Após completar a eutanásia primária, verifique a perda da resposta à dor apertando o pé. Coloque o sapo de costas. Fixe cada membro.
Corte a linha média da pele e, em seguida, corte lateralmente para criar dois retalhos cutâneos. Pegue a linha alba com pinça e retire-a da cavidade celômica. Corte a musculatura.
Corte ou fixe todas as abas para fora do caminho. Corte os ossos coracoides com a ajuda de uma tesoura de dissecção e remova qualquer excesso de tecido para obter melhor acesso ao coração. Em seguida, desloque suavemente o estômago do Xenopus dissecado para o topo do lobo esquerdo do fígado.
Segure suavemente uma ponta do pulmão usando pinças de tecido e puxe-a para fora da cavidade celômica e, em seguida, fixe o pulmão através da ponta. Puxe o pericárdio fino com pinça de tecido. Usando a ponta de uma tesoura de iridectomia, perfure suavemente o pericárdio sem cortar nenhum tecido subjacente.
Descasque o pericárdio para longe das câmaras cardíacas. Segure suavemente o ápice do ventrículo com pinças. Sem perfurar o ventrículo, insira a agulha através do fechamento da pinça na câmara ventricular.
Aperte a pinça de tecido no lugar usando um suporte de agulha ou hemostático. Inicie o fluxo da bomba em aproximadamente cinco mililitros por minuto. Isso irá ingurgitar as câmaras cardíacas e o tronco arterial.
Use uma tesoura para fazer um nick na aurícula direita. Continue o fluxo da bomba até que a vasculatura do estômago se esbranquiça. Lance a aurícula do coração esquerdo.
Aumente a vazão da bomba para 10 mililitros por minuto. Usando uma pipeta de transferência, enxaguar a cavidade celômica e os meios de perfusão. Se os órgãos mudarem durante o enxágue, desloque-os suavemente para trás para manter a visibilidade do estômago e dos pulmões.
Para ajudar a visualizar o perfusato que flui para fora do coração, as aurículas podem ser reduzidas. Mantenha a agulha no lugar até que a vasculatura do estômago e os pulmões tenham branqueado e o perfusato que flui do coração pareça claro. Perfusão bem-sucedida foi observada em todos os tecidos, exceto no fígado, tornando-os nitidamente mais leves e menos saturados de sangue.
Isso é mais visível nos albinos.
