이 작품은 1R03DK096151에 의해 부분적으로 지원되었다.

모든 마우스는 잭슨 연구소 (바 하버, ME)에서 구입하고 NIH 가이드 라인에 콜로라도 덴버 IACUC 대학의 승인에 따라 콜로라도 덴버, 바바라 데이비스 센터 동물 시설의 대학에서 병원균이없는 조건에서 보관 하였다. 1. 기증자 신장 수확 <ol><li> 모든 악기를 소독 절차를 통해 멸균 장갑을 착용하고 멸균 필드를 유지한다. 운영 현미경을 이용하여 모든 수술을 수행한다. </li><li> 수술로 펜 토바 비탈 - 마취 (60mg의 / ㎏ IP) 기증자로부터 마우스 기증자의 신장을 제거합니다. 발가락 핀치에 의한 마취의 깊이를 확인하고 호흡을 관찰한다. </li><li> 다음 4 방향 구속으로 마우스를 고정 모피 클립. 포비돈 - 요오드와 피부를 준비하고 멸균 방식으로 마우스를 드레이프. </li><li> 2cm의 중간 선 수직 복부 절개를 확인하고 복강을 입력합니다. 우량 장을 후퇴하고 구체화가슴에. 절차를 통해 멸균 촉촉한 거즈에 싸서 장을 유지합니다. </li><li> 큰 복부 혈관을 확인하고 그들을 동원, 어떤 요추 가지를 확인하고 소작 또는 10/0 나일론 봉합사를 결찰 중 하나. </li><li> 바로 왼쪽 신장 혈관 원위부는 약 2mm 이상 무딘 절개에 의한 하대 정맥 (IVC)과 떨어져 복부 대동맥 (AA)를 애타게. 10/0 나일론 결찰과 신장 혈관에서 작은 동맥과 정맥의 가지를 나눕니다. </li><li> 이제 이러한 구조의 무딘 절개에 의해 조심스럽게 신장 동맥에서 신장 정맥을 분리합니다. 이것은 수신자 IVC로 엔드 - 투 - 사이드 문합을 형성하는데 사용된다 신정맥의 기단부 카렐 패치의 정확한 생성을 위해 허용한다. </li><li> 식별, 결찰 왼쪽 부신 혈관을 나눕니다. 이것은 부신 대동맥에 대한 액세스를 허용하고 6-0 실크 봉합사 결찰에 대비 대동맥 주위에 위치하지만,이 시점에서 연결되지 않은. </리&gt; <li> 주변 간판에서 신장, 혈관과 요관을 동원. 오른쪽 결찰에 신장을 회전 / 어떤 후방 가지를 나눕니다. 그런 다음 왼쪽 신장을 반환합니다. </li><li> 이제 요관에주의를 지시. 신장 폐문이 ureteric 혈관을 유지하기 위해 주변의 간판 복용 치료에서 요관을 무료 방해하지 않고. 동맥관 정관의 수준에서 요관을 나눈다. 신장은 이제 복구하기위한 준비가되어 있습니다. </li><li> 천천히함으로써 기증자를 heparinizing 말초 IVC에 헤파린 300 단위를 주입. 부신 AA 주위에 배치 6-0 실크 봉합사를 묶고 헤파린 식염수 (100 U / ㎖)와 함께 0.8 ㎖의 원위 복부 대동맥을 통하여 좌측 신장을 관류. </li><li> 관류가 정맥 카렐 패치를 만들 중단되면 즉시 신장으로 역류를 제거합니다. AA와 아래 신장 동맥을 드러내는 신장쪽으로 신장 정맥을 후퇴. </li><li> 신장 동맥에 인접한 대동맥 뒤꿈치에를 만드는 나눈다그림 1과 같이 전자 커프. 기증자로부터 신장, 혈관과 요관을 제거합니다. </li><li> 주입 시간까지 미리 제조 수신자 (0 분 냉 허혈 시간) 또는 미리 결정된 시간에 대한 선택의 용액에 4 ℃로 보관 직접 신장을 제거한다. exsanguanation 자궁 전위에 의해 기증자를 안락사. 기증자의 신장을 복구 할 수있는 총 시간은 약입니다. 15 ~ 20 분. </li></ol> 2. 신장 이식 기법 <ol><li> 펜토 바르 비탈과받는 사람 마우스를 마취 (60mg의 / ㎏ IP 초기 용량, 25 mg의 / ㎏ IP 추가 투여 필요한 경우). 발가락 핀치에 의한 마취의 깊이를 확인하고 호흡을 관찰한다. 모피는 다음 4 방향 구속하여 마우스를 고정하고 눈 안과 연고를 적용 클립. 포비돈 - 요오드와 피부를 준비하고 멸균 방식으로 마우스를 드레이프. </li><li> 2cm의 중간 선 수직 복부 절개를 확인하고 복강을 입력합니다. 장 후퇴우량 가슴에 구체화. 절차를 통해 멸균 촉촉한 거즈에 싸서 장을 유지합니다. </li><li> 이 때 오른쪽 신장 절제술을 수행합니다. 6-0 실크 봉합사와 신장 동맥과 정맥을 결찰. 봉합에 신장의 원위을 절제. 신장에 인접 분할 후 6-0 실크 요관을 결찰하고. </li><li> 신장 혈관 아래 복부 대동맥과 하대 정맥 (IVC)를 분리합니다. 문 합부에 4-0면 대동맥 주위 관계 및 IVC 우수한 다음 열등를 놓습니다. 10-0 나일론 봉합사와 필드 내의 모든 요추 혈관을 확인하고 결찰. </li><li> 우수한 다음에 먼저 열등,면의 관계를 매듭. 