The authors would like to acknowledge funding from the Horserace Betting Levy Board U.K. (grant number 721) and VetCell BioScience Ltd, U.K. and by Consejer&#236;a de Innovaci&#242;n, Ciencia y Empresa, Junta de Andaluc&#236;a, Spain.

여기에 설명 된 경우는 실과 드 Veterinarios 드 말라가, 스페인의 동물 윤리 복지위원회, 왕립 수의과 대학, 노스 Mymms, 영국 말에 사용 된 절차에 의해 부여 윤리 허가 다음을 수행 하였다는 승인 된 프로토콜을 기반으로합니다 이식 후 진정 작용, 골수 흡인, 내 건의 주입, 지역 관​​류, 정맥 주사, 시술 후 치료 및 통증 관리 및 모니터링을 포함 줄기 세포 기반 치료를받는 말에 병원에서 사용. 1. 키 배열은 사전에 수 <ol><li> 기관 윤리 및 동물 복지의 승인을 받아야하고 작업을 시작하기 전에 지역의 법적 요구 사항을 준수. </li><li> 인력의 적절한 수준의 보호와 환경과 CONTAM의 처분을 포함하여 지역 및 법률 규정에 의해 결정으로 이온화 방사선 작업 할 제도적 승인을 받아야inated 폐기물. </li><li> 다음과 같은 포함 기준을 사용 앞다리와 건 내 결함 및 결함의 결과로 병변의 표면 굴곡 디지털 건에 비 외상성 과도한 긴장 부상 (건 병증 또는 desmopathy)와 현재 말하는 것은 그대로 힘줄 및 / 또는 paratenon에 둘러싸여 . 참고 : 이러한 부상과 세포 주입 말의 임상 준비를위한 검사 및 진단은 다른 곳에서 -6,15- 자세한되었습니다. 참고 : 말의 골수에서 유래 BMMSC의 문화의 분리 및 확장 이전 -6,16- 자세히 설명하고있다. 말에 SDFT 부상에 대한 BMMSC를 주입하기위한 현재의 프로토콜은자가 골수 상층 액 (BMS) 16 ml의 4 당 천만 세포를 사용합니다. </li><li> 높은 통로 번호 C와 관련된 잠재적 인 세포 표현형 또는 유전 적 변형을 방지하기 위해 생체 내 이식에 대한 더 이상의 4 구절을 시행하지 않은 세포를 사용하여ELL 학생. </li><li> BMS의 셀을 제공 할 필요 매수 (도 4에서 냉각 상자의 24 시간 이내 - O 8의 C) 세포 주입이 수행 될 수 의학적 클리닉. 주 : 골수 상등액 간엽 줄기 세포를 임상 적으로 사용이 허가를 요구할 수있다 ReCellerate INC (미국) 및 그것의 사용에 의해 소유 특허 절차이다. 참고 : Tc를-99m는 비교적 짧은 반감기를 가진 감마 이미 터 (140 keV의)이다 (6.0058 시간, 따라서 그것의 거의 94 %가 24 시간에서 99 Tc를의 안정적인 형태로 붕괴). 감마 에너지는 말과 ​​동물 취급 담당자 모두 매우 제한된 방사선 노출 시간에 감마 카메라 (신티) 및 짧은 반감기에 의한 검출 결과에 적합한다. 이 프로토콜은 [HMPAO (소디움 퍼 테크네 테이트 등) Tc를-99m로 표지] 테크네튬 99m-HMPAO를 사용하여 세포의 현장 라벨링을 설명한다. </li><li> 이 세포 재치를 라벨에 대한 전달 및 사용되도록 공급 업체 신선한위원회-99m 주문는 TC-99m 발생기로부터 용출의 2 시간을 힌. 는 TC-99m는 1 ml의 용액 (공급 업체의 표준 버퍼)에 1 GBq로 제공되어 있는지 확인합니다. </li><li> 실온에서 모든 버퍼를 사용합니다. 라벨 절차를 수행, 알코올로 세척 모든 장비와 동위 원소 봉쇄 방에있는 세포와 영상 (감마 신티)의 주입은 이전 작업의 시작 정리합니다. </li></ol> 앞다리 힘줄의 말과 초음파 2. 준비 <ol><li> 시점에서 다음 제 (골수 흡인) 부상의 입학 및 기록 초음파 검사는 방사성 표지 된 세포를 주입하는 경우. </li><li> 말은 마구간에 균등하게 무게를 베어링으로​​하고 (오히려 전신 마취보다) 진정 작용을 서에서 초음파 검사 및 세포 이식을 수행합니다. 0.01-0.02 ㎎ / ㎏의 IV에 detomidine HCl 및 타르타르산 부토 르파 놀의 혼합물을 사용하여 각각의 진정 작용을 관리. 참고 : 복구가 신속하고 수술이며 치료가 더 필요합니다특별한 고려 사항. </li><li> 신경초 마취가 영향을받는 사지에서 (단계 2.6)를 적용하면 치료 기간 동안 말의 움직임을 줄이기 위해 진정에 따라 역에서 말을 유지. 시각적으로 인하 머리 위치와 말의 태도에서와 말 세포 주입 및 신티 이미지의 취득시 감마 카메라의 움직임 동안 편안하다고 판단 진정 작용의 적절한 수준을 확인합니다. 참고 :이 때문에 진정 깜박임에서 눈 (건조를 방지하기 위해)에 수의사 연고를 적용 할 영향을받지 않습니다 필요하지 않으며 말은 눈의 수분을 유지 할 수 있습니다. 세포 주입 후 모니터링은 비 침습적 (초음파 감마 신티)이다. </li><li> 클립은 밀접하게 (말 머리 가위와) 힘줄 위에 놓인 머리는 결국 알코올 클로르헥시딘 수술 스크럽의 조합을 사용하여 클리핑 영역을 청소합니다. </li><li> 지역에 음향 커플 링 젤을 적용하고직렬 온 입사 종횡 이미지를 획득하기 위해 선형 변환기 (12 MHz 또는 이와 유사한 것)과, (7) (17) - 완전한 손바닥 장골 영역의 스캔 순차적 표시된 레벨 1을 기록 조직적 스캔. 