Konvansiyonel Kapalı göğüs Tekniği ile Rat Ventriküler Fibrilasyon Modeli ve Resüsitasyon

Özet

This article describes a rat model of electrically-induced ventricular fibrillation and resuscitation by chest compression, ventilation, and delivery of electrical shocks that simulates an episode of sudden cardiac arrest and conventional cardiopulmonary resuscitation. The model enables gathering insights on the pathophysiology of cardiac arrest and exploration of new resuscitation strategies.

Özet

A rat model of electrically-induced ventricular fibrillation followed by cardiac resuscitation using a closed chest technique that incorporates the basic components of cardiopulmonary resuscitation in humans is herein described. The model was developed in 1988 and has been used in approximately 70 peer-reviewed publications examining a myriad of resuscitation aspects including its physiology and pathophysiology, determinants of resuscitability, pharmacologic interventions, and even the effects of cell therapies. The model featured in this presentation includes: (1) vascular catheterization to measure aortic and right atrial pressures, to measure cardiac output by thermodilution, and to electrically induce ventricular fibrillation; and (2) tracheal intubation for positive pressure ventilation with oxygen enriched gas and assessment of the end-tidal CO₂. A typical sequence of intervention entails: (1) electrical induction of ventricular fibrillation, (2) chest compression using a mechanical piston device concomitantly with positive pressure ventilation delivering oxygen-enriched gas, (3) electrical shocks to terminate ventricular fibrillation and reestablish cardiac activity, (4) assessment of post-resuscitation hemodynamic and metabolic function, and (5) assessment of survival and recovery of organ function. A robust inventory of measurements is available that includes – but is not limited to – hemodynamic, metabolic, and tissue measurements. The model has been highly effective in developing new resuscitation concepts and examining novel therapeutic interventions before their testing in larger and translationally more relevant animal models of cardiac arrest and resuscitation.

Giriş

Amerika Birleşik Devletleri'nde ¹ 360,000 kişiye yakın ve daha dünyada ² Birçok ani kardiyak arrest bir bölüm her yıl muzdarip. Sadece kardiyak aktivite yeniden tesis edilmesi ancak hayati organlara zarar veren, önlenebilir minimize veya iptal edilemez gerektiren hayatı geri girişimleri. Güncel kardiyopulmoner resüsitasyon teknikleri yaklaşık% 30 bir başlangıç ​​resüsitasyon oranı elde; Ancak, hastane taburcu hayatta kalma sadece% 5 ^1. Miyokard disfonksiyonu, nörolojik disfonksiyon, sistemik inflamasyon, araya giren hastalıklar, ya da dolaşım ilk karşılığında rağmen ölmektedir hastaların büyük bir kısmı için resüsitasyon sonrası hesabı meydana bunların bir kombinasyonu. Böylece, fizyopatolojisi ve yeni resüsitasyon yaklaşımları daha büyük bir anlayış acilen ilk resüsitasyon ve sağlam bir organ fonksiyonu ile daha sonraki hayatta kalma oranını arttırmak için gereklidir.

Hayvan modukardiyak arrest ls kardiyak arrest ve resüsitasyon patofizyolojisi üzerine anlayışlar ve kavramsallaştırma ve insanlarda ³ test edilebilir önce yeni müdahaleleri test etmek için pratik bir araç sunarak yeni resüsitasyon tedavilerin geliştirilmesinde önemli bir rol oynamaktadır. kapalı göğüs kardiyopulmoner resüsitasyon sıçan modeli (CPR) burada açıklanan önemli bir rol oynamıştır. Geç Profesör Max Harry Weil MD, Ph.D. laboratuvarda ⁴ ve onun işbirlikçileri - anda araştırma görevlisi - modeli Irene von Planta tarafından 1988 yılında geliştirilen Sağlık Bilimleri Üniversitesi (2004 yılında Tıp ve Bilim, Rosalind Franklin Üniversitesi olarak değiştirildi) ve yaygın ağırlıklı Profesör Weil ve kursiyerlerin arkadaşlarının tarafından resüsitasyon alanında kullanılmaktadır.

