Wellcome Trust для обеспечения открытого доступа к финансированию Оксфордского университета. Роберт Дикон является членом группы Оксфорда Oxion, финансируемого Wellcome Trust грант WT084655MA.

1. Аппарат Перевернутый экран 1,1 Kondziela-испытатель Перевернутый экран 43 см квадрат сетки, состоящие из квадратов 12 мм диаметром 1 мм провода (рис. 1). Он окружен 4 см в глубину деревянный бисер (который предотвращает случайное мышь, которая пытается от восхождение на другой стороне) (рис. 2). 1,2 гирь Семь веса составляют аппарата. Каждая состоит из шара запутанные штраф калибровочной проволоки из нержавеющей стали, &quot;масштаб коллектор&quot;, используемое для предотвращения образования накипи известняка во внутреннем чайники. Вес этого мал (7 г), но каждой шкале коллектор присоединен к серии стали звеньев цепи, каждый весом около 13 г. Число звеньев в диапазоне от 6:59. Их вес, следовательно: 20, 33, 46, 59, 72, 85 и 98 г (рис. 3 и 4). 2. Профессиональныйпроцедура Для всех тестов принести мышей к экспериментальной комнате 5-20 мин до начала испытания, чтобы убедиться, что они должным образом проснулся. Как правило, чтобы позволить восстановление мышечной силы и возвращение к нормальному уровню возбуждения, отдохнуть мышей Вернуться на домашнюю клетку после каждого испытания двигателя. <ol><li> Перевернутый экран Kondziela-испытатель </li><li> Процедура: Место мыши в центре экрана сетки, начать StopClock, поворачивать экран в перевернутом положении более 2 сек, с головой мыши снижается в первую очередь. Возьмитесь за дисплей стабильно 40-50 см над мягкой поверхностью. Обратите внимание тот момент, когда мышь падает, или удалить его, когда критерий течение 60 сек будет достигнута. Более длительное время критерий может быть полезен для некоторых экспериментов. </li><li> Забив перевернутого экрана: </li></ol> Падение в диапазоне 1-10 сек = 1 Падение между 11-25 сек = 2 Падение возрасте 26-60 сек = 3 Падение через 60 сек = 4 Или, например, в течение 2 мин: Падение в диапазоне 1-10 сек = 1 Падение между 11-25 сек = 2 Падение возрасте 26-60 сек = 3 Падение между 61-90 сек = 4 Падение после 90 сек = 5 3. Гирь Держите мышь к середине / основания хвоста и опустите его, чтобы позволить ему понять первый вес (20 г), который лежит на лабораторном столе. Как захватывает коллектора провод шкала с передними лапами, начать Остановить часы и поднять мышь, пока ссылка не освободится от скамьи. Трюме трех секунд является критерием. Если мышь падает вес менее чем за 3 сек, заметьте время она провела веса. Установить курсор мыши в течение примерно 10 сек и попробовать его на весу еще раз. Если она не в три раза, что завершает судебное разбирательство, и мышь присваивается максимальное время / вес достигнут. Если он удерживает его в течение 3 секунд, то попробуйте его на следующий тяжелый вес. Если он снимает это на 3 секунды, проверить его на следующий тяжелый вес, после того, какпроверили все его cagemates на первом веса. Опять же, это дается три попытки, чтобы удержать вес на 3 сек. Окончательный общий балл рассчитывается как произведение количества звеньев в тяжелой цепи, предназначенные для полного 3 сек, умноженной на время (сек) она проводится. Если тяжелый вес упал до 3 сек соответствующее промежуточное значение рассчитывается. Таким образом, мышь держит 5-ссылка вес в течение 3 секунд, но не может поднимать 6-ссылка вес, присваивается балл (5 х 3) = 15. Если он держит 6-Link веса в течение 1 секунды, она набирает (5 х 3) + (1) = 16. Иногда мышей могут быть недостаточно мотивирован, чтобы захватить аппарат. Как правило, это происходит у животных старшего возраста. Эта проблема может быть сведено к минимуму путем проведения мышей за хвост течение более длительного времени до приведения его в захватывающий расстояние провод мяча.

