Name: light/dark transition test for mice
Uploaded: 2006-11-13T00:00:00.000+00:00
Duration: 10 min 35 s
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Esta pesquisa foi apoiada pela Grants-in-Aid para Jovens Cientistas (A) (# 16680015), Grant-in-Aid para a Investigação exploratória (# 16653065), Grant-in-Aid para a Investigação Científica em Áreas Prioritárias (# 18023022, # 18016012 e # 18053015) do Ministério da Educação, Cultura, Desporto, Ciência e Tecnologia do Japão, Grant-in-Aid de Promoção de Estudos Fundamentais em Ciências da Saúde do Instituto Nacional de Inovação Biomédica (NIBIO), Grant-in- ajuda de Neuroinformática Japão Center (NIJC), RIKEN

<ol><li> O aparelho utilizado para o teste de transição claro / escuro consistiu em uma gaiola (21x42x25 cm) dividida em duas secções de igual tamanho de uma partição com porta (Ohara &amp; Co., Tokyo). </li><li> Os ratos são alojados 03:57 por gaiola em uma sala com um 12 horas de ciclo claro / escuro (luzes acesas às 07:00) com acesso ad libitum à água e comida. Idealmente, dois controles e dois mutantes estão alojados juntos, re-organizar os ratos logo que são genotipados no momento do desmame. Testes comportamentais é realizada 09h00 - 18:00 Todas as gaiolas de camundongos são transferidos para a sala de testes de comportamento 30 min antes do primeiro julgamento começa. </li><li> Uma câmara é profusamente iluminado por diodos branco (390 lux), enquanto a outra câmara escura (2 lux). Os ratos são colocados no lado escuro ea porta é aberta automaticamente 3 segundos após o mouse é detectado pela câmera infravermelha. A porta é usado para que os ratos não entram na câmara de luz imediatamente após a liberação com a sua motivação para escapar do pesquisador, uma vez que a latência para entrar na câmara de luz pode servir como um índice de ansiedade-como o comportamento. </li><li> Os ratos são autorizados a circular livremente entre as duas câmaras com a porta aberta por 10 min. O aplicativo utilizado para a aquisição e análise de dados comportamentais (Image LD4) é baseado no programa público de domínio J Imagem (desenvolvido byWayne Rasband no Instituto Nacional de Saúde Mental e disponível em http://rsb.info.nih.gov/ij /), que foi modificado por Tsuyoshi Miyakawa (disponível através de O&#39;Hara &amp; Co., Tóquio, Japão). </li><li> A distância percorrida em cada câmara, o número total de transições, o tempo gasto na câmara de cada um, ea latência para entrar no chamberare luz gravada pelo programa Imagem LD4. </li><li> Depois de cada julgamento, todas as câmaras são limpos com água super-hipocloroso para evitar uma polarização com base em pistas olfactivas. </li></ol>

<ol>
	<li>Austin, C. P., Aiba, A., Takao, K., Miyakawa, T., Takao, K., Yamasaki, N., Miyakawa, T., Crawley, J. N., Crawley, J. N., Crawley, J., Goodwin, F. K., Miyakawa, T., Crabbe, J. C., Wahlsten, D., Dudek, B. C. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=The+knockout+mouse+project.">The knockout mouse project.</a> Nat Genet. 36, 921-924 (2004).</li></ol>

Todos os procedimentos foram aprovados pelo Comitê de Uso Animal e Cuidados da Universidade de Kyoto. Tsuyoshi Miyakawa está associada com BIRD, Ciência Japão e Agência de Tecnologia, Saitama, Japão.

