Este trabalho é financiado pelo NIH / NCI conceder R01CA-118916

1. Extrair células-tronco epiteliais da pele humana <ol><li> Antes de iniciar o procedimento de isolar células-tronco epiteliais é preciso preparar os respectivos meios e reagentes (ver tabela 1). </li><li> Frescos adulto pele do couro cabeludo humano de procedimentos facelift ou biópsia com punch é coletado e, em seguida incubar em DMEM FBS / 10% / Dispase (4 mg / mL) durante a noite a 4 ° C. Incubação por 2-4 horas a 37 ° C também é eficaz. Pedaços de pele deve ser uma largura máxima de 1 cm para permitir a enzima para penetrar. </li><li> Transferir a pele em uma placa de Petri esterilizada, retire cada cabelo da pele, segurando o eixo do cabelo perto da superfície da pele e puxando com firmeza e sem sobressaltos. Selecione folículos na fase telógena com base na sua morfologia em um microscópio de dissecação, cortar a região protuberância (Figura 1A) folículos transferência para um tubo de 15 mL esterilizados. Folículos anágenos também pode ser usado se cortado em cima 1 / 3 do folículo para obter folículo piloso &quot;protuberância&quot; região (Figura 1B). </li><li> Incubar os fragmentos folículo isolado em uma mistura de 0,05% de tripsina-EDTA (GIBCO) e Versene (0,53 mM EDTA 4NA, GIBCO) (1:1) para 15-20 minutos em temperatura ambiente com agitação periodicamente, adicionar 4 mL DMEM + 10 FBS% para parar a reação, spin baixo por 5 min a 800 rpm. Alternativamente, explantes folículo fragmento de tecido podem ser colocados em cultura sem tripsina digerir a cultura de células de folículos único. </li><li> Elimine o sobrenadante com cuidado (salvo ~ mL 0,2-0,5 para evitar a perda de células) e re-suspensão em 1 mL KCM (médio queratinócitos), sem EGF. </li></ol> 2. Cultura primária epitelial Células-Tronco <ol><li> Antes de cultivar as células-tronco epiteliais, mitomicina C-tratados 3T3-J2 células (células de alimentação) deve ser preparado da seguinte forma. 3T3-J2 células são cultivadas em DMEM com 10% de FBS antes do tratamento. Remova a mídia de cultura de células e lavar duas vezes com PBS, tratar células com mitomicina C 15μg / mL em DMEM sem soro para 2 hr a 37 ° C, 5% CO 2. Remova a mitomicina C contendo DMEM e lavar duas vezes com PBS, as células estão prontas para uso. (Mitomicina C tratados com células 3T3-J2 também pode ser preparado previamente e armazenadas a -80 ° C. Descongele e semente as células um dia antes de cultivo primário de células-tronco epiteliais, incubar a 37 ° C CO, 5% 2. 150.000-200.000 3T3-J2 células por poço da placa 6-bem é recomendado. </li><li> Sementes isoladas células-tronco do folículo de cabelo a partir do passo 1.5 em mitomicina C-tratados 3T3-J2 células em KCM sem EGF durante a noite a 37 ° C, 5% CO 2, alterado para EGF contendo KCM no dia seguinte. As células são cultivadas a 37 ° C em uma atmosfera úmida contendo 5% de CO 2. Todos os queratinócitos são alimentados com KCM contendo EGF a cada 2 dias e cultivadas por 14-20 dias. Verifique celular todos os dias sob o microscópio. Células-tronco do folículo do cabelo irá formar colônias (Figura 2A). Explantes folículo piloso formarão outgrowths após 10-14 dias (Figura 2B). </li></ol> 3. Células-tronco epiteliais passagem <ol><li> Lavar as células com PBS uma vez. Remover as células 3T3-J2 alimentador por Versene tratamento (pré-aquecido a RT). Incubar a cultura dished em Versene por 5 minutos, em seguida, agite e aspirar as células do alimentador. </li><li> Lave as células-tronco do folículo de cabelo com qualquer Versene ou tempo PBS um. </li><li> Adicionar pré-aquecido (a 37 ° C, crítico) de tripsina-EDTA (2X) e incubar a 37 ° C por 7 minutos ou mais se necessário para a célula-tronco de folículo piloso para separar. Não mais que 15 minutos é o melhor. </li><li> Adicionar KCM w / o EGF para parar a tripsina, gentilmente pipeta cima e para baixo para dispersar as células, spin baixo em 200g, a 5 minutos. </li><li> Re-suspender as células com KCM sem EGF Count, e re-placa em mitomicina C tratados com camada de células 3T3-J2. </li></ol> 4. Imortalizar Células-Tronco Epiteliais Pilhas, células-tronco adultas, mesmo, chegar a senescência após a passagem de série e meses em cultura. Imortalização de células-tronco primário é uma forma eficaz para aliviar este