Nossa pesquisa representa o primeiro passo para entender qual sequência está contida no elemento contendo DNA ribossômico extracromossômico circular fechado, ou CERE, é fundamental para permitir a replicação do CERE. Bem como entender a maquinaria de replicação de DNA do CERE. Este protocolo aborda lacunas na compreensão de como o CERE propaga uma naegleria gruberi e quais componentes do CERE são necessários para uma propagação eficaz.
Nosso protocolo oferece um método minimalista de transecção da naegleria, com o objetivo de reduzir procedimentos que possam perturbar a célula. Assim, aborda como o CERE se propaga em naegleria gruberi e quais componentes do CERE são necessários para uma propagação eficaz. Estabelecemos que as espécies de naegleria que contêm CERE único que varia tanto no comprimento da sequência quanto na composição de nucleotídeos.
Procuramos fornecer as bases para analisar a dinâmica molecular do CERE para espécies do gênero naegleria. Nossos resultados abriram caminho para perguntas sobre quais componentes são necessários para a replicação do CERE. E se o ORI pode ser utilizado para a propagação de construções estranhas em espécies de naegleria.
Nosso objetivo é avançar ainda mais em nossa pesquisa, ramificando-nos em outras espécies do gênero naegleria e fornecendo respostas sobre a transfecção de CERE em nível intra-espécie.
