하는 오른쪽 신장 철회. 거 즈와 머리 간 오른쪽 엽을 철회. 최대한 IVC 가까이로 7-0 비단 봉합 사로 바로 부 신 정 맥에서 고 원심 넥타이 (그림 7)에 걸쳐 부식.
  14. 신중 하 게 비장 정 맥 밖으로 해 부, 그것은 2 개의 7-0 비단 봉합을 사용 하 여 고 두 봉합 사이 가로질러.
  15. 고 추가 혈관 포털 정 맥에 추가 길이 대 한 7-0 비단 봉합 사를 사용 하 여 필요한 경우 선.
    참고: 있습니다 때로는 바로 부 신 정 맥 및 열 등 한 간 사이 infrahepatic IVC의 작은 분 지.
  16. Gastroduodenal 동맥 주위 dissect, 7-0 비단 봉합으로 gastroduodenal 동맥에서 고 gastroduodenal 동맥 선.
  17. 간 동맥 주위 dissect 하 고 장소 주위 (그림 8) 7-0 비단 봉합 넥타이.
  18. 담 즙 덕트에 밖으로 해 부.
    1. 담 즙 덕트의 길이 확인 합니다. 7-0 비단 봉합 사를 사용 하 여 선단부에서 담 즙 덕트에서 타이. 담 관 주위 7-0 비단 봉합의 루프를 가능한 proximally 놓습니다.
    2. 작은 위로 덕트의 절반 직경 구멍을 뚫고 고 27 G 테 담 즙 덕트 proximally 합니다. 로마 샌들 넥타이 봉합 (그림 9)를 사용 하 여 장소에 테를 묶어.
  19. 음 경 정 맥 또는 IVC 27g 바늘을 사용 하 여 동물의 헤 파 린 (50 U)의 0.5 mL를 주사.
    참고: 27 G 인슐린 주사기가 대신 사용할 수도 있습니다.
  20. 클램프와 IVC 이전 배치를 사용 하 여에서 4-0 비단 봉합 넥타이.
  21. 이전 배치를 사용 하 여 간 동맥을 묶어 7-0 비단 봉합.
  22. Microsurgical 클립을 사용 하 여 문맥을 클램프. 22 G angiocatheter를 사용 하 여 문맥 cannulate 플러시 간까지 1 mL 헤 파 린 (100 U)와 차가운 0.9% 정상적인 염 분의 60 mL와 문맥 blanches (그림 10).
    참고: 간 즉시 희게 하지 않습니다 그것은 메 마른 면 끝 도포와 마사지 될 수 있습니다.
  23. IVC suprahepatic 하 고 높은 가능한 가슴에 그것을 통해 잘라.
  24. hepatectomy 다음과 같이 수행 합니다. 막 주위, 간 동맥을 잘라, 잘라는 IVC, 포털 정 맥을 잘라, 어떤 추가 인 대를 잘라 잘라내어 간 꺼내. 간 얼음 차가운 0.9% 정상적인 염 분 (그림 11)에 놓습니다.
  25. 문맥 (그림 12)에서 16 G 혈관 팔목을 놓습니다. 간 비보 전 normothermic 간 관류 회로에 배치 합니다.

4. 전 비보 Normothermic 간 관류

참고: 여기에 사용 되는 perfusate 프로토콜 단계 1.1.1에서에서 준비 되었다.

  1. (그림 13) cuffed 문맥에 문맥 정 맥을 놓습니다.
  2. 문맥 정 맥 배치 하는 동안 하려면 2 mL/min에서 회로 통해 perfusate의 흐름을 유지 합니다. 시계 어떤 스파이크 문맥 압력;에 대 한 모니터 이 선박 차단 되 고 필요 하다는 정 맥의 위치를 나타낼 수 있습니다.
  3. 7-0 비단 봉합 사를 사용 하 여 perfusate의 반환 교류에 대 한 IVC 정에 봉합.
  4. 일단 두 뉼 그 자리에 이면, 10-16 cmH2O의 범위에서 생리 적 압력에 도달할 때까지 1 mL/min에서 흐름을 선회 시작 합니다.
  5. 사전에서 1 mL 샘플 및 0, 30, 60, 90, 120, 150, 180, 210, 및 관류의 240 분에 후 포트를 가져가 라. 1 mL 샘플을 두 0.5 mL 샘플 나눕니다.
    참고: 0.5 mL이 프로토콜 단계 4.5.1에서 사용 될 것입니다 그리고 0.5 mL 프로토콜 단계 4.5.2에서에서 사용 될 것입니다.
    1. 스냅 액체 질소에 저온 관에이 샘플의 0.5 mL를 고정 합니다.
    2. Perfusate의 나머지 0.5 mL를 사용 하 여 동맥 혈 가스 분석을 실행 합니다.
    3. 각 시간 지점에서 혈액 가스 분석을 실행 한 후 (0, 30, 60, 90, 120, 150, 180, 210, 및 240 분) pH 수준을 검토 하 고 pH 7.4로 돌아갈 필요는 perfusate 버퍼.
  6. 4 h 관류의의 결론에 간 관류 회로에서 분리 합니다. 간 0.5 g 세그먼트로 나눕니다. 스냅 액체 질소에 저온 관에 간 조직 고정.