Model geleneksel CPR teknikleri ile teşebbüs resüsitasyon ile ani kalp durması bir bölüm taklit ve böylece askere içerireş zamanlı oksijen zenginleştirilmiş gaz ile pozitif basınçlı ventilasyon sunarken bir pnömatik tahrik piston cihazı ile sağ ventrikül endokarda ve kapalı göğüs CPR sağlanması için elektrik akımı vererek ventriküler fibrilasyon (VF) iyon. VF Fesih elektrik şoku transtorasik teslim gerçekleştirilir. sıçan modeli küçük hayvanlarda geliştirilen büyük hayvanlar (örneğin, domuz) ve modellerde geliştirilen modeller arasında bir denge (örneğin, fareler) sağlam erişimi olan bir iyi-standardize tekrarlanabilir ve verimli bir şekilde yeni araştırma kavramları keşif izin ilgili ölçümlerin envanter. Model, ancak daha büyük bir translasyon etkisi, daha pahalı olan büyük hayvan modellerinde çalışmalar yapmadan önce karıştırıcıların etkilerini yeni kavramlar araştırmak ve incelemek için araştırmaya erken aşamalarında özellikle yararlıdır.

Tüm hakemli makaleler gibi raporlama için bir Medline aramailk 1988 ⁴ yılında yayımlandığı tarihten itibaren kardiyak arrest mekanizması ve kapalı göğüs resüsitasyon çeşit olarak VF sahip imilar sıçan modeli modeli kullanılarak 69 ek orijinal çalışmalar toplam görüldü. Araştırma alanları resüsitasyon ^5-17 patofizyolojik yönlerini içermektedir, sonuçları ^18-30 etkileyen faktörler, vazopressör ajanlar ^31-43, tampon maddeleri inceleyerek farmakolojik müdahalelerin rolü ^44, inotropik ajanlar ^45, miyokard veya serebral koruma ^46-70 yönelik ajanlar, ve aynı zamanda mezenkimal kök hücrelerin ^71-73 etkileri.

Bu makalede açıklanan model ve protokol şu anda Resüsitasyon Enstitüsü'nde kullanılmaktadır. Ancak, bireysel araştırmacılar ve çalışmaların hedefleri mevcut yetenekleri dayalı modeli "özelleştirmek" birden fazla fırsatlar vardır.

Protokol

NOT: protokol Tıp ve Bilim, Rosalind Franklin Üniversitesi Kurumsal Hayvan Bakım ve Kullanım Kurulu tarafından onaylanmıştır. Tüm işlemler Ulusal Araştırma Konseyi tarafından yayınlanan Laboratuvar Hayvanları Bakım Kılavuzuna uygun ve Kullanım vardı.

