Das Modell der chronischen Verzweiflung stellt ein geeignetes Modell für die Induktion eines chronisch depressiven Zustands bei Mäusen dar, um den Verlauf der Physiologie von affektiven Störungen besser zu verstehen und mögliche antidepressive Behandlungsinterventionen zu bewerten. Repetitiver Stress wird verwendet, um einen depressiven Zustand zu induzieren, nach der Idee, dass beim Menschen Depressionen eher durch chronischen als durch akuten Stress induziert werden. Da die Wirkung der CDM-Induktion bis zu vier Wochen stabil ist, ist es nicht nur möglich, schnell wirkende Antidepressiva zu untersuchen, sondern auch Substanzen mit verzögertem Einsetzen wie die meisten herkömmlichen Antidepressiva.
Bevor Sie den chronisch depressiven Zustand induzieren, beobachten Sie die Mäuse visuell auf Anomalien, einschließlich Anzeichen von Beißen oder Friseur. Schließen Sie den gesamten Käfig aus der Versuchsreihe aus, wenn ein Tier Anzeichen von Verletzungen aufweist. Um anschließend parametrische Paartests durchzuführen, stellen Sie sicher, dass jede Maus deutlich markiert oder gekennzeichnet ist.
Wiegen Sie zusätzlich jede Maus, bevor Sie mit dem Experiment beginnen. Um eine erzwungene Schwimmsitzung durchzuführen, füllen Sie einen Becher oder Zylinder mit Wasser bei Raumtemperatur bis zu einer Höhe von mindestens 20 Zentimetern vom Boden auf, wobei mindestens 10 Zentimeter zwischen der Wasseroberfläche und dem oberen Rand des Schiffes verbleiben. Dann die Maus vorsichtig ins Wasser legen und einen Timer auf 10 Minuten einstellen.
Um zu verhindern, dass die Maus ertrinkt, beobachten Sie die Maus kontinuierlich im Wasser von einer Position aus, in der sie den Experimentator nicht sehen kann. Nach 10 Minuten nehmen Sie die Maus aus dem Wasser, indem Sie einfach ihren Schwanz greifen. Trocknen Sie die Maus vorsichtig mit einem Papiertuch ab und legen Sie sie entweder unter ein Heizlicht oder auf eine Heizmatte.
Führen Sie die erzwungene Schwimmsitzung an jeder Maus jeden Tag an fünf aufeinanderfolgenden Tagen durch. Nach fünf Schwimmeinheiten bringen Sie die Tiere zurück in ihre Hauskäfige und lassen Sie sie mindestens zwei Tage ruhen. Um die Immobilitätszeit als Auslesemethode zu verwenden, zeichnen Sie jede Schwimmsitzung mit einer Kamera auf.
Sehen Sie sich dann die Offline-Videoaufzeichnungen an und verwenden Sie eine Stoppuhr, um die Gesamtzeit zu messen, die die Maus in den drei verschiedenen Verhaltensbedingungen während des Schwimmtests, des Kampfes, des Schwimmens und der Unbeweglichkeit verbracht hat. Das Tier gilt als kämpfend, wenn es aktiv versucht, der bedrohlichen Situation zu entkommen. Dies beinhaltet das Pfoten der Seite des Zylinders mit dem Kopf, der auf die Wand ausgerichtet ist, und das Bewegen aller Gliedmaßen.
Die Wasseroberfläche ist typischerweise leicht turbulent. Das Tier gilt als schwimmend, wenn es mindestens beide versteckten Pfoten bewegt und eine Strecke durch das Wasser zurücklegt. Es sucht aktiv nach einem Ausweg, hebt aber seine Pfoten nicht über die Wasseroberfläche oder versucht, die Glaswand des Schiffes zu überwinden.
In diesem Zustand drehen sich die Tiere häufig um oder bewegen sich im Kreis. Schließlich wird davon ausgegangen, dass sich das Tier in der Phase der Immobilität befindet. Wenn es in einer eiskalten Position still bleibt und sich überhaupt nicht bewegt oder nur den Schwanz oder die Vorderpfoten bewegt, um seinen Kopf über der Wasseroberfläche zu halten, wird außer passivem Schwimmen keine Entfernung aktiv zurückgelegt und keine gerichtete Bewegung der Vorderpfoten beobachtet.
In der Induktionsphase des chronischen Verzweiflungsmodells zeigen Mäuse während der ersten Schwimmsitzung meist eine mittlere Immobilitätszeit zwischen 190 und 230 Sekunden, die dann mit jeder weiteren Schwimmeinheit stetig zunimmt. Die am fünften Tag gemessene Immobilitätszeit bleibt über vier Wochen stabil, was auf eine stabile Verhaltensverzweiflung hinweist. Antidepressive Interventionen wie Imipramin, Schlafentzug und Ketamin verkürzen die Immobilitätszeit erheblich.
Während Schlafentzug in Kombination mit einem Erholungsschlaf keine signifikante Veränderung des depressiven Phänotyps zeigt. Da jede Behandlungsgruppe am fünften Tag unterschiedliche Mittelwerte der Immobilitätszeit hat, sollten verschiedene Behandlungen mit normalisierten Mittelwerten anstelle von absoluten Werten verglichen werden. Wenn die Immobilitätszeit während aller fünf Tage unverändert bleibt, konnte der angewendete Stress das Verhalten nicht relevant verändern, und daher können diese Mäuse nicht zur Bewertung der Behandlungseffekte verwendet werden.
Andere Auslesemethoden wie der Schwanzaufhängungstest, der Nose-Poke-Saccharose-Präferenztest und die Beurteilung der Langzeitpotenzierung während der Patch-Clamp-Technik können verwendet werden, um eine breitere Sicht auf die Verhaltensverzweiflung der Tiere zu beschreiben. Die Messung der Immobilitätszeit ist ein wichtiger Teil des Modells der chronischen Verzweiflung, sollte aber niemals die einzige Auslesemethode sein. Mehrere andere Bewertungen wie der Heckaufhängungstest oder der Saccharosepräferenztest sollten verwendet werden.
