ZHP was supported by the Marie-Curie project: NephroTools.

experimentos necessários para desenvolver o protocolo foram realizados de acordo com os regulamentos nacionais e foram aprovados pelo comitê de ciência ética local (Regierungspräsidium Karlsruhe). 1. Preparação da solução de injecção de FITC-sinistrin <ol><li> Dissolve-FITC sinistrin em solução salina fisiológica para preparar uma solução de reserva. A dose recomendada em murganhos é de 7,5 mg / 100 g de peso corporal (BW), enquanto que em ratos 5 mg / 100 g BW-FITC sinistrin é preferível. Para ratinhos, preparar uma solução de uma solução de estoque de FITC-sinistrin a 15 mg / ml, enquanto que para os ratos preparar a uma concentração de 40 mg / ml. Nota: solução de FITC-sinistrin pode ser preparado antecipadamente e guardado a -20 ° C ao abrigo da luz. </li></ol> 2. Preparação de animais <ol><li> Aclimatar os animais durante pelo menos uma semana antes da sua introdução em qualquer experiência. </li><li> Anestesiar o animal utilizando 5% de isoflurano em 5 L / min de O2 </sub&gt; Fluir por 2 min. </li><li> Confirmar que o animal está devidamente anestesiados por observar a sua respiração, o que torna-se mais lenta e profunda, e verificar a ausência de resposta com a falta de uma resposta dedo do pé. </li><li> Uma vez que o animal está adormecido, reduzir a anestesia para 2,5% de isoflurano em O taxa de entrega de 2 L / min 2 e tomar o BW. </li><li> Remover a pele do flanco da parte de trás do animal utilizando uma máquina de barbear eléctrica. Raspar uma área ligeiramente maior do que a área que irá ser ocupada pelo pedaço de material adesivo de dupla face, que tem dimensões de 3 cm x 6 cm. </li><li> Posteriormente aplica o creme de depilação por um curto período (2-3 min) para remover a pele restante. </li><li> Lave bem a área até que o creme foi completamente removido, como o próprio creme pode ser fluorescente. Nota: Evite coçar a pele do animal, pois ele pode produzir irritação / edema. Se a área depilada mostra pigmentação na pele, raspar uma área maior, até um ponto não pigmentado para oparte óptica do aparelho é encontrado. Recomenda-se fazer a barba 24 horas de antecedência para minimizar a exposição a anestesia. </li></ol> 3. Dispositivo de preparação <ol><li> Colocar o dispositivo óptico para medir a função renal em um lado do pedaço de material adesivo de dupla face, o posicionamento da parte óptica acima da janela transparente (Figura 1), deixando a parte oposta com a película de protecção. Nota: Quando se trabalha com pequenos roedores, reduzir o tamanho do penso, como mostrado na Figura 2. </li><li> Anexar um pedaço de emplastro adesivo de dupla face de tamanho correspondente para a bateria, como mostrado na Figura 3. </li></ol> 4. Fixação do dispositivo no animal <ol><li> Calcular o volume adequado de injecção com base no peso corporal do animal. </li><li> Anestesiar os animais com isoflurano como anteriormente indicado em secções 2.1-2.3. </li><li> Corte um pedaço de gaze tubular elástica atadura of cerca de 1 cm mais longo do que a largura do pedaço de material adesivo de dupla face para ser utilizado. </li><li> Puxe a atadura de gaze elástica sobre a cabeça do animal e do lugar em suas costas, deixando a área raspada descoberto. Nota: Como alternativa, fixar o dispositivo usando apenas fita adesiva, mas esteja ciente de pressão indevida sobre o dispositivo. </li><li> Ligar a bateria para o dispositivo, ligando o conector da bateria para a porta correspondente no dispositivo. Depois disso remover a folha de protecção da parte de remendo e montagem da bateria sobre a superfície superior do dispositivo (Figura 4A). Certifique-se de que a bateria está devidamente ligado ao verificar que o dispositivo começa a piscar. Nota: Em ratos, a bateria pode ser também ligado directamente sobre o pedaço de material adesivo, ao lado do dispositivo (Figura 4B). </li><li> Remover a tampa de protecção a partir do emplastro com o dispositivo de operação e colocá-lo na área rapada no dorso do animal, segurando-s bordas até que seja correctamente fixa. </li><li> Cobrir o dispositivo com a atadura de gaze tubular elástica aderindo-o à superfície adesiva do penso (Figura 5). </li><li> Corretamente esticar a atadura tubular no abdômen do animal, garantindo que os membros podem circular livremente. </li><li> Para uma melhor fixação e a protecção do dispositivo, aplicar uma tira de fita adesiva da seguinte forma do dispositivo e que cobrem os fios da bateria. </li><li> Meça fundo para 1 a 3 min, sem colocar pressão sobre o dispositivo </li></ol> Administração 5. FITC-sinistrin e Procedimentos de Medição <ol><li> Se necessário, aquecer-se a cauda do animal, por meio de água quente antes de injecção ou uma placa de aquecimento com controlo de temperatura ao longo de todo o procedimento. </li><li> Injectar através da veia da cauda do volume apropriado de solução de FITC-sinistrin. O volume de injecção depende BW animais e, por conseguinte, deve ser calculado para cada contras individuaisidering a dose desejada e concentração da solução de reserva, acima mencionado na secção 1.1. </li><li> Assegure-se que toda a solução de FITC-sinistrin é administrado por via intravenosa e não por via subcutânea. Nota: Em alternativa, FITC-sinistrin pode ser administrada através de um cateter intravenosa pré-implantados saiu na nuca do pescoço em roedores ou por injecção retro-orbital em murganhos. </li><li> Cuidadosamente, devolver o animal para sua gaiola evitando movimentos fortes e qualquer pressão sobre o dispositivo, uma vez que iria introduzir artefatos de movimento. </li><li> Coloque a gaiola em um lugar calmo para evitar que o animal é perturbado. </li><li> Realizar a medição durante pelo menos 1 hr se trabalhar com camundongos e 2 horas quando se utiliza ratos. Durante esse período, o dispositivo óptico irá medir através da pele a fluorescência emitida por FITC-sinistrin. Nota: Durante o período de gravação do animal deve ser hospedado sozinho. Além disso, o abastecimento de água, bem como salienteestruturas como as tampas de arame, deve ser removido para evitar danos do aparelho e do movimento artefatos eletrônicos devido aos impactos com objetos. </li></ol> Remoção 6. Dispositivo <ol><li> Uma vez que o período de gravação é longo, remover o dispositivo sem anestesia; No entanto, se necessário, anestesiar o animal brevemente sob 5% de isoflurano em taxa de libertação de 5 L / min de O2 durante 2 min. </li><li> Cuidadosamente, retirar a fita adesiva em primeiro lugar, em seguida, a bandagem tubular. </li><li> Gentilmente desprender o adesivo dupla face adesiva da pele e devolver o animal à sua gaiola normal. </li></ol> 7. Leia fora de Dados <ol><li> Desligue a bateria do aparelho e remover o adesivo. Nota: Os dados são armazenados no dispositivo até que um novo começa a medição. Quando a bateria está ligada aos dados armazenados são substituídos com as novas gravações. Portanto, não volte a ligar a bateria antes de baixar os dados dodispositivo. Há um período de carência de 10 seg destinado a reconexão acidental da bateria. </li><li> Conecte o dispositivo a um PC usando um cabo USB micro e baixar os dados usando o software fornecido. O arquivo de saída é um arquivo .csv que pode ser aberto e modificado com um programa de planilha. </li><li> Abra o ficheiro de dados com o software específico para o dispositivo óptico e gerar a curva cinética de eliminação, utilizando os protocolos de software. </li><li> Analisar a curva, seguindo as instruções fornecidas com o dispositivo óptico. Logo, para a avaliação dos dados, definir o sinal de fundo medido administração FITC-sinistrin antes e marca o início da fase de excreção exponencial do marcador, o que geralmente ocorre 15 min e 45 min após a injecção de bólus, em ratinhos e ratos, respectivamente, . Nota: O software irá exibir automaticamente a meia-vida de FITC-sinistrin (t 1/2), juntamente com um valor de R 2, determinada por um 1-Comparmodelo tamento. t 1/2 pode ser utilizado para calcular a taxa de filtração glomerular, utilizando um factor de conversão 9,10. </li></ol>