problema. <ol><li> Placa primária de células-tronco epiteliais (~ 350 mil células / poço de 6 de placa bem) em uma passagem sobre a camada de alimentação (3T3-J2) e cultura para 2 dias. </li><li> Cultura PA317 LXSN linha celular 16E6E7 um dia após a semeadura primária de células-tronco epiteliais com DMEM contendo 10% FBS. (Esta linha produz o LXSN16E6E7 retrovírus amphotropic que codifica o HPV16 E6 e E7 quadros de leitura aberta, e que pode ser usado para infectar e se estavelmente imortalizar muitos tipos de células). </li><li> Tratar PA317 LXSN linha celular 16E6E7 com mitomicina C por 2 horas (mesmo protocolo com 3T3-J2 células). Adicionar mitomicina C tratados PA317 LXSN linha celular 16E6E7 ao primário de células-tronco epiteliais, co-cultura por 6 dias no KCM com EGF. Renovar KCM fresco com EGF media a cada 2 dias. </li><li> Remover 3T3-J2 e PA317 LXSN 16E6E7 célula com Versene. Adicionar mitomicina-C trataram células 3T3-J2 NHP (neomicina, higromicina, puromicina resistentes, ~ 200.000 células por poço) para as células-tronco epiteliais. Células estão selecionadas em 0,2 mg / ml de G418 (Gibco) para adicionaritional 6 dias. Renovar KCM G418 fresco contendo com EGF media a cada 2 dias. Sobrevivendo células-tronco epiteliais será imortalizado células-tronco. Um bem de células-tronco epiteliais primários que não são co-cultivados com PA317 LXSN 16E6E7 célula deve ser definido como um controlo para a selecção G418, todas as células desse bem deve ser morto por G418 após 6 dias de seleção. </li></ol> 5. Resultados representante Passagem precoce de células epiteliais da pele-tronco e células-tronco epiteliais imortalizada formam colónias apertado consistindo de pequenas queratinócitos (Figura 2A) rodeado por células alimentadoras. Se cultivadas em soro de mídia livre com suplementos definido, sem uma camada de alimentação, as células-tronco se dispersa e não formam colônias apertado (elas crescem como células únicas e pequenos aglomerados). Células-tronco epiteliais imortalizada manter um fenótipo estável por&gt; 12 meses de passagem contínua, mas tendem a formar colônias mais apertado do que as células primárias. Eles não formam colônias de ancoragem independente em ensaios agar suave, indicando que estas células imortalizadas não possuem as características de células cancerosas. Primário e as células-tronco epiteliais imortalizada expressar folículo piloso marcador de células-tronco citoqueratina 15 (Figura 3A), e são capazes de se diferenciar em folículo piloso epidérmica, e linhagens sebáceas (Figura 3B-D). <img src="/files/ftp_upload/2561/2561fig1.jpg" alt="Figura 1" /> Figura 1. Dedilhados cabelos. Após arrancar a partir de dispase tratados com pele, folículos pilosos aparecem tanto como os cabelos telógeno clube (A) com uma bola de células em torno do fundo do cabelo, ou cabelos anágenos (B) com uma manga de epitélio em torno do comprimento do cabelo. A região bojo telógeno forma uma região distinta morfológicas para micro-dissecção, enquanto o bojo anágena é menos distintas. A lâmpada contém anagen queratinócitos da matriz, o que representa trânsito ampliando-células que também podem ser isoladas e cultivadas. <img src="/files/ftp_upload/2561/2561fig2.jpg" alt="Figura 2" /> Figura células 2. Culturas Stem. (A) células-tronco epiteliais da pele forma apertada colônias epiteliais (designado por E), quando cultivadas em KCM com uma camada de células de alimentação (designados por F). (B) explantes follicle do cabelo dar origem a outgrowths epiteliais. A região bojo telógeno (designada por T) é anexado ao prato e cercada de colônias de células epiteliais com células alimentadoras. <img src="/files/ftp_upload/2561/2561fig3.jpg" alt="Figura 3" /> Figura 3. Diferenciação de células-tronco. (A) As células-tronco manter colônias expressão de marcadores epiteliais como citoqueratina 15. (B) células-tronco epiteliais de pele pode ser diferenciada ao longo da linhagem folículo piloso como determinado pela expressão K6Hf. (C) As células podem ser cultivadas em de-epidermalized derme ou outras matrizes na interface ar-líquido e formar uma camada de epiderme estratificada com cornified, camada granular e camada espinhosa. (D) As células-tronco podem ser induzidas ao longo da linhagem sebáceas com Oil Red glóbulos positivo.

