출판 기금은 Cerus 사, 가로 채기 피 시스템 제조업체가 제공됩니다.

1. 전체 혈액 수집 <ol><li> 450 ML의 상단에있는 자원 봉사 기증자로부터 온 혈액을 수집 / 하단의 컬렉션은 지역 혈액 수집 가이드 라인에 따라 설정합니다. </li><li> 전체 피를 원심 분리 및 분리하기 전에 냉각 판에 2 시간의 최소 저장됩니다. </li></ol> 2. 버피 코트 준비 <ol><li> 적혈구, 버피 코트, 그리고 플라즈마 : 3 층에 혈액을 분리하는 하드 스핀을 사용하여 전체 혈액을 원심 분리기. 사용 원심 분리기 매개 변수 ± 2 ° C. 22 11 분에 4,880 RCF했다 </li><li> 수집 용기에 버피 코트를 떠나지, 상단 위성 가방과 바닥 위성 가방에 적혈구 (RBC)에 플라즈마를 표현하기 위해 자동화 된 혈액 분리기를 사용하십시오. 버피 코트는 각각 약 48 ML 37 %입니다에 대한 볼륨 및 혈소판 범위를 의미 타겟팅 할 수 있습니다. </li><li> 버피 - 코트 22 ± 2 ° C.에서 혈소판 교반기에 하루 아침에 저장됩니다 </li></ol><ol><li> 멸균 연결 7 버피 코트 및 병렬 라인 열차 구성에서 SSP + 혈소판 첨가제 솔루션 (PAS) 300 ML은 기차 길이를 감소, PAS는 열차의 맨 위에 있어야합니다. PAS 및 제 버피 코트 사이에 선을 고정. </li><li> 버피 코트 단위 사이의 무균 연결을 열고 버피 코트가 마지막 용기에 배출 할 수 있습니다. </li><li> 용접 및 PAS 및 제 버피 코트 사이의 클램프를 엽니 다. 첨가제 솔루션의 삼분의이 순차적으로 버피 코트 컨테이너의 각을 씻어 할 수 있습니다. 두 번 이상 남아있는 PAS의 절반을 사용하여 각 시간을 반복합니다. </li><li> 평균 버피 코트 풀 볼륨 약 600 ML해야합니다. 각 버피 코트의 대상 볼륨과 혈소판이 충족되면 플라즈마 비율은 32 수 - 47% 나중에 그 과정에서 가로 챌 병원체 불 활성화 처리를 위해 필요에 따라. </li><li> 빈 SSP +와 버피을 삭제 하시겠습니까코트 용기. </li><li> 최적의 혈소판 복구를 들어, 원심 분리하기 전에 1 시간 동안 교반에 수영장을 유지. </li><li> 멸균은 버피 코트 수영장에 통합 leukoreduction 필터와 혈소판 스토리지 컨테이너를 연결합니다. </li><li> 정지 혈소판 (9 분 20 초에 462 RCF)에서 적혈구를 분리 할 수​​있는 버피 코트 수영장의 &quot;부드러운 스핀&quot;을 수행합니다. 혈소판 저장 용기에 leukoreduction 필터를 통해 자동으로 혈액 분리기를 사용하여 혈소판 현탁액을 표현한다. </li><li> 420 ML 볼륨, 2.5-7.0 X 10 11 혈소판 복용하고, ≤ 4 X 10 6 / ML 붉은 세포 - 이전에 설명 된 처리 요구 사항은 혈소판 정지가 차단 300 ML 처리 사양을 충족하는지 확인합니다. </li></ol> 4. 치료를 차단 <ol><li> 수집 후 1 일의 끝 (하루 0 수거의 날입니다) 전에 차단 치료를 수행합니다. </li><li> 차단 처리 세트 포장을 푸는투명한 플라스틱 주머니에서 듀얼 저장 용기가있는. </li><li> 멸균은 도청 처리 세트에 amotosalen 컨테이너의 튜브에 혈소판 정지 컨테이너를 연결합니다. </li><li> 지역 요구 사항에 따라 적절한 혈액 제품 식별을 차단 처리 설정 저장 용기 라벨을 지정합니다. </li><li> 혈소판을 잡아와 조명 컨테이너에 흐름에 amotosalen 솔루션을 수 있도록 먼저 amotosalen 컨테이너에 하단의 캐뉼라을 깰. 혈소판은 조명 컨테이너에 amotosalen 컨테이너를 통해 흐를 수 있도록 amotosalen 컨테이너의 상단 캐뉼라를 해봐. </li><li> 부드럽게 혈소판과 amotosalen 혼합물을 혼합 amotosalen 컨테이너에 조명 컨테이너에서 공기를 표현한다. </li><li> 튜브의 4cm에 대해 작성, 튜브에 혈소판 혼합물의 작은 금액을 표현한다. 이 튜브와 조명 컨테이너 모두에서 혈소판이 병원체 inactivati​​을 받다 보장치료. </li><li> 조명 컨테이너와 amotosalen 컨테이너 사이의 튜브를 밀봉합니다. 조명 컨테이너에서 연장 튜브의 약 4cm보다 더를 남겨 없습니다. 제거하고 폐기 빈 혈소판과 amotosalen 용기를하고 샘플링 파우치에 클램프를 닫습니다. </li><li> 왼쪽에있는 큰 칸에있는 조명 컨테이너와 오른쪽에있는 작은 구획의 주최자와 조명기로 처리 세트를 놓습니다. </li><li> 조명기에 기부 ID, 제품 코드, 및 가공 세트 로트 번호를 입력 휴대용 바코드 장치를 사용합니다. 금속 커버를 닫고 조명기 그래픽 인터페이스에 메시지가 표시되면, 서랍을 닫습니다. 조명을 시작하려면 &quot;시작&quot;을 누르십시오. </li><li> 조명 후, 조명기에서 처리 세트를 제거합니다. 조명기가 자동으로 처리 혈소판 장치 (들)에 대한 치료 보고서를 인쇄합니다. </li><li> 주최자의 용기 포장을 푸는와 P에 목을 매latelets 및 가공 세트, 조명 컨테이너의 출구에서 캐뉼라을 아프게하고, 혈소판은 화합물 흡착 장치 (CAD) 용기에 흐를 수 있습니다. </li><li> 플라즈마 추출기를 사용하여 조명 컨테이너에 CAD 컨테이너에서 공기를 표현, CAD 웨이퍼를 구부리 않도록주의를 즐길 수도 있습니다. </li><li> CAD 컨테이너의 입구 포트에 근처에있는 튜브를 밀봉합니다. 제거하고 빈 조명 컨테이너를 폐기하십시오. </li><li> 최소 6 시간의 혈소판 교반기에 첨부 된 저장 용기와 CAD 컨테이너,하지만 이상 16 시간을 놓으십시오. 이 ≤ 2 μm의 농도에 잔류 amotosalen의 감소가 발생합니다. </li><li> CAD 치료 후 교반기에서 혈소판 단위를 제거합니다. 혈소판을 잡아. 캐뉼라을 해제하고 혈소판의 저장 용기로 유동 할 수 있습니다. </li><li> CAD 컨테이너에 저장 용기에서 공기를 표현한다. 