<ol>
	<li>Bulfield, G., Siller, W. G., Wight, P. A., Moore, <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=K.J.X+chromosome-linked+muscular+dystrophy+(mdx)+in+the+mouse.">K.J.X chromosome-linked muscular dystrophy (mdx) in the mouse.</a> Proc. Natl. Acad. Sci. U.S.A. 81, 1189-1192 (1984).</li><li>Contet, C., Rawlins, J. N. P., Deacon, R. M. J. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=A+comparison+of+129S2/SvHsd+and+C57BL/6JOlaHsd+mice+on+a+test+battery+assessing+sensorimotor,+affective+and+cognitive+behaviours:+implications+for+the+study+of+genetically+modified+mice.">A comparison of 129S2/SvHsd and C57BL/6JOlaHsd mice on a test battery assessing sensorimotor, affective and cognitive behaviours: implications for the study of genetically modified mice.</a> Behavioural Brain Research. 124, 33-46 (2001).</li><li>Deacon, R. M. J., Brook, R. C., Meyer, D., Haeckel, O., Ashcroft, F. M., Miki, T., Seino, S., Liss, B. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Behavioral+phenotyping+of+mice+lacking+the+KATP+channel+subunit+Kir6.2.">Behavioral phenotyping of mice lacking the KATP channel subunit Kir6.2.</a> Physiol. Behav. 87, 723-733 (2006).</li><li>Deacon, R. M. J., Croucher, A., Rawlins, J. N. P. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Hippocampal+cytotoxic+lesion+effects+on+species-typical+behaviors+in+mice.">Hippocampal cytotoxic lesion effects on species-typical behaviors in mice.</a> Behav. Brain Res. 132, 203-213 (2002).</li><li>Rawlins, J. N. P., Morley, B. J. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=A+comparison+of+the+behavior+of+C57BL/6+and+C57BL/10+mice.">A comparison of the behavior of C57BL/6 and C57BL/10 mice.</a> Behav. Brain Res. 179, 239-247 (2007).</li><li>Guenther, K., Deacon, R. M. J., Perry, V. H., Rawlins, J. N. P. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Early+behavioural+changes+in+scrapie-affected+mice+and+the+influence+of+dapsone.">Early behavioural changes in scrapie-affected mice and the influence of dapsone.</a> Eur. J. Neurosci. 14, 401-409 (2001).</li><li>Kondziela, W. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Eine+neue+method+zur+messung+der+muskularen+relaxation+bei+weissen+mausen.">Eine neue method zur messung der muskularen relaxation bei weissen mausen.</a> Arch. Int. Pharmacodyn. 152, 277-284 (1964).</li></ol>

Нет конфликта интересов объявлены.

Мышиные модели из многих заболеваний, поражающих человека двигательных систем постоянно развивается, поэтому хорошо анализов силы у мышей имеют важное значение. Примеры включают в себя многие формы мышечной дистрофии, болезни Паркинсона и хореи Гентингтона. Сила анализы также находят применение в моделях регенерацию нерва после спинальной или периферийные повреждения нерва. Промышленные и автомобильные аварии продолжают вызывать значительные инвалидности для людей, но гораздо доклинические работы в настоящее время расследование возможных путей лечения, основанный на нервные факторы роста. Мышцы никогда не работают по отдельности. Они активируются в мозге, местные или выше спинальных рефлексов, через нервно-мышечных синапсах и работы в рамках ограничений других мышц и скелетной системы. Таким образом, сложность системы означает Исследования in vivo мускульной силы в активном животные играют важную роль в оценке его нынешнего состояния и ЭффеCTS любого предполагаемого лечения. Мыши инстинктивно держаться материалов с сильной хваткой, таким образом, Mus мышцы является идеальным животной модели, в которых для оценки нарушения мышечной силы и возможные методы лечения.