<ol>
	<li>Stevens, L. A., Levey, A. S. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Measured+GFR+as+a+confirmatory+test+for+estimated+GFR.">Measured GFR as a confirmatory test for estimated GFR.</a> J Am Soc Nephrol. 20, 2305-2313 (2009).</li><li>Katayama, R., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Calculation+of+glomerular+filtration+rate+in+conscious+rats+by+the+use+of+a+bolus+injection+of+iodixanol+and+a+single+blood+sample.">Calculation of glomerular filtration rate in conscious rats by the use of a bolus injection of iodixanol and a single blood sample.</a> J Pharmacol Toxicol Methods. 61, 59-64 (2010).</li><li>Reinhardt, C. P., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Functional+immunoassay+technology+(FIT),+a+new+approach+for+measuring+physiological+functions:+application+of+FIT+to+measure+glomerular+filtration+rate+(GFR).">Functional immunoassay technology (FIT), a new approach for measuring physiological functions: application of FIT to measure glomerular filtration rate (GFR).</a> Am J Physiol Renal Physiol. 295, F1583-F1588 (2008).</li><li>Rieg, T. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=A+high-throughput+method+for+measurement+of+glomerular+filtration+rate+in+conscious+mice.">A high-throughput method for measurement of glomerular filtration rate in conscious mice.</a> J Vis Exp. , e50330 (2013).</li><li>Yu, W., Sandoval, R. M., Molitoris, B. A. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Rapid+determination+of+renal+filtration+function+using+an+optical+ratiometric+imaging+approach.">Rapid determination of renal filtration function using an optical ratiometric imaging approach.</a> Am J Physiol Renal Physiol. 292, F1873-F1880 (2007).</li><li>Wang, E., Sandoval, R. M., Campos, S. B., Molitoris, B. A. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Rapid+diagnosis+and+quantification+of+acute+kidney+injury+using+fluorescent+ratio-metric+determination+of+glomerular+filtration+rate+in+the+rat.">Rapid diagnosis and quantification of acute kidney injury using fluorescent ratio-metric determination of glomerular filtration rate in the rat.</a> Am J Physiol Renal Physiol. 299, F1048-F1055 (2010).</li><li>Colson, P., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Does+choice+of+the+anesthetic+influence+renal+function+during+infrarenal+aortic+surgery?.">Does choice of the anesthetic influence renal function during infrarenal aortic surgery?.</a> Anesth Analg. 74, 481-485 (1992).</li><li>Fusellier, M., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Influence+of+three+anesthetic+protocols+on+glomerular+filtration+rate+in+dogs.">Influence of three anesthetic protocols on glomerular filtration rate in dogs.</a> Am J Vet Res. 68, 807-811 (2007).</li><li>Schreiber, A., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Transcutaneous+measurement+of+renal+function+in+conscious+mice.">Transcutaneous measurement of renal function in conscious mice.</a> Am J Physiol Renal Physiol. 303, F783-F788 (2012).</li><li>Schock-Kusch, D., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Transcutaneous+measurement+of+glomerular+filtration+rate+using+FITC-sinistrin+in+rats.">Transcutaneous measurement of glomerular filtration rate using FITC-sinistrin in rats.</a> Nephrol Dial Transplant. 24, 2997-3001 (2009).</li><li>Schock-Kusch, D., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Transcutaneous+assessment+of+renal+function+in+conscious+rats+with+a+device+for+measuring+FITC-sinistrin+disappearance+curves.">Transcutaneous assessment of renal function in conscious rats with a device for measuring FITC-sinistrin disappearance curves.</a> Kidney Int. 79, 1254-1258 (2011).</li><li>Steinbach, S., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=A+pilot+study+to+assess+the+feasibility+of+transcutaneous+glomerular+filtration+rate+measurement+using+fluorescence-labelled+sinistrin+in+dogs+and+cats.">A pilot study to assess the feasibility of transcutaneous glomerular filtration rate measurement using fluorescence-labelled sinistrin in dogs and cats.</a> PLoS One. 9, e111734 (2014).</li><li>Schock-Kusch, D., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Reliability+of+transcutaneous+measurement+of+renal+function+in+various+strains+of+conscious+mice.">Reliability of transcutaneous measurement of renal function in various strains of conscious mice.</a> PLoS One. 8, e71519 (2013).</li><li>Cowley, A. W., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Progression+of+glomerular+filtration+rate+reduction+determined+in+conscious+Dahl+salt-sensitive+hypertensive+rats.">Progression of glomerular filtration rate reduction determined in conscious Dahl salt-sensitive hypertensive rats.</a> Hypertension. 62, 85-90 (2013).</li><li>Giani, J. F., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Renal+angiotensin-converting+enzyme+is+essential+for+the+hypertension+induced+by+nitric+oxide+synthesis+inhibition.">Renal angiotensin-converting enzyme is essential for the hypertension induced by nitric oxide synthesis inhibition.</a> J Am Soc Nephrol. 25, 2752-2763 (2014).</li><li>Sadick, M., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Two+non-invasive+GFR-estimation+methods+in+rat+models+of+polycystic+kidney+disease:+3.0+Tesla+dynamic+contrast-enhanced+MRI+and+optical+imaging.">Two non-invasive GFR-estimation methods in rat models of polycystic kidney disease: 3.0 Tesla dynamic contrast-enhanced MRI and optical imaging.</a> Nephrol Dial Transplant. 26, 3101-3108 (2011).</li><li>Trudu, M., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Common+noncoding+UMOD+gene+variants+induce+salt-sensitive+hypertension+and+kidney+damage+by+increasing+uromodulin+expression.">Common noncoding UMOD gene variants induce salt-sensitive hypertension and kidney damage by increasing uromodulin expression.</a> Nat Med. 19, 1655-1660 (2013).</li><li>Zollner, F. G., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Simultaneous+measurement+of+kidney+function+by+dynamic+contrast+enhanced+MRI+and+FITC-sinistrin+clearance+in+rats+at+3+tesla:+initial+results.">Simultaneous measurement of kidney function by dynamic contrast enhanced MRI and FITC-sinistrin clearance in rats at 3 tesla: initial results.</a> PLoS One. 8, e79992 (2013).</li></ol>

