저자는 금융에 대한 ONR-MURI 수상 (NN00014-06-1-1176)과 미군 의료 연구 및 Materiel 명령을 (부여 번호 W81XWH-09-1-0386 및 W81XWH-10-1-0806) 감사드립니다 지원합니다.

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	<li>Ulery, B. D., Kumar, D., Ramer-Tait, A. E., Metzger, D. W., Wannemuehler, M. J., Narasimhan, B. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Design+of+a+protective+single-dose+intranasal+nanoparticle-based+vaccine+platform+for+respiratory+infectious+diseases.">Design of a protective single-dose intranasal nanoparticle-based vaccine platform for respiratory infectious diseases.</a> PLoS One. 6, e17642 (2011).</li><li>Kasturi, S. P., Skountzou, I., Albrecht, R. A., Koutsonanos, D., Hua, T., Nakaya, H. I., Ravindran, R., Stewart, S., Alam, M., Kwissa, M., Villinger, F., Murthy, N., Steel, J., Jacob, J., Hogan, R. J., Garc&#237;a-Sastre, A., Compans, R., Pulendran, B. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Programming+the+magnitude+and+persistence+of+antibody+responses+with+innate+immunity.">Programming the magnitude and persistence of antibody responses with innate immunity.</a> Nature. 470, 543-547 (2011).</li><li>Rice-Ficht, A. C., Arenas-Gamboa, A. M., Kahl-McDonagh, M. M., Ficht, T. A. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Polymeric+particles+in+vaccine+delivery.">Polymeric particles in vaccine delivery.</a> Curr. Opin. Microbiol. 13, 106-112 (2010).</li><li>Jain, J. P., Chitkara, D., Kumar, N. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Polyanhydrides+as+localized+drug+delivery+carrier:+an+update.">Polyanhydrides as localized drug delivery carrier: an update.</a> Expert. Opin. Drug. Deliv. 5, 889-907 (2008).</li><li>Pfeifer, B. A., Burdick, J. A., Little, S. R., Langer, R. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Poly(ester-anhydride):poly(beta-amino+ester)+micro-+and+nanospheres:+DNA+encapsulation+and+cellular+transfection.">Poly(ester-anhydride):poly(beta-amino ester) micro- and nanospheres: DNA encapsulation and cellular transfection.</a> Int. J. Pharm. 304, 210-219 (2005).</li><li>Ahmed, F., Friend, S., George, T. C., Barteneva, N., Lieberman, J. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Numbers+matter:+quantitative+and+dynamic+analysis+of+the+formation+of+an+immunological+synapse+using+imaging+flow+cytometry.">Numbers matter: quantitative and dynamic analysis of the formation of an immunological synapse using imaging flow cytometry.</a> J. Immunol. Methods. 347, 79-86 (2009).</li><li>Hampton, M. B., Winterbourn, C. C. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Methods+for+quantifying+phagocytosis+and+bacterial+killing+by+human+neutrophils.">Methods for quantifying phagocytosis and bacterial killing by human neutrophils.</a> J. Immunol. Methods. 232, 15-22 (1999).</li><li>Rieger, A. M., Hall, B. E., Barreda, D. R. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Macrophage+activation+differentially+modulates+particle+binding,+phagocytosis+and+downstream+antimicrobial+mechanisms.">Macrophage activation differentially modulates particle binding, phagocytosis and downstream antimicrobial mechanisms.</a> Dev. Comp. Immunol. 34, 1144-1159 (2010).</li><li>Murphy, K. C., Campellone, K. G. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Lambda+Red-mediated+recombinogenic+engineering+of+enterohemorrhagic+and+enteropathogenic+E.+coli.">Lambda Red-mediated recombinogenic engineering of enterohemorrhagic and enteropathogenic E. coli.</a> BMC. Mol. Biol. 4, 11 (2003).</li><li>Karsi, A., Lawrence, M. 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G., Alhaique, F., Carafa, M. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=pH-sensitive+non-phospholipid+vesicle+and+macrophage-like+cells:+binding,+uptake+and+endocytotic+pathway.">pH-sensitive non-phospholipid vesicle and macrophage-like cells: binding, uptake and endocytotic pathway.</a> Biochim. Biophys. Acta. 1778, 2749-2756 (2008).</li><li>Torres, M. P., Vogel, B. M., Narasimhan, B., Mallapragada, S. K. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Synthesis+and+characterization+of+novel+polyanhydrides+with+tailored+erosion+mechanisms.">Synthesis and characterization of novel polyanhydrides with tailored erosion mechanisms.</a> J. Biomed. Mater. Res. A. 76, 102-110 (2006).</li></ol>