<ol>
	<li>Jones, P. H., Watt, F. M. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Separation+of+human+epidermal+stem+cells+from+transit+amplifying+cells+on+the+basis+of+differences+in+integrin+function+and+expression.">Separation of human epidermal stem cells from transit amplifying cells on the basis of differences in integrin function and expression.</a> Cell. 73, 713-724 (1993).</li><li>Lyle, S., Christofidou-Solomidou, M., Liu, Y., Elder, D. E., Albelda, S., Cotsarelis, G. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=The+C8/144B+monoclonal+antibody+recognizes+cytokeratin+15+and+defines+the+location+of+human+hair+follicle+stem+cells.">The C8/144B monoclonal antibody recognizes cytokeratin 15 and defines the location of human hair follicle stem cells.</a> J. Cell. Sci. 111, 3179-3188 (1998).</li><li>Bac, S. P., Reneha, A. G., Potte, C. S. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Stem+cells:+the+intestinal+stem+cell+as+a+paradigm.">Stem cells: the intestinal stem cell as a paradigm.</a> Carcinogenesis. 21, 469-476 (2000).</li><li>Slac, J. M. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Stem+cells+in+epithelial+tissues.">Stem cells in epithelial tissues.</a> Science. 287, 1431-1433 (2000).</li><li>It, M., Li, Y., Yan, Z., Nguye, J., Lian, F., Morri, R. J., Cotsarelis, G. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Stem+cells+in+the+hair+follicle+bulge+contribute+to+wound+repair+but+not+to+homeostasis+of+the+epidermis.">Stem cells in the hair follicle bulge contribute to wound repair but not to homeostasis of the epidermis.</a> Nat Med. 11, 1351-134 (2005).</li><li>Spradlin, A., Drummond-Barbos, D., Kai, T. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Stem+cells+find+their+niche.">Stem cells find their niche.</a> Nature. 414, 98-104 (2001).</li><li>Taylo, G., Lehre, M. S., Jense, P. J., Su, T. T., Lavke, R. M. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Involvement+of+follicular+stem+cells+in+forming+not+only+the+follicle+but+also+the+epidermis.">Involvement of follicular stem cells in forming not only the follicle but also the epidermis.</a> Cell. 102, 451-461 (2000).</li><li>Oshim, H., Rocha, A., Kedzi, C., Kobayash, K., Barrandon, Y. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Morphogenesis+and+renewal+of+hair+follicles+from+adult+multipotent+stem+cells.">Morphogenesis and renewal of hair follicles from adult multipotent stem cells.</a> Cell. 104, 233-245 (2001).</li><li>Morri, R. J., Li, Y., Marle, L., Yan, Z., Trempu, C., L, S., Li, J. S., Sawick, J. A. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Cotsarelis+G+Capturing+and+profiling+adult+hair+follicle+stem+cells.">Cotsarelis G Capturing and profiling adult hair follicle stem cells.</a> Nat. Biotechnol. 22, 411-417 (2004).</li><li>Ro, C., Roch, M., Gu, Z., Photopoulo, C., Ta, Q., Lyle, S. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Multi-potentiality+of+a+new+immortalized+epithelial+stem+cell+line+derived+from+human+hair+follicles.">Multi-potentiality of a new immortalized epithelial stem cell line derived from human hair follicles.</a> In vitro Cell. &#38; Dev. Biol. 44, 236-244 (2008).</li><li>Ohyama, M., Vogel, J. C. G. e. n. e. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=delivery+to+the+hair+follicle.">delivery to the hair follicle.</a> J Investig Dermatol Symp Proc. 8, 204-206 (2003).</li><li>Sugiyama-Nakagiri, Y., Akiyama, M., Shimizu, H. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Hair+follicle+stem+cell-targeted+gene+transfer+and+reconstitution+system.">Hair follicle stem cell-targeted gene transfer and reconstitution system.</a> Gene Ther. 13, 732-737 (2006).</li><li>Stenn, K. S., Cotsarelis, G. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Bioengineering+the+hair+follicle:+fringe+benefits+of+stem+cell+technology.">Bioengineering the hair follicle: fringe benefits of stem cell technology.