JoVE Journal

Biochemistry

Aby wyświetlić tę treść, wymagana jest subskrypcja JoVE.

In Vitro Ubiquitination and Deubiquitination Assays of Nucleosomal Histones

Ubiquitination is a post-translational modification that plays important roles in cellular processes and is tightly coordinated by deubiquitination. Defects in both reactions underlie human pathologies. We provide protocols for conducting ubiquitination and deubiquitination reaction in vitro using purified components.

Rozdziały w tym wideo

0:04

Title

1:01

GSH-agarose Affinity Purification of the GST-RING1B(1-159)-BMI1 (1-109) E3 Ubiquitin Ligase Complex

2:16

Purification of the BAP1/DEUBAD (ASXL2) Deubiquitinase Complex

4:58

Purification of the Nucleosomes from HEK293T Cells

7:38

Nucleosome Ubiquitination Assay Using BMI1/RING1B E3 Ubiquitin Ligase Complex and In Vitro Nucleosomal H2A DUB Assay Using BAP1/DEUBAD

9:05

Results: Purification, Ubiquitination, and Deubiquitination

10:40

Conclusion

Powiązane Filmy

Używamy plików cookie, aby ulepszyć Twoje wrażenia z korzystania z naszej witryny.

Kontynuując korzystanie z naszej witryny lub klikając „Kontynuuj”, wyrażasz zgodę na akceptację naszych plików cookie.