NG detém uma patente sobre a produção de FITC-sinistrin.

O presente artigo descreve o procedimento para determinar a função renal em roedores conscientes utilizando um dispositivo miniaturizado ea exógena marcador renal FITC-sinistrin. Como afirmado anteriormente, este método tem várias vantagens em comparação com os processos tradicionais de depuração na urina e no plasma. Um deles é a independência em relação a amostragem de sangue e urina, que conduz a uma grande economia em termos de consumo, o tempo e, evidentemente, o stress dos animais. Como mostrado na Tabela 2, o marcador exógeno renal FITC-sinistrin e a medição da sua cinética de eliminação através da pele permitir que o impacto de patologias renais sobre a função renal a ser estudado 9,10,14-18. A recolha de amostras de sangue em série dos necessários para avaliar a depuração plasmática ou biomarcadores de doença renal são stressante para o animal, pesado e para os investigadores demorado. Portanto, as medidas sequenciais dentro do mesmo animal ter sido limbida pelo bem-estar dos animais e razões metodológicas. A reprodutibilidade intra-provou animais da medição transcutânea 13 faz com que seja um método ideal para a detecção de alterações na função renal devido à progressão da doença ou envelhecimento. Pela mesma razão, também pode ser extremamente útil para estudar a eficácia de abordagens terapêuticas. Dois passos críticos para uma aplicação bem sucedida desta tecnologia são a fixação do dispositivo óptico no animal e a correta administração do marcador. O dispositivo deve ser fixado de forma adequada para evitar artefatos de movimento. Para esse efeito, impedindo a ligação e separação do pedaço de material adesivo de dupla face é crucial, pois pode levar à perda das suas propriedades adesivas e, finalmente, uma fixação inadequada no animal. Como mencionado no protocolo, a imobilização e proteção do dispositivo óptico, cobrindo-o com fita adesiva é uma abordagem eficaz para garantir uma adequate fixação. Ao realizar a injecção bolus FITC-sinistrin é crucial para administrar toda a substância por via intravenosa e não por via subcutânea. A liberação do marcador no tecido subcutâneo pode ser facilmente identificado por um anel amarelo circulando a cauda do animal produzido pela própria cor do FITC-sinistrin. A injecção subcutânea normalmente se manifesta como uma curva mais plana e hora marcador excreção prolongada. A possível limitação deste método está mais relacionado com o marcador usado do que com a tecnologia por si só. Quando um edema está presente na pele de um animal, a avaliação da função renal transcutânea não seria recomendada, como existe um compartimento adicional que pode alterar a dinâmica de excreção de FITC-sinistrin. Da mesma forma, a pele pigmentada pode limitar o uso da técnica, devido à sobreposição de excitação e de emissão de espectros de FITC-sinistrin e melanina. No entanto, em animais com pigmentação da pele em manchas, o problema é resolvido através da colocação da ópticaparte do dispositivo em uma área não pigmentado. É possível modificar os diferentes aspectos da avaliação transcutânea da função renal, a fim de adaptar o procedimento a espécie e / ou abordagens diferentes animais. Por exemplo, a dosagem recomendada de FITC-sinistrin ou o comprimento da medição pode ser ajustado dependendo do objectivo do ensaio, bem como para diferentes espécies ou modelos animais. Esta adaptação do método já foi confirmado pela sua aplicação com sucesso em diferentes espécies de roedores e vários tipos de estirpes com problemas de saúde variados. Além disso, a avaliação transcutânea da função renal foi recentemente validado em cães e gatos 12, com excelentes resultados. Devido às diferenças entre estes animais indubitáveis ​​e roedores, este estudo determinou-se a dose apropriada do FITC-sinistrin para ambos, cães e gatos, e é realizada uma medição de tempo muito mais longo, em vez de 4 horas ou 1 ou 2 horas de usod em roedores. Tomados em conjunto, a utilização desta técnica pode ajudar a obter insights mais precisos em nefrologia, incluindo uma melhor compreensão da progressão da doença renal e o efeito de terapias. As características da avaliação da função renal transcutânea coloca-lo como uma técnica adequada para ser aplicada em campos clínicos humanos e veterinários no futuro, e deve ser considerado como uma tecnologia promissora para substituir as abordagens tradicionais.

