JoVE Logo
АВТОРЫ
СВЯЖИТЕСЬ С НАМИ

Войдите в систему

Для просмотра этого контента требуется подписка на Jove Войдите в систему или начните бесплатную пробную версию.

В этой статье

  • Резюме
  • Аннотация
  • Введение
  • протокол
  • Результаты
  • Обсуждение
  • Раскрытие информации
  • Благодарности
  • Материалы
  • Ссылки
  • Перепечатки и разрешения

Резюме

This protocol demonstrates how to achieve femto molar detection sensitivity of proteins in 10 µL of whole blood within 30 min. This can be achieved by using electrospun nanofibrous mats integrated in a lab-on-a-disc, which offers high surface area as well as effective mixing and washing for enhanced signal-to-noise ratio.

Аннотация

Enzyme-linked immunosorbent assay (ELISA) is a promising method to detect small amount of proteins in biological samples. The devices providing a platform for reduced sample volume and assay time as well as full automation are required for potential use in point-of-care-diagnostics. Recently, we have demonstrated ultrasensitive detection of serum proteins, C-reactive protein (CRP) and cardiac troponin I (cTnI), utilizing a lab-on-a-disc composed of TiO2 nanofibrous (NF) mats. It showed a large dynamic range with femto molar (fM) detection sensitivity, from a small volume of whole blood in 30 min. The device consists of several components for blood separation, metering, mixing, and washing that are automated for improved sensitivity from low sample volumes. Here, in the video demonstration, we show the experimental protocols and know-how for the fabrication of NFs as well as the disc, their integration and the operation in the following order: processes for preparing TiO2 NF mat; transfer-printing of TiO2 NF mat onto the disc; surface modification for immune-reactions, disc assembly and operation; on-disc detection and representative results for immunoassay. Use of this device enables multiplexed analysis with minimal consumption of samples and reagents. Given the advantages, the device should find use in a wide variety of applications, and prove beneficial in facilitating the analysis of low abundant proteins.

Введение

Несколько платформ для диагностики заболеваний, были разработаны на основе наноразмерных материалов , таких как 1,2 нанопроводов, 3 наночастицы, 4, 5 нанотрубок и нановолокон (NFS) 6-8. Эти наноматериалы предлагают отличные перспективы в разработке новых технологий для высокочувствительных биопробы благодаря своим уникальным физико-химическим свойствам. Например, мезопористый оксид цинка нановолокна были использованы для фемтосоты-молярного чувствительного обнаружения рака молочной железы биомаркеров. 9 В последнее время наноматериалы на основе диоксида титана (TiO 2), были исследованы в течение биоаналитических приложений 10 принимая во внимание их химическую стабильность, 11 пренебрежимо мало денатурации белка , 12 и биосовместимость. 13 Кроме того, гидроксильные группы на поверхности TiO 2 облегчить химическую модификацию и ковалентное присоединение биомолекулы. 14,15 узорчатого TiO 2 THIп пленки 16 или TiO 2 нанотрубки 17 были использованы для повышения чувствительности обнаружения белка - мишени за счет увеличения площади поверхности; Тем не менее, процесс изготовления является достаточно сложным и требует дорогостоящего оборудования. С другой стороны, electrospun НФ , получают внимание из - за их высокой площади поверхности, а также простой и изготовление недорогих процесса; 18,19 все же, хрупкое или ослаблены характеристикой electrospun TiO 2 NF мата делает его трудно обрабатывать и интегрироваться с микрофлюидальных устройствами. 6,20 Таким образом, TiO 2 NF маты редко используются в биоаналитических приложениях, особенно те ​​, которые требуют жестких условий промывки.

