산소 그라데이션 ektacytometry는 개별 병가 경향을 평가하는 기능적인 분석입니다. 현재까지 다른 기능적 에세이를 사용할 수 없거나 사용되지 않습니다. 산소 그라데이션 ektacytometry는 겸상적혈구 질병을 가진 환자의 혈액 세포가 겸상적혈구를 시작하는 산소 장력을 결정할 수 있다.
이 산소 장력은 환자 특이적이며 질병 심각도에 대한 바이오 마커역할을 할 수 있습니다. 겸상적혈구에서는, 이 기술은 처리 효험을 감시하기 위하여 이용될 수 있고 새로운 처리의 발달을 위해 이용될 수 있습니다. 이 기술의 시각적 데모는 매우 민감하기 때문에 중요합니다.
이 기술로 작업을 시작할 때 모르는 측정에 영향을 미치는 여러 가지 요인이 있습니다. 처음으로 이것을 시도하는 누군가는 기술이 견본 준비 및 견본 처리를 위해 아주 중요하다는 것을 경험할 수 있습니다. 내 조언은 가능한 한 표준화 된 작업과 루틴을 개발하는 것입니다.
이 절차를 시작하려면 컴퓨터와 ektacytometer를 켜고 컴퓨터에서 소프트웨어를 엽니다. 질소 실린더를 열어 질소가 시료를 분해할 수 있는지 확인합니다. 컵에 밥을 낮추고 컵이 자유롭게 변할 수 있는지 확인합니다.
소프트웨어가 실행 중일 때 메시지가 작동하는지 확인하고 가스 밸브가 열려 있는지 확인하고 확인을 클릭합니다. ektacytometer가 자체 검사 프로세스를 시작하고 시작을 선택하도록 합니다. 셀프 검사가 실패하면 하드웨어 검사, pO2, 자체 확인을 클릭하여 다시 실행합니다. 왼쪽에 나열된 다른 테스트에서 pO2 스캔을 선택합니다.
화면 오른쪽의 설정을 선택하고 모든 측정에 대해 동일한 설정을 유지하도록 하는 텍스트 프로토콜 중 하나에 나열된 매개 변수에 따라 설정되었는지 확인합니다. 확인을 클릭한 다음 확인을 다시 클릭하여 이러한 설정을 저장합니다. 먼저, EDTA가 포함된 튜브에 정맥에 의한 혈액 샘플을 수집하고 최소 30분 동안 4°C에 혈액을 저장하지만 24시간 이상 은 더 이상 저장하지 않습니다.
그 후 반전을 통해 샘플을 부드럽게 섞어 균질화합니다. 측정 하기 전에 롤러 벤치에 실온까지 샘플을 따뜻하게 하자. 혈액학 분석기를 사용하여 포부를 튜브에 넣고 혈액분석기의 바늘 뒤에 버튼을 눌러 측정을 시작하고 분석기는 전체 혈액의 20~200 마이크로리터를 사용합니다.
그런 다음 추가될 시료의 부피를 계산하여 PVP의 5밀리리터에서 2억 개의 적혈구의 RBC 수로 전혈 샘플을 표준화한다. 시작하려면 파이펫 팁을 자르고 혈액을 세 번 다시 중단하여 미리 적시하십시오. 그런 다음 계산된 샘플 볼륨을 PVP 바이알로 피펫합니다.
균일할 때까지 반전으로 샘플을 수동으로 섞습니다. 천천히 바늘없이 3 밀리리터 주사기에 혈액과 PVP 혼합물의 두 밀리리터를 그립니다. 플런저를 눌러 1.5에서 1.8 밀리리터가 주사기에 남을 때까지 눈에 보이는 기포및 과잉 샘플 용액을 제거합니다.
커넥터를 통해 총 샘플 볼륨을 밥에 천천히 고르게 삽입합니다. 샘플의 수준이 산소 센서와 작은 흡입 구멍 위에 있는지 확인하십시오. 소프트웨어에서 새 를 클릭하고 샘플 식별자, 비고, 기부 날짜 및 PVP의 점도를 입력합니다.
