이전 전립선 샘플링 방법에 대한이 프로토콜의 중요성은 연구를 위해 신선한 종양 조직을 표적으로 하는 더 높은 자신감을 제공한다는 것입니다. 따라서, 우리는 새로운 조직을 실험실로 바로 데려가서 어떤 샘플이 종양이고 양성인지에 대한 높은 확신을 가지고 있기 때문에 문화 또는 이미징을 위해 사용할 수 있습니다. 이 기술을 배울 때 나의 중요한 조언은 최종 조직 진단 및 보고가 손상되지 않도록 현지 병리학자와 함께 일하는 것입니다.
종양 위치를 표적으로 하기 위하여는, MRI 심상을 검토하여 종양 위의 위치를 측정하고 종양이 축 평면에서 가장 보이는 서열을 찾아냅니다. 축 이미지를 스크롤하여 종양이 가장 큰 이미지를 식별하고 참조를 위해 이미지를 인쇄합니다. 해당 관상 동맥에서, 전립선의 기지에서 선택된 축 위치로의 거리를 측정하고 밀리미터 단위로 정점에서 전립선의 전체 길이를 측정한다.
그런 다음 이러한 측정값을 인쇄하고 참조를 위해 종양의 위치를 표시합니다. 시편을 수집한 후, 70%에탄올로 라미나르 플로우 후드와 전립선 슬라이싱 장치를 살균하고 전립선의 무게를 그램단위로 측정한다. 그런 다음 오른쪽을 파란색 잉크로 칠하고 수술 마진을 차별할 수 있도록 잉크로 전체 캡슐과 정액 소포를 덮는 검은 잉크로 표본의 왼쪽을 페인트합니다.
전립선을 슬라이스하려면, 기지와 정점을 가진 조직을 후방 측아래로, 앞쪽면을 위로 향하게 한다. 필요한 경우 전립선을 약간 안쪽으로 밀어내는 조직 표본 주위에 골드 핀을 놓고 염기부터 정점에 이르는 전립선 길이를 측정하여 MRI에 의해 측정되는 전립선 길이와 비교합니다. 전립선이 축소된 경우 예상 슬라이싱 위치를 적절한 백분율로 조정합니다.
그런 다음 베이스에서 원하는 횡방향 슬라이스로 측정하고 이 측정에 가장 가까운 핀을 선택하여 슬라이스합니다. 부상을 방지하기 위해 체인 메일 장갑을 착용하고, 식별 된 핀의 양쪽에 슬라이스 장치의 블레이드를 배치하고 스페이서를 사용하여 블레이드를 5 밀리미터 떨어져 유지합니다. 슬라이스를 획득하려면 긴 스트로크를 사용하여 블레이드를 천천히, 앞으로, 뒤로 움직여 장치를 분해하기 전에 전체 슬라이스가 분리되었다고 느끼게 합니다.
그런 다음 벽과 핀을 제거하고 장갑을 사용하여 조각을 코르크 보드의 멸균 조각으로 조심스럽게 옮기습니다. 시편을 획득한 후 축 MRI 이미지와 비교하기 위해 가로 슬라이스를 육안으로 검사합니다. 경우에 따라, 종양 영역은 주변 조직 보다 창백 한 나타날 수 있습니다.
횡방향 슬라이스를 부드럽게 만지릅니다. 종양은 주변 조직보다 더 단단하게 느낄 수 있습니다. 축 MRI 이미지를 가이드로 사용하여 샘플링을 위해 하나 이상의 영역을 선택하고 6밀리미터 펀치를 사용하여 관심 있는 조직 영역을 밀어붙입니다.
필요에 따라 생검 샘플을 시편에서 분리하기 위해 날카로운 메스를 사용하여 전체 분리를 보장하기 위해 코르크에 대한 조직 펀치를 비틀어. 샘플을 획득한 경우 펀치를 제거하고 플런저를 사용하여 샘플을 후속 다운스트림 분석을 위한 적절한 용기로 배출합니다. 그런 다음 펀치가 빨간색으로 찍은 구멍을 잉크로 각 펀치의 위치와 전립선의 무게와 조직 색상과 탄력에 대한 관찰을 기록합니다.
고정 하는 동안 담즙을 방지 하기 위해 코르크에 전립선 캡슐을 고정. 전립선과 코르크를 고정으로 담그면 샘플이 완전히 잠겼습니다. 본 대표적인 분석에서, 입증된 바와 같이 샘플링된 처음 92례중 64%는 종양40% 이상을 함유하고 미세절 없이 100, 000 게놈 프로젝트에 제출되었다.
DNA는 추출되었고 모든 경우에 충분한 수율과 품질이 있었으며 이들 샘플의 59개 초기 하위 집합은 이전 시편 샘플링 방법과 비교하여 출판되었다. 이 절차에 따라, 신선한 종양 샘플은 우리가 새로운 바이오 마커, 약물을 테스트하고 종양 생물학에 대해 자세히 알아 낼 수 있도록 살아있는 이미징 또는 문화에 사용할 수 있습니다. 이제 우리는 이 방법을 일상적으로 사용했기 때문에, 나는 전립선암을 위한 전임상 치료의 새로운 조합을 보기 위하여 전 생체 권 문화에 대한 이 조직을 사용하여 프로젝트를 앞으로 가져올 수 있었습니다.