Для мирянина, идея измерения силы у мышей может показаться абсурдным, даже что-то из оксюморон. Тем не менее, это не без основания, что дом / лабораторные мыши были названы в Mus мышцы. На самом деле они имеют очень высокую прочность / вес, больший, чем у крыс. Например, взрослых мышей может легко поддерживать свой собственный вес тела, даже с использованием только передних или задних лапах, очень мало взрослых крыс лаборатории может этого сделать. Мыши играют все большую роль в биомедицинских исследованиях. Они могут быть использованы для моделирования многих человеческих двигательных расстройств, как соматические и центральной нервной системы в происхождении. Первые включают более тридцати форм наследственной мышечной дистрофии 1 и миастения, в то время как примерами последнего являются рассеянный склероз, спинальную мышечную атрофию, болезнь Паркинсона, болезнь Гентингтона и боковой амиотрофический склероз. Для всех этих моделей, в полной мере оценить свои дефициты двигатель должен включать конкретные тестыпрочности.

measuring the strength of mice

Kondziela 7 разработана перевернутой тест экрана и опубликовал его в 1964 году. Это испытание силы мышц с использованием всех четырех конечностей. Большинство нормальных мышей легко набрать максимум на себя эту задачу, это быстро, но нечувствительным валового экрана, а вес испытания, описанного в этой статье, обеспечивают более тонкую мера мышечной силы. Есть также несколько тензометрических основе Части аппарата коммерчески доступными, что обеспечит больше данных, чем градуированных перевернутой тест экрана, но их стоимость может поставить их вне досягаемости многих лабораторий, которые не специализируются на испытания на прочность. Поэтому в 2000 году простой и дешевый аппарат был разработан автором. Она состоит из ряда звеньев цепи возрастающей длины, прикрепленный к &quot;Меховой коллектор&quot; шар тонкой проволочной сетки продаются для предотвращения накипи в регионах с жесткой водой. Случайного наблюдения показали, что мыши могут захватить эти очень плотно, так что они оказались идеальными как сцепление ПуанкареТ для тяжелой атлетики аппарата. Общим недостатком с коммерческими Измерители прочности является то, что в баре или другая особенность власть не достаточно тонкими для мышей, чтобы оказывать максимальное сцепление. Как правило, чем тоньше провод или баре, тем лучше мышь может захватить с его небольшими когтями. Это чистая проба сил, хотя, как для любого теста мотивационные факторы потенциально могли бы играть роль. Использование масштаба коллекционеры, однако, кажется, чтобы минимизировать мотивационные проблемы, как мотивация, кажется, очень высокие для большинства нормальных молодых взрослых мышей.

Ожидаемые результаты Contet соавт. 2 показано, что 129S2/sv мышам проводили аналогичным образом на веса теста на мышах C57BL / 6. Самки мышей C57BL / 6 забил около 15, 129 17 мышей, который означает, что они могли бы поднять около 5 звеньев цепи, около 70 гр. Это высокое значение, обычно 2-3 звеньев цепи (оценка 6-9, 33-46 г) поднимаются мышей C57BL / 6 5. Эти различия предположительно связанных с такими факторами, как, сколько обработке мышей получили и технических деталей экспериментатора. Поражениях гиппокампа не влияет сила, измеренная либо гирь или перевернутой 4 экрана. Прионами (скрепи) больных мышей были нарушены на перевернутый экран на 18 недель после заражения 6. Хотя несколько обесцененные на турнике и Rotarod относительно мышей C57BL / 6, C57BL/10 мышей не обесцененные по тяжелой атлетике 5. Нокаут мышей тОн КАТП канала субъединицы Kir6.2 возможной к взысканию на перевернутый экран или тяжелая атлетика тесты, хотя забил больше женщин, чем мужчин на последнем 3. Это было необычно, как правило, тяжелее мужчины проявляют большую прочность, чем женщин. <img alt="Рисунок 1" src="/files/ftp_upload/2610/2610fig1.jpg" /> Рисунок 1. Перевернутом экране. <img alt="Рисунок 2" src="/files/ftp_upload/2610/2610fig2.jpg" /> Рисунок 2. Закройте представление мыши на перевернутом экране. <img alt="Рисунок 3" src="/files/ftp_upload/2610/2610fig3.jpg" /> Рисунок 3. Массы, в диапазоне от 20 г до 98 г. <img alt="Рисунок 4" src="/files/ftp_upload/2610/2610fig4.jpg" /> <strong&gt; Рисунок 4. Мышью тяжелой атлетике.

Watch this Scientific Journal Video about Measuring the Strength of Mice at JoVE.com

Measuring the Strength of Mice

Дефицит мышечной силы происходит во многих клинических условий, таких как болезни двигательных нейронов. Перевернутый экран и испытаний вес подъемного описанные здесь мера силы у мышей почти исключительно с минимальным влиянием таких факторов, как координации.