</a> Curr Opin Biotechnol. 16, 493-497 (2005).</li><li>Hoeller, D. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=An+improved+and+rapid+method+to+construct+skin+equivalents+from+human+hair+follicles+and+fibroblasts.+Exp+Dermatol+10.">An improved and rapid method to construct skin equivalents from human hair follicles and fibroblasts. Exp Dermatol 10.</a> , 264-271 (2001).</li><li>Navsaria, H. A., Ojeh, N. O., Moiemen, N., Griffiths, M. A., Frame, J. D. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Reepithelialization+of+a+full-thickness+burn+from+stem+cells+of+hair+follicles+micrografted+into+a+tissue-engineered+dermal+template+(Integra).">Reepithelialization of a full-thickness burn from stem cells of hair follicles micrografted into a tissue-engineered dermal template (Integra).</a> Plast Reconstr Surg. 113, 978-981 (2004).</li><li>Werni, M., Meissne, A., Forema, R., Brambrin, T., K, M., Hochedlinge, K., Bernstei, B. E., Jaenisch, R. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=In+vitro+reprogramming+of+fibroblasts+into+a+pluripotent+ES-cell-like+state.">In vitro reprogramming of fibroblasts into a pluripotent ES-cell-like state.</a> Nature. 448, 318-324 (2007).</li><li>Par, I. H., Zha, R., Wes, J. A., Yabuuch, A., Hu, H., Inc, T. A., Lero, P. H., Lensc, M. W., Dale, G. Q. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Reprogramming+of+human+somatic+cells+to+pluripotency+with+defined+factors.">Reprogramming of human somatic cells to pluripotency with defined factors.</a> Nature. 451, 141-146 (2008).</li><li>Kazantsev, A., Goltso, A., Zinchenk, R., Grigorenk, A. P., Abrukov, A. V., Moliak, Y. K., Kirillo, A. G., Gu, Z., Lyl, S., Ginte, E. K., Rogae, E. I. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Human+hair+growth+deficiency+is+linked+to+a+genetic+defect+in+the+phospholipase+gene+LIPH.">Human hair growth deficiency is linked to a genetic defect in the phospholipase gene LIPH.</a> Science. 314, 982-985 (2006).</li><li>Tola, J., Ishida-Yamamot, A., Riddl, M., McElmurr, R. T., Osbor, M., Xi, L., Lun, T., Slatter, C., Uitt, J., Christian, A. M., Wagne, J. E., Blaza, B. R. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Amelioration+of+epidermolysis+bullosa+by+transfer+of+wild-type+bone+marrow+cells.">Amelioration of epidermolysis bullosa by transfer of wild-type bone marrow cells.</a> Blood. 113, 1167-1174 (2009).</li><li>Wagne, J. E., Ishida-Yamamot, A., McGrat, J. A., Hordinsk, M., Keen, D. R., Riddl, M. J., Osbor, M. J., Lun, T., Dola, M., Blaza, B. R., Tolar, J. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Bone+marrow+transplantation+for+recessive+dystrophic+epidermolysis+bullosa.">Bone marrow transplantation for recessive dystrophic epidermolysis bullosa.</a> N Engl J Med. 363, 629-639 (2010).</li><li>Muraue, E. M., Gach, Y., Grat, I. K., Klausegge, A., Mus, W., Grube, C., Meneguzz, G., Hintne, H., Baue, J. W. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Functional+Correction+of+Type+VII+Collagen+Expression+in+Dystrophic+Epidermolysis+Bullosa.">Functional Correction of Type VII Collagen Expression in Dystrophic Epidermolysis Bullosa.</a> J Invest Dermatol. , (2010).</li><li>Y, H., Kuma, S. M., Kossenko, A. V., Show, L., X, X. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Stem+cells+with+neural+crest+characteristics+derived+from+the+bulge+region+of+cultured+human+hair+follicles.">Stem cells with neural crest characteristics derived from the bulge region of cultured human hair follicles.</a> J Invest Dermatol. 130, 1227-1236 (2010).</li><li>Nishimur, E. K., Grante, S. R., Fishe, D. E. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Mechanisms+of+hair+graying:+incomplete+melanocyte+stem+cell+maintenance+in+the+niche.">Mechanisms of hair graying: incomplete melanocyte stem cell maintenance in the niche.</a> Science. 307, 720-724 (2005).</li></ol>