이런 식으로 몇 가지 혈액 aortotomy을 쉽게 대동맥에 유지됩니다. </li><li> 대동맥의 루멘을 입력 30G 바늘 aortotomy를 형성한다. 약 2mm의 길이에 미세한 마이크로 가위로 절개를 확장 할 수 있습니다. </li><li> 기증자의 대동맥의 발 뒤꿈치와 발가락 커프의 측면 문합에에 끝을 확인다음과 같은 방식으로받는 사람 대동맥. 기증자의 대동맥과받는 사람 대동맥과 넥타이 절개의 하부 각도에 10-0 나일론 봉합사 숙박 스티치를 놓습니다. </li><li> 기증자의 대동맥의 첫 번째 및 복부 대동맥과 넥타이에 절개의 우수한 코너에 대향하는 제 2 10-0 나일론을 놓습니다. 대동맥의 측면 벽에 열등 우수에서 실행 봉합 라인을 확인하고 이전에 배치 숙​​박 스티치에 넥타이. 그런 다음 실행 패션과 넥타이 중간 벽을 봉합. </li><li> 다음과 같은 방식으로받는 사람 IVC에 기증자 신장 정맥 측 문합에 끝을 확인합니다. 30G 바늘 IVC에 구멍을 미세 마이크로 가위로 절개를 확장 할 수 있습니다. 10-0 나일론으로 IVC의 절개의 하부 모서리에 기증자 신장 정맥을 묶어. 신장 정맥과 하대 정맥과 넥타이 사이에 실행 봉합 라인을 확인합니다. 참고 : 그것은 전체 두께가 혈관 adventit을 포함하여 봉합 바늘 통과하는 것도 매우 중요합니다IA와 내막이 달성된다. 가장자리의 외반은 밀봉 및 문합의 치유에 도움 내막 - 투 - 내막 접촉이 있음을 보장합니다. 지혈 응고 에이전트가 누출을 감소하는 데 유용 할 수 있지만, 우리는 외과 의사 대신 좋은 기술에 의존하는 것이 좋습니다. </li><li> 문합은 &quot;깨끗한&quot;인지 확인합니다. 즉 바늘을 배치 할 때 상대 벽은 발견되지 않는다는 것이다. 이것은 실패한 이식과 뒷다리 마비에 극단적 인 경우가 발생합니다 그 흐름에 상당한 수축의 원인이됩니다. 주 : 또 극히 중요한 요소는 문합 봉합선의 장력이 또한 최적 인 것을 보장한다. 너무 느슨하고 돌이킬 누출, 너무 꽉 발생합니다 흐름에 협착이있을 것입니다. 동맥 측에이 이식의 가난한 관류가 발생할 경우, 정맥 측에 혼잡 신장의 원인이됩니다. </li><li> 말초 4-0면 넥타이 재 구축 정맥 흐름을 놓습니다. veno의 지혈 한 번우리의 문합은 근위 4-0면 넥타이를 풀고 지혈을 위해 동맥 문합을 준수 점차적으로 관찰되었다. </li><li> 모두 문합이 안전한 것으로 간주되면 마우스에서 면화 관계를 제거합니다. 피어스 두 개의 구멍을 만드는 20 G 바늘 방광. </li><li> 구멍을 통해 곡선 포셉의 팁을 전달하고 두 10-0 나일론 봉합사로 방광 벽에 ​​고정되는 요관의 기단부와 집게로 방광을 통해 기증자 요관을 당깁니다. 요관이 방광 내에 철회 두 10-0 나일론 봉합사로 구멍을 닫습니다 수 있도록 두 번째 구멍에서 튀어 요관의 초과 길이를 낸다. </li><li> 복부에 장을 돌려줍니다. 실행하는 방식으로 5-0 실크 봉합사를 사용하여 두 층의 복벽을 닫습니다. </li><li> 폐쇄시 유체 소생과 복부에 살균, 따뜻한 생리 식염수 1.0 ML의 덩어리를 관리하고, 생리 식염수를 피하 수술 후 0.8 ml를 주입. 다른 supporti 없습니다적이 조치는 수술 중 필요합니다. </li><li> 온난화 담요에 동물을 복구 할 수 있습니다. 총 주입 시간은 약. 35 ~ 45 분. 이러한 프레 노르 핀, 0.05 ㎎ / ㎏, SC, 절차의 시작과 72 시간의 수술 후마다 6 ~ 12 시간에서 0.1 ~ 0.2 ml의 같은​​ 진통제를 관리. </li></ol> 3. 반대쪽 신장 절제술 <ol><li> 프로토콜 요구 사항에 따라, 몇 일이 임플란트 시술 후, 이소 플루 란 마취에서 반대측 신장 절제술 (유도 5 % 흡입 이소 플루 란, 유지 보수를 위해 1.5-2.0 %)을 수행합니다. </li><li> 복강를 입력하고 부드럽게 동물의 오른쪽에있는 장을 철회. 주위의 근막에서 왼쪽 신장과 무딘 해부 노출. </li><li> 6-0 실크 봉합사와 신장 동맥, 정맥 및 요관을 결찰 한 후 봉합 위의 신장을 절제하고 신장을 제거합니다. 총 수술 시간은 약입니다. 10 분. </li></ol> 4. 이식 평가 <ol><li> 측정 혈청 creati알칼리 피크 레이트 법 (제피 반응)를 사용하여 구. </li></ol>

