Reconhecemos Kevin Macleod para o uso de sua música Creative Commons licenciado no vídeo associado, incluindo (em ordem de aparição) sua &quot;Sala de Embarque&quot;, faixas de &quot;Wallpaper&quot; e &quot;Melodrama da noite.&quot; Gostaríamos também de agradecer Ndubisi Okeke e Frederick Torstrick por sua assistência com o vídeo da cirurgia.

1. Alimentação Spinotrapezius cirurgia de ligadura da artéria <ol><li> Anestesiar rato por injecção intraperitoneal. Em uma seringa de 0,5 ml, formular: 0,06 ml de 100 mg / ml Ketamine 0,03 ml de 20,0 mg / ml Xilazina 0,01 ml de 0,4 mg / ml de atropina 0,30 ml de solução salina a 0,9%. Dose: 0,01 * ml por grama de peso corporal, ip </li></ol> * Dose variável sobre tensão mouse e estoque, ajuste de acordo para recuperação do mouse está dentro de uma hora de indução. <ol start="2"><li> Aplicar pomada oftálmica padrão para evitar a dessecação da córnea. </li><li> Remover o cabelo da parte de trás usando cortadores de corte, seguido pela aplicação breve creme depilatório. </li><li> Desinfectar o campo cirúrgico com clorexidina ou iodo povidona. Alternate povidona-iodo com etanol três vezes, terminando com povidona-iodo. </li><li> Transferir o mouse para a superfície de trabalho previamente preparado cirúrgico, com almofada de aquecimento e bata estérilno lugar. </li><li> Criar uma incisão linear (3-5 mm), através da pele dorsal de aproximadamente 5 mm caudal para a proeminência óssea da omoplata utilizando tesouras e pinças íris padrão padrão (por exemplo, FST, 11271-30) por tenting o tecido e corte paralelo ao coluna. O local de incisão alvo pode ser identificado através da visualização transdérmica da almofada de gordura dorsal que permite pigmentação da pele; cortado na borda caudal da camada de gordura. Expandir a incisão, se necessário, e estender através de camadas secundárias da pele, usando uma tesoura de mola. <ol><li> Nota anatómica - O músculo spinotrapezius reside dorsalmente e estende-se a partir de T4 para L3 ao longo de cada lado da coluna vertebral. A borda anterior estende-se lateralmente para aproximadamente a omoplata. O músculo afunila na direcção caudal, de modo que a borda mais posterior medial está à borda anterior, e pode fixar nivelada com a coluna vertebral. Duas almofadas de gordura são também importante notar, colocando diretamente dorsal e ventral aos spinotrapeziusmúsculo para a metade do crânio. </li><li> Inflamação devido à incisão tem sido demonstrado que não têm qualquer efeito sobre a resposta de remodelação vascular, tal como a cirurgia sham ligadura não mostraram alteração na remodelação da vasculatura spinotrapezius. Dois fatores espaciais contribuem para este resultado. Primeiro, a incisão é removido por 5 mm na direcção craniana da região de interesse, onde a resposta vascular no músculo é normalmente examinado. Além disso, o local de incisão na pele dorsal é separada do local de ligação vaso por uma almofada de gordura abdominal, que se situa na parte superior do terceiro par craniano do músculo spinotrapezius. </li></ol></li><li> Irrigar a incisão com solução de Ringer aquecido para evitar a dessecação do músculo. Aplicação de vasodilatadores tais como papaverina irá ajudar a visualização da artéria alvo para ligação. </li><li> Sob um microscópio de dissecação, utilize uma pinça para neutralizar dissecar e separar (mas não remova) o almofada branca de gordura dorsal do musc subjacenteular tecido, a fim de visualizar o sistema vascular, uma vez que entra e sai da spinotrapezius no seu bordo lateral. </li><li> Localizar o alvo da artéria, a qual, juntamente com um ou dois pares de nervuras, passa através da almofada de gordura que é ventral com as spinotrapezius sobre o seu caminho para a borda lateral do músculo. Esta artéria alimenta uma porção substancial da metade caudal do músculo, o que pode ser confirmado pela reflexão e substituindo o músculo para observar o trajecto da artéria dentro do músculo. O local alvo para a ligadura é o segmento da artéria que sai do bloco ventral gordura e entrarem no músculo, e é bastante acessível nesta região. A par da artéria venosa pode precisar de ser ligeiramente separada da almofada ventral gordura nesta região. Note-se que o spinotrapezius é alimentado por vários pares de artéria veia, incluindo os recipientes que transversais tanto as almofadas de gordura dorsal e ventral. Tome cuidado para não perturbar estas embarcações. <ol><li> Múltiplos indicadores podem ser utilizados para distinguir artériaa partir da veia. Um dos melhores métodos é gentilmente obstruir o fluxo de sangue com a microssonda e mover a montante longe do músculo, o fluxo não será retomada na artéria até que a obstrução é liberado. A cor pode também ser utilizada, como as paredes das veias conter uma bainha esbranquiçada do tecido conjuntivo que as artérias não possuem. Além disso, pode-se considerar o diâmetro antes da aplicação do vasodilatador como veias são tipicamente maiores em tamanho. </li></ol></li><li> A artéria é, tipicamente, na proximidade de sua veia emparelhado; usar dissecção romba com uma microssonda e # 5 fórceps para isolar um segmento de cerca de 5 milímetros, passando a microssonda atrás da artéria, e usando a ponta para fazer uma grande diferença no natural fenda entre a artéria e veia. Esta é a distância através da qual a sutura vai ser enfiada. </li><li> Usando fio de sutura 10-0 único lugar o suporte de agulha e uma ligadura em torno da artéria de alimentação (~ 70 um de diâmetro) para a extremidade proximal do segmento dissecadas de nó de um cirurgião. Place uma ligação adicional para a extremidade distal do segmento da artéria dissecada, com uma separação suficiente entre as ligaduras para permitir a transecção da artéria. <ol><li> A escala pequena associada com a alimentação de artéria spinotrapezius conduz a uma maior dificuldade cirúrgica, em comparação com a ligação de um grande vaso, como a artéria femoral. Cirurgiões inexperientes particularmente terá altas taxas de avulsão, hemorragia inadvertido, e outras complicações cirúrgicas. De preocupação particular é a dificuldade de identificar e cortar a artéria incolor após o fluxo tem sido impedida, pouco antes do corte. Por estas razões, colocando duas ligaduras é recomendado para aqueles acostumados ao processo, como o cirurgião tem uma guia visual na localização onde a transecção da artéria, bem como uma confirmação do corte com a separação facilmente observáveis ​​das duas ligaduras. No entanto, um cirurgião mais experiente pode localizar uma ligadura única suficiente, desde que eles sejam capazes de claramenteidentificar e cortar as artérias jusante da ligadura. Embora esta técnica reduza o risco de inadvertidamente nicking um vaso próximo com a sutura de ligação acentuada, não é isenta de inconvenientes, incluindo o aumento da dificuldade em confirmar a artéria foi seccionada. </li></ol></li><li> Verificar a ligação ao observar diminuição do fluxo de sangue (RBC obstruído coluna) a jusante do local de ligação (isto é, no sentido do músculo). </li><li> Usando tesouras de dissecação da artéria transect ligado, entre as duas ligaduras. Se apenas uma ligadura foi colocada (11), cortado com extremo cuidado no sentido de jusante. </li><li> Droga carregada película lisa (1 mm), pode ser colocado a jusante (caudalmente) como parte do procedimento experimental. </li><li> Reposicionar a fáscia deslocados e tecido adiposo para sua orientação original. </li><li> Feche a incisão na pele usando 8-0 não-reabsorvíveis suturas. Em seguida, coloque o rato em uma gaiola de recuperação preparado aquecida sob observação e administrar um appriado analgésica tais como a bupivacaína, 0,02-0,05 ml de 0,25% de infiltração local. </li></ol> 2. Spinotrapezius microscopia intravital, in situ <ol><li> Anestesiar o rato numa câmara de indução com 3-4% de isoflurano vaporizado em 100% de oxigénio a um caudal de 3-4 L · min -1. <ol><li> O uso de anestesia por inalação é preferível para medidas funcionais, porque há menos depressão cardiovascular do que os anestésicos injectáveis. Se a anestesia por inalação, em que não estão disponíveis, de acção prolongada anestésicos injectáveis, tais como pentobarbital de sódio são preferidos para evitar injecções repetidas uma vez que o animal tenha sido posicionada. </li></ol></li><li> Uma vez anestesiados, continuamente entregar isoflurano através de uma máscara de anestesia (cone do nariz aka) em concentrações de manutenção (geralmente ~ 2%) e taxa de fluxo de 0,5-1 L · min -1. <ol><li> Ratos predominantemente ventilar através das suas vias nasais, por isso, é apenas necessário para cobrir o nariz com o diafragma máscara de anestesia. </li></ol></li><li> Se necessário, remover o cabelo da parte de trás usando cortadores de corte e creme depilatório. </li><li> Transporte do animal para o bloco de calor. <ol><li> É importante manter a ratos em estado euthermic para prevenir a vasoconstrição induzida pela fria, o que pode ser conseguido através de lâmpadas, almofadas de água de circulação de calor, microondas aquece almofadas, etc </li></ol></li><li> Insira a sonda de temperatura retal e definir termo-controlador para 35 ° C. </li><li> Faça uma incisão na pele na extremidade caudal dos spinotrapezius usando tesouras e pinças íris padrão standard. </li><li> Estender a incisão cranialmente para a almofada de gordura, criando uma incisão de ferradura, e cobrir o retalho de pele com filme plástico para evitar a dessecação. </li><li> Blunt dissecar o tecido conjuntivo subcutâneo com uma pinça e tesouras de mola para maximizar a visibilidade. </li><li> Coloque eletrodos estimulantes como toge pertother quanto possível, para minimizar o tamanho do campo de corrente, e posicioná-los na extremidade caudal do músculo exposta imediatamente lateral à coluna vertebral. </li><li> Realize uma estimulação de teste para confirmar a colocação do eletrodo usando um eletrodo sistema de aquisição de dados, isolador de estímulo eletrodo, e controlador de computador, com ondas quadradas de duração mseg 200, 2 mA amplitude, entregue a 1 Hz. </li><li> Coloque filme plástico sobre o músculo exposto de evitar a dessecação. </li><li> Inicie o tempo de um período de 30 minutos, durante o qual os vasos do vai equilibrar. </li><li> Posicione o microscópio intravital sobre o músculo spinotrapezius para ver a arquitetura vascular. <ol><li> Se estiver usando uma lente de imersão, coloque uma gota de PBS entre o objetivo eo plástico. </li></ol></li><li> Começando por cima da arteríola principal (o maior vaso visível), a fase de manipular no plano XY para localizar o vaso de interesse. <ol><li> Visualizando arteriol pequenaes com microscopia de luz refletida requer um maior contraste do que o previsto pela coluna de hemácias. Utilizamos principalmente um lado de fluxo de imagem de microscópio de campo escuro para melhorar o contraste microvascular, mas de contraste pode também ser melhorada através de um microscópio de luz refletida fluorescente após a injecção intravenosa de um elevado peso molecular fluorescente dextrano. </li></ol></li><li> Após o equilíbrio de 30 min, a captura de uma imagem / vídeo do vaso de interesse. </li><li> Estimular o músculo com ondas quadradas de 200 mseg de duração, amplitude de 2 mA, entregue em 8 Hz, durante 90 segundos, tal como descrito acima. </li><li> Capturar outro estímulo imagem / vídeo imediatamente pós e continuar a capturar cada minuto até navio voltou para o diâmetro de descanso, ~ 10 min. </li><li> Repetir os passos 6-18 utilizando o músculo contralateral. </li><li> A análise dos dados pode ser realizada em tempo real, com compassos de calibre de vídeo ou off-line com o software de análise de imagem. </li><li> Euthanize o mouse seguiring IACUC protocolo. </li></ol> 3. Colheita de Tecidos Spinotrapezius e Fixação <ol><li> Anestesiar ratos por injecção intraperitoneal da formulação, tal como no passo Spinotrapezius Ligadura Artéria alimentação 1. </li><li> Faça uma incisão milímetros vários cranianos para a proeminência óssea da lâmina do rato ombro com uma tesoura de íris e pinças padrão standard. Expandir a incisão lateral e, em seguida, caudalmente em ambos os lados. </li><li> Solte a pele do tronco dorsal suavemente refletindo a pele e corte da fáscia superficial. </li><li> Use dissecção romba para remover o tecido adiposo dorsal utilizando fórceps padrão, e, em seguida, reflecte o músculo e tecido adiposo similarmente dissecar ventral. </li><li> Remover fáscia que cobre o músculo usando fórceps e tesouras de mola. Este passo pode ser difícil e demorada, mas é importante para melhorar a coloração de imunofluorescência e de imagem. Manter o tecido hidratado pode facilitar a remoção da fáscia. </li><li> Localizara borda lateral do músculo, e usar dissecção romba para separar o músculo spinotrapezius da almofada de gordura que se encontra ventral a ele. </li><li> Continue a raspagem em um crânio com a direção caudal. Note-se que os vasos sanguíneos vários entram e saem desta superfície ventral do músculo; se a perfusão é necessária, deve ser realizada antes atravessa em estes navios. Note-se também que na metade caudal do músculo, as suas inserções de borda lateral no músculo deitado ventral a ele. Alguns de corte pode ser necessário ao longo desta fronteira para definir completamente e libertar a borda. </li><li> Músculo do Imposto spinotrapezius. Para fazer isso: <ol><li> Livre da borda lateral do músculo, como descrito acima. </li><li> Cortado transversalmente através extensão mais cranial do músculo. </li><li> Corte ao longo da borda medial (ao longo da coluna vertebral), no plano sagital. </li></ol></li><li> Repita os passos 4-9 procedimento no músculo contralateral, e depois eutanásia do mouse por um método aprovado IACUC. </li><li> Fixar os tecidos em lâminas de vidro revestidas com gelatina e por imersão em metanol arrefecido (4 ° C) ou num paraformaldeído a 4% / solução de água desionizada à temperatura ambiente durante 20 min. <ol><li> Em alternativa, a fixação de perfusão pode ser empregado. Antes do passo 2, realizar uma toracotomia, fazer uma incisão no átrio direito e na vasculatura perfundir com 5 ml de 1 × solução salina tamponada com Tris-com 0,1 mM de CaCl 2 e 2% de heparina, através do ventrículo esquerdo, seguida de 5 ml de 4 % de paraformaldeído para fixação do navio, e, finalmente, 5 ml de 1 × solução salina tamponada com Tris-com 0,1 mM de CaCl 2 7. </li></ol></li><li> Imediatamente a seguir a fixação, lavar espécime quatro vezes durante 20 minutos cada. Usando 0,01 M de solução salina tamponada com fosfato (PBS) com 0,1% de saponina </li></ol>