잔여 혈소판 농축 흐름 다시 저장 용기에 의한하자중력. Y-피팅 위의 튜브를 밀봉하고 빈 CAD 컨테이너를 제거합니다. </li><li> 필요에 따라 저장 용기 사이 재배포 볼륨입니다. 볼륨 조정은 저장 용기의 무게에 의해 만들어집니다. 몇 센티미터에 저장 용기의 입구 위의 각 스토리지 컨테이너에 튜브를 밀봉, 5.2에 설명 된대로이 최종 제품에서 멸균 샘플을 확보 용이하게한다. </li></ol> 5. 제품 샘플링 <ol><li> 일상적인 QC 테스트의 경우 최종 저장 용기는 저장 용기의 샘플링 주머니를 사용하여 한 번에 맛보실 수 있습니다. 이렇게하려면 혈소판 장치가 잘 혼합되도록 한 후 주머니에 클램프를 열고 여러 번 당겨 요. 주머니는 혈소판이 가득 한 후 튜브를 밀봉합니다. 적절한 실험실 튜브에 혈소판 샘플을 전송하고 즉시 assays을 수행합니다. </li><li> 이러한 검증 연구로, 저장의 과정을 통해 여러 시간 지점에서 샘플을 구하려면 무균 연결혈소판 저장 용기의 튜브에 새로운 샘플링 컨테이너. 혈소판이 잘 샘플링 컨테이너에 전송하기 전에 혼합되어 있는지 확인합니다. </li></ol> 6.에서 체외 기능 평가 <ol><li> 이 검증 연구를 들어, 체외 평가에서 CAD 처리 (1 일 또는 2 일, CAD 기간에 따라 다름) 후 다시 4 일에 수행 된 (또는 5 일)과 일 7. 체외 측정에서 볼륨, 혈소판 수, pH를, 포함 혈액 가스 (PO 2, PCO 2), 포도당, 젖산, 그리고 회전. </li><li> 볼륨 첨가제 솔루션에서 혈소판의 비중으로 1.01 g / ML을 사용하여 무게에 의해 결정되었다. </li><li> 헤모글로빈 오염은 색상 차트로 비교를 사용하여 시각적으로 평가되었습니다. </li><li> 회전은 시각적으로 산출 된 것입니다. </li><li> 다른 assays의 방법론에 대해 &quot;장비의 표&quot;를 참조하십시오. </li></ol> 7. 대표 결과 d를 생산하는 과정ouble 복용 버피 코트 혈소판은 볼륨과 혈소판에 대한 목표 사양을 충족 개별 버피 코트의 생산을 시작합니다. 이 최종 공정에서는 정품 확인을 통해 개별 버피 코트의 혈소판을 측정 할 실질적인하지 않습니다, 우리는 우리가 지속적으로 대상 볼륨과 혈소판을 충족 할 수 있도록하기 위해 버피 코트를 최적화하기 위해 별도의 노력을 사업으로 시작했다. 표 1에 도시 된 바와 같이, 우리의 최적화 된 버피 코트 46에서 볼륨 및 혈소판 모두 ± 2 ML 37 ± 3 %, 각각의 대상 값으로 호의를 비교했다. 풀링 후, 버피 코트 풀의 볼륨과 혈소판은 각각 부드러운 회전 원심 분리하기 전에 약 600 ML 20 %해야합니다. 표 2에 도시 된 바와 같이, 우리의 버피 코트의 수영장 615 평균 ± 5 ML을, 혈소판 수치가 19 평균 ± 1 %입니다. 더블 선량 혈소판의 conc의 부드러운 회전 원심 분리 결과차단 혈액 시스템 DS 처리 설정을 사용 병원체 불 활성화에 대한 입력 요구 사항을 충족합니다 entrate. 차단 치료를 위해 주요 입력 매개 변수는 볼륨, 혈소판 수, 플라즈마 비율 및 RBC 내용이 포함되어 있습니다. 또한, 우리는 버피 코트 수영장에 비해 혈소판 농축액에있는 혈소판의 ≥ 75 %를 복구하는 것을 목표로하고 있습니다. 지역 요구 사항에 따라, 백혈구 (WBC) 오염은 &lt;1x10 6 / 단위 수 있어야합니다. 혈소판의 검증에 집중이 가로 치료뿐만 아니라 백혈구 오염 및 표 3에 도시 된 바와 같이 혈소판 복구 목표에 대한 주요 매개 변수를 만났다. 병원체 불 활성화에 대한 요격 과정은 하나의 가로 채기 처리 설정을 사용하여 두 번 복용 혈소판 농축액에 수행됩니다. 처리 세트는 처리 장치가 경로의 완성에 두 개인의 치료 혈소판 투여로 분할 할 수 있도록이 통합 저장 용기를 포함ogen의 불 활성화 과정. 유럽 ​​가이드 라인은 테스트 단위의 75 %가 ≥ 200x10 9 혈소판을 포함 할 것을 요구 당 치료 dose1, 스웨덴 지역의 요구 사항이 테스트 단위의 75 %가 포함&gt; 복용량 당 240x10 9 혈소판이 필요합니다. 차단 치료 후 평균 혈소판 내용은 265이었다 ± 22 X10 9 (n은 = 24). 또한, 단위의 88 %가 만족 또는 치료 복용량 당 240x10 9 혈소판을 초과,이은 유럽 지침 및 스웨덴어로 규정 모두에서 잘 수 있습니다. 이중 복용량 버피 코트의 준비와 각각 차단 처리 프로세스의 그림을위한 그림 1 &amp; 2를 참조하십시오. 이 확인을 위해, 우리는 혈소판의 체외 특성의이 차단 처리 (개별 저장 용기에 분할 한 후 예를 들면) 이후에 중점을 측정, 매개 변수는 저장 용량이 7 일 동안 측정 하였다. 평균과 표준 편차는에 수집 된혈소판 투여 량, 산도, PO 2, PCO 2, 젖산 생산과 포도당 소비. 그림 3은 저장 후 7 일 이상 차단 치료 후 분할 제품의 각 차단 치료와 평균 혈소판 복용하기 전에 두 번 복용 혈소판 농축액의 혈소판 투여를 시작하는 의미를 보여줍니다. 저장 중 혈소판 손실은 약 9 %이다. 이 감소는 기존 혈소판의 저장 기간 동안 혈소판의 예상 손실의 차이가 있습니다.이 표 4는 하나의 단위로 처리 및 분할 후 차단 혈소판의에서 체외 특성을 요약 한 것입니다. 유럽​​ 요구 사항에 따라, 혈소판의 pH는 유통 기한의 끝 부분을 통해 6.4 이상 남아 있어야합니다. 처리 과정에서 혈소판의 pH가 약간 혈소판 농도, 양, 그리고 혈소판 스토의 가​​스 투과성을 기반으로 떨어 집중분노의 컨테이너. 그림 4는 저장 7 일에 걸쳐 분할 혈소판 제품의 pH를 보여줍니다. 저장하는 동안 pH는 안정적이고 잘 처리 요구 사항 내에서 유지. 으로 인물 5A 및 5B, 혈소판 O이 소비와 CO 2 생산에 표시된 저장 후 7 일 동안 PL2410 컨테이너에서 차단 혈소판에 의해 계속 호흡을 나타냅니다. 숫자는 6A 및 6B 스토리지 7 일 동안 젖산과 포도당 수준을 보여 . 혈소판 포도당 소비와 젖산 생산은 스토리지의 7 일 동안 서로 일치합니다. 5 단위는 포도당 수준 이하 1.11 mmol / L을 (포도당 분석에 대한 낮은 제한)했다. 