Sherree L. 친구는 ImageStream의 X 시스템을 제조 Amnis 회사에 의해 고용된다.

연구는 폴리 (락트 - 공동 glycolic 산 (PLGA) 또는 polyanhydrides을 기반으로 생분해성 nanoparticles는 대상 세포를 캡슐 항원이나 약물을 전달하는 데 사용할 수있는 것으로 나타났습니다. phagocytic 세포에 의해 이러한 nanoparticles의 이해 이렇게 양적으로 만들어 그들의 효과를 위해 중요하다 . 소설 nanoparticle 전달 시스템을 설계에서 중요한 내면화의 분석이 방법을 사용함으로써는 다양한 세포 유형별로 nano...

<table border="1"><tbody><tr><td> 시약의 이름 </td><td> 회사 </td><td> 카탈로그 번호 </td><td> 댓글 </td></tr><tr><td> RAW 264.7 세포주 </td><td> 미국 유형 문화 수집 (ATCC) </td><td> 티비 - 71 </td><td></td></tr><tr><td> Dulbecco의 수정일 독수리 중간 (DMEM) </td><td> Cellgro </td><td> 10-013 - 이력서 </td><td></td></tr><tr><td> 태아 소 혈청 </td><td> 애틀랜타 체액 </td><td> S 11,150 </td><td> 프리미엄 학년 </td></tr><tr><td> Glutamax </td><td> Gibco </td><td> 35050-061 </td><td></td></tr><tr><td> HEPES </td><td> Gibco </td><td> 15630-080 </td><td></td></tr><tr><td> 24 잘 플레이트</td><td> TPP </td><td> 92,024 </td><td></td></tr><tr><td> 세포 배양 Flasks </td><td> TPP </td><td> 90,151 </td><td></td></tr><tr><td> 셀 스크레이퍼 </td><td> TPP </td><td> 99,002 </td><td> 24cm </td></tr><tr><td> 살모넬라 enterica serovar Typhimurium </td><td> ATCC </td><td> 14,028 </td><td></td></tr><tr><td> BTX ECM630 전기 세포 조작하는 사람 </td><td> BTX 하버드 장치 </td><td></td><td></td></tr><tr><td> 맙스 </td><td> 피셔 과학 </td><td> BP308 </td><td></td></tr><tr><td> 인산염은 식염수 (PBS)를 버퍼 </td><td> Cellgro </td><td> 21-040 - 이력서 </td><td></td></tr><tr><td> 초음파 액체 프로세서 </td><td> MISONIX </td><td> S-4000 </td><td></td></tr><tr><td> Cytochalasin-D </td><td> 시그마 - 올드 리치, </td><td> C8273 </td><td></td></tr><tr><td> 포름 알데히드 </td><td> Polysciences </td><td> 04,018 </td><td></td></tr><tr><td> 버퍼를 씻으십시오 </td><td> 2퍼센트 열 inactivated FBS, PBS에 0.​​1 %의 나트륨 azide. </td><td></td><td></td></tr><tr><td> 버퍼를 씻고 / 파마 </td><td> BD Biosciences </td><td> 554,714 </td><td></td></tr><tr><td> 스냅 캡 microtubes를 클리어 뷰 </td><td> 시그마 </td><td> T4816 </td><td></td></tr><tr><td> 알렉사 형석 phalloidin 660 </td><td> Invitrogen </td><td> A22285 </td><td></td></tr><tr><td> ImageStream X </td><td> Amnis Corpora기 </td><td> 100,200 </td><td> 옵션 : 658nm 레이저, autosampler </td></tr><tr><td> 나트륨 azide </td><td> 피셔 과학 </td><td> S 227I-500 </td><td></td></tr></tbody></table>

analyzing cellular internalization of nanoparticles and bacteria by multi-spectral imaging flow cytometry