taxa de filtração glomerular (TFG) é o melhor parâmetro para avaliar a função renal global. O padrão de ouro para determinar a GFR se baseia na depuração do plasma ou urina dos marcadores renais exógenos, tais como inulina 1. No entanto, estes procedimentos são demorados e complicados, exigindo a recolha de sangue em série e / ou amostras de urina e posteriores ensaios laboratoriais para a sua análise. Além disso, estes métodos são invasivos e stressante para os animais, o que limita o número de vezes e de frequência em que as medições podem ser utilizadas. Um número de abordagens alternativas têm sido desenvolvidas para simplificar os procedimentos clássicos para determinar GFR, mas eles ainda dependem de urina e plasma de amostragem 2-4 e / ou requerem anestesia profunda 5,6, que é conhecido por influenciar a hemodinâmica e função renais 7, 8. Produtos finais do metabolismo, tais como creatinina, também são amplamente utilizados para estimar a função renal. No entanto, sabe-se que o accurACY destes marcadores endógenos não é óptima e, por outro lado, a analisá-los, a urina ou a amostragem de sangue, também é indispensável. Aqui nós descrevemos uma metodologia transcutânea para avaliar a função renal em animais conscientes. Este método é mais simples e mais rápido do que os métodos tradicionais, bem como apenas minimamente invasiva. Com esta técnica, usando um dispositivo óptico miniaturizado e o -sinistrin exógeno renal marcador de isotiocianato de fluoresceína (FITC), é possível determinar a função renal quase em tempo real sem a necessidade de plasma ou amostras de urina e sem cateterização cirúrgico para a administração da substância. Devido a estas características, o método é adequado para realizar medições sequenciais no mesmo animal. FITC-sinistrin é um marcador renal filtrado livremente pelos glomérulos, sem reabsorção tubular ou secreção. A parte óptica do dispositivo miniaturizado consiste em dois diodos emissores de luz (LEDs), que excitamo marcador administrado e um fotodíodo para detectar a fluorescência emitida através da pele. Os dados gravados são armazenados na memória interna integrada no dispositivo e que pode ser usado para gerar a curva cinética de eliminação de FITC-sinistrin. A energia é fornecida por uma pequena bateria de lítio recarregável. Para obter informações mais detalhadas sobre o dispositivo e seus componentes individuais referem-se a Schreiber et al. 9. O dispositivo é facilmente montado sobre o corpo do animal utilizando um emplastro de dupla face adesiva levando uma janela transparente para os componentes ópticos. Os resultados estão disponíveis após o período de gravação é longo. Com o método e o protocolo fornecido aqui, introduzimos uma tecnologia promissora, que pode substituir o padrão de ouro para determinar TFG actual, não só na pesquisa mas também no campo clínico.

<table border="0" cellpadding="0" cellspacing="0" width="930">
	<tbody>
		<tr height="63">
			<td height="63" style="height:63px;width:216px;">NIC-Kidney device</td>
			<td style="width:163px;">Mannheim Pharma &#38; Diagnostics GmbH</td>
			<td style="width:119px;"></td>
			<td style="width:433px;">Software, batteries and chargers are provided together with the device/s. Orderings should be done through info@mapdiagnostics.com</td>
		</tr>
		<tr height="42">
			<td height="42" style="height:42px;width:216px;">FITC-sinistrin</td>
			<td style="width:163px;">Mannheim Pharma &#38; Diagnostics GmbH</td>
			<td style="width:119px;"></td>
			<td style="width:433px;">Orderings should be done through info@mapdiagnostics.com</td>
		</tr>
		<tr height="42">
			<td height="42" style="height:42px;width:216px;">Double-sided adhesive patch</td>
			<td style="width:163px;">Mannheim Pharma &#38; Diagnostics GmbH</td>
			<td style="width:119px;"></td>
			<td style="width:433px;">Orderings should be done through info@mapdiagnostics.com</td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;width:216px;">Isis Rodent electric shaver</td>
			<td>Braun Aesculap&#160;</td>
			<td>GT420</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;width:216px;">Isoflurane</td>
			<td>Abbott GmbH&#160;</td>
			<td style="width:119px;">PZN4831850</td>
			<td style="width:433px;"></td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;width:216px;">Leukosilk adhesive tape</td>
			<td style="width:163px;">BSN medical</td>
			<td>102200</td>
			<td style="width:433px;"></td>
		</tr>
		<tr height="42">
			<td height="42" style="height:42px;">Tubular elastic gauze bandage&#160;</td>
			<td>MaiMed Medical GmbH</td>
			<td style="width:119px;">73012</td>
			<td style="width:433px;">There are different sizes available. Size 1 is recommended for mice.</td>
		</tr>
		<tr height="42">
			<td height="42" style="height:42px;width:216px;">Veet depilation cream</td>
			<td>Reckitt Benckiser</td>
			<td style="width:119px;">PZN7768307</td>
			<td style="width:433px;">Sensitive skin formulation is recommended as is more gentle with the skin of the animals</td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;width:216px;">Micro USB cable</td>
			<td style="width:163px;">Samsung</td>
			<td style="width:119px;">APCBU10BBE</td>
			<td style="width:433px;"></td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;width:216px;">Deltajonin Physiologic solution</td>
			<td>AlleMan Pharma GmbH</td>
			<td style="width:119px;">3366954</td>
			<td style="width:433px;">Alternatively, it can be used saline or PBS&#160;</td>
		</tr>
	</tbody>
</table>

transcutaneous assessment of renal function in conscious rodents

Glomerular filtration rate (GFR) is the gold standard to assess overall kidney function. However, traditional methods to evaluate GFR are cumbersome and time-consuming. In addition, serial blood or urine samples are required, with the associated stress for the experimental animals. A recent technique significantly reduces the investment in time and resources, minimizing the invasiveness and the animal stress, but being equally valid as the traditional approaches. The method measures transcutaneously renal function. Using an optical device and the exogenous renal marker fluorescein isothiocyanate (FITC)-sinistrin, this technique is capable of measuring the elimination kinetics of the marker through the skin. With neither blood nor urine samples nor the associated laboratory assays needed, the results of the transcutaneous measurement are almost instantaneously available. The method has been already validated in different species and successfully applied in several models of renal pathology. Moreover, due to its minimally invasive characteristics, it is suitable for sequential measurements within the same animal. Here is provided a detailed protocol to carry out the transcutaneous assessment of renal function in rodents.