특히, 볼륨, 혈소판 수, 플라즈마 비율, 빨간색 파, 버피 코트의 준비와 풀링을 검증 제작 혈소판 그런 일이 도청 치료에 대한 입력 기준을 충족 집중ood 세포 오염. 최종 단위는 혈소판 복용과 산도 등의 스토리지를 7 일 동안 유효성 검사 기준을 만났습니다. <table border="1"><tbody><tr><td> 매개 변수 </td><td> 대상 범위 </td><td> 결과 ± SD 평균 </td></tr><tr><td> 볼륨 (ML) </td><td> ~ 48 </td><td> 46 ± 2 </td></tr><tr><td> 혈소판 (%) </td><td> ~ 37 </td><td> 37 ± 3 </td></tr><tr><td> 풀링하기 전에 시간을 잡아 </td><td> 교반기에서 숙박 </td><td> 교반기에서 숙박 </td></tr></tbody></table> 개인 버피 코트 (N = 19)의 표 1. 특성. <table border="1"><tbody><tr><td> 매개 변수 </td><td> 대상 범위 </td><td> 결과 ± SD 평균 </td></tr><tr><td> 볼륨 (ML) </td><td> ~ 600 </td><td> 615 ± 5 </td></tr><tr><td> Hematocrit (%) </td><td> ~ 20 </td><td> 19 ± 1 </td></tr><tr><td> 원심 분리하기 전에 시간을 잡아 </td><td> 교반기에서 1 시간 </td><td> 교반기에서 1 시간 </td></tr></tbody></table> 버피 코트 풀 (N = 12)의 표 2. 특성. <table border="1"><tbody><tr><td> 매개 변수 </td><td> 목표 </td><td> 결과 ± SD 평균 </td></tr><tr><td> 볼륨 (ML) </td><td> 370-420 </td><td> 404 ± 8 </td></tr><tr><td> 혈소판 수 (X10 9 / 단위) </td><td> 250-700 </td><td> 577 ± 62 </td></tr><tr><td> 혈소판 복구 (%)를 평균 </td><td> ≥ 75 </td><td> 75 ± 4 </td></tr><tr><td> 플라즈마 비율 (%) </td><td> 32-47 </td><td> 38 ± 1 </td></tr><tr><td> RBC (X10 6 / ML) </td><td> ≤ 4 </td><td> 1.2 ± 0.4 </td></tr><tr><td> WBC (X10 6 </s&gt; / 단위 이상) </td><td> ≤ 1 </td><td> 0.11 ± 0.1 </td></tr><tr><td> 차단 (시간) 전에 시간을 잡아 </td><td> 일 1 ≤ 끝 </td><td> 일 1 ≤ 끝 </td></tr></tbody></table> 두 번 복용 혈소판의 표 3. 특성 (n은 = 12)을 중점을두고 있습니다. <table border="1"><tbody><tr><td></td><td> 평균 ± SD </td><td> 최소 </td><td> 최대 </td></tr><tr><td> 볼륨 (ML) </td><td> 199 ± 16 </td><td> 182 </td><td> 236 </td></tr><tr><td> 혈소판 수 (X10 9 / 단위) </td><td> 265 ± 22 </td><td> 225 </td><td> 292 </td></tr><tr><td> 산도 (22 ° C) </td><td> 6.9 ± 0.1 </td><td> 6.8 </td><td> 7.0 </td></tr><tr><td> PO 2 (kPa) </td><td> 21.4 ± 4.8 </td><td> 12.8 </td><td> 27.3 </td></tr><tr><td> PCO 2 (kPa) </td><td> 4.3 및 PLusmn, 0.4 </td><td> 3.3 </td><td> 4.9 </td></tr><tr><td> 락트산 (mmol / L) </td><td> 9.1 ± 1.7 </td><td> 6.8 </td><td> 12.4 </td></tr><tr><td> 포도당 (mmol / L) </td><td> 5.3 ± 0.9 </td><td> 3.7 </td><td> 6.5 </td></tr></tbody></table> 차단 치료 혈소판의 1 일 / 2 (싱글 단위, N = 24)의 표 4. 특성. <img alt="그림 1" src="/files/ftp_upload/4414/4414fig1.jpg" /> 그림 1. 7 버피 코트의 수영장에서 더블 선량 혈소판 농축 생산. <img alt="그림 2" src="/files/ftp_upload/4414/4414fig2.jpg" /> 그림 2. 차단 혈액 시스템과 더블 선량 혈소판 농축액의 병원체 불 활성화. <img alt="그림 3" src="/files/ftp_upload/4414/4414fig3.jpg" /> 그림 3. 전과에 대한 혈소판 투여 량을 평균차단 치료 후 7 일 (N 도청 이전 = 12; 차단 한 후 N = 24). <img alt="그림 4" src="/files/ftp_upload/4414/4414fig4.jpg" /> 그림 4. 도청 처리 (N = 24) 이후에 혈소판 산도 ± SD를 의미합니다. <img alt="그림 5A" src="/files/ftp_upload/4414/4414fig5a.jpg" /> 그림 5A는. 도청 처리 (N = 24) 이후 PO 2 ± SD를 의미합니다. <img alt="그림 5B" src="/files/ftp_upload/4414/4414fig5b.jpg" /> 도 5B는. 도청 처리 (N = 24) 이후 PO 2 ± SD를 의미합니다. <img alt="그림 6A" src="/files/ftp_upload/4414/4414fig6a.jpg" /> 그림 6A는. 도청 처리 (N = 24) 이후 젖산 수준의 ± SD를 의미합니다. <img alt="그림 6B" src="/files/ftp_upload/4414/4414fig6b.jpg" /> 그림 6B는. 및 포도당 수준을 의미plusmn, SD 차단 처리 후 (N = 24).