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Os autores declaram que não têm interesses conflitantes financeiros.

O modelo de ligação de murino spinotrapezius aqui apresentada é eficaz num modelo animal pequeno para estudar as adaptações funcionais e estruturais que resultam de uma oclusão arterial. Este modelo é complementar para o modelo de isquemia dos membros posteriores amplamente utilizado 4, na medida em que proporciona uma vista de músculo inteiro de redes microvasculares intactas com uma elevada resolução espacial. Além disso, porque este músculo está localizado logo abaixo da pele dorsal, é acessível a imagens em série com microscopia intravital, e para a entrega da droga local através superfusão ou implantação de película fina 2. Estas características tornam um modelo animal atraente pequeno para se estudar os efeitos de novos alvos terapêuticos no remodelamento vascular e vasodilatação funcional após oclusão arterial. Note-se que o cuidado deve ser usado quando se comparam os dados adquiridos no modelo de ligadura spinotrapezius de dados adquiridos no modelo de ligadura dos membros posteriores devido a vários chave differences. Primeiro, os músculos estão se estabilizando spinotrapezius músculos, e eles diferem dos músculos das pernas em termos de função e distribuição do tipo de fibra. O nosso grupo demonstrou anteriormente que a ligadura arteriolar no músculo spinotrapezius cria hipóxia ou menos insignificante em estirpes com redes bem desenvolvidas arteriolares colaterais, em comparação com a hipóxia observado na pata posterior após a ligação da artéria femoral, no modelo de membro posterior 1,8 - 10. Também mostramos que o modelo de ligadura spinotrapezius produz uma resposta de remodelação diferente em ratinhos Balb / c em comparação com ratinhos C57BL / 6, com murganhos Balb / c mice remodelação redes por colateralização capilar e remodelação de C57BL / 6 por alargamento das actuais ligações arteriolares 3. Há um paralelo interessante entre estas observações e aqueles feitos em modelos de ligação dos membros posteriores, em que ratinhos Balb / c uma experiência de recuperação de perfusão prolongada após a ligadura em comparação com ratinhos C57BL / 6 9,11,12 &lt;/ Sup&gt;. Em outros modelos de isquemia do tecido, da idade do rato 14 e 13 do género na presença de doença 15 também impactar as respostas dos tecidos &#39;para oclusão arteriolar, embora não se tenha ainda testado estes preditores no modelo de ligadura spinotrapezius. Em segundo lugar, o tamanho da artéria que está ligado no modelo spinotrapezius é substancialmente menor do que a artéria femoral, e, portanto, a ligadura impacta um menor volume de tecido que está a jusante, isto é, a um nível inferior do sistema circulatório, no spinotrapezius em comparação com o membro posterior 3. Assim, a diferença anatómica na localização da ligação destes dois modelos, devem ser considerados quando se comparam as respectivas respostas fisiológicas (por exemplo, remodelação vascular) para esta intervenção. Em terceiro lugar, a finura das spinotrapezius oxigénio pode permitir atingir a porção não perfundidada do tecido da vizinhade tecido, em comparação com a isquemia e hipoxia combinado no modelo de membro posterior, como notado acima de 3. Em quarto lugar, a recuperação do fluxo para a parte a jusante spinotrapezius da ligadura é mais rápido do que na ligação dos membros posteriores. O modelo de ligadura spinotrapezius é um modelo único crónica e não devem ser confundidos com os outros modelos de oclusão arterial transitória ou modelos de lesão por isquemia-reperfusão. Consideramos que é possível adaptar este modelo para acomodar estes tipos de condições, mas esta está fora do âmbito de trabalho aqui apresentado. Por fim, advertimos contra directamente relacionados observações pré-clínicas neste modelo para as manifestações clínicas da doença isquêmica em seres humanos, especialmente quando utilizando jovem e saudável ratos e devido aos limites inerentes fisiológicas, como freqüência cardíaca 5. No entanto, consideramos que este novo modelo como uma ferramenta valiosa para descobrir mecanismos básicos de respostas teciduais à ligadura e identificar o potencialrapeutic alvos em um ambiente in vivo. Além das notas cirúrgicos fornecidos no procedimento de ligação de alimentação spinotrapezius artéria (nota anatómica (6a), distinguindo-se da artéria da veia (9a), e a utilização de uma ligadura única (11a)), alguns outros aspectos do processo de benefício discussão. Primeiro, a incisão inicial feito ao longo da fronteira almofada dorsal de gordura (ou vários mm caudal ao ombro, se visualização transdérmico não é possível) é idealmente feito tão pequeno quanto o cirurgião é confortável, e expandiu-se durante o procedimento, se necessário. Esta prática minimiza a sutura necessária para fechar a incisão, o que é conveniente para o cirurgião, reduz o tempo de processo, e também é menos irritante para o animal durante a recuperação. Alternativamente, uma incisão maior da pele pode ser apropriado de acordo com a preferência do cirurgião, uma vez que o músculo pode ser mais fácil de localizar com um campo expandido. Neste caso, a incisão podebeneficiar de uma forma de ferradura com uma face medial aberta para permitir que a dobragem no sentido da coluna. Ao fazer a incisão na pele e que se estendem através das camadas de pele secundárias, se um navio de superfície é danificada e causa hemorragia, aplica uma pressão ligeira com uma gaze estéril e proporcionar tempo para a hemostase. Também de nota, é importante para lidar com o tecido com a força mínima necessária, e sempre que possível segurar com uma pinça mais perto da borda lateral do músculo e para longe da zona pretendida isquémico. Esta prática ajuda a evitar lesão por esmagamento, a qual pode levar a outras respostas inflamatórias mediadas por tecidos que podem confundir a resposta de remodelação vascular provocado pela ligadura arterial. Em conclusão, nós demonstramos a utilização do músculo spinotrapezius murino como modelo cirúrgico para analisar as respostas vasculares e tecido para ligadura arteriolar. Este modelo é adequado para avaliação intravital de alterações vasculares (paravasodilatação exemplo, funcional), e para a avaliação ex vivo de alterações vasculares (por exemplo, a imagem latente imunofluorescente e quantificação de redes vasculares). Ambos os estudos pré-clínicos e clínicos demonstraram que a resposta de um indivíduo a obstrução arteriolar (por exemplo, através de ligação nos ratos ou de placas ateroscleróticas em seres humanos) é dependente da idade na presença ou ausência de doença (por exemplo, diabetes mellitus), o diâmetro da artéria obstruída , a constituição genética do indivíduo, e a exigência metabólica do tecido 11-15. Modelos murinos, como o apresentado aqui, aproveitar o pesquisador de diferenças anatômicas cepa-específica e genética e doenças específicas fenótipos, o que facilita a investigação destas relações complexas.