Apesar de todas as seqüências do genoma do rato foram determinadas, as funções da maioria destes genes não são conhecidas. Gene-targeting técnicas, no entanto, pode ser usado para apagar ou manipular um gene específico em camundongos (Aiba et al, 2007;. Austin et al, 2004).. A influência de um determinado gene em um comportamento específico pode ser determinada através da realização de análises comportamentais dos camundongos mutantes (Takao e Miyakawa, 2006;. Takao et al, 2007). Como um teste para fenotipagem comportamental de ratos mutantes, o teste de transição claro / escuro é um dos testes mais utilizados para medir a ansiedade-como o comportamento em camundongos (Crawley, 2000). O teste se baseia na aversão natural dos ratos para áreas iluminadas brilhantemente e em seu comportamento espontâneo exploratório em ambientes novos (Crawley, 1985). O teste é sensível ao tratamento com medicamentos ansiolíticos (Crawley, 1985). O aparelho consiste de uma câmara escura e uma câmara iluminada. A abertura restrita, 3 cm de altura por 5 cm de largura, liga as duas câmaras. Os ratos são autorizados a circular livremente entre as duas câmaras. O número de entradas na câmara clara e da duração do tempo que passei lá são usados ​​como índices de brilhante espaço ansiedade em camundongos. O teste de transição claro / escuro foi originalmente desenvolvido pela Crawley e colegas (Crawley e Goodwin, 1980). Há duas diferenças entre a sua versão original e nosso teste. Primeiro, a câmara de luz é maior do que a câmara escura na versão original, enquanto que o tamanho das duas câmaras é o mesmo em nossa versão do teste. Segundo, na versão original, a câmara de luz não tinha teto e as paredes da câmara de luz eram transparentes (Crawley e Goodwin, 1980), enquanto nós usamos plástico branco opaco para o teto e as paredes da câmara de luz. Essas diferenças, ou seja, o tamanho ea abertura da câmara de luz, permite a detecção simultânea de brilhante espaço ansiedade, bem como abrir espaço ansiedade na versão original do teste. Em nosso laboratório, no entanto, abrir espaço ansiedade-como o comportamento em camundongos é testado em um labirinto em cruz elevado. As paredes eo teto opaco, tamanho da câmara de luz, e nossa específicas de luz / escuro protocolo de teste de transição é mais especializado para detectar brilhante espaço ansiedade em relação à versão original. Embora o teste de transição claro / escuro e labirinto em cruz elevado são utilizados para avaliar a ansiedade-como o comportamento, os resultados nem sempre são consistentes. Por exemplo, prosencéfalo específicos camundongos knockout calcineurina passar uma diminuição da quantidade de tempo na câmara de luz no teste de transição claro / escuro, mas um aumento da quantidade de tempo nos braços abertos no labirinto em cruz elevado (Miyakawa et al., 2003) . Nossa hipótese é que a nossa luz / escuro de transição do teste e testes de labirinto em cruz elevado avaliar diferentes aspectos da ansiedade-como o comportamento, como o brilhante espaço ansiedade e de espaço aberto a ansiedade-como o comportamento. Para testar essa hipótese, usamos um grande conjunto de dados coletados com os ratos mesmo em ambos os testes. Em nosso laboratório, realizamos baterias de testes comportamentais que abrangem vários domínios para a tela para o significado do comportamento dos genes. A bateria de testes requer várias semanas para ser concluído. Durante o período de testes, gaiolas de rato são mantidos em um rack nas nossas instalações. Se os ratos são transportados para o nosso laboratório de outras instituições, que estão habituados ao ambiente das nossas instalações por pelo menos uma semana. Após o período de habituação, os ratos são submetidos a um exame de saúde geral e exames neurológicos (Miyakawa et al., 2003), e após esses exames simples, os ratos são submetidos ao teste de transição claro / escuro. O teste é realizado em uma sala à prova de som experimental, após 30 min de habituação à sala experimental, como mostrado no filme. Avaliou-se a mais de 60 linhagens de ratos mutantes geneticamente modificados usando o protocolo mostrado no filme e tem um grande conjunto de dados brutos para mais de 3000 ratos (incluindo do tipo selvagem e camundongos mutantes). Realizamos análises fatoriais para tirar proveito do grande conjunto de dados brutos. Na verdade, nós detectamos diversos fatores de cada teste (dados não publicados), embora houvesse algumas correlações significativas entre os índices (dados não publicados) .. Esses dados serão divulgados como parte de um banco de dados público que estamos construindo agora. Em nossa bateria de testes, do tipo selvagem littermates são normalmente utilizados como controle. Como uma tensão de fundo, os camundongos C57BL/6J são comumente usados. Foram coletados os dados de camundongos C57BL/6J usado como um controle de ratos mutantes na bateria de testes. Os índices obtidos de camundongos C57BL/6J em nosso teste de transição claro / escuro foram os seguintes (n = 795; SEM média), a distância percorrida: 846,5 8,88 centímetros na câmara de luz, 1478,5 9,53 centímetros na câmara escura; duração do tempo gasto : 215,8 s 1,85 na luz, 395,8 1,86 s no escuro; número de transições entre compartimentos: 30,52 0,43; latência entre na câmara de luz: 64,94 2,40 s. Movimento de ratos em torno das entradas para as câmaras é detectado pela câmera e é contado como tempo gasto em ambos os cHambers. Devido a isso, a soma da duração média de tempo gasto na luz e que em compartimentos escuros foi maior do que a de toda a duração do teste (600 s). Em nosso protocolo, um rato é o primeiro colocado na câmara escura. Três segundos depois de colocar o mouse na câmara escura, a porta entre as câmaras e abre automaticamente o rato pode se mover livremente entre as duas câmaras. Camundongos C57BL/6J gastar menos tempo na câmara de luz do que na câmara escura (p &lt;0,0001, duração, se o tempo gasto em luz: 215,8 1,85 s, duração do tempo gasto no escuro: 316,3 2,11 s [o tempo gasto no escuro faz não inclui o tempo inicial gasto no escuro antes de entrar na câmara de luz pela primeira vez], n = 795, teste T pareado). Isto indica que os camundongos C57BL/6J tendem a evitar a câmara de luz, e que o tempo gasto na luz é um bom índice de ansiedade-como o comportamento. Os resultados obtidos a partir de várias linhagens de ratos mutantes são facilmente comparados, porque todos os dados são obtidos utilizando o mesmo protocolo. Para obter fenotipagem resultados de uma linhagem de camundongos mutantes que podem ser facilmente reproduzidos e comparados com dados de outros mutantes, os métodos de teste comportamental deve ser o mais idêntico possível entre laboratórios. Crabbe e seus colegas testaram a interação entre o comportamento do mouse e ambiente de laboratório usando exatamente as mesmas cepas puras e uma cepa mutante nulo. Em seu estudo, o aparelho, os protocolos de teste, e muitas variáveis ​​ambientais foram rigorosamente padronizado. Apesar da padronização, eles encontraram diferenças sistemáticas no comportamento em laboratório, embora também detectou diferenças tensão em todos os comportamentos (Crabbe et al., 1999). Eles relataram que as variáveis ​​incontroláveis ​​e experiências que caracterizam os mutantes podem produzir resultados que são idiossincráticos a um laboratório particular. As diferenças que existem entre processuais laboratórios tornam difícil replicar ou comparar os resultados entre laboratórios. Aqui, apresentamos nosso protocolo para o teste de transição claro / escuro como um filme para que os detalhes do protocolo pode ser demonstrada. Elaboração de documentação visual do protocolo vai facilitar uma melhor compreensão dos detalhes de procedimentos experimentais, permitindo a padronização dos protocolos utilizados em laboratórios e para as comparações dos fenótipos comportamentais de várias linhagens de ratos mutantes avaliados através deste teste. Filmes de outros protocolos, como para o labirinto em cruz elevado, teste de campo aberto, teste de natação forçada porsolt, o condicionamento do medo, que nós usamos em nossa bateria de testes comportamentais estão sendo feitos para publicação como artigos de periódicos futuro vídeo.