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C. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Protection+Against+TA-GVHD+Due+to+Platelet+Transfusion+By+Using+Pathogen+Inactivation+with+the+INTERCEPT+Blood+SystemTM+-+Gamma+Irradiation+is+Not+the+Only+Answer.">Protection Against TA-GVHD Due to Platelet Transfusion By Using Pathogen Inactivation with the INTERCEPT Blood SystemTM - Gamma Irradiation is Not the Only Answer.</a> Haematologica. 95 (Extra 1), 230-237 (2010).</li><li>Corash, L., Lin, L. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Novel+processes+for+inactivation+of+leukocytes+to+prevent+transfusion-associated+graft-verus-host+disease.">Novel processes for inactivation of leukocytes to prevent transfusion-associated graft-verus-host disease.</a> Bone Marrow Transplant. 33, 1-7 (2004).</li></ol>

이 기사에 생산 및 무료 액세스 Cerus의 후원을받습니다.

버피 코트의 혈소판은 여러 처리 단계를 필요로하는 혈소판 단위를 생산 전체 비용에 반영해야합니다 인사 시간, 소모품, 장비 및 폐기물 등의 사후 수집 비용에 따른 모든 책임은 사용자에게 있습니다. 각 버피 코트에서 혈소판 수율을 (버피 코트 볼륨 이랑 혈소판을 최적화를 통해) 개선하면 일곱 버피 코트의 수영장에서 두 번 복용 버피 코트 혈소판 단위의 생산이 가능합니다. 이 최적화가 수행 될 때, 버피 코트의 수는 혈소판 투여의 고정 번호를 생산하는 데 필요한 감소 될 수있다,이를 버피 코트의 전반적인 활용도를 개선하고 추가 혈소판의 생산 (PCS) 중점을 가능하게한다. 인사 시간뿐만 아니라 풀링 세트, 혈소판 첨가제 솔루션, 살균 연결 웨이퍼, 필터 세트, 및 원심 분리 절차 등의 소모품 및 장비 비용은 최대 50 %까지 감소된다. 혈소판 생산을 최적화하고, 생을 관련 비용을 절감 할뿐만 아니라S 풀링 방식은 우리뿐만 아니라 우리의 수혈을받는 사람에게 향상된 보호 기능을 제공 할 수 있도록 차단 듀얼 스토리지 컨테이너 처리 세트와 함께 사용하기위한 입력 요구 사항을 충족 혈소판 농축액 (PC)를 생성 할 수 있습니다. 병원체 불 활성화에 대한 도청 피 시스템은 핵산 복제 및 질병을 일으킬 수없는 렌더링 병원균을 방지 covalently 상호 링크 DNA와 RNA에 amotosalen와 자외선 A (UVA) 빛을 사용합니다. 3 그것은 효과적으로 바이러스, 세균 등의 병원균의 광범위한 스펙트럼을 inactivates , 기생충 및 오염 기증자 백혈구. 4-6 도청은 새로운 테스트가 개발하고 궁극적으로 구현하는 상당한 재정적 투자를 필요로하는 동안 역사적으로 상당한 지연을 포함 신흥 병원균에 대한 현재 테스트 패러다임에 대한 대안을 제공하는 경우 테스트 사용할 수 있습니다. 7,8는 또한 중복 안전 measu에 대한 대안을 제공 할 수 있습니다이러한 세균 검출 9 감마 방사선으로 고해상도. 또한 10-12, 도청은 우리가 두 번 투여 혈소판 단위를 취급 할 수있는 우리의 생산 효율성을 장점과 우리가 예산을 준수하는 데 도움이됩니다. 가로 더블 복용 버피 코트 방법은 혈액 센터 워크 플로우의 다양한 적용 할 수 있습니다. 예로서, 전체 혈액 컬렉션 500 ML로 증가 될 수있다; 컬렉션은 22 밤새 저장 될 수 있습니다 ° C 분리하기 전에. 또한, 다른 버피 코트 풀링 방법이 가능합니다 (예를 들어 문어 방법 대신 기차 방법) 및 / 또는 자동 장치 (예 TACSI) 남아있는 붉은 세포에서 두 번째 원심 분리하여 혈소판 정지의 분리에 활용 될 수있다 . 증가 혈소판 내용이 필요한 경우, 여러 기술 혈소판 수, 전체 혈액의 하룻밤 배양, a​​djus에 따라 기증자의 사전 선택 등의 이용이 가능합니다원심 분리 설정 tment, 또는 7 대신 8 버피 코트의 풀을 활용. 풀링의 제한으로 인해 현재 사용할 수 있고 원심 분리기의 버킷 용량 설정, 버피 코트 수영장의 총 볼륨은 약 600 ML해야합니다. 이 프로토콜에 설명 원심 분리 과정과 설정은 7 버피 코트의 수영장에 대한 차단 매개 변수를 충족하는 제품을 얻을 수 있도록 최적화되었습니다. 수영장에서 버피 코트의 숫자가 수정되는 경우 원심 분리 설정을 수정해야합니다. 일부 국가에서는 최소 혈소판 복용은 높은 있으며, QC 요구 사항은 스웨덴에 비해 더 엄격한 수 있습니다. 따라서, 우리의 결과는 보편적 적용되지 않을 수 있습니다. 이러한 국가에서는 사전에 차단 치료에 두 번 복용 PC는 가로 채서 처리 및 분할 후 지역의 요구 사항을 충족하기 위해 혈소판의 큰 숫자를 포함해야합니다. 때문에 최대 혈소판 콘텐츠 및 치료 볼륨 구경R 도청는 각각 7x10 11 혈소판과 420 ML이며, 차단 처리 요구 사항을 초과 또는 두 치료 복용으로 분할 할 충분한 혈소판 콘텐츠를 단위의 비율은, 이러한 혈소판 복용, QC 기준에 대한 로컬 요구 사항 등의 요소에 따라 달라집니다 버피 코트 최적화 결과, 생산의 안정성. 더블 선량 PC는 차단 처리 요구 사항을 초과하는 경우에는 수동으로 요구 사항을 충족하도록 조정하고 이후 처리 될 수 있습니다. 7 버피 코트 수영장이 차단 후 두 번 복용 제품에 부족한 혈소판을 산출에 몇 차례에서, 우리는 도청 치료를 수행 할 수 없습니다 선출한다. 또는 다른 혈액 센터는이를 통해 모든 단위에 병원체 불 활성화를 수행, 단일 선량 차단 처리 세트 (대형 볼륨 세트를 IE)로 PC를 취급하고 하나의 큰 치료 용량으로 PC를 저장하도록 선택할 수 있습니다. 우리가 만날 수 있도록 우리QC 요구하고 병원체 가능한 한 우리의 혈소판 단위의 많은, 우리가 풀링 할 때, 수영장에서 5.6x10 11 혈소판의 최소 혈소판 내용에 발생합니다, 기증자 혈소판 수치에 따라 버피 코트를 선택 비활성화. 이 도청 치료 후이 치료 용량을 생산하기에 충분한 혈소판 내용을 보장합니다. Google의 확인은 7 전체 혈액 파생 된 버피 코트 단위가 성공적으로 풀링 및 혈소판에 대한 차단 프로세스를 처리, 제조 (스웨덴어 요구 사항과 유럽 지침) 및 환자 지원을위한 허용 기준을 충족 2 병원체 inactivated 혈소판 제품에 발생 될 수 있다는 설명 임상 실습 가이드 라인과 스웨덴의 표준 혈소판 주입 방법에 따라 혈소판 수혈을 필요로하는.