단면적과 최대 부상 영역 (4)이 화상 해석 소프트웨어의 도움으로 얻어 질 수 있도록 디지털 이미지를 저장한다. </li><li> 건과 표면 디지털 굴근 건을 덮는 피부의 완전한 탈감작을 보장하기 위해 국소 마취제의 무균 주입을위한 손목에 즉시 말초 신경 손바닥 위에 놓인 영역을 준비합니다. mepivicaine 2 ㎖을 피하로하고 (그 서브 근막 위치) 손바닥 신경에 인접 굴근 힘줄 사이에 다리의 양쪽에서 손목 바로 원위 현수 인대 모두를 주입. </li><li> 예비 스캔 클로르헥시딘 외과 영역들로 세정하여 이식 장소 준비를 수행되면crub의 적어도 5 분 솔루션 그리고 마지막으로 알코올 흠뻑 젖은 거즈와. 무균 방식으로 이후의 모든 단계를 수행합니다. </li></ol> 말 중간 엽 줄기 세포의 3 Tc를-99m-표시 주 : 셀 라벨링 단계는 힘줄로 셀 라벨 표지 된 세포의 이식 사이 최소화 동위 원소 붕괴 등의 앞다리 초음파 동안 수행 될 수있다. <ol><li> 이 동위 원소의 흡수 방해로 세포에서 BMS를 제거합니다. 이를 위해서는, 냉각 상자 BMMSC의 바이알 (BMS 1 ㎖에 1000 만 세포)를 검색하고 RT에서 5 분 동안 350 XG에서의 microcentrifuge에서 세포 펠렛. 조심스럽게 세포 재 부유를 돕기 위해 튜브의 작은 방울 (≤0.1 ml)에두고, 18G 또는 (2 ML의 주사기에 부착) 19G 바늘 뜨는을 제거합니다. 멸균 microcentrifuge 관에 뜨는 (BMS)을 저장하고 나중에 다시 사용하기 위해 얼음에 보관하십시오. </li><li> FL하여 상등액의 잔여 액적에서 세포를 재현 탁(오히려 소용돌이보다) 손가락으로 부드럽게 튜브를 icking하고 실온에서 랙에 튜브를 둡니다. 세포가 완전히 재현 탁하고 눈에 보이는 세포 덩어리가 없는지 확인합니다. </li><li> 다음과 같이 Tc를-99m을 준비합니다. 테크네튬의 양도 1 ml를 1 ML의 주사기와 바늘을 사용 HMPAO의 유리 병에 퍼 테크네 테이트. 부드럽게 잘 혼합 납 차폐 뒤 5 분 동안 둡니다. 참고 : 세포 단계 2.1에서 회전하는 동안이 단계를 수행 할 수 있습니다. </li><li> 세포 1 ML의 주사기와 바늘을 사용하여 Tc를-99m-HMPAO 혼합물을 모두 추가하고 부드럽게 섞는다. 납 차폐 뒤에 RT에서 30 분 동안 배양한다. </li><li> 다음 단계는, 동위 원소 (낀)의 엄지 손가락의 오염이어서 다른 장비를 최소화하기 위해 마이크로 원심 튜브의 뚜껑을 여는 집게 (또는 티슈 종이)를 사용한다. 추가하거나 세척 버퍼를 제거하기 위해 2 ML의 주사기와 21 G 바늘을 사용합니다. 주 : 필드 동위체 모니터의 사용 및 장비의 표면의 오염을 모니터링하도록 권장된다. </lI&gt; <li> 뚜껑을 닫고 부드럽게 혼합 스핀 단계 3.1에서와 같이 세포를 펠렛, TC를-99m-HMPAO 세포 혼합물에 1 ml의 PBS를 추가합니다. </li><li> 조심스럽게 새로운 튜브 (W1으로 납 차폐 및 레이블 뒤에이 저장)에 PBS를 제거합니다. 신선한 PBS 1 ml의 세포 펠렛을 재현 탁. 튜브를 원심 분리기와 (W2로이와 라벨을 저장) 위와 같이 뜨는을 제거합니다. </li><li> W1 및 W2 튜브 및 세포 펠렛에 카운트를 측정하여 라벨링의 효율을 계산한다. 잘 동위 원소 선량 교정 기기의 각 튜브를 배치하고 분 (CPM) 당 카운트로 방사능을 기록하여이 작업을 수행합니다. (세포의 CPM 같은 방사능)로서 라벨링 효율을 계산 / (방사능 세포 상등액 +) × 100. </li><li> BMS는 3.1 단계에서 저장 한 추가 후 잔여 PBS로 철저하게 세포를 재현 탁하고. 세포 병변 내 주입에 대한 준비가되어 있습니다. </li></ol> Tc를-99m-HMPAO 표지 세포의 4. 주입 <ol><li> 병변 내 주입초음파지도하에 건에 <ol><li> 천천히 바늘 맞춰 1.5 2 인치 (50mm) 멸균 드레이프에 덮여 초음파 변환기와 길이 방향으로 환부의 최대 부상 구역으로 20 G 바늘을 도입 니들의 길이가 수 있으므로 바늘 정확하게 병변의 중심에있는 경우 ultrasonographically 식별 할 팁. </li><li> 2 mL의 주사기에 세포를 수집, 적절한 차폐를 사용하여 20 G 바늘을 사용하여 (루어 락은 외부 오염의 위험과 리드 실드 커버에 주사기를 최소화하기 위해). 유체를 분실하지 않도록주의 바늘을 폐기​​하십시오. 이제 니들 건에 미리 위치 상에 표시된 세포를 주사기를 연결합니다. </li><li> 조직에 바늘 기관이 명확하게 볼 수 있도록 바늘에서 초음파 프로브를 놓습니다. 병변에 느리지 만 꾸준한 속도로 세포를 주입한다. 주입에 아무 저항이 없음을 확인합니다. 이 발생하는 경우조심스럽게 초음파 유도하에 바늘의 위치를​​ 변경. 병변에 유체 방출이 hyperechogenic 기포를 포함 무반향 유체로 초음파 영상에서 볼 수 있는지 확인합니다. </li><li> 바늘을 인출 즉시 분사 셀의 손실을 방지하고, 사지의 외부 표면에 걸쳐 동위 원소의 확산을 최소화하기 위해 바늘 구멍을 통해 압력을 배치했다. 즉시 autoadhesive 붕대의 한 층으로 사지를 드레스. 