light/dark transition test for mice

Apesar de todas as seqüências do genoma do rato foram determinadas, nós não sabemos ainda as funções da maioria desses genes. Gene-targeting técnicas, no entanto, pode ser usado para apagar ou manipular um gene específico em camundongos. A influência de um determinado gene em um comportamento específico pode ser determinada através da realização de análises comportamentais dos ratos mutantes. Como um teste para fenotipagem comportamental de ratos mutantes, o teste de transição claro / escuro é um dos testes mais utilizados para medir a ansiedade-como o comportamento em camundongos. O teste se baseia na aversão natural dos ratos para áreas iluminadas brilhantemente e em seu comportamento espontâneo exploratório em ambientes novos. O teste é sensível ao tratamento com drogas ansiolíticas. O aparelho consiste de uma câmara escura e uma câmara iluminada. Os ratos são autorizados a circular livremente entre as duas câmaras. O número de entradas na câmara clara e da duração do tempo gasto há índices de brilhante espaço ansiedade em camundongos. Para obter fenotipagem resultados de uma linhagem de camundongos mutantes que podem ser facilmente reproduzidos e comparados com os de outros mutantes, os métodos de teste comportamental deve ser o mais idêntico possível entre laboratórios. As diferenças processuais que existem entre laboratórios, no entanto, torná-lo difícil de replicar ou comparar os resultados entre laboratórios. Aqui, apresentamos nosso protocolo para o teste de transição claro / escuro como um filme para que os detalhes do protocolo pode ser demonstrada. Em nosso laboratório, temos avaliados mais de 60 linhagens de camundongos mutantes usando o protocolo mostrado no filme. Esses dados serão divulgados como parte de um banco de dados público que estamos construindo agora. Visualização do protocolo vai facilitar a compreensão dos detalhes de todo o procedimento experimental, permitindo a padronização dos protocolos utilizados em laboratórios e comparações dos fenótipos comportamentais de várias linhagens de ratos mutantes avaliados através deste teste.

