이 작품은 GJJ에 보건 보조금 R01 AI067548, R01 GM081520, R01 GM086200, R01 AI049194 및 P01 GM066521 국립 연구소뿐만 아니라 하워드 휴즈 의학 연구소, Caltech에서 베크맨 연구소와에서 Caltech에 선물로 일부 지원이 고든 무어와 베티 재단과 Agouron 연구소. MSL은 파멜라 S. Björkman에 NIH 부여 2R37 - A1041239 - 06A1에 의해 지원됩니다. Leica 마이크로 시스템즈 주식 회사 친절 cryosection 컬렉션의 비디오 콘텐츠를 제공했습니다. Treponema primitia의 대표적인 결과가 수집 및 처리 가빈 E. 머피에 의해, 그리고 제목이 &quot;Treponema primitia 및 운동성 위해 의미의 소설 ultrastructures&quot;와 분자 미생물에 게시되었습니다. (머피, G. 외., 몰. Microbiol. 67, 1184-1195, 2008).

<ol>
	<li>Jensen, G. J., Briegel, A. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=How+electron+cryotomography+is+opening+a+new+window+onto+prokaryotic+ultrastructure.">How electron cryotomography is opening a new window onto prokaryotic ultrastructure.</a> Curr. Opin. Struct. Biol. 17, 260-267 (2007).</li><li>Li, Z., Jensen, G. J. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Electron+cryotomography:+a+new+view+into+microbial+ultrastructure.">Electron cryotomography: a new view into microbial ultrastructure.</a> Curr. Opin. Microbiol. 12, 333-340 (2009).</li><li>Frank, J. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Three-dimensional+imaging+of+biological+complexity.">Three-dimensional imaging of biological complexity.</a> J. Struct. Biol. 138, 85-91 (2002).</li><li>Iancu, C. V. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Electron+cryotomography+sample+preparation+using+the+Vitrobot.">Electron cryotomography sample preparation using the Vitrobot.</a> Nat. Protocols. 1, 2813-2819 (2007).</li><li>Studer, D., Graber, W., Al-Amoudi, A., Eggli, P. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=A+new+approach+for+cryofixation+by+high-pressure+freezing.">A new approach for cryofixation by high-pressure freezing.</a> J. Microsc. 203, 285-294 (2001).</li><li>Ladinsky, M. S., Pierson, J., McIntosh, J. R. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Vitreous+cryosectioning+of+cells,+facilitated+by+a+micromanipulator.">Vitreous cryosectioning of cells, facilitated by a micromanipulator.</a> J. Microsc. 224, 129-134 (2006).</li><li>Pierson, J. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Improving+the+technique+of+vitreous+cryo-sectioning+for+cryo-electron+tomography:+Electrostatic+charging+for+section+attachment+and+implementation+of+an+anti-contamination+glove+box.">Improving the technique of vitreous cryo-sectioning for cryo-electron tomography: Electrostatic charging for section attachment and implementation of an anti-contamination glove box.</a> J. Struct. Biol. 169, (2009).</li><li>Suloway, C. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Fully+automated,+sequential+tilt-series+acquisition+with+Leginon.">Fully automated, sequential tilt-series acquisition with Leginon.</a> J. Struct. Biol. 167, 11-18 (2009).</li><li>Fernando, A. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Markov+random+field+based+automatic+image+alignment+for+electron+tomography.">Markov random field based automatic image alignment for electron tomography.</a> J. Struct. Biol. 161, 260-275 (2008).</li><li>Kremer, J. R., Mastronarde, D. N., McIntosh, J. R. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Computer+visualization+of+three-dimensional+image+data+using+IMOD.">Computer visualization of three-dimensional image data using IMOD.</a> J. Struct. Biol. 116, 71-76 (1996).</li><li>Mastronarde, D. N. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Dual-axis+tomography:+an+approach+with+alignment+methods+that+preserve+resolution.">Dual-axis tomography: an approach with alignment methods that preserve resolution.</a> J. Struct. Biol. 120, 343-352 (1997).</li></ol>

관심 없음 충돌 선언하지 않습니다.

우리는 박테리아 세포 요법을 수행하는 방법이 비디오를 문서에 표시됩니다. 공간과 시간에 의해 제한, 우리는 일반적인 프로토콜을 보여줍니다. 자세한 내용은 논문, 장비 및 소프트웨어 개발자의 제조에 의해 제공된 온라인 또는 기타 정보, 그리고 요법 연구 그룹에서 찾을 수 있습니다. 공부 다른 세균 종에 따라 사용하는 장비와 세포의 구조 관심, 프로토콜 및 실험 매개 변수를 테스트하고 최적화해야합니다.

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		<div>
		<table border="1">
		<thead>
		<tr>
		<th>Material Name</th>
		<th>Type</th>
		<th>Company</th>
		<th>Catalogue Number</th>
		<th>Comment</th>
		</tr>
		</thead>
		<tbody>
		