5. 사후 실험 분석

  1. 0, 30, 60, 90, 120, 150, 180, 210, 및 상업 색도계 분석 실험 키트를 사용 하 여 240 분에서 perfusate에 알라닌 aminotransferase (ALT) 레벨을 결정 합니다.
    1. 간단히, 60 분 측정 570에서 광학 밀도 값에 대 한 37 ° C에서 반응 혼합 시 약으로 perfusate를 품 어 nm microplate 리더를 사용 하 여.
  2. 0.5 g의 간 조직 세포의 용 해 버퍼의 100 µ L 균질 하 고 조직 lysate 아데노신 3 인산 염 (ATP), 티 (GSH) 및 malondialdehyde (MDA)에 대 한 분석.
    1. 간단히, 상업 시험 키트를 사용 하 여 간 조직 샘플의 ATP 수준을 측정 합니다. 반응 버퍼와 샘플을 혼합 하 고 30 분 측정 570에서 광학 밀도 대 한 실 온에서 품 어 nm microplate 리더를 사용 하 여.
    2. 상용 시험 키트를 사용 하 여 간 조직 샘플의 GSH 레벨을 측정 합니다. 조직 샘플 분석 결과 칵테일 믹스. 405-414 nm에 광학 밀도 값을 측정 합니다.
    3. 상용 시험 키트를 사용 하 여 간 조직 샘플의 MDA 레벨을 측정 합니다. TBA와 60 분 분리기 반응에 대 한 95 ° C에 열 샘플을 혼합 하 고 96 잘 접시에는 상쾌한 전송. 532에서 광학 밀도 측정 nm.
  3. 0.5 g의 간 조직 세포의 용 해 버퍼의 100 µ L 균질 하 고 상업 시험 키트를 사용 하 여 상대 caspase-3/7 활동에 대 한 lysate 조직 분석.
    1. Caspase-3-7 시 분석 결과 버퍼와 조직 lysate를 혼합 하 고 30 분 동안 실 온에서 품 어.
    2. 잘 사용 하 여 각 microplate 리더에 형광 레벨을 측정 합니다.
  4. 상업적인 제자리에 죽음 탐지 키트를 사용 하 여 간 조직 샘플에 apoptotic 세포의 수준을 결정 합니다.
    1. 사전 치료는 0.5 g 조직 섹션 10 U/mL 가수분해 K 10 분으로 하 고 60 분 수행 형광 현미경을 사용 하 여 분석에 대 한 37 ° C에서 반응 혼합물으로 품 어.

결과

그룹 당 3 개의 쥐의 샘플 크기 사용 되었다. ALT는 0, 30, 60, 90, 120, 150, 180, 210, 및 관류의 240 분에서 측정 했다. 우리가 사용 하는 학생의 t-기본 perfusate 및 기본 perfusate 플러스 각 시간 지점에서 못 고양이 그룹 사이 결과 비교 하는 테스트. 기본 perfusate 및 기본 perfusate 플러스 말뚝-고양이 그룹을 비교, 거기에서는 훨씬 적은 (p < 0.05) 기본 perfusate 플러스 150, 180, 21...

토론

이식에 사용할 수 있는 간 이식의 중요 한 부족은 그리고 응답에 기증자 기준 확장된1,2,3,,45되었습니다. 기증자 부족 결과로 NEVLP 평가 기관 기능6,7을 수정 하는 방법으로 도입 되었습니다. 우리는 NEVLP의 쥐 모델을 설계 했습니다. ...

