El modelo de desesperación crónica representa un modelo adecuado para la inducción de un estado depresivo crónico en ratones con el fin de comprender mejor el camino de la fisiología de los trastornos del estado de ánimo y evaluar posibles intervenciones de tratamiento antidepresivo. El estrés repetitivo se utiliza para inducir un estado depresivo, siguiendo la idea de que en los seres humanos la depresión es inducida por el estrés crónico en lugar de agudo. Dado que los efectos de la inducción del MDL son estables hasta por cuatro semanas, no solo es posible investigar antidepresivos de acción rápida, sino también sustancias con un inicio tardío como la mayoría de los antidepresivos convencionales.
Antes de inducir el estado depresivo crónico, observe visualmente a los ratones en busca de anomalías, incluidos signos de mordedura o barbería. Excluya toda la jaula de la serie experimental si un animal muestra signos de lesión. Para realizar pruebas paramétricas emparejadas después, asegúrese de que cada ratón esté claramente marcado o etiquetado.
Además, pesa cada ratón antes de comenzar el experimento. Para realizar una sesión de natación forzada, llene un vaso de precipitados o cilindro con agua a temperatura ambiente a una altura de al menos 20 centímetros desde el fondo, dejando un mínimo de 10 centímetros entre la superficie del agua y el borde superior del recipiente. Luego transfiera suavemente el mouse al agua y configure un temporizador durante 10 minutos.
Para evitar que el ratón se ahogue, observe continuamente al ratón mientras está en el agua desde una posición en la que no puede ver al experimentador. Después de 10 minutos, saque al ratón del agua simplemente agarrando su cola. Seque suavemente el mouse con una toalla de papel y colóquelo debajo de una luz de calefacción o en una alfombra de calefacción.
Realice la sesión de natación forzada en cada ratón todos los días durante cinco días consecutivos. Después de cinco sesiones de natación, transfiera a los animales de regreso a sus jaulas domésticas y permítales descansar durante al menos dos días. Para usar el tiempo de inmovilidad como método de lectura, grabe cada sesión de natación con una cámara.
Luego vea las grabaciones de video fuera de línea y use un cronómetro para medir el tiempo total que pasa el mouse en las tres condiciones de comportamiento diferentes durante la prueba de natación, lucha, natación e inmovilidad. Se considera que el animal está luchando cuando trata activamente de escapar de la situación amenazante. Esto implica patear el lado del cilindro con la cabeza orientada hacia la pared y mover todas las extremidades.
La superficie del agua suele ser ligeramente turbulenta. Se considera que el animal está nadando cuando se mueve al menos tanto las patas ocultas como viaja una distancia a través del agua. Busca activamente una salida, pero no levanta sus patas por encima de la superficie del agua ni trata de superar la pared de vidrio del recipiente.
En esta condición, los animales con frecuencia se dan la vuelta o se mueven en círculos. Por último, se considera que el animal se encuentra en la etapa de inmovilidad. Si se mantiene quieto en una posición similar a la congelación y no se mueve en absoluto, o solo mueve la cola, o las patas delanteras para mantener su cabeza por encima de la superficie del agua, no se recorre activamente ninguna distancia, excepto la flotación pasiva, y no se observa ningún movimiento dirigido de las patas delanteras.
En la fase de inducción del modelo de desesperación crónica, durante la primera sesión de natación, los ratones suelen mostrar un tiempo medio de inmovilidad entre 190 y 230 segundos, que luego aumenta constantemente con cada sesión de natación adicional. El tiempo de inmovilidad medido en el quinto día se mantiene estable durante cuatro semanas, lo que indica una desesperación conductual estable. Las intervenciones antidepresivas, como la imipramina, la privación del sueño y la ketamina, reducen significativamente el tiempo de inmovilidad.
Mientras que la privación del sueño combinada con un sueño de recuperación no muestra un cambio significativo del fenotipo depresivo. Dado que cada grupo de tratamiento tiene diferentes valores medios de tiempo de inmovilidad en el quinto día, se deben comparar diferentes tratamientos utilizando valores medios normalizados en lugar de valores absolutos. Si el tiempo de inmovilidad permanece sin cambios durante los cinco días, el estrés aplicado no podría cambiar el comportamiento de manera relevante y, por lo tanto, estos ratones no se pueden usar para evaluar los efectos del tratamiento.
Otros métodos de lectura, como la prueba de suspensión de la cola, la prueba de preferencia de sacarosa de la nariz y la evaluación de la potenciación a largo plazo durante la técnica de pinza de parche se pueden usar para describir una visión más amplia de la desesperación conductual de los animales. La medición del tiempo de inmovilidad es una parte importante del modelo de desesperación crónica, pero nunca debe ser el único método de lectura. Se deben usar muchas otras evaluaciones, como la prueba de suspensión de la cola o la prueba de preferencia de sacarosa.