확인 및 흡인을 클릭합니다. 60초 동안 땀을 흘은 후 컵이 회전하고 15초 동안 다시 흡입합니다. 회전이 중지되면 확인을 클릭합니다. 기기 뚜껑을 닫습니다.
산소 그라데이션 ektacytometry가 고정 된 게인으로 수행으로 계속 클릭하고 지금 시작합니다. 측정 후 소프트웨어에서 자동으로 계산되는 곡선및 매개 변수를 표시하는 보고서를 인쇄합니다. 원시 데이터가 설정의 지정된 폴더에 자동으로 저장되는지 확인합니다.
먼저 시료 주사기를 제거하고 증류수 또는 탈온수로 채워진 주사기로 교체하십시오. 헹구는 동안 커넥터를 깨끗하게 누르고 천천히 플러시하여 양방향으로 플러시하십시오. 다음으로 주사기를 제거하고 밥을 들어 올립니다.
부드러운 천을 사용하여 밥과 커넥터를 철저히 건조시다. 그런 다음 큰 주사기를 사용하여 튜브와 밥에 남아있는 물을 제거하기 위해 커넥터를 플러시합니다. 주사기를 입구에 보관하고 밥의 출구를 막아 튜브에 다시 압력을 가하여 나머지 물을 제거합니다.
그런 다음 산소 반점을 만지는 것을 피하면서 컵을 말리십시오. 다음 측정을 위해 기계를 준비하는 밥과 컵을 낮춥다. 기계가 제대로 헹은 후 적절한 튜브가 세척 솔루션과 관련이 있는지 확인하십시오.
소프트웨어를 닫고, 닫기 및 프레스 시작이 끝나면 청소 프로그램이 종료됩니다. 그런 다음 폐병을 비우고 부드러운 천을 사용하여 밥과 컵을 말리십시오. 기기뚜껑을 닫습니다.
질소 실린더를 닫고 컴퓨터와 기계를 끕니다. 산소 그라데이션 ektacytometry산소 농도의 범위에서 적혈구의 병든 행동을 연구하는 데 사용할 수 있습니다. 산소 그라데이션 ektacytometry에서, 질소 가스에 의한 시료의 연속탈화는 주변 공기에 의한 신속한 재산소화에 선행된다.
이러한 조건하에서 적혈구 병동은 탈산소화 하에서 관찰될 수 있습니다. 이는 아픈 적색 세포가 적용된 전단 응력 하에서 제대로 정렬되지 않기 때문에 회절 패턴의 왜곡을 유발합니다. 겸상적혈구는 산소 그라데이션 ektacytometry 도중 조건을 모방하는 탈산소화 도중 모양에 있는 변경을 보여주지 만 산소화될 때 모양에 있는 변경을 보여주지 않습니다.
이 과정은 산소 그라데이션 ektacytometry 동안 회절 패턴의 왜곡을 초래하고 따라서 신장 지수의 감소. ektacytometer에 의해 얻은 대표적인 곡선은 병든 동작의 다른 특성을 반영하는 6개의 파라미터를 나타낸다: 최대 신장 지수, 최소 신장 지수, 델타 EI, 병거의 점, 곡선 아래 영역 및 복구. 건강한 대조군에서 적혈구의 대표적인 곡선, HbS 특성을 가진 환자 및 동형 가상상 적혈구 환자는 여기에서 표시됩니다.
하이드록실 우레아와 수혈으로 치료된 호모자구우스 겸상적혈구 환자의 대표적인 곡선에 있는 명확한 다름은 이 분석의 유용성을 강조합니다. PVP의 온도, pH 및 삼투법과 같은 산소 그라데이션 ektacytometry에 영향을 미치는 수많은 요인이 있지만, 또한 물의 잔재및 혈액 샘플 용액의 혼합 정도는 측정에 영향을 미칠 수 있습니다. 따라서 표준화된 샘플 처리가 필수적입니다.
산소 그라데이션 ektacytometry의 결과는 임상 사례에서 직접 구현될 수 있으므로 개인화된 의학에 기여할 수 있습니다. 이 기술은 겸상적혈구를 위한 새로운 처리의 잠재력을 조사하기 위하여 병상 행동을 연구하는 가능하게 하고 질병 엄격을 위한 임상관련 biomarker로 봉사할 수 있습니다.