A configuração da medição transcutânea é muito simples e rápida: o dispositivo é colocado sobre o pedaço de material adesivo de dupla face (Figura 1) e ajustada em tamanho, se necessário (figura 2), a bateria é preparado (Figura 3) e ligado (Figura 4). Este método para avaliar a função renal já foi validado em diferentes espécies, em comparação com a abordagem tradicional da depuração plasmática 9,11,12. Seguindo o protocolo exposto aqui, Schreiber et ai. demonstraram a validade da técnica em diferentes modelos de ratos, que mostra resultados altamente comparável entre a medição e o plasma passe transcutânea para todos os grupos estudados (Tabela 1) 9. Neste trabalho a obtida t 1/2 foi convertido para GFR usando um mouse de conversão semi-empírica específicafator. A consistência da avaliação transcutânea da função renal também é provada usando diferentes cepas de camundongos. Medidas sequenciais dentro de 3 dias no mesmo animal, mostrou um coeficiente de variâncias de 3,0-6,2% 13. Neste estudo, não houve conversão ao TFG, mas os resultados foram expressos e interpretados diretamente em termos de t 1/2. A possibilidade de ter os resultados quase em tempo real é uma das grandes vantagens deste método. Após o período de gravação, os resultados estão imediatamente disponíveis para a análise e o software fornecido mostra a curva de excreção de FITC-sinistrin instantaneamente (Figura 6). Dentro do mesmo software a t 1/2 de FITC-sinistrin pode ser obtido, o qual pode ser utilizado directamente como o parâmetro para avaliar a função renal do convertida em termos de taxa de filtração glomerular. Figura 7 </strong&gt; mostra como ele olha a curva de excreção FITC-sinistrin medida transcutânea em um animal com insuficiência renal. Quando a função renal é afetada, FITC-sinistrin t 1/2 aumenta devido à excreção reduzida da substância e a aparência da curva muda. Normalmente, a curva medida não voltar para o nível de fundo e apresenta uma área aumentada sob a curva. No mesmo animal, as medições de pré para pós-lesão pode experimentar um aumento na intensidade de fluorescência máxima devido à acumulação do marcador causada por sua excreção reduzida. Na presença de insuficiência renal, a curva medida por via transcutea de FITC-sinistrin pode mostrar um estado estacionário, devido à função severamente prejudicada (Figura 7B). A utilização do dispositivo miniaturizado em diversas estirpes de roedores com diferente estado de saúde tem mostrado que esta técnica é adequada e suficientemente sensível para detectar alterações due a doença renal e ao envelhecimento. A Tabela 2 mostra um resumo dos modelos murinos estudados até à data com este método. <img alt="figura 1" src="/files/ftp_upload/53767/53767fig1.jpg" /> Figura 1. A colocação do dispositivo sobre o pedaço de material adesivo de dupla face. O dispositivo é montado sobre o pedaço de material adesivo de posicionamento sua parte óptico na janela transparente. <img alt="Figura 2" src="/files/ftp_upload/53767/53767fig2.jpg" /> Figura 2. Adaptação do pedaço de material adesivo de pequeno porte roedores. Para uso em pequenos animais, recomenda-se reduzir o tamanho do emplastro. A: usar o dispositivo como um guia para cortar o emplastro adequadamente. B: Uma vez que o tamanho desejado tenha sido obtido, o dispositivo pode ser colocado sobre a superfície adesiva do sistema. <a href="https://www.jove.com/files/ftp_upload/53767/53767fig2large.jpg" target="_blank">P</a>locação clique aqui para ver uma versão maior desta figura. <img alt="Figura 3" src="/files/ftp_upload/53767/53767fig3.jpg" /> Figura 3. Preparação da bateria. Para fixar a bateria ao dispositivo, cortar um pequeno pedaço de adesivo dupla face adesiva (A e B) e coloque-o sobre a superfície da bateria (C). <a href="https://www.jove.com/files/ftp_upload/53767/53767fig3large.jpg" target="_blank">Por favor clique aqui para ver uma versão maior desta figura.</a> <img alt="Figura 4" src="/files/ftp_upload/53767/53767fig4.jpg" /> Figura 4. Ligação e colocação da bateria durante a medição. (A) em pequenas roedores tais como ratinhos, devido ao espaço reduzido, a bateria deve ser colocado na parte superior do dispositivo. (B) Em animais maiores a bateria cum ser colocado ao lado do dispositivo. <a href="https://www.jove.com/files/ftp_upload/53767/53767fig4large.jpg" target="_blank">Por favor clique aqui para ver uma versão maior desta figura.</a> <img alt="Figura 5" src="/files/ftp_upload/53767/53767fig5.jpg" /> Figura 5. Colocação da atadura de gaze elástica tubular em um rato. A bandagem tubular deve cobrir o adesivo dupla face adesiva, sem interferir com a livre circulação dos membros para o conforto do animal. <a href="https://www.jove.com/files/ftp_upload/53767/53767fig5large.jpg" target="_blank">Por favor clique aqui para ver uma versão maior esta figura.</a> <img alt="Figura 6" src="/files/ftp_upload/53767/53767fig6.jpg" /> Figura 6. imagem representativo de uma curva de eliminação do FITC-sinistrin. O sinal gerado por FITC-sinistrin é detectado transcuneamente e armazenados na memória interna do dispositivo. Quando os dados registados são descarregados para um PC, o software gera uma curva comparável ao apresentado na imagem. Eixo Y mostra a intensidade de fluorescência registrados [AU], emitida pelo marcador FITC-sinistrin injetado, enquanto eixo X representa a duração da medição em tempo [min]. <a href="https://www.jove.com/files/ftp_upload/53767/53767fig6large.jpg" target="_blank">Por favor clique aqui para ver uma versão maior desta figura.</a> <img alt="Figura 7" src="/files/ftp_upload/53767/53767fig7.jpg" /> Figura 7. imagem representativo de uma curva de eliminação do FITC-sinistrin em animais com insuficiência renal. (A) curva de eliminação de FITC-sinistrin em animais com uma função renal reduzida tipicamente mostra um aumento da área sob a curva e a incapacidade para atingir a linha de base dentro do período normal de medição<html> . (B) Em animais gravemente prejudicada a curva transcutânea medida pode mostrar um estado estacionário que indica insuficiência renal. <a href="https://www.jove.com/files/ftp_upload/53767/53767fig7large.jpg" target="_blank">Por favor clique aqui para ver uma versão maior desta figura.</a> <img alt="tabela 1" src="/files/ftp_upload/53767/53767table1.jpg" /> Tabela 1. Validação da medida transcutânea, comparando com a depuração plasmática tradicional. A medida transcutânea da função renal foi validado em diferentes modelos de ratos (saudável e unilateralmente nefrectomia (UNX C57BL) / 6-129 SV ratos e mouse modelo de nefronofitíase ( PCY)) em comparação com a depuração de plasma. Os valores são médias ± DP. TFG, taxa de filtração glomerular 9. /53767/53767table2.jpg &quot;/&gt; Tabela 2. modelos murinos estudada usando a medição transcutânea UNX, unilateralmente nefrectomia.; ECA, enzima conversora da angiotensina; T gumodwt / wt, transgénico uromodulin nocaute, SD, Sprague Dawley; PKD, doença renal policística.