1. Deneysel Kurulum ve Anestezi

1. Çeşitli sinyallerin gerçekleştirin kalibrasyonları bir veri toplama sistemi (basınçları, sıcaklık, piston deplasmanı, vb elektrokardiyogram [EKG], kapnografi) kullanılarak çekilecek.
2. Deney sağkalım ameliyat içeriyorsa (kateter için araçların ve etilen oksit sterilizatör için bir otoklav örneğin,) aletleri ve kateter sterilize ve giyinik bir maske, şapka giyen işletmek ve steril eldiven. Temiz cerrahi aletler ve kateterler, ancak hayatta olmayan cerrahi steril olması gerekmez.
3. Hazırlayın kateterler aşağıda açıklanan ve Fi tasvir0.45 kg ve 0.55 kg ağırlığında bir sıçan için saat'in 1.
   1. Mark 2F T-tipi termokupl kateter, boyutu 0.6 mm OD (2F), göğüs aort içine ilerlemesi için kalıcı bir kalem ile ucu, 3, 5, 8 cm. Sıcaklık ve kalp debisini ölçmek için bu kateter kullanın.
   2. Kes polietilen boru, boyutu 0.46 mm ID ve 0.91 mm OD (PE25) uzunluğunda ≈ 25 cm, sağ atrium içine ilerlemesi için torakal aort ve başka içine ilerlemesi için.
   3. Her PE25 kateter ucunun ucu kesin bir 90 ° açıyla damar içine eklenecek.
      NOT: PE boru kullanırken 45 ° açıyla eğimli ipuçları damar perforasyona neden olabilir. Ancak, eğimli ucu kendi netlik azaltmak için zımpara ile aşağı kesilmiş olabilir.
   4. Her bir PE25 kateterin yakın ucuna 26 gauge dişi luer saplama adaptörünü.
   5. 3, 5 ve 8 cm, 3, 5, 8, 10, sağ atriyum kateterinden ve ucundan 12 cm aortik kateter işaretleyin. Ao kullanınrtic kateter aort basıncı ve kan örneklemesi için ölçmek için. Sağ atriyal basıncını ölçmek için sağ atriyal kateter kullanın.
   6. 3-yollu ile donatılmış bir basınç dönüştürücü her diş saplama adaptörünü takın.
   7. Sağ atrium içine ilerlemesi için bir 45 ° açıyla, bir 3F poliüretan pediatrik venöz kateter, boyutu 0.6 mm ID ve 1,0 mm OD (3F) ucu kesin.
   8. Ucundan 4 cm 3F eksternal juguler kateter işaretleyin. Ilaç dağıtım ve kan örneklemesi için kullanmak daha sonraki seçeneği ile VF elektrik indüksiyon sağ ventrikül içine bir kılavuz tel ilerlemek için bu kateter kullanın. Kateter 3-yollu stopcock takın.
      NOT: kateterler gelişmiş olarak kateterler yapılan işaretler cerrahın rehberlik içindir. kateterler 3 cm işareti femoral damarlar uyarıları ile göğüs bölgesinde yukarı doğru eğri başlayan gemilerin kaynaklanan potansiyel direniş bir alanın cerrahı gelişmiş. 8 cm marAort kateter ve termokupl kateter üzerinde ks ucu inen torasik aorta olduğunu göstermektedir. Sağ atriyal kateter 12 cm işareti ucu sağ atrium olduğunu gösterir. Kateterler gelişmiş olarak Geçici işaretler kılavuzları bulunmaktadır. Sağ eksternal juguler kateter 4 cm'lik işareti ucu sağ atrium olduğunu gösterir.
   9. Prime heparin 10 lU / ml ihtiva eden tuzlu su ile her bir kateter (kendi açıklığını temin etmek üzere) ve kapalı konumda karşılık gelen stopcocks açın.
   10. Körelmiş bir ipucu oluşturma uzunluğunda ≈ 8 cm olarak, 1.6 mm OD (5K) bir stylette üzerine monte edilmiş bir 5F florlu etilen propilen kanül, boyutu 1.1 mm kimliği ve kesin. Sırasında ve kardiyak resüsitasyon sonrası pozitif basınçlı ventilasyon için karina onun ucu ≈ 2 cm yerleştirerek trakea içine ilerlemesi için bu kanül kullanın.
       Not: kanül metal stylette trakea içine ilerlemesi yardımcı olmak için ucundan bir 145 ° 'lik açı ≈ 3 cm bükülebilir olması gerekir.
4. Cerrahi aletlere için sıçan hazırlayın.
   1. Sodyum pentobarbital intraperitonal enjeksiyonu (45 mg / kg) ile, sıçan anestezisi. Gerekirse, ek intravenöz dozları (10 mg / kg) anestezi cerrahi uçağı korumak için (damar erişim kurduktan sonra) her 30 dakika verin.
      NOT: Çoğu çalışma, erkek emekli damızlık Sprague-Dawley sıçanları kullandık.
   2. Elektriksel şoklar teslim edilecek cerrahi alanlarda ve bölgelerde saç Klip; Hangi toraks dorsal torasik alanı, sol ve sağ kasık, boyun ve ön yüzeyini kapsar.
   3. Analjezi için buprenorfin subkutan 0.02 mg / kg (1 ml / kg) uygulayınız.
   4. Ön bantla bir cerrahi gemide bir yatar pozisyonda sıçan Fix ve orta hattan 45 ° açıyla uzuvları gerisinde kalınmıştır.
   5. Betadin fırçalayın ile fırçalayın kesi alanları% 70 etanol 3 kez izledi.
   6. Kornealar antibakteriyel oftalmik merhem ince bir tabaka sürün.
   7. Rektal termistör ≈ rektum içine 4 cm yerleştirin ve cerrahi kuruluna termistör sabitleyin.
   8. Deney boyunca bir akkor lamba kullanılarak ısıtma 36.5 ° C ve 37.5 ° C arasında çekirdek vücut ısısını korumak.
   9. Subkutan sağ üst ekstremite yerleştirin EKG iğneler, üst ekstremite, sağ arka ekstremite sol ve deney boyunca EKG kaydı.