<ol>
	<li>Skoskiewicz, M., Chase, C., Winn, H. J., Russell, P. S. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Kidney+transplants+between+mice+of+graded+immunogenetic+diversity.">Kidney transplants between mice of graded immunogenetic diversity.</a> Transplant Proc. 5 (1), 721-725 (1973).</li><li>Kalina, S. L., Mottram, P. L. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=A+microsurgical+technique+for+renal+transplantation+in+mice.">A microsurgical technique for renal transplantation in mice.</a> Aust N Z J Surg. 63 (3), 213-216 (1993).</li><li>Han, W. R., Murray-Segal, L. J., Mottram, P. L. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Modified+technique+for+kidney+transplantation+in+mice.">Modified technique for kidney transplantation in mice.</a> Microsurgery. 19 (6), 272-274 (1999).</li><li>Ge, F., Gong, W. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Strategies+for+successfully+establishing+a+kidney+transplant+in+a+mouse+model.">Strategies for successfully establishing a kidney transplant in a mouse model.</a> Exp Clin Transplant. 9 (5), 287-294 (2011).</li><li>Martins, P. N. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Learning+curve,+surgical+results+and+operative+complications+for+kidney+transplantation+in+mice.">Learning curve, surgical results and operative complications for kidney transplantation in mice.</a> Microsurgery. 26 (8), 590-593 (2006).</li><li>Corry, R. J., Winn, H. J., Russell, P. S. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Primarily+vascularized+allografts+of+hearts+in+mice.+The+role+of+H-2D,+H-2K,+and+non-H-2+antigens+in+rejection.">Primarily vascularized allografts of hearts in mice. The role of H-2D, H-2K, and non-H-2 antigens in rejection.</a> Transplantation. 16 (4), 343-350 (1973).</li><li>Zhang, Z., Chen, H., Qian, S. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Kidney+Transplantation+in+Mice.">Kidney Transplantation in Mice.</a> Experimental Organ Transplantation. , 45-64 (2013).</li><li>Zhang, L., Moskovitz, M., Piscatelli, S., Longaker, M. T., Siebert, J. W. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Hemodynamic+study+of+different+angled+end-to-side+anastomoses.">Hemodynamic study of different angled end-to-side anastomoses.</a> Microsurgery. 16 (2), 114-117 (1995).</li><li>Liu, Q., Mirc, D., Fu, B. M. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Mechanical+mechanisms+of+thrombosis+in+intact+bent+microvessels+of+rat+mesentery.">Mechanical mechanisms of thrombosis in intact bent microvessels of rat mesentery.</a> J Biomech. 41 (12), 2726-2734 (2008).</li><li>Chesnutt, J. K., Han, H. C. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Tortuosity+triggers+platelet+activation+and+thrombus+formation+in+microvessels.">Tortuosity triggers platelet activation and thrombus formation in microvessels.</a> J Biomech Eng. 133 (12), 121004 (2011).</li><li>Han, H. C. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Blood+vessel+buckling+within+soft+surrounding+tissue+generates+tortuosity.">Blood vessel buckling within soft surrounding tissue generates tortuosity.</a> J Biomech. 42 (16), 2797-2801 (2009).</li><li>Gutierrez-Diaz, J. A., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Intraluminal+thrombus+and+neointimal+hyperplasia+after+microvascular+surgery.">Intraluminal thrombus and neointimal hyperplasia after microvascular surgery.</a> Surg Neurol. 24 (2), 153-159 (1985).</li><li>Khouri, R. K., Cooley, B. C., Kenna, D. M., Edstrom, L. E. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Thrombosis+of+microvascular+anastomoses+in+traumatized+vessels:+fibrin+versus+platelets.">Thrombosis of microvascular anastomoses in traumatized vessels: fibrin versus platelets.</a> Plast Reconstr Surg. 86 (1), 110-117 (1990).</li><li>Johnson, P. C., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Initial+platelet+deposition+at+the+human+microvascular+anastomosis:+effect+on+downstream+platelet+deposition+to+intact+and+injured+vessels.">Initial platelet deposition at the human microvascular anastomosis: effect on downstream platelet deposition to intact and injured vessels.</a> Plast Reconstr Surg. 90 (4), 650-658 (1992).</li></ol>

The authors have nothing to disclose.