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Transcutaneous Assessment of Renal Function in Conscious Rodents

Determination of glomerular filtration rate (GFR) is the gold standard to assess overall kidney function. However, traditional procedures to measure this parameter are cumbersome and require a large investment of time. Here we describe a faster and minimally invasive method to determinate GFR transcutaneously.

Avaliação transcutânea da função renal em roedores conscientes

Glomerular filtration rate (GFR) is the gold standard to assess overall kidney function. However, traditional methods to evaluate GFR are cumbersome and ...

transcutaneous-assessment-of-renal-function-in-conscious-rodents

Research

JoVE Journal

Medicine

12.3K visualizações.  Medical Faculty Mannheim, University of Heidelberg. Determination of glomerular filtration rate (GFR) is the gold standard to assess overall kidney function. However, traditional procedures to measure this parameter are cumbersome and require a large investment of time. Here we describe a faster and minimally invasive method to determinate GFR transcutaneously.

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Non-invasive Assessment of Microvascular and Endothelial Function

The authors have utilized capillaroscopy and forearm blood flow techniques to investigate the role of microvascular dysfunction in pathogenesis of cardiovascular disease. Capillaroscopy is a non-invasive, relatively inexpensive methodology for directly visualizing the microcirculation. Percent capillary recruitment is assessed by dividing the increase in capillary density induced by postocclusive reactive hyperemia (postocclusive reactive hyperemia capillary density minus baseline capillary density), by the maximal capillary density (observed during passive venous occlusion). Percent perfused capillaries represents the proportion of all capillaries present that are perfused (functionally active), and is calculated by dividing postocclusive reactive hyperemia capillary density by the maximal capillary density. Both percent capillary recruitment and percent perfused capillaries reflect the number of functional capillaries. The forearm blood flow (FBF) technique provides accepted non-invasive measures of endothelial function: The ratio FBFmax/FBFbase is computed as an estimate of vasodilation, by dividing the mean of the four FBFmax values by the mean of the four FBFbase values. Forearm vascular resistance at maximal vasodilation (FVRmax) is calculated as the mean arterial pressure (MAP) divided by FBFmax. Both the capillaroscopy and forearm techniques are readily acceptable to patients and can be learned quickly.
The microvascular and endothelial function measures obtained using the methodologies described in this paper may have future utility in clinical patient cardiovascular risk-reduction strategies. As we have published reports demonstrating that microvascular and endothelial dysfunction are found in initial stages of hypertension including prehypertension, microvascular and endothelial function measures may eventually aid in early identification, risk-stratification and prevention of end-stage vascular pathology, with its potentially fatal consequences.

Capillaroscopy is a non-invasive, relatively inexpensive methodology for directly visualizing the microcirculation. The forearm blood flow technique provides accepted non-invasive measures of endothelial function.

Avaliação não invasiva da função microvascular e endotelial

The authors have utilized capillaroscopy and forearm blood flow techniques to investigate the role of microvascular dysfunction in pathogenesis of ...

Medicina

Assessment of Vascular Function in Patients With Chronic Kidney Disease

Patients with chronic kidney disease (CKD) have significantly increased risk of cardiovascular disease (CVD) compared to the general population, and this is only partially explained by traditional CVD risk factors. Vascular dysfunction is an important non-traditional risk factor, characterized by vascular endothelial dysfunction (most commonly assessed as impaired endothelium-dependent dilation [EDD]) and stiffening of the large elastic arteries. While various techniques exist to assess EDD and large elastic artery stiffness, the most commonly used are brachial artery flow-mediated dilation (FMDBA) and aortic pulse-wave velocity (aPWV), respectively. Both of these noninvasive measures of vascular dysfunction are independent predictors of future cardiovascular events in patients with and without kidney disease. Patients with CKD demonstrate both impaired FMDBA, and increased aPWV. While the exact mechanisms by which vascular dysfunction develops in CKD are incompletely understood, increased oxidative stress and a subsequent reduction in nitric oxide (NO) bioavailability are important contributors. Cellular changes in oxidative stress can be assessed by collecting vascular endothelial cells from the antecubital vein and measuring protein expression of markers of oxidative stress using immunofluorescence. We provide here a discussion of these methods to measure FMDBA, aPWV, and vascular endothelial cell protein expression.

The degree of vascular dysfunction and contributing physiological mechanisms can be assessed in patients with chronic kidney disease by measuring brachial artery flow-mediated dilation, aortic pulse-wave velocity, and vascular endothelial cell protein expression.

Avaliação da função vascular em pacientes com doença renal crônica

Patients with chronic kidney disease (CKD) have significantly increased risk of cardiovascular disease (CVD) compared to the general population, and this ...

Transcutaneous Microcirculatory Imaging in Preterm Neonates

Microcirculatory imaging (MI) is a relatively new research tool mainly used in the intensive care setting. MI provides a clear view of the smallest capillaries, arterioles and venules. The magnifying effect visualizes the flow pattern of erythrocytes through these vessels.
It's non-invasive character makes it suitable to apply in (preterm) neonates, even in cardiorespiratory unstable patients. In adults and children, MI is mainly performed sublingually, but this is not possible in preterm infants as these cannot cooperate and the size of the probe is problematic. In preterm infants, MI is therefore performed transcutaneously. Their thin skin makes it possible to obtain high quality images of peripheral microcirculation. 
In this manuscript we will demonstrate the method of transcutaneous MI in preterm infants. We will focus on the different techniques and provide tips to optimize image quality. The highlights of software settings, safety and offline analysis are also addressed.

Microcirculatory imaging (MI) is used to monitor peripheral perfusion in critically ill or preterm neonates. This manuscript and video demonstrates the optimal approach for obtaining high-quality images.