<table border="1">
	<tbody>
		<tr>
			<td>Material / Equipment</td>
			<td>Company</td>
			<td>Catalogue Number</td>
			<td>Comments</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>&nbsp;</td>
			<td>&nbsp;</td>
			<td>&nbsp;</td>
			<td>Whole blood donation, primary separation, and platelet production</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Blood collection pack</td>
			<td>Fenwal</td>
			<td>R6485</td>
			<td>Top/Bottom set</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Automated component extractor</td>
			<td>Fenwal</td>
			<td>Optipress-II</td>
			<td>&nbsp;</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Blood mixer and balance system</td>
			<td>Baxter</td>
			<td>Easymix V3</td>
			<td>&nbsp;</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Platelet leukocyte filtration set</td>
			<td>Fenwal</td>
			<td>K4R7042</td>
			<td>&nbsp;</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Centrifuge</td>
			<td>Hettich</td>
			<td>Roto Silenta 63 RS</td>
			<td>Version 5.5</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Platelet additive solution - SSP+</td>
			<td>MacoPharma</td>
			<td>SSP2030U</td>
			<td>300 ml</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Sterile tubing welder</td>
			<td>Terumo</td>
			<td>T-SCD</td>
			<td>&nbsp;</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>&nbsp;</td>
			<td>&nbsp;</td>
			<td>&nbsp;</td>
			<td>INTERCEPT treatment &amp; storage</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>INTERCEPT processing set</td>
			<td>Cerus</td>
			<td>INT2503</td>
			<td>Dual Storage (DS) set</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>INTERCEPT Illuminator</td>
			<td>Cerus</td>
			<td>INT100</td>
			<td>&nbsp;</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>PC sample pack</td>
			<td>Fenwal</td>
			<td>FTX 1122</td>
			<td>&nbsp;</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Incubator</td>
			<td>Helmer</td>
			<td>PC2200/PC3200</td>
			<td>&nbsp;</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Agitator</td>
			<td>Helmer</td>
			<td>PF48H/PF96H</td>
			<td>&nbsp;</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>&nbsp;</td>
			<td>&nbsp;</td>
			<td>&nbsp;</td>
			<td>Evaluation of in vitro Platelet Function</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Blood gas analyzer</td>
			<td>Radiometer</td>
			<td>ABL 735</td>
			<td>Used for pH, blood gases, and lactate measurement</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Chemistry system</td>
			<td>Ortho Clinical Diagnostic</td>
			<td>Vitros 5.1</td>
			<td>Used for glucose measurement</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Hematology analyzer</td>
			<td>Boule Medical AB</td>
			<td>Medonic CA620-Cellguard</td>
			<td>Used for platelet count measurement</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Flow cytometer</td>
			<td>BD</td>
			<td>FACSCanto</td>
			<td>Used for white blood cell measurement</td>
		</tr>
	</tbody>
</table>

preparation and pathogen inactivation of double dose buffy coat platelet products using the intercept blood system

혈액 센터는 극대화 생산에 발생하는 혈액 제품 기부 수율뿐만 아니라, 수혈 전송 질병으로부터 보호 등의 수혈 환자에 대한 안전성 가능한 가장 높은 수준을 보장하는 등 많은 도전에 직면하고 있습니다. 이것은 소모품, 장비, 폐기물 등 중 개인 비용 등의 운영 비용을 최소화 fiscally 책임 방식으로 수행해야합니다. 몇 가지 방법은 혈소판이 수혈에 중점을 생산 할 수 있습니다. 가장 일반적인 중 하나는 하나의 치료 혈소판 단위 (단위 당 또는 현지 규정에 따라 ≥ 2.0 X10 11 혈소판) 반년 혈액 기부까지에서 버피 코트 층을 풀링하여 준비되어있는 버피 코트 방식입니다. &quot;더블 복용량&quot;전체 혈액 유래 혈소판을 생산하기위한 절차는 최근에 개발되었습니다. 준비하기위한 새로운 방법입니다 여기에 제시된이중 복용량 전체 혈액 유래 혈소판은 7 버피 코트와 이후 병원체 불 활성화에 대한 요격 피 시스템과 이중 복용량 단위를 치료 수영장에서 중점을두고 있습니다. 차단은 바이러스, 박테리아, 기생충 및 기증 혈액에 존재 할 수 있습니다 오염 기증자 화이트 셀을 비활성화하기 위해 개발되었습니다. , 듀얼 저장 용기 (이하 &quot;DS 세트&quot;)로 설정 절편 처리를 이용하여 두 번 복용 버피 코트 방식을 차단 페어링하면함으로써 환자 안전을 극대화, 혈액 센터는 단일 병원체 불 활성화 처리 세트에서의 이중 복용량 단위의 각을 치료 할 수 있습니다 비용을 최소화하면서. 이중 복용량 버피 코트 방법은 적은 버피 코트가 필요하며 단일 복용 버피 코트 혈소판 단위의 준비 및 치료에 비해 50 % (예를 들면 풀링 세트, 필터 세트, 혈소판 첨가제 솔루션 및 멸균 연결 웨이퍼)까지하여 소모품의 사용을 감소 . 기타 비용 절감 적은 폐기물, 적은 장비 maintenan을 포함CE, 낮은 전력 요구 사항, 인사 시간을 단축하고, 낮은 수집 비용은 apheresis 기술에 비해.

