Modelo murino de pinzamiento del hiliar pulmonar izquierdo de lesión por isquemia pulmonar y reperfusión

Estamos interesados en estudiar los efectos de la lesión por isquemia-reperfusión en los resultados después del trasplante pulmonar con el objetivo de comprender los mecanismos celulares y moleculares subyacentes. Los neutrófilos que ingresan al pulmón contribuyen a la lesión por isquemia-reperfusión (IRI, por sus siglas en inglés). Recientemente hemos descubierto que las células B preceden a los neutrófilos en la entrada al pulmón, y desempeñan un papel en el reclutamiento de neutrófilos después de la IRI.

El trasplante de pulmón izquierdo en el ratón es técnicamente desafiante y requiere un entrenamiento dedicado a tiempo completo durante varios meses para lograr resultados consistentes. Además, introduce la alergenicidad y el trauma anastomótico quirúrgico. Por lo tanto, necesitamos una técnica más accesible que pueda aislar el estudio de la lesión por isquemia-reperfusión.

Utilizando nuestro modelo de pinza hiliar, hemos descubierto que las células B entran en el pulmón poco después de la lesión por isquemia-reperfusión, y reclutan monocitos clásicos en un receptor de células B de forma dependiente de TLR4. En última instancia, esto da como resultado un aumento de la extravasación de neutrófilos al pulmón. Nuestro protocolo consiste en la ligadura reversible de sutura del hilio pulmonar izquierdo con un nudo corredizo.

La naturaleza flexible y discreta de la sutura permite el cierre del tórax, lo que es útil para estudiar períodos más largos de isquemia caliente, ya que el cierre del tórax minimiza el calor y las pérdidas insensibles de líquido en el ratón.