Nossa pesquisa apresenta um método abrangente e eficiente para a produção de organoides renais a partir de células-tronco pluripotentes induzidas, usando condições culturais de suspensão. Enfatizamos a importância da densidade celular inicial e da concentração de agonistas WNT durante a fase indutora, o que servirá para formar novos pesquisadores organoides. Atualmente, é difícil obter uma única linhagem celular de alta densidade para iPSCs.

O impacto do lote foi perceptível, particularmente em várias linhas iPSC. Os organoides renais de cada lote, podem ter uma forma e tamanho variados. Várias tentativas são necessárias para obter a melhor densidade celular inicial e concentração de CHIR para uma linhagem de iPSC.

Estabelecemos que a diferenciação inicial do método intermediário é importante para o sucesso da formação de organoides renais. Nosso protocolo descreve detalhadamente como escolher as densidades celulares ótimas e as concentrações de CHIR durante o processo, pois diferentes linhagens de iPSC mostraram variações na capacidade de proliferação e diferenciação celular. Os pesquisadores podem gerar rapidamente os organoides renais específicos de suas iPSCs.

De acordo com nosso protocolo, ajustando a densidade celular e a concentração de CHIR, é sem dúvida benéfico para todos os nossos pesquisadores se concentrarem em sua doença renal. Nossa pesquisa futura em laboratório tem que otimizar o método do protocolo em modelos de doenças, regenerar novos medicamentos e a triagem de drogas. Nos últimos cinco anos, nosso laboratório se concentrará na epigenética e no desenvolvimento de drogas tópicas celulares de várias doenças renais hereditárias, com base no desenvolvimento de pacientes, iPSC e modelos de doença organizada renal.