Transcutânea Microcirculatory Imaging no recém-nascidos pré-termo

Microcirculatory imaging (MI) is a relatively new research tool mainly used in the intensive care setting. MI provides a clear view of the smallest ...

Nerve-sparing Mid-urethral Obstruction (NeMO) in Female Small Rodents

Partial bladder outlet obstruction (pBOO) has a high prevalence, causes significant patient burden, and immense health care costs. The most common animal model to investigate bladder remodeling in pBOO are female rodents undergoing partial obstruction at the proximal urethra. Variability in the degree of obstruction and animal mortality are major concerns with proximal obstruction. Furthermore, dissecting around the proximal urethra and bladder neck jeopardizes bladder innervation.
We developed a nerve-sparing mid-urethral obstruction (NeMO) model for pBOO avoiding the disadvantages of the traditional model. We approached the urethra just inferior to the pubic symphysis, which obviated the need for laparotomy as well as for dissection in this area; also, the striated urethral sphincter remained untouched. We performed NeMO in female Sprague-Dawley rats (12 obstructions, 6 sham animals) as well as in female C57/bl6 mice (20 obstructions, 18 sham animals). After two weeks, we evaluated bladder function, bladder mass, and body mass.
We had no mortalities among obstructed- or sham-operated female rats; as described for the traditional proximal pBOO-method, we tied the suture around the proximal urethra and a temporarily placed 0.9 mm metal rod. NeMO induced an 85% increase in bladder mass after two weeks, average residual urine volume was 0.4 mL in partially obstructed rats while only 0.03 mL in sham animals. In mice, we tested 3 sizes of cannulas that we placed along the urethra when tying the suture. We found that using a 27-gauge cannula resulted in over 50% animal mortality; placing the 25-gauge cannula did not yield the desired response in increasing bladder mass; utilizing a 26-gauge cannula yielded favorable results with minimal animal mortality (1/8) yet a significant 2-fold increase in bladder mass.

Nerve-sparing Mid-urethral Obstruction NeMO in Female Small Rodents

Traditional modeling of partial bladder outlet obstruction in rodents is fraught with animal mortality. A denervation injury from dissection around the proximal urethra and bladder neck is also of major concern. We developed and evaluated a safe and reliable mid-urethral obstruction model, avoiding the shortcomings of the traditional model.

-Nervo poupadores Mid-obstrução uretral (Nemo) em fêmeas pequenos roedores

Partial bladder outlet obstruction (pBOO) has a high prevalence, causes significant patient burden, and immense health care costs. The most common animal ...

Assessment of Human Adipose Tissue Microvascular Function Using Videomicroscopy

While obesity is closely linked to the development of metabolic and cardiovascular disease, little is known about mechanisms that govern these processes. It is hypothesized that pro-atherogenic mediators released from fat tissues particularly in association with central/visceral adiposity may promote pathogenic vascular changes locally and systemically, and the notion that cardiovascular disease may be the consequence of adipose tissue dysfunction continues to evolve. Here, we describe a unique method of videomicroscopy that involves analysis of vasodilator and vasoconstrictor responses of intact small human arterioles removed from the adipose depot of living human subjects. Videomicroscopy is used to examine functional properties of isolated microvessels in response to pharmacological or physiological stimuli using a pressured system that mimics in vivo conditions. The technique is a useful approach to gain understanding of the pathophysiology and molecular mechanisms that contribute to vascular dysfunction locally within the adipose tissue milieu. Moreover, abnormalities in the adipose tissue microvasculature have also been linked with systemic diseases. We applied this technique to examine depot-specific vascular responses in obese subjects. We assessed endothelium-dependent vasodilation to both increased flow and acetylcholine in adipose arterioles (50 - 350 &#181;m internal diameter, 2 - 3 mm in length) isolated from two different adipose depots during bariatric surgery from the same individual. We demonstrated that arterioles from visceral fat exhibit impaired endothelium-dependent vasodilation compared to vessels isolated from the subcutaneous depot. The findings suggest that the visceral microenvironment is associated with vascular endothelial dysfunction which may be relevant to clinical observation linking increased visceral adiposity to systemic disease mechanisms. The videomicroscopy technique can be used to examine vascular phenotypes from different fat depots as well as compare findings across individuals with different degrees of obesity and metabolic dysfunction. The method can also be used to examine vascular responses longitudinally in response to clinical interventions.

Videomicroscopy systems are used to examine functional properties of isolated adipose tissue arterioles in response to physiological and pharmacological stimuli. This technique can be used to examine microvascular phenotypes in different adipose tissue domains in obese humans.

Avaliação da função Microvascular de tecido adiposo humano usando tele-microscopia

While obesity is closely linked to the development of metabolic and cardiovascular disease, little is known about mechanisms that govern these processes. ...

Assessment of Kidney Function in Mouse Models of Glomerular Disease

The use of murine models to mimic human kidney disease is becoming increasingly common. Our research is focused on the assessment of glomerular function in diabetic nephropathy and podocyte-specific VEGF-A knock-out mice; therefore, this protocol describes the full kidney work-up used in our lab to assess these mouse models of glomerular disease, enabling a vast amount of information regarding kidney and glomerular function to be obtained from a single mouse. In comparison to alternative methods presented in the literature to assess glomerular function, the use of the method outlined in this paper enables the glomerular phenotype to be fully evaluated from multiple aspects. By using this method, the researcher can determine the kidney phenotype of the model and assess the mechanism as to why the phenotype develops. This vital information on the mechanism of disease is required when examining potential therapeutic avenues in these models. The methods allow for detailed functional assessment of the glomerular filtration barrier through measurement of the urinary albumin creatinine ratio and individual glomerular water permeability, as well as both structural and ultra-structural examination using the Periodic Acid Schiff stain and electron microscopy. Furthermore, analysis of the genes dysregulated at the mRNA and protein level enables mechanistic analysis of glomerular function. This protocol outlines the generic but adaptable methods that can be applied to all mouse models of glomerular disease.

This protocol describes a full kidney work-up that should be carried out in mouse models of glomerular disease. The methods allow for detailed functional, structural, and mechanistic analysis of glomerular function, which can be applied to all mouse models of glomerular disease.

Avaliação da função renal em modelos do rato da doença Glomerular

The use of murine models to mimic human kidney disease is becoming increasingly common. Our research is focused on the assessment of glomerular function ...