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Light/dark Transition Test for Mice

O teste de transição claro / escuro é um dos testes mais utilizados para medir a ansiedade-como o comportamento em camundongos. Aqui, apresentamos um filme que mostra os procedimentos detalhados de como realizar o teste.

Claro / escuro Teste de transição para Ratos

Although all of the mouse genome sequences have been determined, we do not yet know the functions of most of these genes. Gene-targeting techniques, ...

Nanyang Technological University

Research

JoVE Journal

Biology

52.4K visualizações.  Graduate School of Medicine, Kyoto University. He did. So what?

Vídeo: Light/dark Transition Test for Mice

Assessment of Sensorimotor Function in Mouse Models of Parkinson's Disease

Sensitive and reliable behavioral outcome measures are essential to the evaluation of potential therapeutic treatments in preclinical trials for many neurodegenerative diseases. In Parkinson's disease, sensorimotor tests sensitive to varying degrees of nigrostriatal dysfunction are fundamental for testing the efficacy of potential therapeutics. Reliable and quite elegant sensorimotor measures exist for rats, however many of these tests measure sensorimotor asymmetry within the rat and are not entirely suitable for the newer genetic mouse models of PD. We have put together a battery of sensorimotor tests inspired by the sensitive tests in rats and adapted for mice. The test battery highlighted in this study is chosen for a) its sensitivity in a wide variety of mouse models of PD, b) its ease in implementing into a study, and c) its low expense. These tests have proven useful in characterizing novel genetic mouse models of PD as well as in testing potential disease-modifying therapies.

In Parkinson's disease and movement disorders in general, sensitive and reliable behavioral assays are essential for testing novel potential therapeutics. Here, we describe a manageable battery of sensorimotor tests for mice that are sensitive to varying degrees of injury to the nigrostriatal system and useful for preclinical studies.

Avaliação da função sensório-motora em rato modelos de doença de Parkinson

Sensitive and  reliable behavioral outcome measures are essential to the evaluation of  potential therapeutic treatments in preclinical trials for many  ...

Comportamento

Automated, Quantitative Cognitive/Behavioral Screening of Mice: For Genetics, Pharmacology, Animal Cognition and Undergraduate Instruction

We describe a high-throughput, high-volume, fully automated, live-in 24/7 behavioral testing system for assessing the effects of genetic and pharmacological manipulations on basic mechanisms of cognition and learning in mice. A standard polypropylene mouse housing tub is connected through an acrylic tube to a standard commercial mouse test box. The test box has 3 hoppers, 2 of which are connected to pellet feeders. All are internally illuminable with an LED and monitored for head entries by infrared (IR) beams. Mice live in the environment, which eliminates handling during screening. They obtain their food during two or more daily feeding periods by performing in operant (instrumental) and Pavlovian (classical) protocols, for which we have written protocol-control software and quasi-real-time data analysis and graphing software. The data analysis and graphing routines are written in a MATLAB-based language created to simplify greatly the analysis of large time-stamped behavioral and physiological event records and to preserve a full data trail from raw data through all intermediate analyses to the published graphs and statistics within a single data structure. The data-analysis code harvests the data several times a day and subjects it to statistical and graphical analyses, which are automatically stored in the &#34;cloud&#34; and on in-lab computers. Thus, the progress of individual mice is visualized and quantified daily. The data-analysis code talks to the protocol-control code, permitting the automated advance from protocol to protocol of individual subjects. The behavioral protocols implemented are matching, autoshaping, timed hopper-switching, risk assessment in timed hopper-switching, impulsivity measurement, and the circadian anticipation of food availability. Open-source protocol-control and data-analysis code makes the addition of new protocols simple. Eight test environments fit in a 48 in x 24 in x 78 in&#160;cabinet; two such cabinets (16 environments) may be controlled by one computer.