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Preparation and Pathogen Inactivation of Double Dose Buffy Coat Platelet Products using the INTERCEPT Blood System

이 문서는 전체 혈액 기부에서 준비 병원체 불 활성화에 대한 요격 피 시스템과 치료를 두 번 복용 버피 코트의 혈소판 중점을 생산 외 레브로 대학 병원에서 사용하는 프로세스를 설명합니다.<em&gt; 체외에서</em최종 혈소판 단위의&gt; 품질 스토리지의 7 일 동안 평가하고 있습니다.

차단 혈액 시스템을 사용하여 준비 및 더블 복용 버피 코트의 혈소판 제품의 병원체 불 활성화

Blood centers are faced with many challenges including maximizing production yield from the blood product donations they receive as well as ensuring the ...

preparation-pathogen-inactivation-double-dose-buffy-coat-platelet

Research

JoVE Journal

Medicine

28.5K 조회수.  Örebro University Hospital. 이 문서는 전체 혈액 기부에서 준비 병원체 불 활성화에 대한 요격 피 시스템과 치료를 두 번 복용 버피 코트의 혈소판 중점을 생산 외 레브로 대학 병원에서 사용하는 프로세스를 설명합니다. 체외에서 품질 스토리지의 7 일 동안 평가하고 있습니다.

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Minimal Erythema Dose (MED) Testing

Ultraviolet radiation (UV) therapy is sometimes used as a treatment for various common skin conditions, including psoriasis, acne, and eczema. The dosage of UV light is prescribed according to an individual's skin sensitivity. Thus, to establish the proper dosage of UV light to administer to a patient, the patient is sometimes screened to determine a minimal erythema dose (MED), which is the amount of UV radiation that will produce minimal erythema (sunburn or redness caused by engorgement of capillaries) of an individual's skin within a few hours following exposure. This article describes how to conduct minimal erythema dose (MED) testing. There is currently no easy way to determine an appropriate UV dose for clinical or research purposes without conducting formal MED testing, requiring observation hours after testing, or informal trial and error testing with the risks of under- or over-dosing. However, some alternative methods are discussed.

Minimal Erythema Dose MED Testing

This article describes how to conduct minimal erythema dose (MED) testing in order to determine the lowest dose of ultraviolet radiation that will cause erythema (burning) when administered to an individual.

최소 홍반 량 (MED) 시험

Ultraviolet radiation (UV) therapy is  sometimes used as a treatment for various common skin conditions, including  psoriasis, acne, and eczema. The ...

연구

의학

Permanent Cerebral Vessel Occlusion via Double Ligature and Transection

Stroke is a leading cause of death, disability, and socioeconomic loss worldwide. The majority of all strokes result from an interruption in blood flow (ischemia) 1. Middle cerebral artery (MCA) delivers a great majority of blood to the lateral surface of the cortex 2, is the most common site of human stroke 3, and ischemia within its territory can result in extensive dysfunction or death 1,4,5. Survivors of ischemic stroke often suffer loss or disruption of motor capabilities, sensory deficits, and infarct. In an effort to capture these key characteristics of stroke, and thereby develop effective treatment, a great deal of emphasis is placed upon animal models of ischemia in MCA.
Here we present a method of permanently occluding a cortical surface blood vessel. We will present this method using an example of a relevant vessel occlusion that models the most common type, location, and outcome of human stroke, permanent middle cerebral artery occlusion (pMCAO). In this model, we surgically expose MCA in the adult rat and subsequently occlude via double ligature and transection of the vessel. This pMCAO blocks the proximal cortical branch of MCA, causing ischemia in all of MCA cortical territory, a large portion of the cortex. This method of occlusion can also be used to occlude more distal portions of cortical vessels in order to achieve more focal ischemia targeting a smaller region of cortex. The primary disadvantages of pMCAO are that the surgical procedure is somewhat invasive as a small craniotomy is required to access MCA, though this results in minimal tissue damage. The primary advantages of this model, however, are: the site of occlusion is well defined, the degree of blood flow reduction is consistent, functional and neurological impairment occurs rapidly, infarct size is consistent, and the high rate of survival allows for long-term chronic assessment.

Permanent Cerebral Vessel Occlusion via Double Ligature and Transection

We describe a highly reproducible method for the permanent occlusion of a rodent major cerebral blood vessel. This technique can be accomplished with very little peripheral damage, minimal blood loss, a high rate of long-term survival, and consistent infarct volume commensurate with the human clinical population.

영구적 인 뇌 혈관 폐색<em&gt;를 통해</em&gt; 더블 합자 및 절개

Stroke is a leading cause of death, disability, and socioeconomic loss worldwide. The majority of all strokes result from an interruption in blood flow ...

Drug Repurposing Hypothesis Generation Using the "RE:fine Drugs" System

The promise of drug repurposing is that existing drugs may be used for new disease indications in order to curb the high costs and time for approval. The goal of computational methods for drug repurposing is to enable solutions for safer, cheaper and faster drug discovery. Towards this end, we developed a novel method that integrates genetic and clinical phenotype data from large-scale GWAS and PheWAS studies with detailed drug information on the concept of transitive Drug-Gene-Disease triads. We created "RE:fine Drugs," a freely available, interactive dashboard that automates gene, disease and drug-based searches to identify drug repurposing candidates. This web-based tool supports a user-friendly interface that includes an array of advanced search and export options. Results can be prioritized in a variety of ways, including but not limited to, biomedical literature support, strength and statistical significance of GWAS and/or PheWAS associations, disease indications and molecular drug targets. Here we provide a protocol that illustrates the functionalities available in the "RE:fine Drugs" system and explores the different advanced options through a case study.

Drug Repurposing Hypothesis Generation Using the &quot;RE:fine Drugs&quot; System

Here we describe a protocol using the web-based drug repurposing hypothesis generation tool: "RE:fine Drugs." This protocol can be modified to a user's preferences at the level of the query type (gene, drug or disease) and/or the range of available advanced options.

은 &quot;RE를 : 좋은 약&quot;을 사용하여 의약품 용도 변경 가설 발전 시스템

The promise of drug repurposing is that existing drugs may be used for new disease indications in order to curb the high costs and time for approval. The ...