В этом исследовании, чтобы преодолеть эти ограничения, мы разработали новую технологию для передачи electrospun NF матов на поверхности любой целевой подложки за счет использования клеевого слоя тонкой полидиметилсилоксана (PDMS). Furthermore, мы успешно продемонстрировали интеграцию electrospun TiO 2 NF Маты на центробежный микрожидком устройства изготовлен из поликарбоната (PC). С помощью этого устройства, высокий чувствительный, полностью автоматизированы и интегрированы обнаружение С-реактивного белка (CRP), а также сердечный тропонин I (cTnI) был достигнут в течение 30 мин только с 10 мкл цельной крови. 21 Из - за комбинированный преимущества свойств NFs и центробежной платформы, анализ представил широкий динамический диапазон на шесть порядков от 1 пг / мл (~ 8 Fm) до 100 нг / мл (~ 0,8 пм) с нижним пределом обнаружения 0,8 пг / мл (~ 6 Fm) для СРБ и динамическом диапазоне от 10 пг / мл (~ 0,4 пМ) до 100 нг / мл (~ 4 нм) с пределом обнаружения 37 пг / мл (~ 1,5 мкм) для cTnI. Эти пределы обнаружения составляют ~ 300 и ~ 20 раз ниже по сравнению с их соответствующими традиционными результатами ELISA. Этот метод может быть применен для обнаружения любых белков-мишеней, с соответствующими антителами. В целом, это устройство совместнопакетирования в значительной степени способствовать лабораторной диагностики и биохимических анализов , так как он может обнаружить редкие количества белков - мишеней с большой чувствительностью даже от очень малых количеств биологических образцов, например, по 10 мкл цельной крови. Хотя мы только показали обнаружение сывороточного белка с использованием ELISA в данном исследовании, передача и интеграция технологии electrospun NFs с микрофлюидальных устройств можно было бы также более широкое применение в других биохимических реакций, которые требуют большую площадь поверхности для достижения высокой чувствительности обнаружения.

протокол

Примечание: Кровь отбирали у здоровых пациентов, и собирали в пробирку для сбора крови. Письменное информированное согласие было получено от всех добровольцев.

1. Изготовление TiO 2 NF Мат

  1. Приготовление раствора 22 предшественника
    1. Растворить 1,5 г тетраизопропилата титана (TTIP) в смеси этанола (99,9%, 3 мл) и ледяной уксусной кислоты (3 мл) и перемешивают раствор при комнатной температуре (25 ° С) в течение 30 мин на магнитной мешалке.
    2. Растворить 11 мас% поливинилпирролидона (PVP) в 3,64 г этанола (99,9%) и перемешивают раствор при температуре 65 ° С в течение 1 часа с использованием горячей пластины магнитной мешалки.
    3. Объединение и перемешивать оба раствора при 65 ° С в течение 4 ч на горячей пластине магнитной мешалкой.
  2. электроформования
    1. Загрузить приготовленный раствор в шприц, соединенный с иглой из нержавеющей стали 200 мкм внутренней Diameтер. Налейте раствор непосредственно в шприце после удаления плунжера.
    2. Вводят раствор непрерывно со скоростью потока 0,3 мл / ч в течение 10 мин на кремниевую пластину с (2 см х 2 см), помещенной на заземленную подложку при высоком напряжении постоянного тока (15 кВ). Во время электроформования, установите расстояние между иглой и заземленным субстрата до 10 см.
  3. Обжиг мата NF
    1. Поместите мат NF в печи и повышают температуру до 500 ° С со скоростью линейного изменения от 3 ​​° С / мин в атмосфере с высоким вакуумом (5 х 10 -5 торр).
    2. Поддерживают температуру при 500 ° С в течение 3 часов. Охладить температуру образцов до комнатной температуры (25 ° C) в печи.