이 이식 기술을 습득하는 것은 어렵지만 달성되면 그것은 매우 강력한 연구 도구이다. 환자 외과 의사 / 연구원은 세부 사항 및 작은 동물 모델에서 더욱 더 어떤 수술을 마스터하는 열쇠입니다 기술의 일관성에 대한 관심에 의해 보상 될 것이다. 마우스 신장 이식을 마스터의 기술적 어려움이 많은 주름, 그리고 그것은 다른 작은 동물 이식 모델에서 경험이 절차를 폭행하기 전에 얻을 수 있어야 ...

1973 년 이후 쥐 신장 이식 모델은 유용한 연구 도구 왔지만, 기술적 인 문제는 광범위한 사용을 저해했다. 수년에 걸쳐 여러 논문 출판이 절차 개선 / 개선을 자세히 설명하고있다. 주로 혈관 고형 장기 이식의 모델로이 절차는 또한 1973 6 러셀 실험실에 의해 고안되었다 이소성 심장 이식 모델에 아마 두 번째입니다. 두 모델은 동종 거부 반응, 지연 이식 기능의 개발에 대한 연구하기 위해 자신을 빌려 허혈 및 재관류 손상. 신장 이식에보고 할 수있는 가장 일반적인 문제 중 하나는 우리는 또한 우리의 실험실에서 경험 동맥 혈전증 4,5,7의 상대적으로 높은 발병률이다. 그러므로 우리는 혈전 형성의 문헌 고찰을 수행하고 가능성이 기술적 인 문제의 원인을 찾기 위해 밖으로 설정하고 또한을 고안가능한 솔루션입니다. 혈전증의 원인은 혈액 기증자 신장 동맥에 다음 기증자 신장 대동맥으로,받는 사람 대동맥에서 걸리는 다소 고통스러운 경로입니다. 이 경로는 혈소판 활성화 및 혈전 형성으로 이어질 수 있습니다 신장 동맥에 난류가 발생합니다. 최근의 관찰과 관련 문헌 8-14의 검색을 바탕으로 우리는 0 %에 혈전증을 감소시켰다 새로운 기술 내놓았다. 여기에 기재된 기술은 시설 혈류를 개선 동맥 힐 앤드 토 커프스의 형성 이전에보고 된 방법과 크게 다르다 혈전 형성을 감소시킨다. 커프 미만 45 O 대동맥 (도 1A 및 1B)의 종축에 각도 신장 동맥의 소공면에 걸쳐 적외선 신장 대동맥을 분할함으로써 형성된다. 이 길이는 약 2mm 커프스가 발생합니다. 정맥 카렐 패치는 R을에 병행하여 형성된다IVC enal 정맥 내로함으로써 커프스의 직경을 증가시킨다. 적외선 신장 기증자 복부 대동맥 발 뒤꿈치와 발가락 커프는 엔드 - 투 -면이받는 사람 복부 대동맥 및 기증자 신장 정맥에 문합이다 / IVC 패치 (IVC) 엔드 - 투 -면이받는 사람 복부 하대 정맥에 문합이다 . 요관 다음에 도입 한 알 동부 (3)에 의해 설명 된 바와 같이 공기 주머니에 고정된다. 이 연구 단지 따뜻한 허혈 시간이 치료 이식의 경우 (예 :., 냉 허혈)는 비교되지 않습니다. 이 경우, 온 허혈 손상이 도너 신장을 통한 혈류의 중단으로부터 시간을 의미한다 (아래의 단계 1.11)와 수신자 (아래 단계 2.11)에 이식 재관류. 냉 허혈은 신장되지 않고, 관류 이식 절차를 시작할 때까지 냉장 보관되는 시간을 의미한다.