Modelos animais de isquemia crônica são ferramentas valiosas para estudar a fisiopatologia das doenças isquêmicas, como a doença arterial periférica, doença arterial coronariana e doença cerebrovascular. Em roedores, tal como nos seres humanos, a oclusão arterial leva a remodelação estrutural da rede vascular, incluindo a arteriogénese e a angiogénese. Em pacientes saudáveis ​​e mais jovens, esta remodelação pode ser suficiente para salvar o tecido de isquemia induzida por lesão, mas co-morbidades, como a diabetes pode comprometer gravemente a remodelação e recuperação. Compreender os mecanismos subjacentes a eventos de remodelação vascular é essencial para o desenvolvimento de terapias que estimulam esses processos de revascularização endógenos. Actualmente, a ligação da artéria femoral ou ressecção no membro posterior é a técnica padrão de remodelação para o estudo da isquemia induzida vascular crónica em pequenos animais 4,5. Análise do diâmetro, conectividade e reatividade deos microvasos que compõem a jusante da rede vascular da artéria femoral ligado é difícil, contudo, devido à espessura dos músculos. Nós desenvolvemos um modelo de ligadura arteriolar no músculo do rato spinotrapezius: ligadura unilateral da artéria alimentação lateral deste músculo estabilizador dorsal 1. Os spinotrapezius relativamente finas (60-200 mm) é passível de en imunocoloração cara para a avaliação da topologia da rede inteira com uma única célula de resolução, permitindo um exame detalhado de eventos de remodelação vascular em todo o tecido inteiro. O spinotrapezius também é superficial e acessível, e, portanto, seus navios são facilmente observáveis ​​por microscopia intravital, para caracterização eficiente do impacto de remodelação e ligadura arteriolar na reatividade vascular. Neste relatório, nós descrevemos em detalhes e demonstrar o mouse spinotrapezius modelo de ligadura arteriolar. In vivo e ex vivo methods cirurgia de avaliação a seguir são descritos, incluindo a medição da vasodilatação funcional, que tem sido mostrado para ser comprometida sob condições de isquemia 6, e imagiologia por imunofluorescência das redes de músculo inteiro microvasculares. Nós também incluímos resultados de dois estudos separados piloto para demonstrar a utilidade do modelo. Em primeiro lugar, utilizou-se o modelo de ligadura arterial para induzir um aumento estatisticamente significativo da tortuosidade navio em ratinhos C57BL / 6 (Figura 2B). Tortuosidade aumenta durante arteriogênese em garantias das arteríolas. Em outras estirpes de ratinho, que são mais vulneráveis ​​à isquemia, devido à ausência das arteríolas colaterais (por exemplo, ratinhos Balb / c), observa-se arterialização capilar 10. Arterialização capilar é detectada pelo aumento de diâmetros e ao desenvolvimento de α-actina de músculo liso de reactividade. Em segundo lugar, a estimulação eléctrica funcional do músculo leva à vasodilatação em arteríolas terminais da spinotrapezius (Figura 3B).