2. Интеграция TiO 2 NF Мат в центробежную микрожидком диск

  1. Изготовление диска
    1. С помощью программного обеспечения проектирования 3D (например, СолidWorks или аналогичный), чтобы изобразить камеры, каналы или клапаны каждого слоя диска. Преобразование графических файлов в компьютерный код с числовым программным управлением (ЧПУ) с использованием кода генерации программного обеспечения (например, Edgecam или аналогичный). С помощью программного обеспечения в соответствии с инструкцией по эксплуатации 23,24 . Примечание: Типичные размеры канала , используемые в данном устройстве составляют 1,0 мм х 0,3 мм (ширина х глубина).
    2. Открыть рабочее программное обеспечение ЧПУ фрезерного станка (например., DeskCNC или аналогичный) и загрузки кода с ЧПУ для работы программного обеспечения и нажмите следующее по порядку: "AUTO" -> "G КОД OPEN" -> Выберите сгенерированный код ЧПУ.
    3. Прикрепите PC пластину на фрезерном станке с ЧПУ: использовать 1 мм PC пластины для верхнего слоя и 5 мм пластин для ПК слоя диска. Запуск фрезерный станок с ЧПУ, чтобы сократить каждый слой диска, нажав на кнопку "Старт".
  2. Передача TiO 2 NF мата на диск
    1. Поместите кремниевую подложку и небольшую чашку Петри, содержащую 40 мкл (tridecafluoro-1,1,2,2-tetrahydrooctyl) -1-трихлорсилана в вакуумной камере под вакуумом в течение 30 мин. Фторсилановое испаряет и получает покрытием на подложке.
    2. Смешайте полидиметилсилоксан (PDMS) форполимера с отвердителем в соотношении 10: 1 и дегазацию в вакуумной камере. Спин-Покрывают ПДМС на кремниевую подложку со скоростью 650 оборотов в минуту в течение 60 с.
    3. Вылечить PDMS покрытием на кремниевой подложке в сушильном шкафу при температуре 65 ° С в течение 10 мин для достижения клейкого состояния.
      Примечание: Время обжига может изменяться в зависимости от условий окружающей среды, и сила адгезии может быть проверена с помощью теста галс с использованием реометра.
    4. Перенести мат TiO 2 NF , подготовленный электроформования и кальцинации на кремнии PDMS-покрытием , используя пинцет. Затем вручную применить конформное давление на передаваемый TiO 2 NF коврик с плоским предметом (например., Предметное стекло) и удалить объект. ПоложилВ этом примере в печи при температуре 65 ° С в течение 4 ч или при 80 ° С в течение 1 часа, чтобы полностью вылечить PDMS слой.
    5. Coat связывающие реакционные камеры в диске с 20 мкл ПДМС / отвердитель смеси (10: 1), который выступает в качестве адгезивного слоя для прикрепления TiO 2 NF мата на диск.
    6. Разлить по 50 мкл этанола (99,9%) на TiO 2 NF мата на слой PDMS, разрезать мат NF с пуансоном отверстие диаметром 6 мм, и передать разрез TiO 2 NF мата к связыванию реакционных камер , покрытых 20 мкл из PDMS в предыдущем шаге.
      Примечание: На этом этапе этанол будет полезно отделить разрезанную TiO 2 NF мата из кремниевой подложки.
    7. Выдержите TiO 2 Н.Ф. мат интегрированный диск в сушильном шкафу при температуре 65 ° С в течение 4 часов или при температуре 80 ° С в течение 1 ч до полного отверждения PDMS.
  3. Поверхностная модификация TiO 2 NF мата на диске
    1. п1% его восстановить объем / объем раствора (3-глицидоксипропил) methyldiethoxy силана (GPDES) в этаноле (99,9%).
    2. Лечить TiO 2 NF мат интегрированный диск с кислородной плазмой при 140 Вт, 50 SCCM потока кислорода в течение 180 сек. Распределить 100 мкл раствора GPDES на каждой нановолокна мата и инкубировать при комнатной температуре (25 ° C) в течение 2 часов.
    3. Промыть кратко подложках дозирования этанола (99,9%) с использованием промывочной бутылки, затем удалите этанол полностью переворачивая диск и промокательной его против чистой салфеткой. Отверждение при 80 ° C в течение 1 часа. Промыть дважды с этанолом (99,9%), таким же образом, как указано выше, для удаления физически адсорбированной, так и несвязанные молекулы GPDES.
    4. Продуйте струей азота, сушат под вакуумом.
      Примечание: Диск можно хранить в герметичном контейнере при комнатной температуре (25 ° С) до момента использования.
  4. Иммобилизация антител на поверхности
    1. Сделайте раствор 200 мкг / мл антител захвата (моноклональное анти-мышьчеловеческий вчСРБ или мышиное моноклональное анти-cTnI) путем разбавления антител с фосфатным буферным солевым раствором (PBS) буфере (рН 7,4). Разлить по 5 мкл раствора на каждый мат NF в диск с помощью микропипетки. Просмотреть список материалов для получения дополнительной информации о антител.
    2. Хранить диски в увлажненной камере и инкубируют при температуре 37 ° С в течение 4 часов. Промыть антитела, покрытые NF мат с 0,1% -ным буфером BSA-PBS. Заполнить камеру 100 мкл буфера для промывки с помощью микропипетки, удалите буфер аспирацией или декантацией. И, наконец, перевернуть диск и промокните его против чистой стереть, а затем собрать диск.
  5. сборка дисков
    1. Нарисовать дизайн диска на двухсторонней клейкой ленты с помощью программы CAD (например, AutoCAD или аналогичный). Загрузите дизайн CAD плоттера.
    2. Обрежьте двусторонней клейкой ленты с помощью режущего плоттера. Лупиться один защитный слой двойного скотча и прикрепить Iт в верхней части слоя диска. Лупиться другой защитный слой и прикрепить верхний слой на слое диска.
    3. Загрузите предварительно собранный диск в прессом и точно выровнять верх / клей / дисковые слои с использованием Совместите метки в каждом слое для подключения каждого клапана, канал и камеры. Применить конформное давление с помощью прессования машины.

