이 프로토콜은 대형 동물 모델을 위한 가장 간단한 폐 이식 프로토콜 중 하나이며 수술 관리 측면에서 가장 자세한 정보를 제공합니다. 이 기술의 주요 장점은 수술 설명, 이식 후 고립된 좌측 폐 기능 평가, 수술 중 돼지 안정화입니다. 이 방법은 in vivo 재관류 이식 모델로 ex-situ 결과를 검증하기 위한 ex-situ 폐 fusion 연구에 유용합니다.
폐 이식의 생체 내 재관류 모델은 제자리 폐 증식 소견을 테스트하는 데 유용하며 생체 공학 또는 기계 폐와 같은 인공 장기 테스트에도 사용할 수 있습니다. 왼쪽 전방 외측 개흉술을 위해 돼지를 오른쪽 외측 욕창 위치에 배치하는 것으로 시작합니다. 그런 다음 흉골보다 아래쪽에 있는 시푸이드 돌기에서 왼쪽 견갑골 끝을 촉진으로 확인하고 확인된 두 지점을 연결하여 20cm 길이의 개흉 절개 부위를 표시합니다.
마취를 유도한 후 메스를 사용하여 피부를 절개한 후 전기 소작을 사용하여 동물의 피하층과 근육층을 절개합니다. latissimus dorsi는 나뉘어야합니다. 절개 부위 바로 아래의 갈비뼈를 확인한 후 갈비뼈 위에 소작하여 늑간 신경혈관 다발을 피하면서 늑간 근육을 노출시킵니다.
모기 지혈제를 사용하여 갈비뼈 바로 위의 늑간 근육에 구멍을 뚫은 다음 손가락으로 가슴 안쪽을 만져보세요. 갈비뼈의 상단 가장자리를 소작하는 동안 Yankauer 흡입을 사용하여 흉곽 절개술을 흉골에서 1인치 떨어진 전방과 척추 주위 근육까지 후방으로 확장하기 위해 폐를 밀어냅니다. Cooley 흉골 견인기를 삽입하여 10cm 너비의 개흉술을 열어 폐를 수축시키고 왼쪽 반접합 정맥을 노출시킵니다.
Metzenbaum 가위와 미세한 아래쪽을 사용하여 왼쪽 반접합 정맥을 원주방향으로 절개합니다. 실크 넥타이로 혈관을 둘러싸고 정맥을 합착하고 횡단합니다. 실크 타이의 정맥을 둘러싸기 전에 좌측 폐동맥(PA)과 좌측 폐정맥(PV)을 절개합니다.
헤파린 투여 5분 후 PA를 DeBakey 크로스 클램프로, 왼쪽 전방 PV를 Satinsky 클램프로, 왼쪽 기관지를 Spoon Pots 클램프로 고정합니다. PA, 왼쪽 하부 PV 및 왼쪽 기관지를 통과시켜 최소 0.5cm의 조직 커프를 남깁니다. 좌측 하폐인대를 분할한 후 좌측 폐를 절제합니다.
이식의 경우, 기증자의 폐를 수혜자의 흉부에 삽입하되, 폐를 제자리에 억지로 넣지 않고 하엽부터 삽입합니다. 그런 다음 TF 바늘에 4.0 Prolene 봉합사를 사용하여 기관지 문합을 수행합니다. 흡입 분비물의 기관지 문합을 평가하려면 어댑터 연결을 사용하여 기관지 내시경을 기관내관에 삽입하여 좌우 폐 기관지 내시경을 수행한 다음 내시경을 흡입에 연결한 후 기관지 내시경을 왼쪽 기관지로 전진시킵니다.
폐 호흡을 관찰하고 기관지 문합술의 바이탈을 검사합니다. 오른쪽에서 이 과정을 반복합니다. 다음으로, BV-1 바늘에 6.0 Prolene 봉합사를 사용하여 종단 간 좌심방 또는 LA 문합을 수행한 후 초과 조직을 다듬습니다.
기증자 SVP를 하부 PV 및 LA 문합에 통합한 후 실행 중인 종단 간 문합을 사용하여 BV-6.0 바늘에 1 Prolene 봉합사로 PA 문합을 완료합니다. 나중에, 헤파린화를 확인하고 동물에게 칼륨 이동을 투여합니다. 그런 다음 PA cl을 엽니다.amp 부분적으로 공기를 제거하고 혈액이 봉합사를 통해 흐르도록 합니다.
그런 다음 LA 클램프를 풀고 봉합사 라인이 다시 블리딩되도록 하여 갇힌 공기를 더 방출합니다. LA를 묶은 다음 PA cl을 제거하십시오.amp 완전히. 완료되면 기관지 클램프를 제거하고 킬로그램당 10밀리리터를 목표로 일회 호흡량을 늘립니다.
20개의 프렌치 가단성 흉관을 삽입한 후 개흉술을 3층으로 봉합합니다. Metzenbaum 가위를 사용하여 왼쪽 흉막을 열어 왼쪽 하엽에서 혈액 샘플을 채취합니다. 오른쪽 흉막을 열어 오른쪽 폐동맥을 절개합니다.
그런 다음 클램프를 배치하여 오른쪽 폐 관류를 중지합니다. 21 게이지 바늘을 왼쪽 폐 정맥 쪽으로 향하게 하고 왼쪽 심방에서 멀리 떨어진 곳에 LA 문합에서 혈액 샘플을 채취하여 왼쪽 폐 기능을 평가합니다. 클램핑 후 왼쪽 폐를 향한 21게이지 바늘로 왼쪽 PV 문합에서 혈액 샘플을 채취합니다.
대표적인 분석은 폐 이식 프로토콜 중 전형적인 PF 비율 변화와 부종 형성을 나타냅니다. 재관류에서 PF 비율은 약 100mm의 수은으로 떨어졌는데, 이는 왼쪽 폐가 산소 공급에 즉시 효과적이지 않았기 때문입니다. 4시간 시점의 고립된 좌측 폐 평가에서 PF 비율은 안정적이었다.
성공적인 이식 시 왼쪽 폐는 순환계에 남아 있는 혈액으로 인해 약 20%에서 50%의 체중 증가를 경험할 수 있습니다. 왼쪽 폐 이식 12시간 후 혈액 가스 분석을 수행했습니다. 칼륨 수치는 60 내지 120분의 재관류 동안 증가되는 것이 관찰되었다.
칼륨을 리터당 5밀리몰 미만으로 유지하기 위해 4시간의 재관류 동안 약 2-4교대가 필요했습니다. 수혜자의 상부 폐 정맥을 결찰하는 봉합 대신 측면 무는 클램프를 혈관 조절에 사용할 수 있으며 혈관을 쉽게 꿰맬 수 있습니다.
