Модель хронического отчаяния представляет собой подходящую модель для индукции хронического депрессивного состояния у мышей, чтобы лучше понять путь физиологии расстройств настроения и оценить потенциальные антидепрессивные лечебные вмешательства. Повторяющийся стресс используется, чтобы вызвать депрессивное состояние, следуя идее, что у людей депрессия вызвана хроническим, а не острым стрессом. Поскольку эффекты индукции CDM стабильны в течение четырех недель, можно исследовать не только быстродействующие антидепрессанты, но и вещества с отсроченным началом, как большинство обычных антидепрессантов.
Прежде чем вызвать хроническое депрессивное состояние, визуально наблюдайте за мышами на наличие аномалий, включая признаки укусов или парикмахерских. Исключите всю клетку из экспериментальной серии, если у животного проявляются признаки травмы. Чтобы выполнить парные параметрические тесты впоследствии, убедитесь, что каждая мышь четко обозначена или помечена.
Дополнительно взвесьте каждую мышь перед началом эксперимента. Для выполнения сеанса форсированного плавания наполните стакан или цилиндр водой комнатной температуры на высоту не менее 20 сантиметров от дна, оставив между поверхностью воды и верхней границей сосуда не менее 10 сантиметров. Затем аккуратно перенесите мышь в воду и установите таймер на 10 минут.
Чтобы мышь не утонула, непрерывно наблюдайте за мышью, пока она находится в воде, из положения, когда она не может видеть экспериментатора. Через 10 минут вытащите мышь из воды, просто схватив ее за хвост. Аккуратно высушите мышь бумажным полотенцем и положите ее либо под нагревательный свет, либо на нагревательный коврик.
Выполняйте принудительный сеанс плавания на каждой мыши каждый день в течение пяти дней подряд. После пяти сеансов плавания переведите животных обратно в их домашние клетки и дайте им отдохнуть не менее двух дней. Чтобы использовать время неподвижности в качестве метода считывания, записывайте каждый сеанс плавания с помощью камеры.
Затем посмотрите оффлайн-видеозаписи и используйте секундомер, чтобы измерить общее время, проведенное мышью в трех различных поведенческих условиях во время теста на плавание, борьба, плавание и неподвижность. Животное считается борющимся, когда оно активно пытается вырваться из угрожающей ситуации. Это включает в себя лапу боковой части цилиндра с головкой, ориентированной на стену, и перемещение всех конечностей.
Водная гладь, как правило, слегка турбулентная. Считается, что животное плавает, когда оно двигается, по крайней мере, как прячет лапы, так и путешествует на расстояние по воде. Он активно ищет выход, но не поднимает лапы над поверхностью воды и не пытается преодолеть стеклянную стенку сосуда.
В этом состоянии животные часто поворачиваются или передвигаются по кругу. Наконец, считается, что животное находится в стадии неподвижности. Если он держится неподвижно в морозоподобном положении и вообще не двигается, или только двигает хвостом, или передними лапами, чтобы держать голову над поверхностью воды, не проходит никакого активного расстояния, кроме пассивного плавания, и не наблюдается направленного движения передних лап.
В индукционной фазе модели хронического отчаяния во время первого сеанса плавания мыши обычно показывают среднее время неподвижности между 190 и 230 секундами, которое затем постоянно увеличивается с каждым дополнительным сеансом плавания. Время неподвижности, измеренное на пятый день, остается стабильным в течение четырех недель, что указывает на стабильное поведенческое отчаяние. Антидепрессивные вмешательства, такие как имипрамин, лишение сна и кетамин, значительно сокращают время неподвижности.
При этом лишение сна в сочетании с восстановительным сном не показывает существенного изменения депрессивно-подобного фенотипа. Поскольку каждая группа лечения имеет разные средние значения времени неподвижности на пятый день, различные методы лечения следует сравнивать с использованием нормализованных средних значений вместо абсолютных значений. Если время неподвижности остается неизменным в течение всех пяти дней, примененный стресс не может соответствующим образом изменить поведение, и, таким образом, эти мыши не могут быть использованы для оценки эффектов лечения.
Другие методы считывания, такие как тест на подвешивание хвоста, тест на предпочтение сахарозы в нос и оценка долгосрочного потенцирования во время техники зажима пластыря, могут быть использованы для описания более широкого взгляда на поведенческое отчаяние животных. Измерение времени неподвижности является важной частью модели хронического отчаяния, но оно никогда не должно быть единственным методом считывания. Следует использовать несколько других оценок, таких как тест на хвостовую подвеску или тест на предпочтение сахарозы.