말은 지금 감마 신티에 대한 준비가되어 있습니다. 바로이 작업을 수행합니다. 주 : 힘줄로 세포를 주입 한 후, 주사기에 남아있을 수 직접적인 세포 손실을 평가하기 위해 빈 주사기 바늘의 개수를 획득. </li></ol></li><li> Tc를-99m-HMPAO 표지 세포의 지역 관​​류 <ol><li> 2.4 단계를 따릅니다. </li><li> 내측 및 측면에 위치 두 개의 100mm면 롤 거즈 붕대 근위 장부에 100mm 고무 지혈대 붕대를 적용합니다. </li><li> 무균 일을 준비적어도 5 분 동안 수술 스크럽 클로르헥시딘 용액으로 세정하여 영역을 최종적으로 알코올에 적신 거즈 횡 근위 종자 골 뼈의 수준에 좌우 손바닥 정맥을 통해 디지털 전자 피부. 무균 방식으로 이후의 모든 단계를 수행합니다. </li><li> 헤파린 멸균 식염수로 작성하여 정맥 천자에 대한 21 G의 X의 ¾ &quot;(0.8 × 19mm) 나비 바늘 세트 100 mm 확장을 준비하고 측면 손바닥 디지털 정맥에 바늘을 소개합니다. 정맥가 입력되면 혈액이 부분적으로 확장 세트를 채울 것입니다. 루어 록 커넥터에 표시된 세포의 후속 주입을 용이하게하기위한 루어 잠금 고무 캡을 부착합니다. </li><li> 사전로드 PBS 20 ㎖ 주사기로 세포를 수집하여 PBS 19 ㎖ 중의 엽 줄기 세포를 희석. (- 40 초 30) (18) G (1.2 X 40mm) 느리지 만 꾸준한 속도로 피하 주사 바늘을 사용하여 고무 컵을 통해 세포를 적용합니다. syring에 미리로드 PBS 1 ㎖로 카테터를 플러싱이자형. </li><li> 다섯 4 × 4면 거즈 층으로 바늘 구멍을 통해 피부에 압력을 즉시 바늘을 제거하고. 그런 다음 근위 종자 골의 영역에 탄성 접착제 빛 붕대를 배치하고 주입 후 30 분 동안 자리에 지혈대를 둡니다. </li><li> 30 분 후 지혈대를 놓습니다. 말은 지금 감마 신티에 대한 준비가되어 있습니다. 주 : 세포를 주입 한 후, 주사기에 남아있을 수 직접적인 세포 손실을 평가하기 위해 빈 주사기 바늘의 개수를 획득. </li></ol></li></ol> 5. 감마 신티 <ol><li> 신티 이미지 <ol><li> 낮은 에너지, 평행 구멍 조준기를 장착 (20 % 대칭 창을 사용하여 140 KeV의 광전 피크로 설정) 감마 카메라와 평면 신티그라피 이미지를 획득. <ol><li> 단계 2.2에서와 같이 진정 말 서에 시간 0 후 모든 이미지를 얻습니다. 시간 0 scintigram 후, 주입시를 통해 빛 붕대를 교체패딩 붕대 테. 각 신티그라피 시험하기 전에이 붕대를 제거합니다. </li><li> &quot;연구 선택&quot;- - &quot;획득&quot;로 처리 소프트웨어를 사용하여 60 초마다 (256 256 매트릭스)에 대한 정적 인 이미지를 획득 &quot;뼈 정적&quot;옵션을. 이는 정적 모드 옵션 움직임 보정 모듈을 가지고 있지 않기 때문에 말 화상 획득 기간 동안 움직이지 않는 것이 필수적이다. </li><li> 병소 내 주사의 경우, 말단부에 손목에서 병변 영역으로부터 좌우 영상을 구 반대편 다리, 왼쪽 폐야 좌측 갑상선의 등가 영역. 앞다리 이미지 획득 동안 사지 반대측의 화상을 방지하기 위해 다리 사이 리드 화면 위치. 주입 (시간 0) 후의 5 분간의 영상을 획득 한 후 1, 3, 6, 12, 24, 36 및 48 시간에서. </li><li> 지역 관류를 들어, 5.1.1.3에 관해서는 측면과 등의 감마 이미지를 얻을 수 있습니다. 이미지 5 분 AF를 얻습니다터 지혈대 자료. 이 즉시 방출 지혈대 이전에 수를 평가하기 위해 세포를 주입 후에는 사지 이미지에 유용 할 수 있습니다 시간이 0이됩니다. 세포의 투여 후 1, 3, 6, 12, 24, 36 및 48 시간에 감마 영상을 얻었다. </li></ol></li><li> 이미지가 인수 한 후, 프로세스를 수동으로 &quot;Sokoloff&quot;색상 &quot;반전&quot;색상 선택 옵션을 사용하여 소프트웨어의 &quot;처리&quot;옵션을 사용하여 이미지. 이 병변 영역에 걸쳐 선택 마스크와 운동의 재 형성을 허용하는 다음 &quot;관심의 영역&quot;(ROI) 및 &quot;타원&quot;를 선택합니다. &quot;통계에 추가&quot;옵션을 선택하여 투자 수익 (ROI)을 통해 수를 가져옵니다. 관심 (ROI)의 동일 크기의 영역을 서로 다른 시간 지점에서 각 동물에 대한 기록을 확인합니다. </li><li> 이어서, 각 시점에서의 테크네튬의 붕괴에 대한 예측 카운트를 수정한다. 부패를 수정하기 위해 다음의 식을 사용하여= 전자 O를 - (0.693t는 / T 1/2) 붕괴가 시간 제로 방사능 수정 O는 동위 원소의 초기 활동, A는, T는 경과 시간이며, T 1/2 절반 동위 원소의 - 생활. 다음 식을 이용하여, 남은 세포의 비율을 해결하기 위해 시간 0에서 ROI의 백분율로서 각 시점에서의 보정 계수를 표현 : </li></ol></li></ol> 남은 세포 % (t) = 100 - {[(예측 붕괴 (t) - 감쇠 (t)가) / 감쇠 예측 (t)]을} × 100 부패 (T) = 투자 수익 (ROI) (t)는 / 투자 수익 (ROI) (0) × 100.