공개

모든 저자 들은 아무 관련 공개 보고서.

감사의 말

이 작품은 장기 이식, 관류, 엔지니어링 및 오하이오 주립 대학에서 재생에 대 한 NIH T32AI 106704-01A1와 토니 flesch 식 기금에 의해 지원 되었다.

자료

NameCompanyCatalog NumberComments
Perfusate
8% AlbuminCLS Behring, King of Prussia, PA0053-7680-32
Williams MediaSigma Aldrich, St. Louis, MOW1878
Penicillin/StreptomycinSigma Aldrich, St. Louis, MOP4333
InsulinEli Lilly, Indianapolis, IL0002-8215-91
HeparinFresnius Lab, Lake Zurich, ILC504701
L-glutamineSigma Aldrich, St. Louis, MOG3126
HydrocortisoneSigma Aldrich, St. Louis, MOH0888
THAMHospira, Inc,0409-1593-04
Polyethylene Glycol - CatalaseSigma AldrichS9549 SIGMA
Personal Protective Equipment
Surgical MaskGenericN/A
Protective GownGenericN/A
Surgical GlovesGenericN/A
Liver Procurement
Sprague-Dawley RatHarlan Sprague Dawley Inc.250 -350 grams
Surgical MicroscopeLeicaM500-N w/ OHS
Charcoal CanistersKent ScientificSOMNO-2001-8
IsofluranePiramal HealthcareN/A
Pressure-Lok Precision Analytical Syringe Valco Instruments Co, Inc.SOMNO-10ML
Electrosurgical UnitMacanMV-7A
Warming PadBraintree ScientificHHP2
SomnoSuite Small Animal Anesthesia SystemKent ScientificSS-MVG-Module
PhysioSuiteKent ScientificPS-MSTAT-RT
Isoflurane chamberKent ScientificSOMNO-0530LG
SurgiVetIsotecCDS 9000 Tabletop
OxygenPraxair98015
Rib retractorsKent ScientificINS600240
GenieTouchKent ScientificGenieTouch
Normal SalineBaxterNDC 0338-0048-04
4x4 Non-Woven SpongesCriterion104-2411
Sterile Q-TipsHenry Schein Animal Health1009175
U-100 27 Gauge Insulin SyringeTerumo22-272328
5mL SyringeBDREF 309603
4-0 Braided Silk SutureDeknatel, Inc.198737LP
7-0 Braided Silk SutureTeleflex MedicalREF 103-S
16 gauge CathetersBBraun Introcan Safety4252586-02
14 gauge CathetersBBraun Introcan Safety4251717-02
Bile Duct Cannular TubingAltec01-96-1727       
Liver Perfusion Circuit Components
Water Bath WarmerLauda Ecoline StareditionE103
Data Collection SoftwareADInstruments Labchart 7
Liver Perfusion CircuitHarvard Apparatus73-2901
Membrane OxygenatorMediac SPAM03069
Roller PumpIsmatecISM827B
Gas (95% oxygen and 5% carbon dioxide)Praxair98015
Organ ChamberHarvard ApparatusILP-2
1.8 mL Arcticle Cryogenic TubeUSA Scientific1418-7410
MucasolSigma-AldrichZ637181
Microsurgical Instruments
Small ScissorsRobozRS-5610
Large ScissorsS&TSAA-15
Forceps - Large AngledS&TJFCL-7
Forceps - Small AngledS&TFRAS-15 RM-8
Clip ApplierROBOZRS-5440
Scissors - non microFST 14958-1114958-11
Forceps - Straight TipS&TFRS-15 RM8TC
Large Microsurgical ClipFine Scientific Tools18055-01
Small Microsurgical ClipFine Scientific Tools18055-01
Small Microsurgical ClipFine Scientific Tools18055-02
Small Microsurgical ClipFine Scientific Tools18055-03
Small Mosquito ClampsGenericN/A
Post-Experiment Analysis
Alanine Aminotransferase (ALT) Activity Colorimetric/Fluorometric Assay KitBioVisionK752
Adenosine Triphosphate (ATP) Colorimetric/Fluorometric Assay KitBioVisionK354
Glutathione Assay KitCayman Chemical703002
Lipid Peroxidation (MDA) Assay KitAbcamab118970
Caspase-Glo 3/7 Assay SystemsPromegaG8090
POLARstar OMEGA Microplate ReaderBMG LABTECHN/A

참고문헌

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