2. Vasküler Kanülasyonlar

2.1) inen torasik aort içine T-tipi termokupl kateteri ilerleyen femoral arter Sol

1. Onun korunun 90 ° açıyla sol inguinal bölgede 2 cm kesi yapmak.
2. Hemostatlarla bir çift kullanarak çevredeki bağ dokusu künt diseksiyon ile femur damarları ve sinir Açığa.
3. Kavisli mikro diseksiyon forseps kullanarak damarların etrafında damar kılıfı Açığa.
   NOT: gemi veya pı ya delme kaçınınrve.
4. Femoral arter, ven ve sinir altında mikro diseksiyon forseps ile seyahat ve gemilere 90 ° açıyla onlara destek. Her iki gemi ve desteklenen sinir, kavisli mikro diseksiyon forseps başka bir çift ile sinir ve damardan arterin ayrılması başlar.
   NOT: Ayırma gemiler ve sinir yaralanma riskini en aza indirmek için gemilere altında ve paralel yapılır.
5. Destekleyici forseps yeniden konumlandırma; sinir bırakmadan sadece ven ve arter desteklemek için.
6. Arter ve ven arasında bir forseps geçirin ve ≈ 1 cm uzunluğunda ayırın.
7. Yavaşça destek forseps izole ven bırakın, ve sadece arteri destekleyen kalır.
8. İki ipek 3-0 örgülü emilmeyen bitişik harfler ve distal pozisyonunu bir ve birbirinden 1 cm ≈ bir proksimal takın.
9. Arter hala cerrahın düğüm & # kullanarak desteklenen ise iyice uzak bitişik harfleri sıkın160; iki tek knot izledi. Gevşek bir cerrahın düğümü ile proksimal bitişik harfleri sıkın.
10. Yaklaşık dörtte kendi enine kesit alanına sahip kesme kabına 60 ° açıda uzak dikilen yakın mikro diseksiyon bir makas kullanılarak kap küçük bir kesi olun.
    NOT: lümen ulaşıldı kesim sinyalleri çıkan kan küçük bir damla.
11. Kateterin düzgün takılmasını sağlamak için gemiye heparinize tuzlu Damla.
    Not:% 1 lidokain çözeltisinin bir iki damla damar spazmı önlemek için de kullanılabilir.
12. Olan ucu özel bir 70 ° açıyla bükülmüş olan ve zımpara (yani, sokma) kullanılarak köreltilmiş - - hafifçe gemi stabilize etmek hemostatlarla distal bitişik harfleri çekerken kap ağzına bir 22 iğne takın.
13. Kaldırarak, lümen maruz hafifçe introducer kaldırın ve introdusere altında T-tipi termokupl kateter kılavuzubu kateter ucu takıldıktan sonra.
14. Rahat bir konumda Öte yandan uzlaşmacı kateteri ilerletmek için ise tek elle yerde kateter tutun.
15. Destek forseps kapatın ve kateter ilerletilir olarak distal taşıyabilirsiniz.
    NOT: Herhangi bir direnç kateter ilerleyen ederken araya geldi ise; durdurmak, geri çekin ve alternatif bir açıyla yerleştirin.
16. Inen torasik aorta içine ucu konumlandırmak için 8 cm işareti kadar kateteri ilerletin.
17. Proksimal bitişik harfleri sıkma ve iki ek tek knot ekleyerek kaba kateter sabitleyin.
    NOT: kateter ve yanlışlıkla yerinden etrafında kanama önlemek için yeterince sıkı Güvenli knot; yeniden konumlandırılması için gerekirse henüz yeterince gevşek ileri ve geri hareketini sağlamak için.
18. Forseps ve hemostat hafifçe kaldırın.