Assessment of Respiratory Function in Conscious Mice by Double-chamber Plethysmography

Air volume changes created by a conscious subject breathing spontaneously within a body box are at the basis of plethysmography, a technique used to non-invasively assess some features of the respiratory function in humans as well as in laboratory animals. The present article focuses on the application of the double-chamber plethysmography (DCP) in small animals. It provides background information on the methodology as well as a detailed step-by-step procedure to successfully assess respiratory function in conscious, spontaneously breathing animals in a non-invasive manner. The DCP can be used to monitor the respiratory function of multiple animals in parallel, as well as to identify changes induced by aerosolized substances over a chosen time period and in a repeated manner. Experiments on control and allergic mice are used herein to demonstrate the utility of the technique, explain the associated outcome parameters, as well as to discuss the related advantages and shortcomings. Overall, the DCP provides valid and theoretically sound readouts that can be trusted to evaluate the respiratory function of conscious small animals both at baseline and after challenges with aerosolized substances.

The objective of the present article is to provide a detailed description of the recommended procedures to evaluate respiratory function in conscious mice by double-chamber plethysmography.

Avaliação da função respiratória em ratos conscientes por pletismografia dobro-câmara

Air volume changes created by a conscious subject breathing spontaneously within a body box are at the basis of plethysmography, a technique used to ...

Non-invasive Assessment of Dorsiflexor Muscle Function in Mice

Assessment of skeletal muscle contractile function is an important measurement for both clinical and research purposes. Numerous conditions can negatively affect skeletal muscle. This can result in a loss of muscle mass (atrophy) and/or loss of muscle quality (reduced force per unit of muscle mass), both of which are prevalent in chronic disease, muscle-specific disease, immobilization, and aging (sarcopenia). Skeletal muscle function in animals can be evaluated by a range of different tests. All tests have limitations related to the physiological testing environment, and the selection of a specific test often depends on the nature of the experiments. Here, we describe an in vivo, non-invasive technique involving a helpful and easy assessment of force frequency-curve (FFC) in mice that can be performed on the same animal over time. This permits monitoring of disease progression and/or efficacy&#160;of a potential therapeutic treatment.

Measurement of rodent skeletal muscle contractile function is a useful tool that can be used to track disease progression as well as efficacy of therapeutic intervention. We describe here the non-invasive, in vivo assessment of the dorsiflexor muscles that can be repeated over time in the same mouse.

Avaliação não-invasiva da função de músculos levantadores em ratos

Assessment of skeletal muscle contractile function is an important measurement for both clinical and research purposes. Numerous conditions can negatively ...

A Computerized Functional Skills Assessment and Training Program Targeting Technology Based Everyday Functional Skills

Today, many functional skills are technology-based, so development of a technology-based training program has broad importance. Here we present a computerized functional skills training program that was paired in half of the participants with a commercially available cognitive training (CCT) program.
Non-impaired older individuals (NC) aged 60+ (n=45) and similarly aged individuals with mild cognitive impairment (MCI; n=50) were randomized to receive 12 weeks of twice-weekly computerized functional skills training (CFST) or 12 weeks of twice-weekly sessions split between CCT and CFST. Skills trained were use of an ATM; internet banking; ticket kiosk; telephone and internet prescription refill; medication management; and internet shopping. As with previous functional capacity assessments, we focus on completion time for each simulation.
51 participants completed the training program, either by mastering all 6 tasks (34) or completing 12 weeks of training. 44 more participants completed 4 or more training sessions so they were also analyzed for improvement up to their last training session. Completion time for all 6 tests significantly improved from the baseline assessment to the final training session in both groups of participants (all p&#60;0.001 with an average improvement in task completion time of 45%). Further, there was no differential improvement in MCI and NC in the 6 tests from baseline to end of training (all t&#60;1.66, all p&#62;0.12). Finally, combined CCT plus CFST did not differ from CSFT alone on any of the percent-change score measures (all t&#60;1.64, all p&#62;0.11).
Both NC and MCI groups evidenced substantial improvements in performance. CCT supplementation led to similar functional gains with half as many training sessions. The NC participants proceeded through the training fairly rapidly even without CCT supplementation; MCI participants required more training but learned equivalently. These findings suggest that even in cases with memory impairments, functional skills can be efficiently learned with training.

This training protocol uses computerized training to teach technology-related everyday functional skills. These skills include financial skills, travel and transit, as well as medication management.

Um programa informatizado de avaliação e treinamento de habilidades funcionais que visa a tecnologia baseada em habilidades funcionais cotidianas

Today, many functional skills are technology-based, so development of a technology-based training program has broad importance. Here we present a ...

Echocardiographic Assessment of Cardiac Anatomy and Function in Adult Rats

The use of experimental animal models has become crucial in cardiovascular science. Most studies using rodent models are focused on two-dimensional imaging to study the cardiac anatomy of the left ventricle and M-mode echo to assess its dimensions. However, this could limit a comprehensive study. Herein, we describe a protocol that allows an assessment of the heart chamber size, left ventricular function (systolic and diastolic) and valvular function. A conventional medical ultrasound machine was used in this protocol and different echo views were obtained through left parasternal, apical and suprasternal windows. In the left parasternal window, the long and short axis were acquired to analyze left chamber dimensions, right ventricle and pulmonary artery dimensions, and mitral, pulmonary and aortic valve function. The apical window allows the measurement of heart chamber dimensions and evaluation of systolic and diastolic parameters. It also allows Doppler assessment with detection and quantification of heart valve disturbances (regurgitation or stenosis). Different segments and walls of the left ventricle are visualized throughout all views. Finally, the ascending aorta, aortic arch, and descending aorta can be imaged through the suprasternal window. A combination of ultrasound imaging, Doppler flow and tissue Doppler assessment have been obtained to study cardiac morphology and function. This represents an important contribution to improve the assessment of cardiac function in adult rats with impact for research using these animal models.

A non-invasive protocol for transthoracic echocardiography assessment of cardiac anatomy and function for adult rats is presented in the current study. The heart valves, all four cardiac chambers and the ascending aorta, aortic arch and descending aorta are studied in detail.

Avaliação ecocardiográfica da anatomia e função cardíaca em ratos adultos

The use of experimental animal models has become crucial in cardiovascular science. Most studies using rodent models are focused on two-dimensional ...