Turbidimetry on Human Washed Platelets: The Effect of the Pannexin1-inhibitor Brilliant Blue FCF on Collagen-induced Aggregation

Turbidimetry is a laboratory technique that is applied to measure the aggregation of platelets suspended in either plasma (platelet-rich plasma, PRP) or in buffer (washed platelets), by the use of one or a combination of agonists. The use of washed platelets separated from their plasma environment and in the absence of anticoagulants allows for studying intrinsic platelet properties. Among the large panel of agonists, arachidonic acid (AA), adenosine di-phosphate (ADP), thrombin and collagen are the most frequently used. The aggregation response is quantified by measuring the relative optical density (OD) over time of platelet suspension under continuous stirring. Platelets in homogeneous suspension limit the passage of light after the addition of an agonist, platelet shape change occurs producing a small transitory increase in OD. Following this initial activation step, platelet clots form gradually, allowing the passage of light through the suspension as a result of decreased OD. The aggregation process is ultimately expressed as a percentage, compared to the OD of platelet-poor plasma or buffer. Rigorous calibration is thus essential at the beginning of each experiment. As a general rule: calibration to 0% is set by measuring the OD of a non-stimulated platelet suspension while measuring the OD of the suspension medium containing no platelets represents a value of 100%. Platelet aggregation is generally visualized as a real-time aggregation curve. Turbidimetry is one of the most commonly used laboratory techniques for the investigation of platelet function and is considered as the historical gold standard and used for the development of new pharmaceutical agents aimed at inhibiting platelet aggregation. Here, we describe detailed protocols for 1) preparation of human washed platelets and 2) turbidimetric analysis of collagen-induced aggregation of human washed platelets pretreated with the food dye Brilliant Blue FCF that was recently identified as an inhibitor of Pannexin1 (Panx1) channels.

We describe a straightforward method for the isolation of washed platelets from human blood followed by agonist-induced platelet aggregation measurements by turbidimetry. As an example we apply this method for studying the aggregation response of human platelets to collagen after a pre-incubation with the Pannexin1 channel inhibitor Brilliant Blue FCF.

콜라겐 - 유도 된 응집에 Pannexin1 억제제의 효과 브릴리언트 블루 FCF : 탁도는 인간 혈소판에 씻어

Turbidimetry is a laboratory technique that is applied to measure the aggregation of platelets suspended in either plasma (platelet-rich plasma, PRP) or ...

Routine Screening Method for Microparticles in Platelet Transfusions

Platelet inventory management based on screening microparticle content in platelet concentrates is a new quality improvement initiative for hospital blood banks. Cells fragment off microparticles (MP) when they are stressed. Blood and blood components may contain cellular fragments from a variety of cells, most notably from activated platelets. When performing their roles as innate immune cells and major players in coagulation and hemostasis, platelets change shape and generate microparticles. With dynamic light scattering (DLS)-based microparticle detection, it is possible to differentiate activated (high microparticle) from non-activated (low microparticle) platelets in transfusions, and optimize the use of this scarce blood product. Previous research suggests that providing non-activated platelets for prophylactic use in hematology-oncology patients could reduce their risk of becoming refractory and improve patient care. The goal of this screening method is to routinely differentiate activated from non-activated platelets. The method described here outlines the steps to be performed for routine platelet inventory management in a hospital blood bank: obtaining a sample from a platelet transfusion, loading the sample into the capillary for DLS measurement, performing the DLS test to identify microparticles, and using the reported microparticle content to identify activated platelets.

Platelet inventory management based on screening microparticle content in platelet concentrates is a new quality improvement initiative in hospital blood banks. The goal is to differentiate activated from non-activated platelets to optimize the use of platelets. Providing non-activated platelets to hematology-oncology patients might reduce their high risk to become refractory.

혈소판 수혈에 미에 대 한 메서드를 검사 하는 루틴

Platelet inventory management based on screening microparticle content in platelet concentrates is a new quality improvement initiative for hospital blood ...

Preparation, Procedures and Evaluation of Platelet-Rich Plasma Injection in the Treatment of Knee Osteoarthritis

Knee osteoarthritis (KOA) is one of the most frequently encountered diseases in the orthopedic department. Existing non-surgical treatments have a limited effect on the repair of cartilage and on bone regeneration. Platelet-rich plasma (PRP) is an autologous bioactive substance that can repair cartilage injury and accelerate bone regeneration effectively. However, reporting of PRP preparation protocols in clinical studies is highly inconsistent, with the majority of studies providing insufficient information to allow the protocol to be reproduced. We describe a repeatable method of preparing PRP visually, the treatment of KOA using PRP intra-articular injection, and methods of evaluating the outcome. PRP was prepared using manual double centrifugation. The PRP layer was extracted from peripheral blood and used for knee joint cavity injection. Evaluations included assessments of blood platelet concentrations and clinical outcomes. Preparation of PRP by manual centrifugation requires less apparatus and is less costly than plasma filtration or centrifugation using equipment. The centrifugation time of our double centrifugation method was 6 and 5 minutes for the respective centrifugations at forces of 800 and 1400 x g, respectively, to allow for the consistent preparation of standardized PRP. However, a manual method is susceptible to operator error, and PRP batch preparation is not available. Intra-articular injection of PRP proved to be an effective treatment for knee osteoarthritis. The entire treatment procedure took less than 30 minutes, the blood platelet concentration of PRP could be standardized, and treatment was proven to be effective when evaluated by follow-up.

Knee osteoarthritis is frequently seen in the orthopedic department. We introduce in detail the entire knee osteoarthritis treatment process with platelet-rich plasma injection, including preparation, procedures, and evaluation.

준비, 절차 및 무릎 관절염의 치료에 혈소판이 풍부한 혈장 주입의 평가

Knee osteoarthritis (KOA) is one of the most frequently encountered diseases in the orthopedic department. Existing non-surgical treatments have a limited ...

An In Vivo Method for Evaluating the Gut-Blood Barrier and Liver Metabolism of Microbiota Products

The gut-blood barrier (GBB) controls the passage of nutrients, bacterial metabolites and drugs from intestinal lumen to the bloodstream. The GBB integrity is disturbed in gastrointestinal, cardiovascular and metabolic diseases, which may result in easier access of biologically active compounds, such as gut bacterial metabolites, to the bloodstream. Thus, the permeability of the GBB may be a marker of both intestinal and extraintestinal diseases. Furthermore, the increased penetration of bacterial metabolites may affect the functioning of the entire organism.
Commonly used methods for studying the GBB permeability are performed ex vivo. The accuracy of those methods is limited, because the functioning of the GBB depends on intestinal blood flow. On the other hand, commonly used in vivo methods may be biased by liver and kidney performance, as those methods are based on evaluation of urine or/and peripheral blood concentrations of exogenous markers. Here, we present a direct measurement of GBB permeability in rats using an in vivo method based on portal blood sampling, which preserves intestinal blood flow and is virtually not affected by the liver and kidney function. 
Polyurethane catheters are inserted into the portal vein and inferior vena cava just above the hepatic veins confluence. Blood is sampled at baseline and after administration of a selected marker into a desired part of the gastrointestinal tract. Here, we present several applications of the method including (1) evaluation of the colon permeability to TMA, a gut bacterial metabolite, (2) evaluation of liver clearance of TMA, and (3) evaluation of a gut-portal blood-liver-peripheral blood pathway of gut bacteria-derived short-chain fatty acids. Furthermore, the protocol may also be used for tracking intestinal absorption and liver metabolism of drugs or for measurements of portal blood pressure.

