При перерезании и перевязке общего малоберцового и икроножного нервов с интактным большеберцовым нервом, определяемым как SNIt, наблюдается гораздо меньший моторный дефицит с более короткой кривой обучения. Модифицированная хирургическая процедура SNIt у мышей была разработана для перевязки общих малоберцовых и икроножных нервов вместе с одной лигацией нерва и одним перерезанием нерва, что приводит к сокращению времени процедуры. Для начала поместите мышь в правильное боковое положение.
Держите левую ногу вверх, сгибая колено, и закрепите ее скотчем. Удалите волосы в области бедер и колен с помощью электробритвы и крема для удаления волос. Поместив мышь на новое стерильное хирургическое полотенце, продезинфицируйте кожу 2% хлоргексидином и 70% спиртом.
Закрепите его скотчем. Сделайте разрез в один сантиметр, начиная с одной трети горизонтальной линии, пересекая скальпелем колено под углом примерно 30 градусов от вертикальной линии. Две белые линии могут быть визуализированы под двуглавой мышцей бедра после разделения разреза кожи с толстой линией медиального головного мозга над бедренной костью и латеральной каудальной тонкой линией над седалищным нервом.
Тупой рассеките двуглавую мышцу бедра вдоль каудальной белой линии с помощью изогнутых микрощипцов и микроножниц, чтобы обнажить седалищный нерв. Дифференцируйте три ветви седалищного нерва на верхнем крае икроножной мышцы. Наибольший диаметр большеберцовый нерв проходит под икроножной мышцей, в то время как икроножные нервы боковые и наименьшие в диаметре.
Общий малоберцовый нерв проходит над икроножной мышцей. В зависимости от того, как рассекается и раскрывается двуглавая мышца бедра, визуализируйте общий малоберцовый нерв как латеральный или медиальный по отношению к большеберцовому нерву. Затем отделите общие малоберцовые и икроножные нервы от соседних тканей с помощью изогнутых микрощипцов.
Перевязать общие малоберцовые и икроножные нервы вместе с помощью шва 6/0. Оба нерва проходят над икроножной мышцей, но большеберцовый нерв проходит под икроножной мышцей. Наблюдайте за сокращением конечности после тугой лигатуры.
Разрежьте нерв в дистальном отделе в пределах двух-четырех миллиметров от лигирования с помощью микроножниц. Следите за тем, чтобы большеберцовый нерв оставался нетронутым в течение всей процедуры. Закройте мышечный слой шелковым швом 6/0 и закройте разрез кожи раневыми зажимами.
Результаты показывают, что модифицированный подход потребовал почти в два раза меньше времени процедуры для выполнения SNlt по сравнению с контролем традиционного подхода. На исходном уровне в двух группах не наблюдалось различий в оценке по методу фон Фрея. Традиционный метод и модифицированный метод индуцировали аналогичную механическую гиперчувствительность на ипсилатеральной стороне с первого по 14-й день после операции.
Процентная реакция между традиционными и модифицированными методами показала сходную механическую гиперчувствительность на ипсилатеральной стороне от исходного уровня. Легкое и быстрое обнажение седалищного нерва, точная идентификация общих малоберцовых, большеберцовых и икроножных нервов, перерезание и перевязка общих малоберцовых и икроножных нервов являются тремя важнейшими этапами этого протокола. Метод был успешно разработан для имитации кардио-симптомов повреждения периферических нервов и рандомизирован для изучения молекулярного и клеточного механизма нейропатической боли.