2.2) sağ atrium içine PE25 kateteri ilerleyen femoral ven Sol

1. Kaldırma tO femoral arter zaten hafifçe dikilen yukarı çekerek ve komşu femoral ven açığa T-tipi termokupl kateter ile kanüle.
2. Forseps kullanarak damarın altında seyahat ve ven desteklemek için onları açın.
3. Adımları 2.1.18 ile 2.1.8 izleyin ama 12 cm işaretine (yerine T-tipi termokupl) PE25 kateter ilerleyen sağ atrium yakınında ucu konumlandırmak için.
4. Doğrulayın kan onun intraluminal engelsiz konumu onaylamak ve heparinli serum fizyolojik 0.2 ml kateter temizlemek için kateter yoluyla geri alınabilir.
5. Tek bir cerrahın düğüm cerrahi kesi kapatın.

Inen torasik aort içine PE25 kateteri ilerleyen 2.3) sağ femoral arter

1. Adımları 2.1.18 ile 2.1.1 izleyin ama 8 cm işareti PE25 kateter ilerleyen inen torasik aorta içine ucu konumlandırmak için.
2. Tekrar 2.2.4 ve 2.2.5 adımları.

2.Sağ atrium içine 3F poliüretan pediatrik venöz kateter ilerleyen 4) Sağ eksternal juguler ven

1. 1.5 cm uzunluğunda kesi boyun, sadece tiroid altında biten trakea sağa 1 cm, dibinde başlayan olun.
   NOT: yaralanmasına veya tiroid bezi maruz bırakmayın.
2. Yavaşça eksternal juguler ven maruz hemostatlarla bir çift kullanarak çevredeki bağ dokusu teşrih.
3. Forseps kullanarak damarın altında seyahat ve ven desteklemek için onları açın.
4. Tekrar ven kateterizasyon 2.1.18 ile 2.1.8 adımları, ancak sağ atrium onun ucu konumlandırma 4 cm işaretine 3F kateter ilerleyen.
5. Adımı yineleyin 2.2.4.
6. 3-yollu ile kateter kap ve kapalı konuma getirin.

3. Trakeal entübasyon

3.1) Trakeal maruz

1. Hemostat kullanarak orta hat doğru önceden yapılan boyun kesi genişletin.
2. Diss EKT trakea maruz ve bir doku yayıcı kullanılarak yüzeylemektedir tutmak için cleidocephalic kasların sternohyoid, sternothyroid ve mastoid parçası künt tekniği kullanılarak hemostatlarla ve forseps ile.

3.2) Trakeal entübasyon

1. Havayolunu germek için dil çekin. 5F kateter Advance (yani, trakea kanül) stylette üzerine monte edilmiş. Ucu yukarı bakacak ve avans üst solunum yolu, ses telleri, ve trakea girmek isteyen ilerleyen ederken sıkıca kanül tutun.
2. Bu doğru pozisyona rehberlik gelişmeler olarak trakeal kanül Trans-görselleştirmek.
3. Kanül stylette çıkarın ve kanülün uzak ucuna bir kızıl ötesi _CO2 Çözümleyici adaptörü takın.
4. Karakteristik capnographic dalga tanıyarak başarılı trakeal entübasyon onaylamak; yani, havayolu CO ₂ ekspirasyon sırasında artan ve ilham sırasında azalan.

Temel İstikrarın ove_title "> 4. Onay

1. Cerrahi aletleri ve çeşitli kateterler, kanüller bağlantısını tamamlayın ve EKG veri toplama sistemine bunlara karşılık gelen dönüştürücüler ve sinyal klimalar yoluyla açar ve kan ölçerek kardiyak output ve kan basıncı ölçümlerin yapılması ve metabolik stabilite (tavsiye) dayalı hemodinamik stabilite onaylamak gazlar ve laktat düzeyleri.
   Not: Kardiyak çıkış sağ atriuma oda sıcaklığında% 0.9 NaCI 200 ul bolus enjeksiyonu sonrası ısıl çift ile aşağı torasik aortun kaydedilen termodilusyon eğrisinin bilgisayar analizi ile ölçülür.
2. Ilgi çeşitli parametreler için özel başlangıç ​​referans değerleri tanımlayın; Hangi sıçan suşu, cinsiyet ve ağırlık şarta değişebilir. Burada tarif edilen sıçan modeli kullanılarak temsili bir deneyden elde bazal ve resüsitasyon sonrası referans değerleri Tablo 1'de verilmiştir.