3. иммуноферментный

  1. Заполните камеры с 1% -ным буфером БСА-PBS с помощью микропипетки и инкубировать диск при 37 ° С в течение 1 часа. Удалить буфер путем аспирации с помощью микропипетки. Выполните этот шаг, чтобы блокировать непрореагировавшего сайты и уменьшить неспецифической адсорбции белка на диске.
  2. Промыть два раза с 0,1% BSA-PBS путем заполнения и аспирационного камер с помощью микропипетки.
    Примечание: На этом этапе диск не может храниться при температуре 4 ° С до использования.
  3. Нагрузка 10 мкл антигена подскочили цельной крови или CRP свободной сыворотки для обнаружения CRP на диске с помощью micropipettе. Для изготовления калибровочных графиков, используют концентрации CRP от 1 пг / мл до 100 нг / мл; и cTnI от 10 пг / мл до 100 нг / мл.
    Примечание: В связи с более высоким уровнем СРБ в цельной крови, которая, как правило, в диапазоне мкМ, CRP-сыворотку использовали для демонстрации нижнего предела обнаружения устройства.
  4. Вращение диска при 3600 оборотах в минуту (391 XG) в течение 60 секунд, чтобы отделить красные кровяные клетки.
  5. Открытый клапан # 1 лазерным излучением, и перенос 4 мкл супернатанта плазмы в камере, содержащей 8 мкл обнаружения антител, конъюгированных с пероксидазой хрена, вращая диск при 2,400 оборотах в минуту в течение 3 сек.
    Примечание:. Общие способы приведения в действие клапана и визуализации работы диска подробно описаны в предыдущем докладе 21
  6. Нанести режиме смешивания (15 Гц с -1, 15 °) в течение 5 секунд для связывания белка и детекции антител.
  7. Открыть вентиль # 2, и перенесите смесь, полученную на стадии 6 к связующей реакционной камере (2400 оборотов в минуту, 3 сек). Затем применяется режим микширования (60 Гц с -1, 2 °) в течение 20 мин для достижения иммунореакции между смесью и связывания антител на TiO 2 НФ. После завершения реакции, открытый клапан # 3 и перевести остаточную смесь в камере отходов (2400 оборотов в минуту, 10 секунд).
  8. Перенести промывочным буфером (600 мкл) в реакции связывания камеры путем открытия клапана # 4 и вращающийся диск (2400 оборотов в минуту, 4 сек). Затем примените режим смешивания (30 Гц с -1, 30 °) в течение 120 секунд , чтобы вымыть TiO 2 НФ в камере.
  9. Вымойте TiO 2 НФ в два раза больше, следуя тому же условию стадии 3.8, и полностью удалить остаточный промывочный буфер, вращая диск при 2400 оборотах в минуту в течение 20 сек. Затем закройте клапан # 5.
  10. Для хемилюминесцентной реакции, применяют режим микширования (30 Гц с -1, 2 °) в течение 1 мин после передачи хемилюминесцентного раствора субстрата к переплету реакционной камере путем открытия клапана # 6 и прядениедиск при 2400 оборотах в минуту в течение 10 секунд впоследствии.
  11. Перенести Реакционный раствор субстрата с камерами обнаружения путем открытия клапана # 7 и вращающийся диск при 2400 оборотах в минуту в течение 10 сек.
  12. Мера хемилюминесценции сигналы от прореагировавшего раствора субстрата с использованием фотоумножителя (ФЭУ) модуль есть системы обнаружения.
    Примечание: Система обнаружения является несерийный машина с использованием следующих частей: шаг двигателя, оптико-механические компоненты, этапы перевода, и коммерчески доступные PMT. В оптико-механические части и шаговый двигатель собираются держать устройство, и двигатель может вращаться диск. Детектирование осуществляется ФЭУ закрепляются на оптико-механической части, и она расположена над камерами обнаружения устройства. Управляя шаговым двигателем, камеры обнаружения выровнены прямо ниже зоны обнаружения ФЭУ.