Nanoparticulate 시스템은 항원 제시 세포를 1-5으로, 효율적으로 단백질을 포함하여화물을 전달하는 능력을 통해 백신 전달에 유용한 도구로 등장했습니다. 항원 제시 세포에 의해 nanoparticles의 내면화 (NP)는 캡슐화된 항원에 대한 효과적인 면역 반응을 생성에 중요한 단계입니다. nanoparticle 제제 영향을 미치는 기능에 어떻게 변경 사항을 확인하려면, 우리는 internalized nanoparticles뿐만 아니라 박테리아를 검출과 호환였다 높은 처리량, 양적 실험 프로토콜을 개발하기 위해 모색하고 있습니다. 현재까지, 두 개의 독립적인 기법, 현미경 및 유동세포계측법는 nanoparticles의 phagocytosis를 연구하는 데 사용되는 방법 왔습니다. 유동세포계측법의 높은 처리량 본질은 강력한 통계 데이터를 생성합니다. 그러나, 낮은 해상도로 인해, 그것은 정확하게 셀 바운드 nanoparticles 비해 internalized 수치 실패합니다. 현미경은 높은 공간적 해상도로 이미지를 생성합니다; However, 그건 시간이 소요되며 작은 샘플 크기에게 6-8을 포함한다. 멀티 스펙트럼 이미징 유동세포계측법 (MIFC)는 판상 코어를 통해 동시에 멀티 컬러 스펙트럼 형광 및 명시야 현미경 이미징을 수행하고 유동세포계측법 양쪽 측면을 통합함으로써 새로운 기술입니다. 이 기능은 형광 신호 강도와 다양한 구조와 고속 세포 기능 사이의 공간적 관계의 정확한 분석을 제공합니다. 여기, 우리는 polyanhydride의 nanoparticles이나 살모넬라 enterica serovar Typhimurium을 internalized 않은 세포 인구를 특성화하기 위해 MIFC을 활용한 방법을 설명합니다. 우리는 또한 nanoparticle의 현탁액, 세포 라벨, ImageStream X 시스템의 취득 및 아이디어 응용 프로그램을 사용하여 데이터 분석 준비에 대해 설명합니다. 또한 국제화 P를 차별화하는 데 사용할 수있는 기술의 응용을 설명actin - 중재의 phagocytosis의 억제제로서 cytochalasin-D를 사용하여 nanoparticles와 박테리아 athways.

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Analyzing Cellular Internalization of Nanoparticles and Bacteria by Multi-spectral Imaging Flow Cytometry

이 문서에서는 RAW 264.7 세포에 의한 polyanhydride의 nanoparticles이나 박테리아의 내면화를 수치 멀티 스펙트럼 이미징 유동세포계측법을 활용한 방법을 설명합니다.

멀티 스펙트럼 이미징 유동세포계측법 의해 Nanoparticles과 박테리아의 세포 내면화 분석

Nanoparticulate  systems have emerged as valuable tools in vaccine delivery through their  ability to efficiently deliver cargo, including proteins, to ...

analyzing-cellular-internalization-nanoparticles-bacteria-multi

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16.2K 조회수.  Iowa State University. 이 문서에서는 RAW 264.7 세포에 의한 polyanhydride의 nanoparticles이나 박테리아의 내면화를 수치 멀티 스펙트럼 이미징 유동세포계측법을 활용한 방법을 설명합니다.