<table border="0" cellpadding="0" cellspacing="0">
	<tbody>
		<tr>
			<td>Instrument</td>
			<td>Roboz #</td>
			<td>Fine Science Tools #</td>
			<td>Arosurgical #</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Straight micro-dissecting forcep #5</td>
			<td>RS-5015</td>
			<td>11295-51</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Curved micro-dissecting forcep #7</td>
			<td>RS-5047</td>
			<td>11297-00</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Curved serrated forcep</td>
			<td>RS-5137</td>
			<td>11052-10</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Vannas micro-dissecting scissors, short</td>
			<td>RS-5610</td>
			<td></td>
			<td>09.140.08</td>
		</tr>
		<tr>
			<td colspan="2">Micro-dissecting scissors, straight, sharp, long</td>
			<td></td>
			<td>11.602.11</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Micro spring handle needle holder</td>
			<td></td>
			<td></td>
			<td>11.549.15</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Straight mosquito forcep</td>
			<td></td>
			<td>91308-12</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Micro-dissecting scissors, straight, blunt</td>
			<td>RS-5962</td>
			<td>14078-10</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Micro-dissecting scissors, curved, blunt</td>
			<td>RS-5981</td>
			<td>14079-10</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Micro retractor</td>
			<td>RS-6540</td>
			<td></td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Instrument tray, 10&#8221; x 6 &#189;&#8221; x &#190;&#8221;</td>
			<td>RT-1350S</td>
			<td></td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Silk suture, 5/0, 22.5m spool</td>
			<td></td>
			<td>18020-50</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td></td>
			<td></td>
			<td></td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Suture</td>
			<td></td>
			<td></td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>10/0 nylon</td>
			<td></td>
			<td></td>
			<td>T4A10Q07</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>5/0 silk</td>
			<td></td>
			<td></td>
			<td>E19A05N</td>
		</tr>
		<tr>
			<td></td>
			<td></td>
			<td></td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Gloves</td>
			<td></td>
			<td>Drapes</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Biogel from Medex Supply</td>
			<td></td>
			<td>Precept, #64-9012-9</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td></td>
			<td></td>
			<td></td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Syringes</td>
			<td></td>
			<td>Cotton applicators</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>B-D 1cc insulin, #329424</td>
			<td></td>
			<td colspan="2">Fisher-brand, #23-400-100</td>
		</tr>
		<tr>
			<td></td>
			<td></td>
			<td></td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Povidone-Iodine swabs</td>
			<td></td>
			<td></td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>PDI, #B40600</td>
			<td></td>
			<td></td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td></td>
			<td></td>
			<td></td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>4/0 Cotton ties</td>
			<td></td>
			<td></td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td colspan="2">Domestic cotton autoclaved with instruments</td>
			<td></td>
			<td></td>
		</tr>
	</tbody>
</table>

murine kidney transplant technique

The first mouse kidney transplant technique was published in 19731 by the Russell laboratory. Although it took some years for other labs to become proficient in and utilize this technique, it is now widely used by many laboratories around the world. A significant refinement to the original technique using the donor aorta to form the arterial anastomosis instead of the renal artery was developed and reported in 1993 by Kalina and Mottram 2 with a further advancement coming from the same laboratory in 1999 3. While one can become proficient in this model, a search of the literature reveals that many labs still experience a high proportion of graft loss due to arterial thrombosis. We describe here a technique that was devised in our laboratory that vastly reduces the arterial thrombus reported by others 4,5. This is achieved by forming a heel-and-toe cuff of the donor infra-renal aorta that facilitates a larger anastomosis and straighter blood flow into the kidney.

이 수술 기법은 단순한 이식 생존 / 거부 연구, 또는 매우 복잡한 실험 프로토콜 중 하나를 수 있습니다. 도면에서 우리는이 향상된 동맥 문합 기술을 사용하는 장점을 설명 이하. 우리가 유의하게 0 %, 따라서 생산성 향상 35 %에서 동맥 혈전증의 발생을 감소이 기술을 사용. 우리는 유지 동일한 0 % 혈전증 결과에 1 년 이상이 기술을 이용했다. (1)이 새로운 기술의 기초이다 동맥 힐 앤드...

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Murine Kidney Transplant Technique

The goal of this manuscript is to describe the steps required to perform a kidney transplant in a mouse, paying particular attention to the details of the arterial anastomosis.

쥐 신장 이식 기술

The first mouse kidney transplant technique was published in 19731 by the Russell laboratory. Although it took some years for other labs to become ...

Research

JoVE Journal

Medicine

15.7K 조회수.  University of Colorado, Denver. The goal of this manuscript is to describe the steps required to perform a kidney transplant in a mouse, paying particular attention to the details of the arterial anastomosis. 

비디오: Murine Kidney Transplant Technique

A Method for Murine Islet Isolation and Subcapsular Kidney Transplantation

Since the early pioneering work of Ballinger and Reckard demonstrating that transplantation of islets of Langerhans into diabetic rodents could normalize their blood glucose levels, islet transplantation has been proposed to be a potential treatment for type 1 diabetes 1,2. More recently, advances in human islet transplantation have further strengthened this view 1,3. However, two major limitations prevent islet transplantation from being a widespread clinical reality: (a) the requirement for large numbers of islets per patient, which severely reduces the number of potential recipients, and (b) the need for heavy immunosuppression, which significantly affects the pediatric population of patients due to their vulnerability to long-term immunosuppression. Strategies that can overcome these limitations have the potential to enhance the therapeutic utility of islet transplantation.
Islet transplantation under the mouse kidney capsule is a widely accepted model to investigate various strategies to improve islet transplantation. This experiment requires the isolation of high quality islets and implantation of islets to the diabetic recipients. Both procedures require surgical steps that can be better demonstrated by video than by text. Here, we document the detailed steps for these procedures by both video and written protocol. We also briefly discuss different transplantation models: syngeneic, allogeneic, syngeneic autoimmune, and allogeneic autoimmune.