Результаты

Используя этот протокол, полностью автоматизированный центробежный микрожидкостных устройство для обнаружения белка из цельной крови с высокой чувствительностью был подготовлен. В TiO 2 NF маты были подготовлены процессы электроформования и кальцинации. Для то?...

Обсуждение

Анализ на TiO 2 NF интегрированный диск представляет собой быстрый, недорогой и удобной техникой для сверхчувствительного обнаружения низких обильных белков , присутствующих в очень небольшом объеме крови. Этот метод имеет то преимущество, что с помощью небольших объемов образцов ...

Раскрытие информации

The authors have nothing to disclose.

Благодарности

Эта работа была поддержана Национальным исследовательским фондом Кореи (NRF) грантов (2013R1A2A2A05004314, 2012R1A1A2043747), грант от Корейского медицинских технологий R & D проекта, Министерство здравоохранения и социального обеспечения (A121994) и IBS-R020-D1, финансируемой правительством Кореи.

Материалы

NameCompanyCatalog NumberComments
Si waferLG SILTRONPolished Wafer, test gradeDia. (mm) = 150, orientation = <100>, dopant = boron, RES(Ohm-cm) = 1 - 30, thickness (μm) = 650 - 700
Polycarbonate (PC) Daedong PlasticPCS#6900Thickness (mm) = 1 and 5 
Titanium tetraisopropoxide, 98%,Sigma-Aldrich205273
Polyvinylpyrrolidone, Mw = 1,300,000Sigma-Aldrich437190
Acetic acidSigma-Aldrich320099
Anhydrous ethanolSigma-Aldrich459836
Tridecafluoro-1,1,2,2-tetrahydrooctyl)-1-trichlorosilaneSigma-Aldrich448931
PDMS and curing agentDow CorningSYLGARD 184
GPDESGelest IncSIG5832.0 
EthanolJ T Baker
FE-SEMFEINova NanoSEM
X-ray photoelectron spectroscopyThermoFisherK-alpha
3D modeling machineM&I CNC Lab, KoreaCNC milling machine
Wax-dispensing machineHanra Precision Eng. Co. Ltd., KoreaCustomized
Double-sided adhesive tapeFLEXcon, USADFM 200 clear 150 POLY H-9 V-95
Cutting plotterGraphtec Corporation, JapanGraphtec CE3000-60 MK2
Spin coaterMIDASSPIN-3000D
Furnace (calcination)R. D. WEBB COMPANYWEBB 99
Rheometer (Tack test)Thermo ScientificHaake MARS III - ORM Package
Oxygen plasma systemFEMTOCUTE
Monoclonal mouse antihuman hsCRPHytest Ltd., Finland4C28(clone # C5)
Monoclonal mouse anti-cTnIHytest Ltd., Finland4T21(clone # 19C7)
HRP conjugated goat polyclonal anti-hsCRPAbcam plc., MAab19175
HRP conjugated mouse monoclonal anti-cTnIAbcam plc., MAab24460(clone # 16A11)
hsCRPAbcam plc., MAab111647
cTnIFitzgerald, MA30-AT43
Bovine AlbuminSigma-AldrichA7906
PBSAmresco IncE404
Blood collection tubesBD vacutainer367844K2 EDTA 7.2 mg plus blood
collection tubes
SuperSignal ELISA femtoInvitrogen37074
Modular multilabel plate readerPerkin ElmerEnvision 2104
Disc operating machineHanra Precision Eng. Co. Ltd., KoreaCustomized
Photomultiplier tube (PMT)Hamamatsu PhotonicsH1189-210
AutoCADAutoDeskVersion 2012Design software
SolidWorks 3D CAD software SOLIDWORKS Corp.Version 20133D Design software,
EdgecamVero softwareversion 2009.01.06928Code generating software
DeskCNCCarken Co.version 2.0.2.18CNC milling machine software