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M., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Systemic+delivery+of+bone+marrow-derived+mesenchymal+stem+cells+to+the+infarcted+myocardium:+feasibility,+cell+migration,+and+body+distribution.">Systemic delivery of bone marrow-derived mesenchymal stem cells to the infarcted myocardium: feasibility, cell migration, and body distribution.</a> Circulation. 108, 863-868 (2003).</li><li>Heckl, S. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Future+contrast+agents+for+molecular+imaging+in+stroke.">Future contrast agents for molecular imaging in stroke.</a> Current Medicinal Chemistry. 14, 1713-1728 (2007).</li></ol>

JD and RKS are Scientific Advisory Board members to ReCellerate Inc.

골수 외에도, 이러한 지방 조직과 같은 소스로부터 격리 줄기 세포는이 프로토콜에 표시하기에 적합하다. 또한, 냉동 상태에서 세포 부활 및 라벨 연구 (12)에 대해 원하는 번호로 문화 확장 할 수있다. BMMSC 레이블의 효율성을 결정하는 중요한 요소는 radiopharmacy에서 몰리브덴 발생기는 TC-99m의 용출 사이의 시간, Tc를-99m-HMPAO의 준비 및 병원에서 방사성 의약품의 사용?...

병에 걸린 또는 손상된 조직의 복구를위한 재생 전략은 영향을받는 영역으로의 다양한 조직으로부터 유도 된 다 능성 및 주입 된 줄기 세포를 기반으로한다. 말의 힘줄 및 인대 손상의 치료를위한자가 BMMSC의 응용 프로그램에서 최근 진보는 모두 실험 1-5에서 개선 된 결과 측정 및 임상 연구 (6)을 보여 주었다. 말은 나이 앓고 및 원위 앞다리의 힘줄에 관련 부상 과도한 긴장, 그것은 운동 동물 때문에 치료 관련 줄기 세포의 효능을 평가하는데 특히 매력적인 모델이며,이 큰 용이 골수 회복이며 정확한 주입. 힘줄 손상은 섬유화와 함께 자연스럽게 치유하지만 치유 건 7 기능적으로 열등하고 다시 부상 (8)의 위험이 있습니다. 이 탄성 에너지의 역할을하도록 진화로 표면 디지털 굴근 건 (SDFT)는 가장 일반적으로 영향을받는상점과 경험을 높은 부하는 에너지 효율과 고속 운동을 달성하기 위해 강조하고있다. 손상 후 기능을 복원 때문에 중요하다. 이 부상은 유사한 기능 (9)을 수행 인간의 아킬레스 건에 영향을 미치는 것과 유사하다. 따라서 세포 기반 재생 전략이 성과를 향상시키고 재 부상을 줄이기 위해 매력적인 기회를 제공, 치료 또는 부상에 대한 좋은 보수를 달성하기 위해 더 좋은 치료 옵션이 없습니다. 대부분의 연구에서 5-20000000자가 BMMSC 보통 따라서 세포 수용기로서 작용 건 본체의 코어 내에서 발생하는 병변에 직접 주입된다. 일단 주입 된 세포의 운명은 세포가 최근 기술되었다 추적 명확하고 다른 세포 표지 방법이 아니다. 형광 태그로 표시된 셀은 상대적으로 적은 수의 (&lt;10 %) 10, 11에서 생존 것으로 나타났다. 형광 라벨이 필요로시간을 소비하고하지 않는 조직 학적 분석을위한 조직 추출 및 단면은 쉽게 큰 동물 모델에서 임상의 경우 시간적 분석을 용이하게한다. 최근 연구에서 우리는 세포 레이블 및 감마 신티그라피 (1)에 의해 자신의 운명을 따라 방사성 동위 원소 99m Tc를 사용했다. 이 방법은 빠른 비교는 12 동맥 또는 정맥 주사를 통한 1,12- 경정맥 1 지역을 통해 정맥 내 관류 병변을 포함한 세포의 다른 전달 경로 사이에서 이루어질 수있다. 세포의 지속성과 분포는 다음 여러 장기의 감마 신티그라피에 의해 촬영 할 수 있습니다. 이것은 세포의 24 %가 24 시간 intralesionally (1)에 의해 병변에 남아 주입이 실험적으로 생성하여 병변과 같은 방사성 표지 (5)를 사용하여 다른 연구에 의해지지되는 것을 보여 주었다. 또한, 세포는 delivere 힘줄 병변으로 가정 제한 능력을 보여정맥 지역 관류 또는 의해 거라고하지만 후자의 노선 (4)에 의해 폐에 분산되어있다. 철 나노 입자로 표지 BMMSC는 앞다리 힘줄 (13)에 이식 된 세포를 추적 할 수있는 또 다른 방법이다. 철 나노 입자 표지 된 세포는 MRI에 의해 생체 내에서 세포의 추적을 허용하지만, 많은 동물 연구는 시간적 마취 MRI 스캔을 수행하기위한 각각의 시점에서 투여 할 수있는 횟수가 제한된다. 또한, 철 나노 입자는 건 본체로 표지화 된 세포의 이동에 대한 정보를 제한 MRI에 hypointense이다. 사용될 수있는 다른 방사성 동위 원소는 인듐-111을 포함하지만 이것 테크네튬 99m보다 더 긴 반감기의 불이익 (VS 2.8 일 6.0 시간) 및 높은 감마선 방사 에너지를 겪고있다. 인듐 - 111 (14)으로 표시 할 때뿐만 아니라, 세포 생존율이 감소 될 것으로보고되었다. TC-99m, 다른 한편으로는, 일상적으로 말 두 인간 핵에 사용약은 말초 혈액 단핵 세포를 라벨 및 신티그라피에 의해 생체 내에서의 분포를 따르십시오. 이것은 비교적 용이 세포, 테크네튬 99m-HMPAO 같은 테크네튬 바인딩 링커 분자로서 HMPAO을 이용하여 상기 셀에 의해 흡수 될 수있다. TC-99m-HMPAO는 BMMSC 좋은 가능성을 보여주고 체외 4에서 증식 할 수 표시. 이 프로토콜은 앞다리의 SDFT에서 자연적으로 발생하는 병변에 주입 라벨과 말자가 BMMSC의 추적을 자세히 설명합니다. 이것은 프로토콜 만 의도 연구 도구로서 이용 될 수 있음을 주목하는 것이 중요하다. 임상 치료 양상으로 그것의 사용은 완전히 해명되지 않은 세포 표현형에 방사성 표지의 효과하지 않는 것이 좋습니다.