<table border="1"><tbody><tr><td> Nome </td><td> Companhia </td><td> Número de catálogo </td><td> Comentários </td></tr><tr><td> Iris tesoura </td><td> FST </td><td> 14090-09 </td><td> Tipo: Ferramenta </td></tr><tr><td> Tamanho 7 fórceps </td><td> FST </td><td> 11271-30 </td><td> Tipo: Ferramenta </td></tr><tr><td> Tamanho 5 fórceps </td><td> FST </td><td> 11251-20 </td><td> Tipo: Ferramenta </td></tr><tr><td> Tesoura Primavera </td><td> Roboz </td><td> RS5671 </td><td> Tipo: Ferramenta </td></tr><tr><td> Microssonda </td><td> FST </td><td> 10140-03 </td><td> Tipo: Ferramenta Pode ser substituído com sonda linear </td></tr><tr><td> Suporte da agulha </td><td> FST </td><td> 12500-12 </td><td> Tipo: Ferramenta </td></tr><tr><td> Câmara de indução </td><td> JD Medical Dist. Co., Inc. </td><td> IC-1086 </td><td>Tipo: Equipamento </td></tr><tr><td> Gel Eye </td><td> Dechra </td><td> NDC 17033-211-38 </td><td> Tipo: Reagente </td></tr><tr><td> Calor pad </td><td> FST </td><td> 21060-01 </td><td> Tipo: Equipamento </td></tr><tr><td> Sonda de temperatura retal </td><td> FST </td><td> 21060-01 </td><td> Tipo: Equipamento </td></tr><tr><td> Eletrodos estimuladores </td><td> FHC </td><td> UEWSGCSE0N1M </td><td> Tipo: Equipamento </td></tr><tr><td> Artesão Polymer Clay </td><td> Polyform </td><td> N / A </td><td> Tipo: Equipamento </td></tr><tr><td> PowerLab sistema de aquisição de dados </td><td> ADInstruments </td><td> ML 845 </td><td> Tipo: Equipamento </td></tr><tr><td> Isolador de estímulo </td><td> ADInstruments </td><td> FE 180 </td><td> Tipo: Equipamento </td></tr><tr><td> LabChart </td><td> ADInstruments </td><td> ML S060 / 7 </td><td> Tipo: Software </td></tr&gt; <tr><td> Luz refletida microscópio de fluorescência </td><td> Olimpo </td><td> BFXM </td><td> Tipo: Equipamento </td></tr><tr><td> Alto MW fluorescente dextrano </td><td> Sigma </td><td> FD250S-100mg </td><td> Tipo: Reagente </td></tr><tr><td> Pinças de vídeo </td><td> Colorado vídeo </td><td> 308 </td><td> Tipo: Equipamento </td></tr><tr><td> Análise Vascular automatizado (AVA) </td><td> Microvision Médica </td><td></td><td> Tipo: Software </td></tr><tr><td> Anti-αSMA fluoróforo Conjugated </td><td> Sigma </td><td> 1A4-Cy3 </td><td> Tipo: Reagente Clonal, 1:100 </td></tr><tr><td> Microscópio Fluorescente </td><td> Olimpo </td><td> BFXM </td><td> Tipo: Equipamento </td></tr><tr><td> De elevado peso molecular fluorescente dextrano </td><td> Sigma </td><td> FD250S-100mg </td><td> Tipo: Reagente </td></tr></tbody></table>

murine spinotrapezius model to assess the impact of arteriolar ligation on microvascular function and remodeling

O spinotrapezius murino é uma fina, músculo esquelético apoio superficial que se estende de T3 a L4, e é facilmente acessível através de incisão na pele dorsal. Sua anatomia singular faz com que os spinotrapezius útil para investigação de lesão isquêmica e remodelação microvascular subseqüente. Aqui, nós demonstramos um modelo de ligadura arteriolar no músculo murino spinotrapezius que foi desenvolvido por nossa equipe de pesquisa e publicado anteriormente 1-3. Para determinadas estirpes de ratinhos vulneráveis, tais como o rato Balb / c, esta cirurgia de ligação fiável cria isquemia do músculo esquelético, e serve como uma plataforma para investigar terapias que estimulam a revascularização. Os métodos de avaliação são também demonstrados, incluindo a utilização de microscopia intravital e confocal. O spinotrapezius é bem adequado para estudos de imagiologia tais, devido à sua acessibilidade (anatomia dorsal superficial) e magreza relativa (60-200 jim). O músculo spinotrapezius pode ser montado en face, facilitandode imagem de todo-musculares redes microvasculares sem cortes histológicos. Descreve-se a utilização de microscopia intravital adquirir métricas na sequência de um procedimento de vasodilatação funcional, mais especificamente, o aumento do diâmetro arterilar como resultado da contracção muscular. Também demonstramos os procedimentos de colheita e fixa os tecidos, um precursor necessário para a imunocoloração estudos e da utilização de microscopia confocal.

Uma vista cirúrgica da artéria principal alimentando o músculo spinotrapezius que sofre de ligação é mostrado na Figura 1, com as etiquetas que indicam áreas de interesse. Uma imagem confocal exemplo da região colhidas e imunocoradas de músculo localizada directamente a jusante a partir da artéria ligado de uma semana após a ligadura é mostrado na Figura 2A. Arteríolas colaterais dilatadas contêm actina de músculo liso alfa-expressando células de músculo liso (vermelho) exibir tortuosidade característica após ligação. Tortuosidade do vaso, relatados como a razão entre o comprimento do navio e à distância via cabo (isto é, a linha que se estende ao longo dos pontos de extremidade do caminho mesmos vasos), no músculo ligado (à direita) é aumentada em relação ao músculo contralateral não ligada (Figura 2B, n = 8) . Figura 3 mostra os resultados de um estudo piloto no qual terminais de vasodilatação arteriolar funcional foi medida utilizando a microscopia intravital. Como esperado, di arteriolar<html> ameter aumenta significativamente após a contração muscular estimulação elétrica induzida. <img src="/files/ftp_upload/50218/50218fig1.jpg" alt="Figura 1" fo:content-width="4in" fo:src="/files/ftp_upload/50218/50218fig1highres.jpg"/> Figura 1. Campo cirúrgico do músculo spinotrapezius reflectida e da artéria de alimentação. A artéria de alimentação é ligada nos dois locais indicados por A0. Entre estas ligaduras e após obstrução de fluxo de sangue, a artéria é seccionado no local indicado por A. O segmento alvo das transições da artéria ventral da almofada gorda, descrito por C, no músculo spinotrapezius, descrito por D, no local indicado com seta de direção de fluxo B. é indicado pela seta tracejada E. ghres.jpg &quot;/&gt; Figura 2. Imagem confocal de spinotrapezius rede microvascular músculo para estudo piloto de tortuosidade. (A) colhida e muscular de todo montado foi reativa para o músculo liso alfa-actina e fotografada usando microscopia confocal. O campo de visão mostra a região do músculo localizado imediatamente a jusante do posto de ligação ligado arteríola 1 semana. Vasos tortuosos são evidentes no músculo, como resultado da ligação de (B) os resultados do estudo piloto mostra um aumento significativo (p = 0,035, 1 Student tailed t-test). Tortuosidade exibida pelos microvasos no músculo ligado medida pelo comprimento do vaso caminho proporção cordão distância para um teste de ratinhos C57BL / 6 (n = 8), em comparação com o controlo contralateral. <img src="/files/ftp_upload/50218/50218fig3.jpg" alt="Figura 3" fo:content-width="4.5in" fo:src="/files/ftp_upload/50218/50218fig3highres.jpg"/> Figure 3. Imagens de microscopia intravital de vasodilatação funcional em arteríolas spinotrapezius, in vivo. (A) fotomicrografias representativas de arteríolas terminais spinotrapezius em repouso (à esquerda) e imediatamente a seguir a cessação de 8 a contração muscular Hz (à direita). (B) Terminal diâmetro arteriolar em repouso ( 8,5 ± 0,5 m, à esquerda) e imediatamente após (11 ± 1 um, meio) 90 seg de contração muscular, o que aumentou significativamente o diâmetro arteriolar (p = 0,032; 1-tailed teste t pareado) em camundongos Balb / C (n = 6). Variação percentual indicado (à direita).

