Gerando e analisando imagens histológicas de alto parâmetro com citometria de histofluxo

Nosso objetivo geral é estudar como as células do sistema imunológico e as células gliais do sistema nervoso central contribuem para o desenvolvimento e progressão de distúrbios neurológicos, como a esclerose múltipla. A microscopia imunofluorescente é uma técnica padrão e amplamente utilizada em todas as disciplinas biológicas e é essencial para a pesquisa em neurociência e imunologia. Um dos principais problemas que afligem os pesquisadores é que a microscopia imunofluorescente é normalmente limitada no número de sondas que podem ser visualizadas de uma só vez devido às limitações dos microscópios convencionais.

Neste protocolo, descrevemos um método para expandir o número de sondas que muitos microscópios podem obter imagens de uma só vez e fornecer um pipeline de análise para processar imagens densas em informações. A vantagem desse protocolo é que ele pode ser adaptado a muitos microscópios amplamente disponíveis e é fácil de executar, o que tornaria a análise histológica multiplex disponível para um número maior de laboratórios.