Измеритель прочности Мыши

Kondziela7 devised the inverted screen test and published it in 1964. It is a test of muscle strength using all four limbs. Most normal mice easily score ...

Research

JoVE Journal

Medicine

53.5K Views.  University of Oxford. Дефицит мышечной силы происходит во многих клинических условий, таких как болезни двигательных нейронов. Перевернутый экран и испытаний вес подъемного описанные здесь мера силы у мышей почти исключительно с минимальным влиянием таких факторов, как координа...

Video: Measuring the Strength of Mice

Transthoracic Echocardiography in Mice

In recent years, murine models have become the primary avenue for studying the molecular mechanisms of cardiac dysfunction resulting from changes in gene expression. Transgenic and gene targeting methods can be used to generate mice with altered cardiac size and function,1-3 and as a result, in vivo techniques are needed to evaluate their cardiac phenotype. Transthoracic echocardiography, pulse wave Doppler (PWD), and tissue Doppler imaging (TDI) can be used to provide dimensional measurements of the mouse heart and to quantify the degree of cardiac systolic and diastolic performance. Two-dimensional imaging is used to detect abnormal anatomy or movements of the left ventricle, whereas M-mode echo is used for quantification of cardiac dimensions and contractility.4,5 In addition, PWD is used to quantify localized velocity of turbulent flow,6 whereas TDI is used to measure the velocity of myocardial motion.7 Thus, transthoracic echocardiography offers a comprehensive method for the noninvasive evaluation of cardiac function in mice.

Transthoracic echocardiography offers a noninvasive method for the evaluation of cardiac function in mice. A combination of ultrasound and Doppler imaging modalities can be used to obtain dimensional measurements of the heart and intracardiac blood flow, which together provide an assessment of cardiac systolic and diastolic performance.

Трансторакальной эхокардиографии у мышей

In recent years, murine models have become the primary avenue for studying the molecular mechanisms of cardiac dysfunction resulting from changes in gene ...

Manual Muscle Testing:  A Method of Measuring Extremity Muscle Strength Applied to Critically Ill Patients

Survivors of acute respiratory distress syndrome (ARDS) and other causes of critical illness often have generalized weakness, reduced exercise tolerance, and persistent nerve and muscle impairments after hospital discharge.1-6 Using an explicit protocol with a structured approach to training and quality assurance of research staff, manual muscle testing (MMT) is a highly reliable method for assessing strength, using a standardized clinical examination, for patients following ARDS, and can be completed with mechanically ventilated patients who can tolerate sitting upright in bed and are able to follow two-step commands. 7, 8 
This video demonstrates a protocol for MMT, which has been taught to &ge;43 research staff who have performed &gt;800 assessments on &gt;280 ARDS survivors. Modifications for the bedridden patient are included. Each muscle is tested with specific techniques for positioning, stabilization, resistance, and palpation for each score of the 6-point ordinal Medical Research Council scale.7,9-11 Three upper and three lower extremity muscles are graded in this protocol: shoulder abduction, elbow flexion, wrist extension, hip flexion, knee extension, and ankle dorsiflexion. These muscles were chosen based on the standard approach for evaluating patients for ICU-acquired weakness used in prior publications. 1,2.

Survivors of acute respiratory distress syndrome (ARDS) and critical illness frequently develop long-lasting muscle weakness. Manual muscle testing (MMT) is a standardized clinical examination commonly used to measure strength of peripheral skeletal muscle groups. This video demonstrates MMT using the 6-point Medical Research Council scale.

Руководство Тестирование мышц: метод измерения силы мышц конечностей Применяют для критически больных пациентов

Survivors of acute respiratory distress syndrome (ARDS) and other causes of critical illness often have generalized weakness, reduced exercise tolerance, ...