Transplantation of isolated islets has been proposed to be a potential treatment for type 1 diabetes. Here we describe a method to isolate islets from mouse pancreata and transplant them to the subcapsular space of the kidney.

Murine 아일릿 절연 및 Subcapsular 신장 이식을위한 방법

Since the early pioneering work of Ballinger and Reckard demonstrating that transplantation of islets of Langerhans into diabetic rodents could normalize ...

연구

의학

Murine Cervical Heart Transplantation Model Using a Modified Cuff Technique

Mouse models are of special interest in research since a wide variety of monoclonal antibodies and commercially defined inbred and knockout strains are available to perform mechanistic in vivo studies. While heart transplantation models using a suture technique were first successfully developed in rats, the translation into an equally widespread used murine equivalent was never achieved due the technical complexity of the microsurgical procedure. In contrast, non-suture cuff techniques, also developed initially in rats, were successfully adapted for use in mice1-3. This technique for revascularization involves two major steps I) everting the recipient vessel over a polyethylene cuff; II) pulling the donor vessel over the formerly everted recipient vessel and holding it in place with a circumferential tie. This ensures a continuity of the endothelial layer, short operating time and very high patency rates4.
Using this technique for vascular anastomosis we performed more than 1,000 cervical heart transplants with an overall success rate of 95%. For arterial inflow the common carotid artery and the proximal aortic arch were anastomosed resulting in a retrograde perfusion of the transplanted heart. For venous drainage the pulmonary artery of the graft was anastomosed with the external jugular vein of the recipient5.
Herein, we provide additional details of this technique to supplement the video.

The murine cervical heart transplantation model is well suited for immunological as well as ischemia reperfusion injury studies. We modified the procedure using a non-suture cuff technique and performed more than 1,000 successful transplants with this approach.
Herein, we provide additional details of this technique to supplement the video.

수정 커프 기술을 사용하여 쥐의 자궁 심장 이식 모델

Mouse models are of special interest in research since a wide variety of monoclonal antibodies and commercially defined inbred and knockout strains are ...

Technique of Subnormothermic Ex Vivo Liver Perfusion for the Storage, Assessment, and Repair of Marginal Liver Grafts

The success of liver transplantation has resulted in a dramatic organ shortage. In most transplant regions 20-30% of patients on the waiting list for liver transplantation die without receiving an organ transplant or are delisted for disease progression. One strategy to increase the donor pool is the utilization of marginal grafts, such as fatty livers, grafts from older donors, or donation after cardiac death (DCD). The current preservation technique of cold static storage is only poorly tolerated by marginal livers resulting in significant organ damage. In addition, cold static organ storage does not allow graft assessment or repair prior to transplantation.
These shortcomings of cold static preservation have triggered an interest in warm perfused organ preservation to reduce cold ischemic injury, assess liver grafts during preservation, and explore the opportunity to repair marginal livers prior to transplantation. The optimal pressure and flow conditions, perfusion temperature, composition of the perfusion solution and the need for an oxygen carrier has been controversial in the past.
In spite of promising results in several animal studies, the complexity and the costs have prevented a broader clinical application so far. Recently, with enhanced technology and a better understanding of liver physiology during ex vivo perfusion the outcome of warm liver perfusion has improved and consistently good results can be achieved.
This paper will provide information about liver retrieval, storage techniques, and isolated liver perfusion in pigs. We will illustrate a) the requirements to ensure sufficient oxygen supply to the organ, b) technical considerations about the perfusion machine and the perfusion solution, and c) biochemical aspects of isolated organs.

Technique of Subnormothermic Ex Vivo Liver Perfusion for the Storage, Assessment, and Repair of Marginal Liver Grafts

Marginal grafts, such as fatty livers, grafts from older donors, or livers retrieved after cardiac death (DCD) tolerate conventional, cold static storage only poorly. We developed a novel model of subnormothermic ex vivo liver perfusion for preservation, assessment, and repair of marginal liver grafts prior to transplantation.

Subnormothermic의 기술<em&gt; 전의 VIVO</em&gt; 간 스토리지, 평가를위한 관류 및 한계 간 이식의 수리

The success of liver transplantation has resulted in a dramatic organ shortage. In most transplant regions 20-30% of patients on the waiting list for ...

Murine Heterotopic Heart Transplant Technique

It is now over forty years since this technique was first reported by Corry, Wynn and Russell. Although it took some years for other labs to become proficient in and utilize this technique, it is now widely used by many laboratories around the world. A significant refinement to the original technique was developed and reported in 2001 by Niimi. Described here are the techniques that have evolved over more than a decade in the hands of three surgeons (Plenter, Grazia, Pietra) in our center. These techniques are now being passed on to a younger generation of surgeons and researchers.
Based largely on the Niimi experience, the procedures used have evolved in the fine details - details which we will endeavor to relate here in such a way that others may be able to use this very useful model. Like Niimi, we have found that a video aid to learning is a priceless resource for the beginner.

