Modelo de grampo hilar pulmonar esquerdo murino de lesão de isquemia pulmonar e reperfusão

Estamos interessados em estudar os efeitos da lesão de isquemia-reperfusão nos resultados após o transplante de pulmão com o objetivo de entender os mecanismos celulares e moleculares subjacentes. Os neutrófilos que entram no pulmão contribuem para a lesão de isquemia-reperfusão, ou IRI. Descobrimos recentemente que as células B fazem com que os neutrófilos entrem no pulmão e desempenham um papel no recrutamento de neutrófilos após o IRI.

O transplante de pulmão esquerdo no camundongo é tecnicamente desafiador e requer treinamento dedicado em tempo integral ao longo de vários meses para alcançar resultados consistentes. Além disso, introduz alergenicidade e trauma anastomótico cirúrgico. Assim, precisamos de uma técnica mais acessível que possa isolar o estudo da lesão de isquemia-reperfusão.

Usando nosso modelo de grampo hilar, descobrimos que as células B entram no pulmão logo após a lesão de isquemia-reperfusão e recrutam monócitos clássicos em um receptor de células B de maneira dependente de TLR4. Em última análise, isso resulta em aumento do extravasamento de neutrófilos para o pulmão. Nosso protocolo envolve ligadura reversível do hilo pulmonar esquerdo com nó corrediço.

A natureza flexível e discreta da sutura permite o fechamento do tórax, o que é útil para estudar períodos mais longos de isquemia quente, pois o fechamento do tórax minimiza as perdas de calor e fluidos insensíveis no camundongo.