Orthotopic Aortic Transplantation in Mice for the Study of Vascular Disease

Vascular procedures involving anastomoses in the mouse are generally thought to be difficult and highly dependent on the skill of the individual surgeon. This is largely true, but there are a number of important principles that can reduce the difficulty of these procedures and enhance reproducibility. Orthotopic aortic transplantation is an excellent procedure in which to learn these principles because it involves only two end-to-end anastomoses, but requires good suturing technique and handling of the vessels for consistent success. This procedure begins with the procurement of a length of abdominal aorta from a donor animal, followed by division of the native aorta in the recipient. The procured aorta is then placed between the divided ends of the recipient aorta and sutured into place using end-to-end anastomoses. To accomplish this objective successfully requires a high degree of concentration, good tools, a steady hand, and an appreciation of how easily the vasculature of a mouse can be damaged, resulting in thrombosis. Learning these important principles is what occupies most of the beginner's time when learning microsurgery in small rodents. Throughout this protocol, we refer to these important points. This model can be used to study vascular disease in a variety of different experimental systems1-8. In the context shown here, it is most often used for the study of post-transplant vascular disease, a common long-term complication of solid organ transplantation in which intimal hyperplasia occurs within the allograft. The primary advantage of the model is that it facilitates quantitative morphometric analyses and the transplanted vessel lies contiguous to the endogenous vessel, which can serve as an additional control9. The technique shown here is most often used for mice weighing 18-25 grams. We have accumulated most of our experience using the C57BL/6J, BALB/cJ, and C3H/HeJ strains.

We describe a technique in which a section of the abdominal aorta from a mouse is transplanted orthotopically to just below the renal arteries in an allogeneic or syngeneic recipient. This technique can be useful in studies in which transplantation of large arteries of uniform size is deemed advantageous.

Ортотопической трансплантации аорты у мышей для изучения сосудистых заболеваний

Vascular procedures involving anastomoses in the mouse are generally thought to be difficult and highly dependent on the skill of the individual surgeon. ...

Measuring Ascending Aortic Stiffness In Vivo in Mice Using Ultrasound

We present a protocol for measuring in vivo aortic stiffness in mice using high-resolution ultrasound imaging. Aortic diameter is measured by ultrasound and aortic blood pressure is measured invasively with a solid-state pressure catheter. Blood pressure is raised then lowered incrementally by intravenous infusion of vasoactive drugs phenylephrine and sodium nitroprusside. Aortic diameter is measured for each pressure step to characterize the pressure-diameter relationship of the ascending aorta. Stiffness indices derived from the pressure-diameter relationship can be calculated from the data collected. Calculation of arterial compliance is described in this protocol.
This technique can be used to investigate mechanisms underlying increased aortic stiffness associated with cardiovascular disease and aging. The technique produces a physiologically relevant measure of stiffness compared to ex vivo approaches because physiological influences on aortic stiffness are incorporated in the measurement. The primary limitation of this technique is the measurement error introduced from the movement of the aorta during the cardiac cycle. This motion can be compensated by adjusting the location of the probe with the aortic movement as well as making multiple measurements of the aortic pressure-diameter relationship and expanding the experimental group size.

Measuring Ascending Aortic Stiffness In Vivo in Mice Using Ultrasound

We describe a technique for measuring aortic stiffness from its pressure-diameter relationship in vivo in mice. Aortic diameter is recorded by ultrasound and aortic pressure is measured invasively with a solid-state pressure catheter. Blood pressure is changed incrementally and the resulting diameter is measured.

Измерение восходящей аорты жесткость<em&gt; В Vivo</em&gt; У мышей с помощью ультразвука

We present a protocol for measuring in vivo aortic stiffness in mice using high-resolution ultrasound imaging. Aortic diameter is measured by ultrasound ...

Adapted Resistance Training Improves Strength in Eight Weeks in Individuals with Multiple Sclerosis

Hip weakness is a common symptom affecting walking ability in people with multiple sclerosis (MS). It is known that resistance strength training (RST) can improve strength in individuals with MS, however; it remains unclear the duration of RST that is needed to make strength gains and how to adapt hip strengthening exercises for individuals of varying strength using only resistance bands. This paper describes the methodology to set up and implement an adapted resistance strength training program, using resistance bands, for individuals with MS. Directions for pre- and post-strength tests to evaluate efficacy of the strength-training program are included. Safety features and detailed instructions outline the weekly program content and progression. Current evidence is presented showing that significant strength gains can be made within 8 weeks of starting a RST program. Evidence is also presented showing that resistance strength training can be successfully adapted for individuals with MS of varying strength with little equipment.

Hip weakness is a common symptom affecting walking ability in people with multiple sclerosis. Isolated muscle strengthening is a useful method to target specific weaknesses. This protocol describes a progressive resistance-training program using exercise bands to increase hip muscle strength.