Ссылки

  1. Zhang, Y., et al. Nanomaterials for Ultrasensitive Protein Detection. Adv. Mater. 25 (28), 3802-3819 (2013).
  2. Hu, W., Li, C. M. Nanomaterial-based advanced immunoassays. Wiley Interdiscip. Rev. Nanomed. Nanobiotechnol. 3 (2), 119-133 (2011).
  3. Yang-Kyu, C., Chang-Hoon, K. Silicon Nanowire Biosensor for Cancer Markers. Biosensors and Cancer. , 164-183 (2012).
  4. Baltazar, R., Vistas, C. R., Ferreira, G. M. Biosensing Applications Using Nanoparticles. Nanocomposite Particles for Bio-Applications. , 265-282 (2011).
  5. Roy, P., Berger, S., Schmuki, P. TiO2 Nanotubes: Synthesis and Applications. Angew. Chem. Int. Ed. 50 (13), 2904-2939 (2011).
  6. Yang, D., et al. Electrospun Nanofibrous Membranes: A Novel Solid Substrate for Microfluidic Immunoassays for HIV. Adv. Mater. 20 (24), 4770-4775 (2008).
  7. Chantasirichot, S., Ishihara, K. Electrospun phospholipid polymer substrate for enhanced performance in immunoassay system. Biosens. Bioelectron. 38 (1), 209-214 (2012).
  8. Zhang, N., et al. Electrospun TiO2 Nanofiber-Based Cell Capture Assay for Detecting Circulating Tumor Cells from Colorectal and Gastric Cancer Patients. Adv. Mater. 24 (20), 2756-2760 (2012).
  9. Ali, M. A., Mondal, K., Singh, C., Dhar Malhotra, B., Sharma, A. Anti-epidermal growth factor receptor conjugated mesoporous zinc oxide nanofibers for breast cancer diagnostics. Nanoscale. 7 (16), 7234-7245 (2015).
  10. Mondal, K., Ali, M. A., Agrawal, V. V., Malhotra, B. D., Sharma, A. Highly Sensitive Biofunctionalized Mesoporous Electrospun TiO2 Nanofiber Based Interface for Biosensing. ACS Appl. Mater. Interfaces. 6 (4), 2516-2527 (2014).
  11. Tu, W., Dong, Y., Lei, J., Ju, H. Low-Potential Photoelectrochemical Biosensing Using Porphyrin-Functionalized TiO2 Nanoparticles. Anal. Chem. 82 (20), 8711-8716 (2010).
  12. Liu, S., Chen, A. Coadsorption of Horseradish Peroxidase with Thionine on TiO2 Nanotubes for Biosensing. Langmuir. 21 (18), 8409-8413 (2005).
  13. Portan, D. V., Kroustalli, A. A., Deligianni, D. D., Papanicolaou, G. C. On the biocompatibility between TiO2 nanotubes layer and human osteoblasts. J.Biomed.Mater.Res. Part A. 100 (10), 2546-2553 (2012).
  14. Dettin, M., et al. Covalent surface modification of titanium oxide with different adhesive peptides: Surface characterization and osteoblast-like cell adhesion. J. Biomed. Mater. Res. Part A. 90 (1), 35-45 (2009).