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Murine Spinotrapezius Model to Assess the Impact of Arteriolar Ligation on Microvascular Function and Remodeling

Nós demonstramos um modelo de ligadura arterial novel no músculo spinotrapezius murino, incluindo um procedimento passo-a-passo e uma descrição da instrumentação necessária. Descrevemos a cirurgia e avaliação dos resultados relevantes referentes à remodelação da rede vascular e vasodilatação funcional usando microscopia intravital e confocal.

Modelo Spinotrapezius murino para avaliar o impacto da ligadura arteriolar em função microvascular e Remodelação

The murine spinotrapezius is a thin, superficial skeletal support muscle that extends from T3 to L4, and is easily accessible via dorsal skin incision. ...

murine-spinotrapezius-model-to-assess-impact-arteriolar-ligation-on

Research

JoVE Journal

Medicine

12.0K visualizações.  University of Virginia. Nós demonstramos um modelo de ligadura arterial novel no músculo spinotrapezius murino, incluindo um procedimento passo-a-passo e uma descrição da instrumentação necessária. Descrevemos a cirurgia e avaliação dos resultados relevantes referentes à remodelação da rede vascular e vasodilatação funcional usando microscopia intravital e confocal.

Vídeo: Murine Spinotrapezius Model to Assess the Impact of Arteriolar Ligation on Microvascular Function and Remodeling

Coronary Artery Ligation and Intramyocardial Injection in a Murine Model of Infarction

Mouse models are a valuable tool for studying acute injury and chronic remodeling of the myocardium in vivo. With the advent of genetic modifications to the whole organism or the myocardium and an array of biological and/or synthetic materials, there is great potential for any combination of these to assuage the extent of acute ischemic injury and impede the onset of heart failure pursuant to myocardial remodeling. 
Here we present the methods and materials used to reliably perform this microsurgery and the modifications involved for temporary (with reperfusion) or permanent coronary artery occlusion studies as well as intramyocardial injections. The effects on the heart that can be seen during the procedure and at the termination of the experiment in addition to histological evaluation will verify efficacy. 
Briefly, surgical preparation involves anesthetizing the mice, removing the fur on the chest, and then disinfecting the surgical area. Intratracheal intubation is achieved by transesophageal illumination using a fiber optic light. The tubing is then connected to a ventilator. An incision made on the chest exposes the pectoral muscles which will be cut to view the ribs. For ischemia/reperfusion studies, a 1 cm piece of PE tubing placed over the heart is used to tie the ligature to so that occlusion/reperfusion can be customized. For intramyocardial injections, a Hamilton syringe with sterile 30gauge beveled needle is used. When the myocardial manipulations are complete, the rib cage, the pectoral muscles, and the skin are closed sequentially. Line block analgesia is effected by 0.25% marcaine in sterile saline which is applied to muscle layer prior to closure of the skin. The mice are given a subcutaneous injection of saline and placed in a warming chamber until they are sternally recumbent. They are then returned to the vivarium and housed under standard conditions until the time of tissue collection. At the time of sacrifice, the mice are anesthetized, the heart is arrested in diastole with KCl or BDM, rinsed with saline, and immersed in fixative. Subsequently, routine procedures for processing, embedding, sectioning, and histological staining are performed. 
Nonsurgical intubation of a mouse and the microsurgical manipulations described make this a technically challenging model to learn and achieve reproducibility. These procedures, combined with the difficulty in performing consistent manipulations of the ligature for timed occlusion(s) and reperfusion or intramyocardial injections, can also affect the survival rate so optimization and consistency are critical.

Numerous genetic manipulations and/or intramyocardial injections of genes, proteins, cells, and/or biomaterials are superimposed upon the dimension of time in studies of acute ischemia/ reperfusion injury and chronic remodeling in mice. This video illustrates the microsurgical procedures for ischemia/reperfusion, permanent coronary artery ligation, and intramyocardial injection studies.

Ligadura da artéria coronária e injeção intramiocárdica em um modelo murino de infarto

Mouse models are a valuable tool for studying acute injury and chronic remodeling of the myocardium in vivo.  With the advent of genetic modifications to ...

Medicina

Non-invasive Assessment of Microvascular and Endothelial Function

The authors have utilized capillaroscopy and forearm blood flow techniques to investigate the role of microvascular dysfunction in pathogenesis of cardiovascular disease. Capillaroscopy is a non-invasive, relatively inexpensive methodology for directly visualizing the microcirculation. Percent capillary recruitment is assessed by dividing the increase in capillary density induced by postocclusive reactive hyperemia (postocclusive reactive hyperemia capillary density minus baseline capillary density), by the maximal capillary density (observed during passive venous occlusion). Percent perfused capillaries represents the proportion of all capillaries present that are perfused (functionally active), and is calculated by dividing postocclusive reactive hyperemia capillary density by the maximal capillary density. Both percent capillary recruitment and percent perfused capillaries reflect the number of functional capillaries. The forearm blood flow (FBF) technique provides accepted non-invasive measures of endothelial function: The ratio FBFmax/FBFbase is computed as an estimate of vasodilation, by dividing the mean of the four FBFmax values by the mean of the four FBFbase values. Forearm vascular resistance at maximal vasodilation (FVRmax) is calculated as the mean arterial pressure (MAP) divided by FBFmax. Both the capillaroscopy and forearm techniques are readily acceptable to patients and can be learned quickly.
The microvascular and endothelial function measures obtained using the methodologies described in this paper may have future utility in clinical patient cardiovascular risk-reduction strategies. As we have published reports demonstrating that microvascular and endothelial dysfunction are found in initial stages of hypertension including prehypertension, microvascular and endothelial function measures may eventually aid in early identification, risk-stratification and prevention of end-stage vascular pathology, with its potentially fatal consequences.

Capillaroscopy is a non-invasive, relatively inexpensive methodology for directly visualizing the microcirculation. The forearm blood flow technique provides accepted non-invasive measures of endothelial function.

Avaliação não invasiva da função microvascular e endotelial

The authors have utilized capillaroscopy and forearm blood flow techniques to investigate the role of microvascular dysfunction in pathogenesis of ...