<table>
	<tbody>
		<tr>
			<td>Technetium99m&#160;</td>
			<td></td>
			<td></td>
			<td>Please enquire with local ionisation radiation supplier in accordance with legal requirements.&#160; The isotope must be used within 2 h of elution from the molybdenum-99 generator</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Ceretec - Hexamethylpropyleneamine oxime (HMPAO)&#160;</td>
			<td>GE HealthCare</td>
			<td></td>
			<td>Please enquire directly with GE HealthCare</td>
		</tr>
		<tr>
			<td></td>
			<td></td>
			<td></td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Microfuge, Minispin/Minispin Plus</td>
			<td>Ependorf</td>
			<td>22620100</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>18G and 19G Needles</td>
			<td>Terumo Medical</td>
			<td>NN-1838R (18G);&#160;&#160;&#160;&#160;&#160;&#160;&#160;&#160; NN1938R (19G)</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Syringes 1 mL and 2 mL</td>
			<td>Scientific Laboratory Supplies Ltd</td>
			<td>SYR6200 (1 mL); SYR6003 (2 mL)</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Microcentrifuge tubes 1.5 mL</td>
			<td>Greiner Bio-One Ltd</td>
			<td>616201</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>PBS - Phosphate-Buffered Saline</td>
			<td>LifeTechnologies</td>
			<td>14190</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Sterile Gauze Swabs</td>
			<td>Shermond Ltd</td>
			<td>UNG602</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>CoflexVet self adhering bandage</td>
			<td>Andover Healthcare, Inc.</td>
			<td>3540RB-018</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Ultrasound imaging software</td>
			<td>Scion Image, Scion Corporation, USA</td>
			<td></td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>MicasXplus Scintigram processing software</td>
			<td>Bartec Technologies Ltd</td>
			<td></td>
			<td>http://www.bartectechnologies.com/veterinaryscintigraphy.html</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Field isotope counter for monitoring isotope</td>
			<td>John Caunt U.K.</td>
			<td>GMS1800a</td>
			<td>http://www.johncaunt.com/</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Well counter for isotope measurements, dose calibrator</td>
			<td>Capintec Southern Scientific</td>
			<td>CRC-25R</td>
			<td></td>
		</tr>
	</tbody>
</table>

in vivo imaging and tracking of technetium-99m labeled bone marrow mesenchymal stem cells in equine tendinopathy

말의 힘줄 및 인대 손상의 치료를위한 골수 중간 엽 줄기 세포 (BMMSC)의 응용 프로그램에서 최근 진보는 실험과 임상 연구 모두에서 결과 측정을 개선하는 것이 좋습니다. BMMSC는 많은 수의 건 병변에 주입되어 있지만 (일반적으로 10-20000000 세포) 만 상대적으로 적은 수의 생존 (&lt;10 %)이가 이식 후 최대 5 개월 동안 지속될 수 있지만. 이 BMMSC 다른 조직으로 이식 된 다른 종의 일반적인 관측이 나타납니다이 손실이 많은 초기 주입 공정에서 살아남을 방법과 세포가 다른 장기로 삭제 여부, 발생했을 때 그것을 이해하는 것이 중요합니다. 세포의 운명을 추적하는 셀 위치 및 세포 수를 정량화의 생체 촬상의 비 침습적으로 허용 주입 BMMSC 전에 방사성 표지에 의해 달성 될 수있다. 이 프로토콜은 셀을 설명 labeli말의 부상 굴근 힘줄에 테크네튬 (TC-99m), 및 주입 다음이 세포의 추적을 사용 NG 절차. TC-99m 감마선을 방출 및 친 유성 화합물 hexamethylpropyleneamine 옥심 (HMPAO)의 존재 하에서 세포에 의해 내재화 될 수 단명 (t 1/2 6.01의 HR) 동위 원소이다. 이러한 속성은 여러 가지 질병의 진단을위한 핵 의학 클리닉에서 사용하기에 이상적이다. 표지 된 세포의 운명은 폐, 갑상선 및 다른 장기에 병변 세포의 분포에 보유 세포의 수를 모두 정량화 감마 신티 의한 단기 (36 시간까지)에 따라 될 수있다. 이 기술은 혈액 백혈구 라벨링 각색 및 다른 장기에 이식 BMMSC 이미지에 이용 될 수있다.

BMMSs에 TC-99m-HMPAO의 통합에 악영향을 조직 배양 플라스틱을 준수 할 수있는 능력에 영향을주지 않습니다 그리고 그들은 (그림 1) 단일 층을 형성하는 확산 능력을 표시하는 동안 우리는 확산 속도 또는 다른 세포 표현형이 영향을 받는지 완전히 결정하지 않았습니다. 이들의 형태는 전형적인 스핀들 모양으로 레이블이 지정되지 않은 세포와 유사하다. 세포의 표지 효율 (즉. 라?...

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In Vivo Imaging and Tracking of Technetium-99m Labeled Bone Marrow Mesenchymal Stem Cells in Equine Tendinopathy

This protocol describes the radiolabeling of equine mesenchymal stem cells and their implantation into tendon injuries in the horse in order to determine cell survival and tissue distribution using gamma scintigraphy.

말 건 병증에 골수 중간 엽 줄기 세포를 레이블 테크네튬 99m의 생체 ​​이미징 및 추적에서

Recent advances in the application of bone marrow mesenchymal stem cells (BMMSC) for the treatment of tendon and ligament injuries in the horse suggest ...

in-vivo-imaging-tracking-technetium-99m-labeled-bone-marrow

Research

JoVE Journal

Medicine

In Vivo Imaging and Tracking of Technetium-99m Labeled Bone Marrow Mesenchymal Stem Cells in Equine Tendinopathy

9.7K 조회수.  The Royal Veterinary College. This protocol describes the radiolabeling of equine mesenchymal stem cells and their implantation into tendon injuries in the horse in order to determine cell survival and tissue distribution using gamma scintigraphy.

