Мы заинтересованы в изучении влияния ишемии-реперфузионного повреждения на исходы после трансплантации легких с целью понимания основных клеточных и молекулярных механизмов. Нейтрофилы, попадающие в легкие, способствуют ишемии-реперфузионному повреждению, или ИРИ. Недавно мы обнаружили, что В-клетки способствуют проникновению нейтрофилов в легкие, и они играют роль в наборе нейтрофилов после IRI.
Трансплантация левого легкого у мышей является технически сложной задачей и требует полного рабочего дня в течение нескольких месяцев для достижения стабильных результатов. Кроме того, он вызывает аллергию и хирургическую травму анастомоза. Таким образом, нужна более доступная методика, которая сможет изолировать изучение ишемии-реперфузионного повреждения.
Используя нашу модель прикорневого зажима, мы обнаружили, что В-клетки проникают в легкое на ранних этапах после ишемии-реперфузионного повреждения и рекрутируют классические моноциты в рецепторе В-клеток в TLR4-зависимый способ. В конечном итоге это приводит к увеличению экстравазации нейтрофилов в легкие. Наш протокол включает в себя обратимую перевязку швов левого легочного ворота со скользящим узлом.
Податливый и незаметный характер шва позволяет закрывать грудную клетку, что полезно для изучения более длительных периодов теплой ишемии, так как закрытие грудной клетки сводит к минимуму тепло и неощутимые потери жидкости у мыши.