A Murine Model of Myocardial Ischemia-reperfusion Injury through Ligation of the Left Anterior Descending Artery

Acute or chronic myocardial infarction (MI) are cardiovascular events resulting in high morbidity and mortality. Establishing the pathological mechanisms at work during MI and developing effective therapeutic approaches requires methodology to reproducibly simulate the clinical incidence and reflect the pathophysiological changes associated with MI. Here, we describe a surgical method to induce MI in mouse models that can be used for short-term ischemia-reperfusion (I/R) injury as well as permanent ligation. The major advantage of this method is to facilitate location of the left anterior descending artery (LAD) to allow for accurate ligation of this artery to induce ischemia in the left ventricle of the mouse heart. Accurate positioning of the ligature on the LAD increases reproducibility of infarct size and thus produces more reliable results. Greater precision in placement of the ligature will improve the standard surgical approaches to simulate MI in mice, thus reducing the number of experimental animals necessary for statistically relevant studies and improving our understanding of the mechanisms producing cardiac dysfunction following MI. This mouse model of MI is also useful for the preclinical testing of treatments targeting myocardial damage following MI.

We introduce a surgical method to induce experimental ischemia/reperfusion (I/R) injury to simulate myocardial infarction (MI) in mouse models that allows for more clarity in positioning of the ligation on the left anterior descending artery (LAD) to increase the reproducibility of MI experiments in mice.

Um modelo murino de isquemia-reperfusão, através da ligadura da artéria Descendente Anterior Esquerda

Acute or chronic myocardial infarction (MI) are cardiovascular events resulting in high morbidity and mortality. Establishing the pathological mechanisms ...

A Rat Carotid Balloon Injury Model to Test Anti-vascular Remodeling Therapeutics

The rat carotid balloon injury is a well-established surgical model that has been used to study arterial remodeling and vascular cell proliferation. It is also a valuable model system to test, and to evaluate therapeutics and drugs that negate maladaptive remodeling in the vessel. The injury, or barotrauma, in the vessel lumen caused by an inflated balloon via an inserted catheter induces subsequent neointimal growth, often leading to hyperplasia or thickening of the vessel wall that narrows, or obstructs the lumen. The method described here is sufficiently sensitive, and the results can be obtained in relatively short time (2 weeks after the surgery). The efficacy of the drug or therapeutic against the induced-remodeling can be evaluated either by the post-mortem pathological and histomorphological analysis, or by ultrasound sonography in live animals. In addition, this model system has also been used to determine the therapeutic window or the time course of the administered drug. These studies can leadto the development of a better administrative strategy and a better therapeutic outcome. The procedure described here provides a tool for translational studies that bring drug and therapeutic candidates from bench research to clinical applications.

The rat carotid balloon injury model described below allows researchers to evaluate drugs or therapeutics that negate injury-induced arterial hyperplasia. Detailed pre-surgical preparation, surgical procedure, and post-surgical cares of the animal are described.

A Rat carótida Balão Injury modelo para testar Therapeutics remodela Anti-vasculares

The rat carotid balloon injury is a well-established surgical model that has been used to study arterial remodeling and vascular cell proliferation. It is ...

Murine Left Anterior Descending (LAD) Coronary Artery Ligation: An Improved and Simplified Model for Myocardial Infarction

Ischemic heart disease (IHD), or acute coronary syndrome (ACS), is one of the leading causes of death in the United States. IHD is characterized by reduced blood supply to the heart, resulting in the loss of oxygen to and the ensuing necrosis of the heart muscle. The MI model has gained popularity for its use as a short-term ischemia-reperfusion model and a long-term permanent ligation model. Below, we describe a reliable method for the permanent ligation of the LAD. With mouse genetic engineering technology becoming more advanced, and with an increasing availability of quality murine surgical instruments, the mouse has become a popular model for MI surgeries. Our surgical model incorporates the use of an easily reversible anesthetic for the rapid recovery of the mouse; a minimally invasive endotracheal intubation without involving a tracheotomy; and a thoracentesis through the original thoracotomy site without creating an additional incision in the chest, as is done in some other methods, to effectively remove excess blood and air from the chest cavity. This method is comparatively less invasive than other methods, which dramatically reduces surgical and post-surgical complications and mortality and improves reproducibility.

Murine Left Anterior Descending LAD Coronary Artery Ligation: An Improved and Simplified Model for Myocardial Infarction

We provide a reliable method for left anterior descending artery (LAD) ligation in a mouse model. This method is comparatively less invasive than other methods, involving endotracheal intubation, a left-sided thoracotomy approach, and thoracentesis. This method can be used as a model for both acute and chronic myocardial infarction (MI).

Murino Descendente Anterior Esquerda (LAD) ligação da artéria coronária: um modelo melhorado e simplificado para Infarto do Miocárdio

Ischemic heart disease (IHD), or acute coronary syndrome (ACS), is one of the leading causes of death in the United States. IHD is characterized by ...

Assessment of Human Adipose Tissue Microvascular Function Using Videomicroscopy

While obesity is closely linked to the development of metabolic and cardiovascular disease, little is known about mechanisms that govern these processes. It is hypothesized that pro-atherogenic mediators released from fat tissues particularly in association with central/visceral adiposity may promote pathogenic vascular changes locally and systemically, and the notion that cardiovascular disease may be the consequence of adipose tissue dysfunction continues to evolve. Here, we describe a unique method of videomicroscopy that involves analysis of vasodilator and vasoconstrictor responses of intact small human arterioles removed from the adipose depot of living human subjects. Videomicroscopy is used to examine functional properties of isolated microvessels in response to pharmacological or physiological stimuli using a pressured system that mimics in vivo conditions. The technique is a useful approach to gain understanding of the pathophysiology and molecular mechanisms that contribute to vascular dysfunction locally within the adipose tissue milieu. Moreover, abnormalities in the adipose tissue microvasculature have also been linked with systemic diseases. We applied this technique to examine depot-specific vascular responses in obese subjects. We assessed endothelium-dependent vasodilation to both increased flow and acetylcholine in adipose arterioles (50 - 350 &#181;m internal diameter, 2 - 3 mm in length) isolated from two different adipose depots during bariatric surgery from the same individual. We demonstrated that arterioles from visceral fat exhibit impaired endothelium-dependent vasodilation compared to vessels isolated from the subcutaneous depot. The findings suggest that the visceral microenvironment is associated with vascular endothelial dysfunction which may be relevant to clinical observation linking increased visceral adiposity to systemic disease mechanisms. The videomicroscopy technique can be used to examine vascular phenotypes from different fat depots as well as compare findings across individuals with different degrees of obesity and metabolic dysfunction. The method can also be used to examine vascular responses longitudinally in response to clinical interventions.