Fully automated system for measuring physiologically meaningful properties of the mechanisms mediating spatial localization, temporal localization, duration, rate&#160;and probability estimation, risk assessment, impulsivity, and the accuracy and precision of memory, in order to assess the effects of genetic and pharmacological manipulations on foundational mechanisms of cognition in mice.

Automatizada, Quantitative Cognitiva / Screening Comportamental de Ratos: Para Genética, Farmacologia, Cognição Animal e Instrução Graduação

We describe a high-throughput, high-volume, fully automated, live-in 24/7 behavioral testing system for assessing the effects of genetic and ...

Measuring Circadian and Acute Light Responses in Mice using Wheel Running Activity

Circadian rhythms are physiological functions that cycle over a period of approximately 24 hours (circadian- circa: approximate and diem: day)1, 2. They are responsible for timing our sleep/wake cycles and hormone secretion. Since this timing is not precisely 24-hours, it is synchronized to the solar day by light input. This is accomplished via photic input from the retina to the suprachiasmatic nucleus (SCN) which serves as the master pacemaker synchronizing peripheral clocks in other regions of the brain and peripheral tissues to the environmental light dark cycle3-7. The alignment of rhythms to this environmental light dark cycle organizes particular physiological events to the correct temporal niche, which is crucial for survival8. For example, mice sleep during the day and are active at night. This ability to consolidate activity to either the light or dark portion of the day is referred to as circadian photoentrainment and requires light input to the circadian clock9. Activity of mice at night is robust particularly in the presence of a running wheel. Measuring this behavior is a minimally invasive method that can be used to evaluate the functionality of the circadian system as well as light input to this system. Methods that will covered here are used to examine the circadian clock, light input to this system, as well as the direct influence of light on wheel running behavior.

This article will review methods that can be used to determine circadian function and light responsiveness in mice.

Medição Responses Luz circadianos e aguda em ratos usando Atividade Roda Executando

Circadian rhythms are physiological functions that cycle over a period of approximately 24 hours (circadian- circa: approximate and diem: day)1, 2.  They ...

Neurociência

Elevated Plus Maze for Mice

Although the mouse genome is now completely sequenced, the functions of most of the genes expressed in the brain are not known. The influence of a given gene on a specific behavior can be determined by behavioral analysis of mutant mice. If a target gene is expressed in the brain, behavioral phenotype of the mutant mice could elucidate the genetic mechanism of normal behaviors. The elevated plus maze test is one of the most widely used tests for measuring anxiety-like behavior. The test is based on the natural aversion of mice for open and elevated areas, as well as on their natural spontaneous exploratory behavior in novel environments. The apparatus consists of open arms and closed arms, crossed in the middle perpendicularly to each other, and a center area. Mice are given access to all of the arms and are allowed to move freely between them. The number of entries into the open arms and the time spent in the open arms are used as indices of open space-induced anxiety in mice. Unfortunately, the procedural differences that exist between laboratories make it difficult to duplicate and compare results among laboratories. Here, we present a detailed movie demonstrating our protocol for the elevated plus maze test. In our laboratory, we have assessed more than 90 strains of mutant mice using the protocol shown in the movie. These data will be disclosed as a part of a public database that we are now constructing.
Visualization of the protocol will promote better understanding of the details of the entire experimental procedure, allowing for standardization of the protocols used in different laboratories and comparisons of the behavioral phenotypes of various strains of mutant mice assessed using this test. 


The elevated plus maze test is one of the most widely used tests for measuring anxiety-like behavior in mice. Here, we present a movie showing the detailed procedures for conducting the test.

Labirinto elevado para Ratos

Although the mouse genome is now completely sequenced, the functions of most of the genes expressed in the brain are not known. The influence of a given ...