<tr>
<td>Poly-L-Lysine</td>
<td>&nbsp;</td>
<td>Sigma Aldrich</td>
<td>P8920</td>
<td>0.1% solution</td>
</tr>
<tr>
<td>MKIII Vitrobot</td>
<td>&nbsp;</td>
<td>FEI</td>
<td>&nbsp;</td>
<td>&nbsp;</td>
<tr>
<td>Gold colloid solution</td>
<td>&nbsp;</td>
<td>Sigma</td>
<td>G1527-25ml</td>
<td>10 nm</td>
</tr>
<tr>
<td>Bovine serum Albumin</td>
<td>&nbsp;</td>
<td>Invitrogen</td>
<td>P2489</td>
<td>10%</td>
</tr>
<tr>
<td>Nr 1 Filter paper</td>
<td>&nbsp;</td>
<td>Whatman</td>
<td>1001 055</td>
<td>&nbsp;</td>
<tr>
<td>Dextran</td>
<td>&nbsp;</td>
<td>Sigma</td>
<td>31389</td>
<td>15-25%, MW 39000</td>
</tr>
<tr>
<td>Brass-domed planchet</td>
<td>&nbsp;</td>
<td>Swiss Precision Company</td>
<td>&nbsp;</td>
<td>&nbsp;</td>
<tr>
<td>Bal-Tec HPm 010 high pressure freezer</td>
<td>&nbsp;</td>
<td>Leica Microsystems Inc.</td>
<td>&nbsp;</td>
<td>&nbsp;</td>
<tr>
<td>Cryo-ultra microtome UC6/FC6</td>
<td>&nbsp;</td>
<td>Leica Microsystems Inc.</td>
<td>&nbsp;</td>
<td>&nbsp;</td>
<tr>
<td>Diamond cryo trim 45</td>
<td>&nbsp;</td>
<td>Diatome US Inc</td>
<td>&nbsp;</td>
<td>&nbsp;</td>
<tr>
<td>Static line II ioniser</td>
<td>&nbsp;</td>
<td>Diatome US Inc</td>
<td>&nbsp;</td>
<td>&nbsp;</td>
<tr>
<td>CX100 Dry shipper</td>
<td>&nbsp;</td>
<td>Taylor-Wharton-Cryogenics</td>
<td>&nbsp;</td>
<td>&nbsp;</td>
<tr>
<td>MSH loading station</td>
<td>&nbsp;</td>
<td>Gatan</td>
<td>&nbsp;</td>
<td>&nbsp;</td>
<tr>
<td>Ti E/B inverted microscope</td>
<td>&nbsp;</td>
<td>Nikon</td>
<td>&nbsp;</td>
<td>Custom</td>
</tr>
<tr>
<td>Cryo LM stage</td>
<td>&nbsp;</td>
<td>FEI</td>
<td>&nbsp;</td>
<td>Custom</td>
</tr>
<tr>
<td>TF30-polara</td>
<td>&nbsp;</td>
<td>FEI</td>
<td>&nbsp;</td>
<td>With UltraCam from Gatan</td>
</tr>
<tr>
<td>Amira</td>
<td>&nbsp;</td>
<td>Visage Imaging</td>
<td>&nbsp;</td>
<td>&nbsp;</td>		</tbody>
		</table>
		</div>

electron cryotomography of bacterial cells

많은 이미 세균 세포의 기본적인 신진 대사에 대한 알려져 있지만, 많은 근본적인 문제는 여전히 놀라울 정도로 그들이 생성하고 유지 특정 셀 모양, 극성을 설립, 자신의 genomes을 분리하고, 어떻게 분할 예를 들어 포함 답이 있습니다. 이러한 현상을 이해하기 위해 이미징 기술이 필요합니다 그 다리 형광 조명 현미경 및 X - 레이 crystallography와 NMR 분광법으로 높은 해상도의 방법 사이의 해상도 차이. 전자 cryotomography (요법)는 세포의 ultrastructure이 &quot;macromolecular&quot;해상도 (~ 4nm)의 세 차원 (3D)에 가까운 원시 상태에 시각 수 있도록, 이번 않는 새로운 기술입니다. 1, 2 년 요법, 세포는 낮은 온도에서 cryo 전송 전자 현미경 (cryoTEM)에 &quot;냉동 수산화&quot;상태, 유리체에서 몇 군데 아르 (&lt;-180 ° C). 슬림 전지 (두께 3 최대 ~ 500 nm의)의 경우, 손상 세포 수 있습니다 플런지 - 냉동 등 에탄이나 에탄 / 프로판 혼합물로 cryogens에서 EM 격자를 통해 미디어 이내. 두꺼운 세포 biofilms도 처음엔 &quot;고압 동결 &#39;과하여 유리 상태로 몇 군데있을 수있다, 그들을&quot;cryo는 - sectioning. &quot; 그것이 점차적으로 하나 또는 두 개의 축을 따라 기울어져와 같이 2 차원 투영 이미지의 시리즈는 다음 예제를 통해 수집하고 있습니다. 3 차원 재건, 또는 &quot;tomogram&quot;는 다음 그림에서 계산하실 수 있습니다. 요법은 비싼 장비를 필요로하지만, 최근 몇 년 동안, 그것은 다양한 외부 부속의 구조를 밝힐 수있는 몇 가지 실험실에서 사용되고 있으며, 다른 세포 봉투, cytoskeletal 필라멘트의 위치와 구조, 그리고 위치 및 대형 macromolecular의 아키텍처의 구조 이러한 flagellar 모터, 내부 구획 및 chemoreceptor 배열로 조립. 1, 2 이 비디오를 문서에서 우리는 샘플 준비 프로세스, 데이터 수집, tomogram 재건 및 세분화를 통해 가벼운 현미경과 어떤 경우의 상관 관계에있는 결과의 해석을 포함한 요법과 이미지 세포 방법을 보여줍니다.

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Electron Cryotomography of Bacterial Cells

가까운 원시 상태에서 세균 세포의 ultrastructure 연구를 전자 cryotomography (요법)를 사용하는 방법을 우리는 &quot;macromolecular&quot;(~ 4 NM) 해상도, 여기를 보여줍니다.

세균성 세포의 전자 Cryotomography

While much is already known about the basic metabolism of bacterial cells, many fundamental questions are still surprisingly unanswered, including for ...

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25.2K 조회수.  California Institute of Technology - Caltech. 가까운 원시 상태에서 세균 세포의 ultrastructure 연구를 전자 cryotomography (요법)를 사용하는 방법을 우리는 "macromolecular"(~ 4 NM) 해상도, 여기를 보여줍니다.