Videomicroscopy systems are used to examine functional properties of isolated adipose tissue arterioles in response to physiological and pharmacological stimuli. This technique can be used to examine microvascular phenotypes in different adipose tissue domains in obese humans.

Avaliação da função Microvascular de tecido adiposo humano usando tele-microscopia

While obesity is closely linked to the development of metabolic and cardiovascular disease, little is known about mechanisms that govern these processes. ...

Isometric Contractility Measurement of the Mouse Mesenteric Artery Using Wire Myography

The wire myograph technique is used to assess the contractility of vascular smooth muscles in response to depolarization, GPCR agonists/inhibitors and drugs. It is widely used in many studies on the physiological functions of vascular smooth muscle, the pathogenesis of vascular diseases such as hypertension, and the development of smooth muscle relaxant drugs. The mouse is a widely used model animal with a large pool of disease models and genetically modified strains. We introduced this method to measure the isometric contraction of mouse mesenteric artery in detail. A 1.4-mm segment of mouse mesenteric resistance artery was isolated and mounted on a myograph chamber by passing two steel wires through its lumen. After equilibration and normalization steps, the vessel segment was potentiated by a high-K+ solution twice prior to the contraction assay. As an example of the application of this method in drug development, we measured the relaxant effect of a novel natural substance, neoliensinine, isolated from a Chinese herb, embryos of the lotus seed (Nelumbo nucifera Gaertn.) on mouse mesenteric arteries. The vessel segments mounted on the myograph chamber were stimulated with a high-K+ solution. When the force tension reached a stable sustained phase, cumulative doses of neoliensinine were added to the chamber. We found that neoliensinine had a dose-dependent relaxant effect on smooth muscle contraction, thus suggesting that it bears potential activity against hypertension. In addition, as the vessel segment can survive at least 4 hours after mounting and maintain contractility induced by the high-K+ solution for many times, we suggest that the wire myograph system may be used for the time-consuming process of drug screening.

The wire myograph technique is used to investigate vascular smooth muscle functions and screen new drugs. We report a detailed protocol for measuring the isometric contractility of the mouse mesenteric artery and for screening new relaxants of vascular smooth muscle.

Medição de contratilidade isométrica da artéria mesentérica Mouse usando fio miografia

The wire myograph technique is used to assess the contractility of vascular smooth muscles in response to depolarization, GPCR agonists/inhibitors and ...

Murine Myocardial Infarction Model using Permanent Ligation of Left Anterior Descending Coronary Artery

Myocardial infarction (MI) and acute coronary diseases are among the most prominent causes of death in population with western lifestyle. The murine models of MI with permanent ligation of left-anterior descending (LAD) coronary artery closely mimics MI in humans. Murine models benefit from the extensive genetic engineering available nowadays. Here we propose a reproducible murine surgical model of myocardial infarction by permanent LAD coronary ligation. Our technique comprises anesthesia with ketamine/xylazine that can be rapidly reversed by administration of an antagonist, intubation without tracheotomy for mechanical-assisted ventilation, ventilation with application of extrinsic positive end-expiratory pressure (PEEP) to avoid alveolar collapse, a thoracotomy method limiting to the minimum surgical lesions made to skeletal muscles, and lung inflation without thoracentesis. This method is sparsely invasive, reproducible and reduces post-surgery mortality and complications.

Herein we describe a surgical procedure showing how to achieve permanent ligation of the left-anterior descending coronary artery in mice. This model is of high relevance to investigate the pathophysiology of myocardial infarction and the concomitant biological processes.

Modelo de infarto do miocárdio murino usando ligadura permanente da artéria coronária descendente anterior esquerda

Myocardial infarction (MI) and acute coronary diseases are among the most prominent causes of death in population with western lifestyle. The murine ...

A Non-Invasive Method for Generating the Cyclic Loading-Induced Intra-Articular Cartilage Lesion Model of the Rat Knee

The pathophysiology of primary osteoarthritis (OA) remains unclear. However, a specific subclassification of OA in relatively younger age groups is likely correlated with a history of articular cartilage damage and ligament avulsion. Surgical animal models of OA of the knee play an important role in understanding the onset and progression of post-traumatic OA and aid in the development of novel therapies for this disease. However, non-surgical models have been recently considered to avoid traumatic inflammation that could affect the evaluation of the intervention. 
In this study, an intra-articular cartilage lesion rat model induced by in vivo cyclic compressive loading was developed, which allowed researchers to (1) determine the optimal magnitude, speed, and duration of load that could cause focal cartilage damage; (2) assess post-traumatic spatiotemporal pathological changes in chondrocyte vitality; and (3) evaluate the histological expression of destructive or protective molecules that are involved in the adaptation and repair mechanisms against joint compressive loads. This report describes the experimental protocol for this novel cartilage lesion in a rat model.

Here, we present the cyclic loading-induced intra-articular cartilage lesion model of the rat knee, generated by 60 cyclic compressions over 20 N, resulting in damage to the femoral condylar cartilage in rats.

Um Método Não Invasivo para Gerar o Modelo de Lesão da Cartilagem Intra-Articular Induzida por Carga Cíclica do Joelho de Rato

The pathophysiology of primary osteoarthritis (OA) remains unclear. However, a specific subclassification of OA in relatively younger age groups is likely ...

Left Coronary Artery Ligation: A Surgical Murine Model of Myocardial Infarction

Ischemic heart disease and subsequent myocardial infarction (MI) is one of the leading causes of mortality in the United States and around the world. In order to explore the pathophysiological changes after myocardial infarction and design future treatments, research models of MI are required. Permanent ligation of the left coronary artery (LCA) in mice is a popular model to investigate cardiac function and ventricular remodeling post MI. Here we describe a less invasive, reliable, and reproducible surgical murine MI model by permanent ligation of the LCA. Our surgical model comprises of an easily reversible general anesthesia, endotracheal intubation that does not require a tracheotomy, and a thoracotomy. Electrocardiography and troponin measurement should be performed to ensure MI. Echocardiography at day 28 after MI will discern heart function and heart failure parameters. The degree of cardiac fibrosis can be evaluated by Masson's trichrome staining and cardiac MRI. This MI model is useful for studying the pathophysiological and immunological alterations after MI.

Presented here is a surgical procedure for permanent ligation of the left coronary artery in mice. This model can be used to investigate the pathophysiology and associated inflammatory response after myocardial infarction.

Laqueadura da Artéria Coronária Esquerda: Um Modelo Murino Cirúrgico de Infarto do Miocárdio

Ischemic heart disease and subsequent myocardial infarction (MI) is one of the leading causes of mortality in the United States and around the world. In ...