Não há conflitos de interesse declarados.

Os métodos de extração de células e cultura descritos são surpreendentemente fáceis e reprodutíveis. Temos gerado culturas de células-tronco epiteliais de dezenas de indivíduos através de uma faixa etária ampla, incluindo pacientes com defeitos da pele herdado 18. É melhor para começar o processo no dia da colheita de tecidos, no entanto células permanecerá viável nos meios de comunicação sobre o gelo por vários dias, facilitando o transporte de noite, se necessário. Pele facelift descarta...

Media dos queratinócitos (KCM) [DMEM e Ham s F12 (GIBCO, 3:1), adenina (Sigma, 180 mM), 10% de soro fetal bovino (GIBCO), a toxina do cólera (ICN, 0,1 nM), a penicilina / estreptomicina (GIBCO, 100 U / ml e 100 mg / ml, respectivamente), hidrocortisona (Sigma, 0,4 mg / ml, 1,1 mM), T/T3 (transferrina, GIBCO, 5 mg / ml, 649 nM e triiodo-l-thyronine, Sigma, 2 nM) , a insulina (Sigma, 5 mg / ml, 862 nM) e EGF (Sigma, 10 ng / ml, 1,6 nM), pH 7,2]

isolation and culture of adult epithelial stem cells from human skin

A homeostase de todos os tecidos auto-renovação é dependente das células-tronco adultas. Como células-tronco indiferenciadas sofrer divisões assimétricas, que geram células-filhas que mantêm o fenótipo de células-tronco e trânsito ampliando-cells (células TA) que migram do nicho de células-tronco, são submetidos a rápida proliferação e diferenciação terminal para repovoar o tecido. Células-tronco epiteliais foram identificados na epiderme, folículo piloso, e intestino como células com alto potencial proliferativo in vitro e como o ciclismo slow-label de retenção de células in vivo 1-3. Adulto, tecido-específicos de células-tronco são responsáveis ​​pela regeneração dos tecidos em que residem durante turnover fisiológico normal, assim como em épocas de estresse 4-5. Além disso, as células-tronco são geralmente consideradas como multi-potentes, possuindo a capacidade de dar origem a vários tipos de células dentro do tecido 6. Por exemplo, roedor cabelos células-tronco do folículo pode gerar epiderme, glândulas sebáceas e folículos pilosos 7-9. Nós mostramos que as células-tronco do humano região bojo folículo piloso apresentam potencialidade multi-10. Células-tronco tornaram-se uma ferramenta valiosa na pesquisa biomédica, devido à sua utilidade como um sistema in vitro para estudar a biologia do desenvolvimento, diferenciação, tumorigênese e para a sua eventual utilidade terapêutica. É provável que células-tronco adultas do epitélio será útil no tratamento de doenças como displasias ectodérmicas, monilethrix, síndrome de Netherton, doença de Menkes, epidermólise bolhosa hereditária e alopecias 11-13. Além disso, outros problemas de pele, como queimaduras, feridas crônicas e úlceras irá beneficiar de terapias com células-tronco relacionadas 14,15. Dado o potencial para a reprogramação de células adultas em estado pluripotentes (células iPS) 16,17, as células adultas de fácil acesso e expansível-tronco na pele humana pode fornecer uma valiosa fonte de células para a indução e terapia a jusante de uma ampla gama de doenças, incluindo diabetes e doença de Parkinson.

Watch this Scientific Journal Video about Isolation and Culture of Adult Epithelial Stem Cells from Human Skin at JoVE.com

Isolation and Culture of Adult Epithelial Stem Cells from Human Skin

Uma maneira rápida e robusta de isolar células-tronco adultas viável epiteliais da pele humana é descrito. O método utiliza a digestão enzimática da matriz de colágeno da pele, seguido por arrancar dos folículos pilosos e isolamento de células em suspensão simples ou fragmentos de tecido para cultura de células.

Isolamento e Cultura de Células-Tronco Adultas epitelial da pele humana

The homeostasis of all self-renewing tissues is dependent on adult stem cells. As undifferentiated stem cells undergo asymmetric divisions, they generate ...

isolation-and-culture-of-adult-epithelial-stem-cells-from-human-skin

Research

JoVE Journal

Biology

28.1K visualizações.  University of Massachusetts Medical School. Uma maneira rápida e robusta de isolar células-tronco adultas viável epiteliais da pele humana é descrito. O método utiliza a digestão enzimática da matriz de colágeno da pele, seguido por arrancar dos folículos pilosos e isolamento de células em suspensão simples ou fragmentos de tecido para cultura de células.