An In Vivo Method for Evaluating the Gut-Blood Barrier and Liver Metabolism of Microbiota Products

The access of nutrients, microbiota metabolites and medicines to the circulation is controlled by the gut-blood barrier (GBB). We describe a direct method for measuring the GBB permeability in vivo, which, in contrast to commonly used indirect methods, is virtually not affected by liver and kidney functions.

창 자-혈액 장벽 및 간 대사 Microbiota 제품의 평가 위한 Vivo에서 방법

The gut-blood barrier (GBB) controls the passage of nutrients, bacterial metabolites and drugs from intestinal lumen to the bloodstream. The GBB integrity ...

Platelet-based Detection of Nitric Oxide in Blood by Measuring VASP Phosphorylation

Platelets are the blood components responsible for proper blood clotting. Their function is highly regulated by various pathways. One of the most potent vasoactive agents, nitric oxide (NO), can also act as a powerful inhibitor of platelet aggregation. Direct NO detection in blood is very challenging due to its high reactivity with cell-free hemoglobin that limits NO half-life to the millisecond range. Currently, NO changes after interventions are only estimated based on measured changes of nitrite and nitrate (members of the nitrate-nitrite-NO metabolic pathway). However precise, these measurements are rather difficult to interpret vis a vis actual NO changes, due to the naturally high baseline nitrite and nitrate levels that are several orders of magnitude higher than expected changes of NO itself. Therefore, the development of direct and simple methods that would allow one to detect NO directly is long overdue. This protocol addresses a potential use of platelets as a highly sensitive NO sensor in blood. It describes initial platelet rich plasma (PRP) and washed platelet preparations and the use of nitrite and deoxygenated red blood cells as NO generators. Phosphorylation of VASP at serine 239 (P-VASPSer239) is used to detect the presence of NO. The fact that VASP protein is highly expressed in platelets and that it is rapidly phosphorylated when NO is present leads to a unique opportunity to use this pathway to directly detect NO presence in blood.

Here, we present a protocol to address the potential use of platelets as a highly sensitive nitric oxide sensor in blood. It describes initial platelet preparation and the use of nitrite and deoxygenated red blood cells as nitric oxide generators.

VASP 인 산화를 측정 하 여 혈액에 산화 질소의 혈소판 기반 탐지

Platelets are the blood components responsible for proper blood clotting. Their function is highly regulated by various pathways. One of the most potent ...

Measuring the Effects of Bacteria and Chemicals on the Intestinal Permeability of Caenorhabditis elegans

In living organisms, intestinal hyperpermeability is a serious symptom that leads to many inflammatory bowel diseases (IBDs). Caenorhabditis elegans is a nonmammalian animal model that is widely used as an assay system due to its short lifespan, transparency, cost-effectiveness, and lack of animal ethics issues. In this study, a method was developed to investigate the effects of different bacteria and 3,3'-diindolylmethane (DIM) on the intestinal permeability of C. elegans with a high-throughput image analysis system. The worms were infected with different gut bacteria or cotreated with DIM for 48 h and fed with fluorescein isothiocyanate (FITC)-dextran overnight. Then, the intestinal permeability was examined by comparing the fluorescence images and the fluorescence intensity inside the worm bodies. This method may also have the potential to identify probiotic and pathogenic intestinal bacteria that affect intestinal permeability in the animal model and is effective for examining the effects of harmful or health-promoting chemicals on intestinal permeability and intestinal health. However, this protocol also has some considerable limitations at the genetic level, especially for determining which genes are altered to control illness, because this method is mostly used for phenotypic determination. In addition, this method is limited to determining exactly which pathogenic substrates cause inflammation or increase the permeability of the worms' intestines during infection. Therefore, further in-depth studies, including investigation of the molecular genetic mechanism using mutant bacteria and nematodes as well as chemical component analysis of bacteria, are required to fully evaluate the function of bacteria and chemicals in determining intestinal permeability.

Measuring the Effects of Bacteria and Chemicals on the Intestinal Permeability of Caenorhabditis elegans

This protocol describes how to measure intestinal permeability of Caenorhabditis elegans. This method is helpful for basic biological research on intestinal health related to the interaction between intestinal bacteria and their host and for screening to identify probiotic and chemical agents to cure leaky gut syndrome and inflammatory bowel diseases.

케노하브디티스 예쁜꼬마선충의 장 내 침투성에 대한 박테리아와 화학물질의 영향 측정

In living organisms, intestinal hyperpermeability is a serious symptom that leads to many inflammatory bowel diseases (IBDs). Caenorhabditis elegans is a ...

Laminectomy for the Removal of Thoracic Ossification of the Ligamentum Flavum (TOLF) Using Ultrasonic and Conventional Osteotomes

Thoracic ossification of the ligamentum flavum (TOLF) is a common cause of progressive thoracic myelopathy. TOLF is typically treated with surgical decompression. A variety of surgical techniques, including laminoplasty, laminectomy, and lamina fenestration, are used for the effective treatment of TOLF. However, traditional methods are associated with a substantial risk of perioperative complications, including dural laceration and/or iatrogenic spinal cord injury. Therefore, it is important to develop an efficient and secure surgical technique for TOLF. Herein, we describe a method for laminectomyperformed at the thoracic spine using an ultrasonic osteotome combined with a conventional osteotome. This technique can reduce intraoperative complications. This is a relatively safe and easy-to-learn method that should be recommended for the treatment of TOLF.

Laminectomy for the Removal of Thoracic Ossification of the Ligamentum Flavum TOLF Using Ultrasonic and Conventional Osteotomes

We present a methodology for using an ultrasonic osteotome combined with a conventional osteotome for laminectomy in thoracic ossification of the ligamentum flavum. This is a relatively safe and easy-to-learn method that avoids the perioperative complications associated with the conventional method.

초음파 및 기존 절골술을 사용한 인대(TOLF)의 흉부 골화 제거를 위한 추궁 절제술

Thoracic ossification of the ligamentum flavum (TOLF) is a common cause of progressive thoracic myelopathy. TOLF is typically treated with surgical ...