Biologia

Light Preference Assay to Study Innate and Circadian Regulated Photobehavior in Drosophila Larvae

Light acts as environmental signal to control animal behavior at various levels. The Drosophila larval nervous system is used as a unique model to answer basic questions on how light information is processed and shared between rapid and circadian behaviors. Drosophila larvae display a stereotypical avoidance behavior when exposed to light. To investigate light dependent behaviors comparably simple light-dark preference tests can be applied. In vertebrates and arthropods the neural pathways involved in sensing and processing visual inputs partially overlap with those processing photic circadian information. The fascinating question of how the light sensing system and the circadian system interact to keep behavioral outputs coordinated remains largely unexplored. Drosophila is an impacting biological model to approach these questions, due to a small number of neurons in the brain and the availability of genetic tools for neuronal manipulation. The presented light-dark preference assay allows the investigation of a range of visual behaviors including circadian control of phototaxis.

Light Preference Assay to Study Innate and Circadian Regulated Photobehavior in Drosophila Larvae

Here we describe a light-dark preference test for Drosophila larva. This assay provides information about innate and circadian regulation of light sensing and processing photobehavior.

Luz Ensaio Preferências para estudar inata e circadiano Photobehavior Regulamentado<em&gt; Drosophila</em&gt; As larvas

Light acts as environmental signal to control animal behavior at various levels. The Drosophila larval nervous system is used as a unique model to answer ...

Investigating Migraine-Like Behavior Using Light Aversion in Mice

Migraine is a complex neurological disorder characterized by headache and sensory abnormalities, such as hypersensitivity to light, observed as photophobia. Whilst it is impossible to confirm that a mouse is experiencing migraine, light aversion can be used as a behavioral surrogate for the migraine symptom of photophobia. To test for light aversion, we utilize the light/dark assay to measure the time mice freely choose to spend in either a light or dark environment. The assay has been refined by introducing two critical modifications: pre-exposures to the chamber prior to running the test procedure and adjustable chamber lighting, permitting the use of a range of light intensities from 55 lux to 27,000 lux. Because the choice to spend more time in the dark is also indicative of anxiety, we also utilize a light-independent anxiety test, the open field assay, to distinguish anxiety from light-aversive behavior. Here, we describe a modified test paradigm for the light/dark and open field assays. The application of these assays is described for intraperitoneal injection of calcitonin gene-related peptide (CGRP) in two mouse strains and for optogenetic brain stimulation studies.

Rodents are not able to report migraine symptoms. Here, we describe a manageable test paradigm (light/dark and open field assays) to measure light aversion, one of the most common and bothersome symptoms in patients with migraines.

Investigando comportamento semelhante à enxaqueca usando aversão à luz em camundongos

Migraine is a complex neurological disorder characterized by headache and sensory abnormalities, such as hypersensitivity to light, observed as ...

A Phenotyping Regimen for Genetically Modified Mice Used to Study Genes Implicated in Human Diseases of Aging

Age-related diseases are becoming increasingly prevalent and the burden continues to grow as our population ages. Effective treatments are necessary to lessen the impact of debilitating conditions but remain elusive in many cases. Only by understanding the causes and pathology of diseases associated with aging, can scientists begin to identify potential therapeutic targets and develop strategies for intervention. The most common age-related conditions are neurodegenerative disorders such as Parkinson's disease and blindness. Age-related macular degeneration (AMD) is the leading cause of blindness in the elderly. Genome wide association studies have previously identified loci that are associated with increased susceptibility to this disease and identified two regions of interest: complement factor H (CFH) and the 10q26 locus, where the age-related maculopathy susceptibility 2 (ARMS2) and high-temperature requirement factor A1 (HtrA1) genes are located. CFH acts as a negative regulator of the alternative pathway (AP) of the complement system while HtrA1 is an extracellular serine protease. ARMS2 is located upstream of HtrA1 in the primate genome, although the gene is absent in mice. To study the effects of these genes, humanized knock-in mouse lines of Cfh and ARMS2, knockouts of Cfh, HtrA1, HtrA2, HtrA3 and HtrA4 as well as a conditional neural deletion of HtrA2 were generated. Of all the genetically engineered mice produced only mice lacking HtrA2, either systemically or in neural tissues, displayed clear phenotypes. In order to examine these mice thoroughly and systematically, an initial phenotyping schedule was established, consisting of a series of tests related to two main diseases of interest: AMD and Parkinson's. Genetically modified mice can be subjected to appropriate experiments to identify phenotypes that may be related to the associated diseases in humans. A phenotyping regimen with a mitochondrial focus is presented here alongside representative results from the tests of interest.

