Модель апикальной резекции в сердце взрослого Xenopus tropicalis

Резюме

Xenopus tropicalis является идеальной моделью для регенеративных исследований, поскольку многие из его органов обладают замечательной регенеративной способностью. Здесь мы представляем метод построения модели повреждения сердца у X. tropicalis с помощью резекции вершины.

Аннотация

Известно, что у взрослых млекопитающих сердце утратило свою регенеративную способность, что делает сердечную недостаточность одной из основных причин смерти во всем мире. Предыдущие исследования продемонстрировали регенеративную способность сердца взрослого Xenopus tropicalis, беснулевой амфибии с диплоидным геномом и тесной эволюционной связью с млекопитающими. Кроме того, исследования показали, что после резекции верхушки желудочка сердце может регенерировать без рубцевания у X. tropicalis. Следовательно, эти предыдущие результаты свидетельствуют о том, что X. tropicalis является подходящей альтернативной моделью позвоночных для изучения регенерации сердца у взрослых. Здесь представлена хирургическая модель регенерации сердца у взрослой особи X. tropicalis. Вкратце, лягушки были обезболены и зафиксированы; Затем был сделан небольшой разрез ножницами для иридэктомии, проникающий в кожу и перикард. На желудочек оказывалось легкое давление, а затем ножницами вырезали верхушку желудочка. Повреждение сердца и регенерация были подтверждены гистологией через 7-30 дней после резекции (ДПР). Этот протокол установил модель апикальной резекции у взрослых X. tropicalis, которая может быть использована для выяснения механизмов регенерации сердца у взрослых.

Введение

Сердечная недостаточность является основной причиной смертности во всем мире в последние годы. С 2000 года число смертей от сердечной недостаточности со временем увеличивается. В 2019 году от кардиомиопатии умерло более 9 миллионов человек, что составило 16% от общего числа смертей во всем^мире1. Из-за потери регенеративной способности сердца у взрослых млекопитающих в некоторых случаях не хватает кардиомиоцитов для поддержания сократительных функций в сердце, что влияет на функцию сердца и способствует аномальному ремоделированию желудочков и сердечной недостаточности ^2,....

протокол

Все экспериментальные протоколы, связанные с X. tropicalis , были одобрены Комитетом по уходу за животными Цзинаньского университета.

1. Хирургия

1. Предоперационная подготовка: Держите наготове офтальмологические ножницы, офтальмологические щипцы, игольчатые щипцы, абсорбирующие шарики, фильтровальную бумагу и хирургические швы/иглы для резекции вершины сердца X. tropicalis. Подробную информацию см. в Таблице материалов . Перед использованием стерилизуйте все хирургические инструменты путем автоклавирования и подготовьте достаточное количество льда для будущего использован....

Результаты

Сердечки были собраны в 0 днр, 7 днр, 14 днр и 30 днр. Морфологический анализ показал, что сгусток крови, вызванный повреждением сердца, исчез через 30 дней (рис. 2). При этом появление сердец на 30 дпр в группе резекции было аналогично появлению сердец в бутафорской оперативной г.......

Обсуждение

Апикальная резекция, которая включает хирургическую ампутацию верхушки сердца, была описана у рыбок данио-рерио и мышей ^6,18; однако это не было описано в X. tropicalis. В этом отчете описывается достоверная модель сердечной травмы и демонстрируется, что се?.......

Материалы

Name	Company	Catalog Number	Comments
Acetic acid	GHTECH	64-19-7-500ml
Acid Alcohol Fast Differentiation Solution	Beyotime	C0163M
Acid Fuchsin	aladdin	A104916
Alcohol Soluble Eosin Y Stainin Solution	Servicebio	G1001-500ML
BioReagent	Beyotime	ST2600-100g
Ethanol absolute	Guangzhou Chemical Reagent Factory	HB15-GR-0.5L
Hematoxylin Stain Solution	Servicebio	G1004-500ML
Neutral balsam	Solarbio	G8590
Operating Scissors	Prosperich	HC-JZ-YK-Z-10cm
Paraffins	Leica	39601095
Para-formaldehyde Fixative	Servicebio	G1101-500ML
Phosphate Buffered Saline (PBS) powder	Servicebio	G0002-2L
Phosphomolybdic acid hydrate	Macklin	P815551
Stereo microscope	Leica
surgical forceps	ChangZhou	zfq-11-btjw
Surgical Suture	HUAYON	18-5140
Tricaine	Macklin
Xylene	Guangzhou Chemical Reagent Factory	IC02-AR-0.5L