5. Deneysel Protokolü

Ventriküler fibrilasyon 5.1) İndüksiyon (VF)

1. Akım (AC) jeneratör (0-12 mA) alternatif bir 60 Hz negatif kutbuna bağlı sıçan karın duvarında bir iğne deri altına yerleştirin. Iç organlara yanlışlıkla yaralanmasını önlemek için karın boşluğuna cilt altı dokusu ötesinde iğneyi ilerleyen kaçının.
2. Bir precurved 0.38 mm OD bir ucunu AC jeneratörün pozitif kutbuna 40 cm (tel konnektörü üzerinden) uzun kılavuz tel takın. Polarite ters olmadığından emin olun; aksi takdirde VF neden olabilir.
3. Sağ eksternal juguler ven takılı 3F poliüretan kateter 3-yollu stopcock çıkarın ve kılavuz tel EKG ve aort basıncı izlerken sağ ventrikül girmek isteyen yaklaşık 7 cm yumuşak ucu ilerlemek.
   NOT: kılavuz telin doğru yerleştirilmesi ektopik ventr tarafından önerilen olacakicular atım ECG ve aort basıncında görülmektedir.
4. 60 Hz AC jeneratör açın ve aort basıncı izlerken yavaş yavaş akımı artar.
   NOT: Bir 2,0 mA akım tipik VF ikna etmek için yeterli ama sağ ventrikül kılavuz tel göreli yere şarta değişir. Ucu konumu küçük ayarlamalar düşük akım seviyelerinde VF ikna etmek gerekebilir.
5. Şekil 2'de gösterildiği gibi, ≈ 5 saniye EKG'de düzensiz elektriksel aktivite (2) bir görünüm içinde ≈ 20 mm Hg (1) aort titreşimlerle kesme ve aort basıncı üstel bozulma belgelenmesi ile VF indüksiyonunu teyit edin.
6. VF ikna etmek için gerekli yaklaşık yarısı düzeyinde ilk dakikadan sonra yoğunluğunu azaltarak 3 dakika kesintisiz akım koruyun.
7. VF akımı uygulamak gerek kalmadan devam 3 dakika ve belgeden sonra akım kapatın.
   NOT: Küçük kalpler kendiliğinden defibrilefibrilasyon ön öncü iniş engelleyen refrakter dönemde firar sonuna geldiğinde sayede kısa devre uzunluğu verilen. Sadece miyokardiyal iskemi bir süre sonra,. Örneğin, yeterli 3 dakika, yeniden giriş Şekil 2'de gösterildiği gibi, VF, kendini sürdüren olur izin vermek için iletim ve yavaş olur.
8. , 3-yollu ile kılavuz teli, yeniden keper juguler kateter çıkarın zemin iğneyi çıkarın ve VF yayınlanan dayalı (yani, 4-15 dakika resüsitasyon girişimleri başlamadan önce protokol arzusu süresince kendiliğinden devam etmesine izin çalışmalar).

5.2) Göğüs kompresyon ve pozitif basınçlı ventilasyon

NOT: Bu yayında yer göğüs kompresör ısmarlama pnömatik tahrik ve elektronik kontrollü piston cihazdır. ventilatör piyasada mevcut cihazdır.