  15. Kim, W. -. J., et al. Enhanced Protein Immobilization Efficiency on a TiO2 Surface Modified with a Hydroxyl Functional Group. Langmuir. 25 (19), 11692-11697 (2009).
  16. Son, K. J., Ahn, S. H., Kim, J. H., Koh, W. -. G. Graft Copolymer-Templated Mesoporous TiO2 Films Micropatterned with Poly(ethylene glycol) Hydrogel: Novel Platform for Highly Sensitive Protein Microarrays. ACS Appl. Mater. Interfaces. 3 (2), 573-581 (2011).
  17. Kar, P., Pandey, A., Greer, J. J., Shankar, K. Ultrahigh sensitivity assays for human cardiac troponin I using TiO2 nanotube arrays. Lab Chip. 12 (4), 821-828 (2012).
  18. Agarwal, S., Wendorff, J. H., Greiner, A. Use of electrospinning technique for biomedical applications. Polymer. 49 (26), 5603-5621 (2008).
  19. Ding, B., Wang, M., Wang, X., Yu, J., Sun, G. Electrospun nanomaterials for ultrasensitive sensors. Mater. Today. 13 (11), 16-27 (2010).
  20. Liu, Y., Yang, D., Yu, T., Jiang, X. Incorporation of electrospun nanofibrous PVDF membranes into a microfluidic chip assembled by PDMS and scotch tape for immunoassays. ELECTROPHORESIS. 30 (18), 3269-3275 (2009).
  21. Lee, W. S., Sunkara, V., Han, J. -. R., Park, Y. -. S., Cho, Y. -. K. Electrospun TiO2 nanofiber integrated lab-on-a-disc for ultrasensitive protein detection from whole blood. Lab Chip. 15 (2), 478-485 (2015).
  22. Li, D., Xia, Y. Fabrication of Titania Nanofibers by Electrospinning. Nano Lett. 3 (4), 555-560 (2003).
  23. Lombard, M. . SolidWorks 2013 BIBLE. , (2013).
  24. Tickoo, S. . EdgeCAM 11.0 for Manufacturers. , (2007).
  25. Zhu, R., et al. Improved adhesion of interconnected TiO2 nanofiber network on conductive substrate and its application in polymer photovoltaic devices. Appl. Phys. Lett. 93 (1), 013102 (2008).
  26. Song, M. Y., Ahn, Y. R., Jo, S. M., Kim, D. Y., Ahn, J. -. P. TiO2 single-crystalline nanorod electrode for quasi-solid-state dye-sensitized solar cells. Appl. Phys. Lett. 87 (11), 113113 (2005).
  27. Katsuhiro, O., et al. Electrospinning processed nanofibrous TiO2 membranes for photovoltaic applications. Nanotechnology. 17 (4), 1026-1031 (2006).

Перепечатки и разрешения

Запросить разрешение на использование текста или рисунков этого JoVE статьи

Запросить разрешение

Смотреть дополнительные статьи

110TiO 2

This article has been published

Video Coming Soon

JoVE Logo

Конфиденциальность

Условия эксплуатации

Политика

СВЯЖИТЕСЬ С НАМИ

РЕКОМЕНДОВАТЬ БИБЛИОТЕКЕ

НОВОСТИ JoVE

Исследования

Образование

АВТОРЫ

Библиотекарь

О JoVE

Авторские права © 2025 MyJoVE Corporation. Все права защищены