Il modello di disperazione cronica rappresenta un modello adatto per l'induzione di uno stato depressivo cronico nei topi al fine di comprendere meglio il percorso di fisiologia dei disturbi dell'umore e di valutare potenziali interventi di trattamento antidepressivo. Lo stress ripetitivo viene utilizzato per indurre uno stato depressivo, seguendo l'idea che negli esseri umani la depressione è indotta da stress cronico piuttosto che acuto. Poiché gli effetti dell'induzione del CDM sono stabili fino a quattro settimane, non è solo possibile studiare antidepressivi ad azione rapida, ma anche sostanze ad insorgenza ritardata come la maggior parte degli antidepressivi convenzionali.
Prima di indurre lo stato depressivo cronico, osservare visivamente i topi per anomalie tra cui segni di morso o barbiere. Escludere l'intera gabbia dalla serie sperimentale se un animale mostra segni di lesioni. Per eseguire successivamente test parametrici accoppiati, assicurarsi che ogni mouse sia chiaramente contrassegnato o etichettato.
Pesare inoltre ogni topo prima di iniziare l'esperimento. Per eseguire una sessione di nuoto forzata, riempire un becher o un cilindro con acqua a temperatura ambiente ad un'altezza di almeno 20 centimetri dal fondo, lasciando un minimo di 10 centimetri tra la superficie dell'acqua e il bordo superiore della nave. Quindi trasferire delicatamente il mouse nell'acqua e impostare un timer per 10 minuti.
Per evitare che il topo anneghi, osserva continuamente il topo mentre è in acqua da una posizione in cui non può vedere lo sperimentatore. Dopo 10 minuti, togli il mouse dall'acqua semplicemente afferrando la coda. Asciugare delicatamente il mouse con un tovagliolo di carta e metterlo sotto una luce riscaldante o su un tappetino riscaldante.
Esegui la sessione di nuoto forzato su ciascun mouse ogni giorno per cinque giorni consecutivi. Dopo cinque sessioni di nuoto, trasferisci gli animali nelle loro gabbie di casa e lasciali riposare per almeno due giorni. Per utilizzare il tempo di immobilità come metodo di lettura, registra ogni sessione di nuoto utilizzando una fotocamera.
Quindi guarda le registrazioni video offline e usa un cronometro per misurare il tempo totale trascorso dal mouse nelle tre diverse condizioni comportamentali durante il test di nuoto, lotta, nuoto e immobilità. L'animale è considerato in difficoltà quando cerca attivamente di fuggire dalla situazione minacciosa. Ciò comporta la zampa del lato del cilindro con la testa orientata verso il muro e lo spostamento di tutti gli arti.
La superficie dell'acqua è in genere leggermente turbolenta. Si ritiene che l'animale nuoti quando muove almeno entrambe le zampe di cuoio e percorre una distanza attraverso l'acqua. Cerca attivamente una via d'uscita ma non solleva le zampe sopra la superficie dell'acqua o cerca di superare la parete di vetro della nave.
In questa condizione gli animali spesso si girano o si muovono in cerchio. Infine, l'animale è considerato nella fase di immobilità. Se si mantiene fermo in una posizione simile al congelamento e non si muove affatto, o muove solo la coda, o le zampe anteriori per mantenere la testa sopra la superficie dell'acqua, nessuna distanza viene percorsa attivamente tranne che per il galleggiamento passivo e non si osserva alcun movimento diretto delle zampe anteriori.
Nella fase di induzione del modello di disperazione cronica, durante la prima sessione di nuoto, i topi di solito mostrano un tempo medio di immobilità tra 190 e 230 secondi, che poi aumenta costantemente con ogni sessione di nuoto aggiuntiva. Il tempo di immobilità misurato il quinto giorno rimane stabile per quattro settimane indicando una disperazione comportamentale stabile. Gli interventi antidepressivi, come l'imipramina, la privazione del sonno e la ketamina, riducono significativamente il tempo di immobilità.
Mentre la privazione del sonno combinata con un sonno di recupero non mostra un cambiamento significativo del fenotipo depressivo. Poiché ogni gruppo di trattamento ha diversi valori medi di tempo di immobilità il quinto giorno, diversi trattamenti devono essere confrontati utilizzando valori medi normalizzati anziché valori assoluti. Se il tempo di immobilità rimane invariato durante tutti e cinque i giorni, lo stress applicato non può modificare il comportamento in modo rilevante, e quindi questi topi non possono essere utilizzati per valutare gli effetti del trattamento.
Altri metodi di lettura come il test di sospensione della coda, il test di preferenza del saccarosio del naso e la valutazione del potenziamento a lungo termine durante la tecnica del morsetto del cerotto possono essere utilizzati per descrivere una visione più ampia della disperazione comportamentale degli animali. La misurazione del tempo di immobilità è una parte importante del modello di disperazione cronica, ma non dovrebbe mai essere l'unico metodo di lettura. Dovrebbero essere utilizzate diverse altre valutazioni come il test di sospensione della coda o il test di preferenza del saccarosio.
