Obrigado por assistir nossos vídeos. Sou Susumu Minamisawa, da Escola de Medicina da Universidade Jikei, em Tóquio, Japão. Nossa oportunidade de hipertensão pulmonar animal devido a doença cardíaca de rato que é classificada como hipertensão pulmonar do Grupo Dois.
A Organização Mundial da Saúde classifica a hipertensão pulmonar em cinco grupos. O rato de estenose atrial esquerda é um grupo modelo animal dois hipertensão pulmonar que é a forma mais prevalente de hipertensão pulmonar e atualmente não há terapias aprovadas para este grupo de hipertensão pulmonar. Nestes vídeos estamos demonstrando o passo a passo de como realizar a cirurgia de estenose atrial esquerda em rato.
A estenose atrial criada cirurgicamente imita estenose mitral em humano. Quando o usamos para estudar a possibilidade e sob o grupo dois hipertensão pulmonar. Vamos começar.
Prepare o seguinte equipamento antes da cirurgia, um pequeno respirador animal e uma máquina anestésico. Um kit de incubação compõe um par de fórceps hemostat, um depressor de língua e um angio-cateter de 18 bitolas. Os instrumentos cirúrgicos incluem um par de fórceps curvos, um par de fórceps retos, um driver de agulha, um retrátil torácico, um par de tesouras, uma sutura monofilamento 5-0, um aplicador de clipe, um clipe médio grande e um tubo torácico calibre 23.
Anestesiar o rato em uma câmara de indução com 5% de isoflurane misturado com dois metros por minuto de ar da sala. Antes da intubação raspar o cabelo do peito. Aplique creme de depilação para remover cabelos finos não removidos pela máquina de barbear.
Enganche os dentes da frente com uma corda e fixe as cordas nos pinos. Depois que a corda for presa, abra a boca com as fórceps hemostat e insira o depressor da língua na boca. Levante o depressor da língua para visualizar a corda vocal.
Insira o angio-cateter de 18 bitolas como tubo endotraqueal na traqueia e, em seguida, conecte rapidamente o cateter ao respirador. Ajuste o volume da maré para 10 microliter por grama com uma taxa respiratória de 100 respirações por minuto. Mantenha a anestesia com 2% de isoflurane misturado com dois metros por minuto de ar da sala.
Esterilize o local cirúrgico com esfoliantes alternados de clorexidina e álcool. Dê a Buprenorfina 01 miligramas por quilograma subcutâneamente. Cubra o rato com uma cortina estéril.
Verifique o reflexo do pedal para confirmar a anestesia bem sucedida antes da cirurgia. Marque o local da incisão dois centímetros abaixo da axila. Faça uma incisão lateral lateral de dois centímetros com uma tesoura.
Separe cuidadosamente o músculo intercostal entre a quarta e a quinta costela usando um fórceps reto e curvo até entrar na cavidade torácica. Insira o retrátil do peito na cavidade torácica. Use alguma força para abrir o retrátil do peito para dividir a quarta e quinta costela em cerca de um centímetro.
Levante o timo com um par de fórceps retos. Remova cuidadosamente o timo que cobre o coração com uma tesoura. Passe cuidadosamente uma sutura de monofilamento 5-0 através da superfície do ventrículo esquerdo logo abaixo do apêndice atrial esquerdo.
Deve-se tomar cuidado para evitar passar a agulha pelas principais artérias coronárias. Depois que a sutura estiver no lugar e não houver uma gravata de sangramento significativa um nó solto. Puxe o fio de sutura para cima e para a frente para levantar o coração para fora do peito.
Uma vez que o coração é levantado fora do peito, aplique rapidamente um clipe médio grande no átrio esquerdo logo acima da válvula mitral. Remova cuidadosamente a sutura de permanência usada para levantar o coração. Comece a fechar o peito com uma sutura de monofilamento 5-0 usando um padrão simples interrompido.
Insira um tubo torácico de calibre 23 preso a uma seringa de 10cc na cavidade torácica. E então proceder com o fechamento do peito. Desenhe qualquer derrame de ar, sangue e pleurae perto do tubo torácico inserido usando a seringa de 10cc anexada.
E então puxe o tubo quando nada está saindo. Feche a área da pele com sutura de monofilamento 5-0 usando um padrão simples interrompido. Remova a cortina cirúrgica.
Dê a Buprenorfina 01 miligramas por quilograma subcutâneamente. Desligue o isoflurane. Escavar o rato quando ele começar a acordar.
Duas semanas após a operação usam a ecografia para confirmar o sucesso da cirurgia de estenose atrial esquerda. A eficácia da estenose atrial esquerda é confirmada usando a cardiografia ecológica duas semanas após a operação. Acredita-se que ratos com velocidade de entrada do ventrículo esquerdo superiores a dois metros por segundo medidos em quatro câmaras tenham desenvolvido estenose significativa.
10 semanas após a cirurgia de estenose atrial esquerda os ratos do grupo LAS mostram alargamento atrial esquerdo, congestão pulmonar, sobrecarga de pressão ventrículo direita e aumento do fluxo venoso pulmonar em comparação com os ratos do grupo operado falso. Além disso, há um aumento significativo da pressão sistólica ventricular direita no grupo de estenose atrial esquerda versus o grupo operado por sham. No entanto, a pressão sistólica do ventrículo esquerdo permanece a mesma em ambos os grupos.
Exame histológico de longa seção transversal manchada com van gieson elástico mostra aumento da doença arterial pulmonar e venosa pulmonar. Uma dimensão venosa pulmonar aumentada o grupo de estenose atrial esquerda versus o grupo operado falso foi mais uma atuação muscular suave na coloração mostra aumento do número de células musculares lisas na artéria pulmonar e na veia pulmonar do grupo de estenose atrial esquerda versus o grupo controle. Espero que tenham gostado de ver este vídeo.
Embora a cirurgia seja relativamente simples, deve-se tomar cuidado ao aplicar a sutura no ventrículo esquerdo para evitar atingir as principais artérias coronárias. Ao levantar o coração puxe a sutura em direção à cabeça do rato para que o átrio esquerdo sua estrutura de corrida possa ser claramente visualizada. Aplicando o clipe no átrio esquerdo, o aperto do clipe deve ser suficiente para causar estenose atrial esquerda significativa, mas não muito apertada para induzir edema pulmonar agudo e insuficiência cardíaca direita.
Obrigado por assistir este vídeo. E boa sorte com sua experiência.