Адаптированный Сопротивление Обучение повышает прочность в восемь недель у лиц с рассеянным склерозом

Hip weakness is a common symptom affecting walking ability in people with multiple sclerosis (MS). It is known that resistance strength training (RST) can ...

Improving Strength, Power, Muscle Aerobic Capacity, and Glucose Tolerance through Short-term Progressive Strength Training Among Elderly People

This protocol describes the simultaneous use of a broad span of methods to examine muscle aerobic capacity, glucose tolerance, strength, and power in elderly people performing short-term resistance training (RET). Supervised progressive resistance training for 1 h three times a week over 8 weeks was performed by RET participants (71&#177;1 years, range 65-80). Compared to a control group without training, the RET showed improvements on the measures used to indicate strength, power, glucose tolerance, and several parameters of muscle aerobic capacity. Strength training was performed in a gym with only robust fitness equipment. An isokinetic dynamometer for knee extensor strength permitted the measurement of concentric, eccentric, and static strength, which increased for the RET group (8-12% post- versus pre-test). The power (rate of force development, RFD) at the initial 0-30 ms also showed an increase for the RET group (52%). A glucose tolerance test with frequent blood glucose measurements showed improvements only for the RET group in terms of blood glucose values after 2 h (14%) and the area under the curve (21%). The blood lipid profile also improved (8%). From muscle biopsy samples prepared using histochemistry, the amount of fiber type IIa increased, and a trend towards a decrease in IIx in the RET group reflected a change to a more oxidative profile in terms of fiber composition. Western blot (to determine the protein content related to the signaling for muscle protein synthesis) showed a rise of 69% in both Akt and mTOR in the RET group; this also showed an increase in mitochondrial proteins for OXPHOS complex II and citrate synthase (both ~30%) and for complex IV (90%), in only the RET group. We demonstrate that this type of progressive resistance training offers various improvements (e.g., strength, power, aerobic capacity, glucose tolerance, and plasma lipid profile).

The effect of short-term resistance training on elderly people was investigated through the simultaneous use of several methods. Compared to a control group, many improvements were seen, including on muscle aerobic capacity, glucose tolerance, strength, power, and muscle quality (i.e., protein involved in cell signaling and muscle fiber type composition).

Улучшение силы, силы, мышечной аэробной способности и толерантности к глюкозе благодаря краткосрочной прогрессивной силовой тренировке среди пожилых людей

This protocol describes the simultaneous use of a broad span of methods to examine muscle aerobic capacity, glucose tolerance, strength, and power in ...

Measuring the Effect of Chemicals on the Growth and Reproduction of Caenorhabditis elegans

Toxicological evaluation is crucial for understanding the effects of chemicals on living organisms in basic and applied biological science fields. A non-mammalian soil round worm, Caenorhabditis elegans, is a valuable model organism for toxicology studies due to its convenience and lack of animal ethics issues compared with mammalian animal systems. In this protocol, a detailed procedure of toxicological evaluation of chemicals in C. elegans is described. A clinical anticancer drug, etoposide, which targets human topoisomerase II and inhibits DNA replication of human cancer cells, was selected as a model testing chemical. Age-synchronized C. elegans eggs were exposed to either dimethyl sulfoxide (DMSO) or etoposide, and then the growth of C. elegans was monitored every day for 4 days by the stereo microscope observation. The total number of eggs laid from C. elegans treated with DMSO or etoposide was also counted by using the stereo microscope. Etoposide treatment significantly affected the growth and reproduction of C. elegans. By comparison of the total number of eggs laid from worms with different treatment periods of chemicals, it can be decided that the reproductive toxicity of chemicals on C. elegans reproduction is reversible or irreversible. These protocols may be helpful for both the development of various drugs and risk assessment of environmental toxicants.

Measuring the Effect of Chemicals on the Growth and Reproduction of Caenorhabditis elegans

A basic protocol to evaluate the toxicity of chemicals in a model animal, Caenorhabditis elegans, is described. The method is convenient and useful for the development of pharmaceuticals as well as for the risk assessment of various environmental pollutants.

Измерение воздействия химических веществ на рост и размножение Caenorhabditis elegans

Toxicological evaluation is crucial for understanding the effects of chemicals on living organisms in basic and applied biological science fields. A ...