A reverse-genetics approach to understanding gene families associated with human disease is presented, using mouse as a model system, and the subsequent mouse phenotyping schedule is described. Because mice defective in a gene of interest, HtrA2, manifested Parkinsonian symptoms, the phenotyping regimen is focused on identifying neurological defects.

Um regime de fenotipagem de camundongos geneticamente modificados usados ​​para estudar genes implicados nas doenças humanas do envelhecimento

Age-related diseases are becoming increasingly prevalent and the burden continues to grow as our population ages. Effective treatments are necessary to ...

Medicina

A Custom Multiphoton Microscopy Platform for Live Imaging of Mouse Cornea and Conjunctiva

Conventional histological analysis and cell culture systems are insufficient to simulate in vivo physiological and pathological dynamics completely. Multiphoton microscopy (MPM) has become one of the most popular imaging modalities for biomedical study at cellular levels in vivo, advantages include high resolution, deep tissue penetration and minimal phototoxicity. We have designed an MPM imaging platform with a customized mouse eye holder and a stereotaxic stage for imaging ocular surface in vivo. Dual fluorescent protein reporter mouse enables visualization of cell nuclei, cell membranes, nerve fibers, and capillaries within the ocular surface. In addition to multiphoton fluorescence signals, acquiring second harmonic generation (SHG) simultaneously allows for the characterization of collagenous stromal architecture. This platform can be employed for intravital imaging with accurate positioning across the entire ocular surface, including cornea and conjunctiva.

Presented here is a multiphoton microscopic platform for live mouse ocular surface imaging. Fluorescent transgenic mouse enables the visualization of cell nuclei, cell membranes, nerve fibers and capillaries within the ocular surface. Non-linear second harmonic generation signals derived from collagenous structures provide label-free imaging for stromal architectures.

Uma plataforma personalizada de microscopia multifotn para imagens ao vivo de córnea de rato e conjuntiva

Conventional histological analysis and cell culture systems are insufficient to simulate in vivo physiological and pathological dynamics completely. ...

Bioengenharia

Light Spot-Based Assay for Analysis of Drosophila Larval Phototaxis

The larvae of Drosophila melanogaster show obvious light-avoiding behavior during the foraging stage. Drosophila larval phototaxis can be used as a model to study animal avoidance behavior. This protocol introduces a light-spot assay to investigate larval phototactic behavior. The experimental set-up includes two main parts: a visual stimulation system that generates the light spot, and an infrared light-based imaging system that records the process of larval light avoidance. This assay allows tracking of the behavior of larva before entering, during encountering, and after leaving the light spot. Details of larval movement including deceleration, pause, head casting, and turning can be captured and analyzed using this method.

Light Spot-Based Assay for Analysis of Drosophila Larval Phototaxis

This protocol introduces a light-spot assay to investigate Drosophila larval phototactic behavior. In this assay, a light spot is generated as light stimulation, and the process of larval light avoidance is recorded by an infrared light-based imaging system.

Ensaio Light Spot-Based para análise de Drosophila larval Phototaxis

The larvae of Drosophila melanogaster show obvious light-avoiding behavior during the foraging stage. Drosophila larval phototaxis can be used as a model ...

Light-Dark Preference Test: A Method to Study Anxiety-Related Behavior in Zebrafish

Source: Holcombe, A., et al. <a href="https://www.jove.com/v/51851/" target="_blank">A Novel Method of Drug Administration to Multiple Zebrafish (Danio rerio) and the Quantification of Withdrawal</a>. &#160;J. Vis. Exp.&#160;(2014)
The video describes the light-dark preference assay to study the anxiety-related behavior in zebrafish following the exposure to ethanol.

Teste de preferência claro-escuro: um método para estudar o comportamento relacionado à ansiedade em peixe-zebra

Source: Holcombe, A., et al. A Novel Method of Drug Administration to Multiple Zebrafish (Danio rerio) and the Quantification of Withdrawal. &#160;J. Vis. ...

Claro / escuro Teste de transição para Ratos

Transcrição

Resumo

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