The manuscript describes the steps required to perform the heterotopic heart transplant in the mouse.

쥐 이소성 심장 이식 기술

It is now over forty years since this technique was first reported by Corry, Wynn and Russell. Although it took some years for other labs to become ...

Technique of Porcine Liver Procurement and Orthotopic Transplantation using an Active Porto-Caval Shunt

The success of liver transplantation has resulted in a dramatic organ shortage. Each year, a considerable number of patients on the liver transplantation waiting list die without receiving an organ transplant or are delisted due to disease progression. Even after a successful transplantation, rejection and side effects of immunosuppression remain major concerns for graft survival and patient morbidity. 
Experimental animal research has been essential to the success of liver transplantation and still plays a pivotal role in the development of clinical transplantation practice. In particular, the porcine orthotopic liver transplantation model (OLTx) is optimal for clinically oriented research for its close resemblance to human size, anatomy, and physiology. 
Decompression of intestinal congestion during the anhepatic phase of porcine OLTx is important to guarantee reliable animal survival. The use of an active porto-caval-jugular shunt achieves excellent intestinal decompression. The system can be used for short-term as well as long-term survival experiments. The following protocol contains all technical information for a stable and reproducible liver transplantation model in pigs including post-operative animal care.

Experimental animal research plays a pivotal role in the development of clinical transplantation practice. The porcine orthotopic liver transplantation model (OLTx) closely resembles human conditions and is frequently used in clinically oriented research. The following protocol contains all information for a reliable porcine OLTx model using an active porto-caval-jugular shunt.

활성 포르토 대정맥 션트를 사용하여 돼지 간 조달 및 동소 이식 이식의 기술

The success of liver transplantation has resulted in a dramatic organ shortage. Each year, a considerable number of patients on the liver transplantation ...

Normothermic Ex Vivo Kidney Perfusion for the Preservation of Kidney Grafts prior to Transplantation

Kidney transplantation has become a well-established treatment option for patients with end-stage renal failure. The persisting organ shortage remains a serious problem. Therefore, the acceptance criteria for organ donors have been extended leading to the usage of marginal kidney grafts. These marginal organs tolerate cold storage poorly resulting in increased preservation injury and higher rates of delayed graft function. To overcome the limitations of cold storage, extensive research is focused on alternative normothermic preservation methods.
Ex vivo normothermic organ perfusion is an innovative preservation technique. The first experimental and clinical trials for ex vivo lung, liver, and kidney perfusions demonstrated favorable outcomes.
In addition to the reduction of cold ischemic injury, the method of normothermic kidney storage offers the opportunity for organ assessment and repair. This manuscript provides information about kidney retrieval, organ preservation techniques, and isolated ex vivo normothermic kidney perfusion (NEVKP) in a porcine model. Surgical techniques, set up for the perfusion solution and the circuit, potential assessment options, and representative results are demonstrated.

Normothermic Ex Vivo Kidney Perfusion for the Preservation of Kidney Grafts prior to Transplantation

The severe organ shortage has resulted in increased use of marginal kidney grafts for transplantation. This has triggered interest in alternative storage methods, since marginal grafts especially tolerate cold storage poorly. The technique of normothermic ex vivo kidney perfusion (NEVKP) represents a novel preservation method for kidney grafts prior to &#160;transplantation.

정상 체온<em&gt; 전의 VIVO</em&gt; 신장의 보존을위한 신장 관류는 이식 전에 이식

Kidney transplantation has become a well-established treatment option for patients with end-stage renal failure. The persisting organ shortage remains a ...

An &#8220;All-laser&#8221; Endothelial Transplant

The &#8220;all laser&#8221; assisted endothelial keratoplasty is a procedure that is performed with a femtosecond laser used to cut the donor tissue at an intended depth, and a near infrared diode laser to weld the corneal tissue. The proposed technique enables to reach the three main goals in endothelial keratoplasty: a precise control in the thickness of the donor tissue; its easy insertion in the recipient bed and a reduced risk of donor lenticule dislocation. The donor cornea thickness is measured in the surgery room with optical coherence tomography (OCT), in order to correctly design the donor tissue dimensions. A femtosecond laser is used to cut the donor cornea. The recipient eye is prepared by manual stripping of the descemetic membrane. The donor endothelium is inserted into a Busin-injector, the peripheral inner side is stained with a proper chromophore (a water solution of Indocyanine Green) and then it is pulled in the anterior chamber. The transplanted tissue is placed in the final and correct location and then diode laser welding is induced from outside the eyeball. The procedure has been performed on more than 15 patients evidencing an improvement in surgery performances, with a good recovery of visual acuity and a reduced donor lenticule dislocation event.