Blood Collection Through Subclavian Vein Puncture in Mice

The mouse is the foremost mammalian model for studying human disease and human health. However, blood sample collection from mice is challenging in research work. Tail blood collection is a popular method when a small amount of blood sample is needed. Orbital artery could be considered if a large amount of blood is needed but this blood collection method has ethical issues. Formerly, we demonstrated the feasibility and safety of blood sample collection through subclavian vein puncture in rats, and here we investigate whether this method could be used in mice. We report that this method is safe and practical for blood collection in mice. Blood collection through the subclavian vein puncture in mice can be a convenient method in daily research works.

Here, we present a protocol to take blood samples from the subclavian vein of mice.

Сбор крови через Субключичную Вену пункцию у мышей

The mouse is the foremost mammalian model for studying human disease and human health. However, blood sample collection from mice is challenging in ...

Measuring the Effects of Bacteria and Chemicals on the Intestinal Permeability of Caenorhabditis elegans

In living organisms, intestinal hyperpermeability is a serious symptom that leads to many inflammatory bowel diseases (IBDs). Caenorhabditis elegans is a nonmammalian animal model that is widely used as an assay system due to its short lifespan, transparency, cost-effectiveness, and lack of animal ethics issues. In this study, a method was developed to investigate the effects of different bacteria and 3,3'-diindolylmethane (DIM) on the intestinal permeability of C. elegans with a high-throughput image analysis system. The worms were infected with different gut bacteria or cotreated with DIM for 48 h and fed with fluorescein isothiocyanate (FITC)-dextran overnight. Then, the intestinal permeability was examined by comparing the fluorescence images and the fluorescence intensity inside the worm bodies. This method may also have the potential to identify probiotic and pathogenic intestinal bacteria that affect intestinal permeability in the animal model and is effective for examining the effects of harmful or health-promoting chemicals on intestinal permeability and intestinal health. However, this protocol also has some considerable limitations at the genetic level, especially for determining which genes are altered to control illness, because this method is mostly used for phenotypic determination. In addition, this method is limited to determining exactly which pathogenic substrates cause inflammation or increase the permeability of the worms' intestines during infection. Therefore, further in-depth studies, including investigation of the molecular genetic mechanism using mutant bacteria and nematodes as well as chemical component analysis of bacteria, are required to fully evaluate the function of bacteria and chemicals in determining intestinal permeability.

Measuring the Effects of Bacteria and Chemicals on the Intestinal Permeability of Caenorhabditis elegans

This protocol describes how to measure intestinal permeability of Caenorhabditis elegans. This method is helpful for basic biological research on intestinal health related to the interaction between intestinal bacteria and their host and for screening to identify probiotic and chemical agents to cure leaky gut syndrome and inflammatory bowel diseases.

Измерение воздействия бактерий и химических веществ на кишечную проницаемость Caenorhabditis elegans

In living organisms, intestinal hyperpermeability is a serious symptom that leads to many inflammatory bowel diseases (IBDs). Caenorhabditis elegans is a ...

Repeated Orotracheal Intubation in Mice

The literature describes several methods for mouse intubation that either require visualization of the glottis through the oral cavity or incision in the ventral neck for direct confirmation of cannula placement in the trachea. The relative difficulty or the tissue trauma induced to the subject by such procedures can be an impediment to an investigator&#8217;s ability to perform longitudinal studies. This article illustrates a technique in which physical manipulation of the mouse following the use of a depilatory to remove hair from the ventral neck permits transcutaneous visualization of the trachea for orotracheal intubation regardless of degree of skin pigmentation. This method is innocuous to the subject and easily achieved with a limited understanding of murine anatomy. This refined approach facilitates repeated intubation, which may be necessary for monitoring progression of disease or instillation of treatments. Using this method may result in a reduction of the number of animals and technical skill required to measure lung function in mouse models of respiratory disease.

The goal of this article is to describe a refined method of intubation of the laboratory mouse. The method is noninvasive and, therefore, ideal for studies that require serial monitoring of respiratory function and/or instillation of treatments into the lung.

Повторная интубация оротрахии у мышей

The literature describes several methods for mouse intubation that either require visualization of the glottis through the oral cavity or incision in the ...