비디오: In Vivo Imaging and Tracking of Technetium-99m Labeled Bone Marrow Mesenchymal Stem Cells in Equine Tendinopathy

Pre-clinical Evaluation of Tyrosine Kinase Inhibitors for Treatment of Acute Leukemia

Receptor tyrosine kinases have been implicated in the development and progression of many cancers, including both leukemia and solid tumors, and are attractive druggable therapeutic targets. Here we describe an efficient four-step strategy for pre-clinical evaluation of tyrosine kinase inhibitors (TKIs) in the treatment of acute leukemia. Initially, western blot analysis is used to confirm target inhibition in cultured leukemia cells. Functional activity is then evaluated using clonogenic assays in methylcellulose or soft agar cultures. Experimental compounds that demonstrate activity in cell culture assays are evaluated in vivo using NOD-SCID-gamma (NSG) mice transplanted orthotopically with human leukemia cell lines. Initial in vivo pharmacodynamic studies evaluate target inhibition in leukemic blasts isolated from the bone marrow. This approach is used to determine the dose and schedule of administration required for effective target inhibition. Subsequent studies evaluate the efficacy of the TKIs in vivo using luciferase expressing leukemia cells, thereby allowing for non-invasive bioluminescent monitoring of leukemia burden and assessment of therapeutic response using an in vivo bioluminescence imaging system. This strategy has been effective for evaluation of TKIs in vitro and in vivo and can be applied for identification of molecularly-targeted agents with therapeutic potential or for direct comparison and prioritization of multiple compounds.

Receptor tyrosine kinases are ectopically expressed in many cancers and have been identified as therapeutic targets in acute leukemia. This manuscript describes an efficient strategy for pre-clinical evaluation of tyrosine kinase inhibitors for the treatment of acute leukemia.

급성 백혈병의 치료에 대한 티로신 키나제 억제제의 전임상 평가

Receptor tyrosine kinases have been implicated in the development and progression of many cancers, including both leukemia and solid tumors, and are ...

연구

의학

In vivo 19F MRI for Cell Tracking

In vivo 19F MRI allows quantitative cell tracking without the use of ionizing radiation. It is a noninvasive technique that can be applied to humans. Here, we describe a general protocol for cell labeling, imaging, and image processing. The technique is applicable to various cell types and animal models, although here we focus on a typical mouse model for tracking murine immune cells. The most important issues for cell labeling are described, as these are relevant to all models. Similarly, key imaging parameters are listed, although the details will vary depending on the MRI system and the individual setup. Finally, we include an image processing protocol for quantification. Variations for this, and other parts of the protocol, are assessed in the Discussion section. Based on the detailed procedure described here, the user will need to adapt the protocol for each specific cell type, cell label, animal model, and imaging setup. Note that the protocol can also be adapted for human use, as long as clinical restrictions are met.

In vivo 19F MRI for Cell Tracking

We describe a general protocol for in vivo cell tracking using MRI in a mouse model with ex vivo labeled cells. A typical protocol for cell labeling, image acquisition processing and quantification is included.

세포 추적을위한 생체 19 F MRI에서

In vivo 19F MRI allows quantitative cell tracking without the use of ionizing radiation. It is a noninvasive technique that can be applied to humans. ...

Sequential In vivo Imaging of Osteogenic Stem/Progenitor Cells During Fracture Repair

Bone turns over continuously and is highly regenerative following injury. Osteogenic stem/progenitor cells have long been hypothesized to exist, but in vivo demonstration of such cells has only recently been attained. Here, in vivo imaging techniques to investigate the role of endogenous osteogenic stem/progenitor cells (OSPCs) and their progeny in bone repair are provided. Using osteo-lineage cell tracing models and intravital imaging of induced microfractures in calvarial bone, OSPCs can be directly observed during the first few days after injury, in which critical events in the early repair process occur. Injury sites can be sequentially imaged revealing that OSPCs relocate to the injury, increase in number and differentiate into bone forming osteoblasts. These methods offer a means of investigating the role of stem cell-intrinsic and extrinsic molecular regulators for bone regeneration and repair.

Sequential In vivo Imaging of Osteogenic Stem/Progenitor Cells During Fracture Repair

Quantitative measurement of bone progenitor function in fracture healing requires high resolution serial imaging technology. Here, protocols are provided for using intravital microscopy and osteo-lineage tracking to sequentially image and quantify the migration, proliferation and differentiation of endogenous osteogenic stem/progenitor cells in the process of repairing bone fracture.

순차<em&gt; 생체 내</em&gt; 골절 치료시 골 형성 줄기 / 전구 세포의 이미징

Bone turns over continuously and is highly regenerative following injury. Osteogenic stem/progenitor cells have long been hypothesized to exist, but in ...

Femoral Bone Marrow Aspiration in Live Mice

Serial sampling of the cellular composition of bone marrow (BM) is a routine procedure critical to clinical hematology. This protocol describes a detailed step-by-step technical procedure for an analogous procedure in live mice which allows for serial characterization of cells present in the BM. This procedure facilitates studies aimed to detect the presence of exogenously administered cells within the BM of mice as would be done in xenograft studies for instance. Moreover, this procedure allows for the retrieval and characterization of cells enriched in the BM such as hematopoietic stem and progenitor cells (HSPCs) without sacrifice of mice. Given that the cellular composition of peripheral blood is not necessarily reflective of proportions and types of stem and progenitor cells present in the marrow, procedures which provide access to this compartment without requiring termination of the mice are very helpful. The use of femoral bone marrow aspiration is illustrated here for cytological analysis of marrow cells, flow cytometric characterization of the hematopoietic stem/progenitor compartment, and culture of sorted HSPCs obtained by femoral BM aspiration compared with conventional marrow harvest.

This protocol describes a procedure for serial sampling of femoral bone marrow (BM) without requiring the sacrifice of mice. This procedure facilitates longitudinal studies of the BM composition of mice over time and provides serial access to cells within the BM for ex vivo and transplantation studies.

라이브 쥐의 대퇴부 골수 흡인

Serial sampling of the cellular composition of bone marrow (BM) is a routine procedure critical to clinical hematology. This protocol describes a detailed ...