1. Eylemler açıklanan b ile işlenmemiş VF zaman kullanınelow; bunlar VF oluşturulmadan önce gerçekleştirilebilir, ancak.
2. 2.8 cm ve kılıç şeklinde sürecin tabanından 4.2 cm göğüs işaretleyin. göğüs kompresyonu başlatmak için en uygun alan, genellikle bu iki işaretleri arasında bulunmuştur.
3. Bir defibrilasyon raket iletken jel uygulayın ve cerrahi kuruluna raket güvence, sıçan göğüs altına doğru kaydırın.
4. Biraz göğüs dokunmadan iki göğüs işaretleri arasındaki göğüs kompresör pistonu yerleştirin.
5. Dakikada 200 kompresyon teslim ve 0 mm başlangıç ​​Piston ayarlamak için kompresör ayarlayın.
   Not: Sıkıştırma oranı 350 dakikalık bir ani kalp hızı ile küçük bir hayvan için uygun olan ^-1 ancak tanımlanmamıştır fare modelinde için optimal bir kompresyon oranı olarak değiştirilebilir.
6. 25 dk vantilatör Set ^-1 göğüs c eşitlenmemiş 1.0 6 ml / kg tidal volüm ve ilham oksijen bir kısmını (FiO ₂₎ teslimompression.
7. Trakea kanül bırakarak kadar (inspiratuar ve ekspiratuar bacaklarda bağlayan Y-adaptörü ile biten) ventilatör boru takın kızılötesi CO ₂ analizörü adaptörü yerleştirilen.
8. Ventilatör açın ve yavaş yavaş ilk dakika içinde 10 mm 0 mm sıkıştırma derinliği artırarak göğüs sıkıştırma başlar. Sidewise biraz pistonu hareket ettirin ve en yüksek aort diyastolik basınç veren bir pozisyon bulmak isteyen rostro (yani, kompresyon arasındaki basınç) belirli bir sıkıştırma derinliği için.
   NOT: sıkıştırma derinliği kademeli artış Resüsitasyon Enstitüsü benzersizdir; çoğu araştırmacı maksimal sıkıştırma derinliği ile başlar.
9. Bir hedef aort diyastolik basınç elde edilinceye kadar, ikinci dakika boyunca sıkıştırma derinliği artmaya devam.
   NOT: 24 mm Hg veya daha yüksek bir hedef aort diyastolik basınç çıkarıldıktan sonra 20 mm Hg veya daha yüksek bir koroner perfüzyon basıncını verirsağ atriyal diyastolik basınç; Bu sıçan modelinde ⁴ resuscitability eşiğine karşılık gelir. Hedef aort diyastolik basınç - resuscitability eşiğini aşabilir - Çalışma hedefi dayalı araştırmacı tarafından karar verilecek olup. Ancak, göğüs duvarı ve intratorasik organların zarar vermekten kaçınmak için 17 mm sıkıştırma derinliği aşması tavsiye edilmez.
10. Defibrilasyon başlamadan önce istenen süre için göğüs kompresyonu koruyun.
    NOT: göğüs sıkıştırma Altı dakika minimum başarılı defibrilasyon ²⁶ için uygun miyokard koşulları yaratmak için gerekli gibi görünüyor. Ancak, artan süre ile, hemodinamik göğüs sıkıştırma azalır etkinliği ve birçok çalışma, 6 ila 10 dakika arasında değişen bir süre kullanın.

5.3) Defibrilasyon

1. Bir başlangıç ​​iç defibrilasyon için yeteneği ile piyasada mevcut bifazik dalga defibrilatör kullanmafareye özel küreklerle donatılmış 5 J teslim enerji.
2. Defibrilasyon kürek iletken jel uygulayın.
3. Göğüs kompresyonu önceden belirlenmiş süresini tamamlamadan hemen önce defibrilatör şarj edin.
4. Göğüs sıkıştırma kesin ve kalp EKG inceleyen VF kalır doğrulayın.
5. VF varsa 5 saniye arayla göğüs duvarı boyunca 5 J, her iki elektriksel şoklara kadar sunun ve aort bakliyat ve ortalama aort basınç ≥25 mm Hg ile elektrikle organize EKG iadesi için dikkat.
6. Başka bir 30 saniye veya 60 saniye ortalama aort basıncı 25 mm Hg olursa olsun elektrik ritminin
7. Belirli protokol ancak ilk 5 J şoklar VF sonlandırmak için başarısız olursa 7 J defibrilasyon enerjisini tırmanan şarta kadar 5 kez 5.3.6 için 5.3.4 den adımları tekrarlayın. Şekil 3 defibrilasyon pro gösteriyortokol Resüsitasyon Enstitüsü'nde kullanılan ve Şekil 4 defibrilasyon aşamasında bir temsilci deney göstermektedir.
8. VF mevcut sadece elektrik şoku sunun; Aksi takdirde elektrik şoku önceki olmadan göğüs sıkıştırma devam ve kalp nabızsız elektriksel aktivite veya asistoli olduğunu varsayalım.
9. Defibrilasyon-sıkıştırma döngülerinin tamamlanması (Şekil 3) ile resüsitasyon sonucunu belirlemek.

