Abordagem microfluídica para resolver a secreção simultânea e sequencial de citocinas de células polifuncionais individuais

Neste projeto, nos concentramos no desenvolvimento e aplicação de novas estratégias analíticas, que permitem a análise direta, quantitativa e profunda das funcionalidades celulares na resolução de uma única célula. E assim, indo além da medição pura de um ponto de dados, pretendemos entender e explorar melhor essa multifuncionalidade, que vem de respostas complexas no hospedeiro e no tecido. Obter uma compreensão abrangente dessas funcionalidades é complexo, difícil e requer abordagens interdisciplinares.

E, portanto, um desafio neste contexto é garantir que a faixa dinâmica do desenvolvimento do ensaio seja apropriada para capturar a quantidade e a dinâmica de uma proteína secretada, que pode variar muito entre amostras, preparações e tecidos. A interrupção na regulação da resposta imune pode induzir vários distúrbios, levando à febre leve a complicações potencialmente fatais. Indo além das medições tradicionais de endpoints, propusemos medir diretamente a desregulação e ativação de células imunes dinamicamente em um nível de célula única para obter informações adicionais.

Portanto, as citocinas geralmente são detectadas no ponto de tempo específico como uma concentração no sobrenadante ou concentração de células ativadas. Medição em massa diretamente para quantificar a secreção de cada célula individual, mascarando a heterogeneidade celular que, como medições finais, não distinguem entre secreção simultânea e secundária. Negligenciando o aspecto dinâmico da resposta A funcionalidade total celular refere-se à capacidade de uma célula imune de secretar várias citocinas simultaneamente.

Isso permite que eles ajustem sua resposta contra ameaças, por exemplo, e meçam essa funcionalidade poli dinamicamente, o que significa que, com o tempo, podem fornecer uma visão geral das diferentes nuances de uma resposta imunológica.