Studying Pancreatic Cancer Stem Cell Characteristics for Developing New Treatment Strategies

Pancreatic ductal adenocarcinoma (PDAC) contains a subset of exclusively tumorigenic cancer stem cells (CSCs) which have been shown to drive tumor initiation, metastasis and resistance to radio- and chemotherapy. Here we describe a specific methodology for culturing primary human pancreatic CSCs as tumor spheres in anchorage-independent conditions. Cells are grown in serum-free, non-adherent conditions in order to enrich for CSCs while their more differentiated progenies do not survive and proliferate during the initial phase following seeding of single cells. This assay can be used to estimate the percentage of CSCs present in a population of tumor cells. Both size (which can range from 35 to 250 micrometers) and number of tumor spheres formed represents CSC activity harbored in either bulk populations of cultured cancer cells or freshly harvested and digested tumors 1,2. Using this assay, we recently found that metformin selectively ablates pancreatic CSCs; a finding that was subsequently further corroborated by demonstrating diminished expression of pluripotency-associated genes/surface markers and reduced in vivo tumorigenicity of metformin-treated cells. As the final step for preclinical development we treated mice bearing established tumors with metformin and found significantly prolonged survival. Clinical studies testing the use of metformin in patients with PDAC are currently underway (e.g., NCT01210911, NCT01167738, and NCT01488552). Mechanistically, we found that metformin induces a fatal energy crisis in CSCs by enhancing reactive oxygen species (ROS) production and reducing mitochondrial transmembrane potential. In contrast, non-CSCs were not eliminated by metformin treatment, but rather underwent reversible cell cycle arrest. Therefore, our study serves as a successful example for the potential of in vitro sphere formation as a screening tool to identify compounds that potentially target CSCs, but this technique will require further in vitro and in vivo validation to eliminate false discoveries.

Pancreatic cancer stem cells (CSCs) can be expanded in vitro using the anchorage-independent sphere culture technique, which represents a powerful tool to study CSC biology and can serve as the first step to develop novel CSC-targeting therapies. Here the methodology for expanding, analyzing and targeting of pancreatic CSCs is provided.

췌장암 새로운 치료 전략을 개발하기위한 전지 특성 줄기 공부

Pancreatic ductal adenocarcinoma (PDAC) contains a subset of exclusively tumorigenic cancer stem cells (CSCs) which have been shown to drive tumor ...

Isolation and Cellular Phenotyping of Mesenchymal Stem Cells Derived from Synovial Fluid and Bone Marrow of Minipigs

Mesenchymal stem cells (MSCs) have been established after isolation from various tissue sources, including bone marrow and synovial fluid. Recently, synovial-fluid-derived MSCs were reported to have multi-lineage differentiation potential and immunomodulatory features, which indicates that these cells can be used for tissue engineering and systemic treatments. This study presents a protocol for simple and non-invasive isolation of MSCs derived from the bone marrow and synovial fluid of minipigs to analyze cell surface markers for cell phenotyping and in vitro culturing. Using sexually mature six-month-old minipigs, bone marrow was extracted from the iliac crest bone using a bone marrow extractor, and the synovial fluid was aspirated from the femorotibial joint. Procedures for the collection of samples from both sources were non-invasive. The protocols for effective isolation of MSCs from harvested cell sources and for creating in vitro culture conditions to expand stable MSCs from minipigs and the application of systemic autologous treatments are provided. For cell phenotyping, the cell surface markers of both cells were analyzed using flow cytometry. In the results, the MSCs were isolated from the synovial fluid of the minipigs and showed that synovial-fluid-derived MSCs have a similar morphology and cell phenotype to bone-marrow-derived MSCs. Therefore, non-invasively obtained synovial fluid is a valuable source of MSCs.

A protocol establishing mesenchymal stem cells (MSCs) isolated from the synovial fluid and bone marrow of minipigs and non-invasively collected using syringe aspiration is presented. Cellular phenotyping was performed using flow cytometry after cell isolation and in vitro cultivation of bone marrow and synovial fluids derived from MSCs.

Minipigs의 활액과 골수 유래 중간 엽 줄기 세포의 분리 및 세포 표현형

Mesenchymal stem cells (MSCs) have been established after isolation from various tissue sources, including bone marrow and synovial fluid. Recently, ...

Depletion of Mouse Cells from Human Tumor Xenografts Significantly Improves Downstream Analysis of Target Cells

The use of in vitro cell line models for cancer research has been a useful tool. However, it has been shown that these models fail to reliably mimic patient tumors in different assays1. Human tumor xenografts represent the gold standard with respect to tumor biology, drug discovery, and metastasis research 2-4. Tumor xenografts can be derived from different types of material like tumor cell lines, tumor tissue from primary patient tumors4 or serially transplanted tumors. When propagated in vivo, xenografted tissue is infiltrated and vascularized by cells of mouse origin. Multiple factors such as the tumor entity, the origin of xenografted material, growth rate and region of transplantation influence the composition and the amount of mouse cells present in tumor xenografts. However, even when these factors are kept constant, the degree of mouse cell contamination is highly variable.
Contaminating mouse cells significantly impair downstream analyses of human tumor xenografts. As mouse fibroblasts show high plating efficacies and proliferation rates, they tend to overgrow cultures of human tumor cells, especially slowly proliferating subpopulations. Mouse cell derived DNA, mRNA, and protein components can bias downstream gene expression analysis, next-generation sequencing, as well as proteome analysis 5. To overcome these limitations, we have developed a fast and easy method to isolate untouched human tumor cells from xenografted tumor tissue. This procedure is based on the comprehensive depletion of cells of mouse origin by combining automated tissue dissociation with the benchtop tissue dissociator and magnetic cell sorting. Here, we demonstrate that human target cells can be can be obtained with purities higher than 96% within less than 20 min independent of the tumor type.

Human tumor xenografts are vascularized and infiltrated by cells of mouse origin during the growth phase in vivo. To circumvent the bias caused by these contaminating cells during downstream analysis, we developed a method allowing for comprehensive depletion of all mouse cells by magnetic cell sorting.

인간 종양 이종 이식에서 마우스 세포의 고갈은 크게 대상 세포의 다운 스트림 분석을 향상

The use of in vitro cell line models for cancer research has been a useful tool. However, it has been shown that these models fail to reliably mimic ...