An &amp;#8220;All-laser&amp;#8221; Endothelial Transplant

An all laser procedure is proposed in the endothelial transplant. The surgical technique is based on the use of a femtosecond laser to prepare the donor tissue. Laser welding technique is then used to secure the donor endothelium in the correct position.

&quot;모든 레이저&quot;내피 세포 이식

The &#8220;all laser&#8221; assisted endothelial keratoplasty is a procedure that is performed with a femtosecond laser used to cut the donor tissue at an ...

Mouse Model for Pancreas Transplantation Using a Modified Cuff Technique

Mouse models have several advantages in transplantation research, including easy handling, a variety of genetically well-defined strains, and the availability of the widest range of molecular probes and reagents to perform in vivo as well as in vitro studies. Based on our experience with various murine transplantation models, we developed a heterotopic pancreas transplantation model in mice with the intent to analyze mechanisms underlying severe ischemia reperfusion injury-associated early graft damage. In contrast to previously described techniques using suture techniques, herein we describe a new procedure using a non-suture cuff technique. 
In recent years, we have performed more than 300 pancreas transplantations in mice with an overall success rate of &gt;90%, a success rate never described before in mouse pancreas transplantation. The backbone of this non-suture cuff technique for graft revascularization consists of two major steps: (I) pulling the recipient vessel over a polyethylene/polyamide cuff and fixing it with a circumferential ligature, and (II) placing the donor vessel over the everted recipient vessel and fixing it with a second circumferential ligature. The resultant continuity of the endothelial layer results in less thrombogenic lesions with high patency rates and, finally, high success rates.
In this model, arterial anastomosis is achieved by pulling the abdominal aorta of the donor graft over the everted common carotid artery of the recipient animal. Venous drainage of the graft is achieved by pulling the portal vein of the graft over the everted external jugular vein of the recipient. This manuscript provides details and crucial steps of the organ recovery and organ implantation procedures, which will allow researchers with microsurgical skills to perform the transplantation successfully in their laboratories.

Among abdominal solid organ transplantation, pancreatic grafts are prone to develop severe ischemia reperfusion injury-associated graft damage, leading eventually to early graft loss. This protocol describes a model of murine pancreas transplantation using a non-suture cuff technique, ideally suited for analyzing these early, deleterious damages.

췌 장 이식 수정된 팔목 기술을 사용 하 여 마우스 모델

Mouse models have several advantages in transplantation research, including easy handling, a variety of genetically well-defined strains, and the ...

Murine Cervical Aortic Transplantation Model using a Modified Non-Suture Cuff Technique

With the introduction of powerful immunosuppressive protocols, distinct advances are possible in the prevention and therapy of acute rejection episodes. However, only minor improvement in the long-term results of transplanted solid organs could be observed over the past decades. In this context, chronic allograft vasculopathy (CAV) still represents the leading cause of late organ failure in cardiac, renal and pulmonary transplantation.
Thus far, the underlying pathogenesis of CAV development remains unclear, explaining why effective treatment strategies are presently missing and emphasizing a need for relevant experimental models in order to study the underlying pathophysiology leading to CAV formation. The following protocol describes a murine heterotopic cervical aortic transplantation model using a modified non-suture cuff technique. In this technique, a segment of the thoracic aorta is interpositioned in the right common carotid artery. With the use of the non-suture cuff technique, an easy to learn and reproducible model can be established, minimizing the possible heterogeneity of sutured vascular micro anastomoses.

Here, we present a protocol of heterotopic aortic transplantation in mice using the non-suture cuff technique in a cervical murine model. This model can be used to study the underlying pathology of chronic allograft vasculopathy (CAV) and can help evaluate new therapeutic agents in order to prevent its formation.

수정된 비봉합사 커프 기술을 사용한 뮤린 자궁 경부 대동맥 이식 모델

With the introduction of powerful immunosuppressive protocols, distinct advances are possible in the prevention and therapy of acute rejection episodes. ...

Organ Ischemia-Reperfusion Injury by Simulating Hemodynamic Changes in Rat Liver Transplant Model

Orthotopic liver transplantation (OLT) in rats is a tried and proven animal model used for preoperative, intraoperative, and postoperative studies, including ischemia-reperfusion injury (IRI) of extrahepatic organs. This model requires numerous experiments and devices. The duration of anhepatic phase is closely related to the time to develop IRI after transplantation. In this experiment, we used hemodynamic changes to induce extrahepatic organ damage in rats and determined the maximum tolerance time. The time until the most severe organ injury varied for different organs. This method can easily be replicated and can also be used to study IRI of the extrahepatic organs after liver transplantation.

This paper provides a detailed description of how to build an animal model of the anhepatic phase (liver ischemia) in rats to facilitate basic research into ischemia-reperfusion injury after liver transplantation.

쥐 간 이식 모형에 있는 혈역학적인 변경을 시뮬레이션하여 기관 허혈-재관류 상해

Orthotopic liver transplantation (OLT) in rats is a tried and proven animal model used for preoperative, intraoperative, and postoperative studies, ...