Nerve Stimulator-guided Injection of Autologous Stem Cells Near the Equine Left Recurrent Laryngeal Nerve

Recurrent laryngeal neuropathy (RLN) commonly affects horses and is characterized by abnormal respiratory sounds and exercise intolerance. The recurrent laryngeal nerve shows lesions of demyelination. The benefit of applying stem cells to demyelinated nerves has been demonstrated in various animal models. The aim of the study was to test the feasibility and safety of a peri-neuronal injection of autologous muscle-derived mesenchymal stem cells to the left recurrent laryngeal nerve in healthy horses by using an electrical nerve stimulator.
Muscle-derived stems cell are obtained from five healthy Standardbred horses by sampling 20 mg of muscle tissue with a semi-automatic 14 G biopsy needle from the triceps muscle. Movements of the larynx are monitored via upper-airway video endoscopy. The left recurrent laryngeal nerve is approached with an insulated nerve block needle. Nerve stimulation is applied, starting at 2 mA, and the successful abduction of the left arytenoid is monitored. The stimulation intensity is reduced progressively. When a loss of the motor response is observed at 0.5 mA, 107 autologous muscle-derived stem cells are injected. Two examiners, who are blinded to the time point, score the laryngeal function of the horses prior to the treatment and at day 1, day 7, and day 28 after the injection of the cells. In a sixth horse, 1 mL of 2% lidocaine is injected to further confirm the correct positioning of the needle. This leads to a temporary paralysis of the left arytenoid cartilage.
This study proves that the recurrent laryngeal nerve can be approached with the help of an electrical nerve stimulator and that the electrical stimulation of the nerve is well tolerated by the horses. No modification of the laryngeal function was observed in any of the horses after the injection of the stem cells. Further studies should be conducted to describe the effects of a peri-neuronal injection of autologous muscle-derived mesenchymal stem cells to horses suffering from RLN.

Here, we present a protocol to inject autologous muscle-derived stem cells in the proximity to the recurrent laryngeal nerve with the help of an electrical nerve stimulator. This novel technique may become useful for the treatment of equine recurrent laryngeal neuropathy.

말 왼쪽된 회귀 후 두 신경 근처 헌 혈 줄기 세포의 신경 자극을 유도 주사

Recurrent laryngeal neuropathy (RLN) commonly affects horses and is characterized by abnormal respiratory sounds and exercise intolerance. The recurrent ...

Quantitative [18F]-Naf-PET-MRI Analysis for the Evaluation of Dynamic Bone Turnover in a Patient with Facetogenic Low Back Pain

Imaging techniques that reflect dynamic bone turnover may aid in characterizing a wide range of bone pathologies. Bone is a dynamic tissue undergoing continuous remodeling with the competing activity of osteoblasts, which produce the new bone matrix, and osteoclasts, whose function is to eliminate mineralized bone. [18F]-NaF is a positron emission tomography (PET) radiotracer that enables visualization of bone metabolism. [18F]-NaF is chemically absorbed into hydroxyapatite in the bone matrix by osteoblasts and can thus noninvasively detect osteoblastic activity, which is occult to conventional imaging techniques. Kinetic modeling of dynamic [18F]-NaF-PET data provides detailed quantitative measures of bone metabolism. Conventional semi-quantitative PET data, which utilizes standardized uptake values (SUVs) as a measure of radiotracer activity, is referred to as a static technique due to its snapshot of tracer uptake in time.&#160; Kinetic modeling, however, utilizes dynamic image data where tracer levels are continuously acquired providing tracer uptake temporal resolution. From the kinetic modeling of dynamic data, quantitative values like blood flow and metabolic rate (i.e., potentially informative metrics of tracer dynamics) can be extracted, all with respect to the measured activity in the image data. When combined with dual modality PET-MRI, region-specific kinetic data can be correlated with anatomically registered high-resolution structural and pathologic information afforded by MRI. The goal of this methodological manuscript is to outline detailed techniques for performing and analyzing dynamic [18F]-NaF-PET-MRI data. The lumbar facet joint is a common site of degenerative arthritis disease and a common cause for axial low back pain.&#160; Recent studies suggest [18F]-NaF-PET may serve as a useful biomarker of painful facetogenic disease.&#160; The human lumbar facet joint will, therefore, be used as a prototypical region of interest for dynamic [18F]-NaF-PET-MRI analysis in this manuscript.

Quantitative [18F]-Naf-PET-MRI Analysis for the Evaluation of Dynamic Bone Turnover in a Patient with Facetogenic Low Back Pain

Imaging techniques that reflect dynamic bone turnover may aid in characterizing a wide range of bone pathologies. We present detailed methodologies for performing and analyzing dynamic [18F]-NaF-PET-MRI data in a patient with facetogenic low back pain using the lumbar facet joints as a prototypical region of interest.

정량 [18F]-Naf-PET-MRI 분석 은 얼굴 투박성 요통 환자에서 동적 뼈 회전율의 평가를 위한

Imaging techniques that reflect dynamic bone turnover may aid in characterizing a wide range of bone pathologies. Bone is a dynamic tissue undergoing ...

High-throughput Nitrobenzoxadiazole-labeled Cholesterol Efflux Assay

Atherosclerosis leads to cardiovascular disease (CVD). It is still unclear whether cholesterol-HDL (cHDL) concentration plays a causal role in atherosclerosis development. However, an important factor in early stages of atheroma plaque formation is cholesterol efflux capacity to HDL (the ability of HDL particles to accept cholesterol from macrophages) in order to avoid foam cell formation. This is a key step in avoiding the accumulation of cholesterol in the endothelium and a part of reverse cholesterol transport (RCT) to eliminate cholesterol through the liver. Cholesterol efflux capacity to serum or plasma in macrophage cell models is a promising tool that can be used as biomarker for atherosclerosis. Traditionally, [3H]-cholesterol has been used in cholesterol efflux assays. In this study, we aim to develop a safer and faster strategy using fluorescent labelled-cholesterol (NBD-cholesterol) in a cellular assay to trace the cholesterol uptake and efflux process in THP-1-derived macrophages. Finally, we optimize and standardize the NBD-cholesterol efflux method and develop a high-throughput analysis using 96-well plates.

Measurement of in vitro cholesterol efflux capacity to serum or plasma in macrophage cell models is a promising tool as a biomarker for atherosclerosis. In the present study, we optimize and standardize a fluorescent NBD-cholesterol efflux method and develop a high-throughput analysis using 96-well plates.

말 건 병증에 골수 중간 엽 줄기 세포를 레이블 테크네튬 99m의 생체 ​​이미징 및 추적에서

말 건 병증에 골수 중간 엽 줄기 세포를 레이블 테크네튬 99m의 생체 이미징 및 추적에서