5.4) Post-resüsitasyon

1. Spontan dolaşımın dönüşünden sonra ^-1 60 dk ^-1 25 dakikadan havalandırma oranını artırmak ve spontan dolaşımın 15 dakika sonra 1,0-0,5 FiO ₂ düşük.
2. VF tekrarlarsa son şok aynı enerjide elektrik çarpmasına sunun. Ancak, VF genellikle birkaç saniye içinde sinüs ritmine kendiliğinden tersine çevirir.
   NOT: VF nüks kısa bir süre reperfüzyon aritmileri parçası olarak ortaya çıkabilirspontan dolaşımın dönüşünden sonra ancak nadiren 15 dakika ötesinde.
3. Araştırmacı tarafından karar spesifik resüsitasyon sonrası protokolüne göre hayvan uyun; Ötenazi önce anestezi kurtarma akut deneylerde genellikle 180-240 dk. Tipik bir akut deneyin zaman çizelgesi, Şekil 5 'de gösterilmiştir.
4. Bir deney geçersiz hale getirebilir iç organlara kateterler konumunu ve yaralanma belgelemek akut deneylerde nekropsi gerçekleştirin.
5. Tüm kateterler çıkarın damarları bağlayan, ve metal klipler ile yaraları kapatmak ve hayatta kalma deneyleri aşağıda listelenen adımları izleyin.
6. Tüpü hayvan kendiliğinden nefes yapabiliyor sağladı.
7. Sırt yatma komple ve yardımsız kendini doğrulma kanıtladığı anestezi kurtarma sonra temiz bir kafes hayvan dönün.
8. Enjekte% 0.9 NaCI (1 ml / 100 gr vücut ağırlığı) intraperitonal hipotermi ve d riskini azaltmak için ısıtıldıehydration.
9. Deri altına 4 saat günde bir kez kadar 72 saat için 1 mg / kg deri altı dozunda takip analjezi dozundan sonra meloksikam (2 mg / kg) deri altından dozunun tatbik edilmesi.
10. Ev güvenli kurtarma için en fazla 48 saat zenginleştirme yalnız hayvan ve post-operatif bakım ve izleme için kurumsal standart işletim prosedürü kullanın.

Sonuçlar

Burada anlatılan sıçan modeli son zamanlarda göğüs sıkıştırma ve post-resüsitasyon sırasında ⁶¹ miyokard ve hemodinamik fonksiyonu üzerindeki sarkolemmal sodyum-hidrojen değiştirici izoformu 1 (NHE-1) iki inhibitörlerinin etkilerini karşılaştırmak için kullanıldı. Daha önce NHE-1 inhibitörleri sodyum kaynaklı sitozolik ve mitokondriyal kalsiyum aşırı sınırlayarak miyokard reperfüzyon hasarı zayıflatır, ve böylece göğüs sıkıştırma sırasında sol ventrikül genişley...

Tartışmalar

Protokol Kritik Adımlar

Protokol kritik adımlar vardır. Hakim olduğunda, hazırlık ve protokol olarak kısaca aşağıda açıklanmıştır ilerleyiniz. Cerrahi hazırlık tek veya birkaç girişimi (ler) sonra başarılı entübasyon ardından, az ya da hiç damar spazmı tetikleyen ve amaçlandığı gibi kateter ipuçları konumlandırma küçük kesiler yoluyla hızla ilerleyen kateter, süratli şekilde; Bu şekilde, bir referans değerler arasında temel ölçümler

Malzemeler

Name	Company	Catalog Number	Comments
Name of Material/ Equipment	Company	Catalog Number	Comments/Description
Sodium pentobarbital	Sigma Aldrich	P3761	http://www.sigmaaldrich.com/catalog/product/sigma/p3761?lang=en&region=US
Rectal thermistor	BIOPAC Systems, INC	TSD202A	http://www.biopac.com/fast-response-thermistor
Needle electrode biopolar concentric 25 mm TP	BIOPAC Systems, INC	EL451	http://www.biopac.com/needle-electrode-concentric-25mm
PE25 polyethylene tubing	Solomon Scientific	BPE-T25	http://www.solsci.com/products/polyethylene-pe-tubing
26GA female luer stub adapter	Access Technologies	LSA-26	http://www.norfolkaccess.com/needles.html
Stopcocks with luer connections; 3-way; male lock, non-sterile	Cole-Parmer	UX-30600-02	http://www.coleparmer.com/Product/Large_bore_3_way _male_lock_stopcocks _10_pack_Non_sterile/EW-30600-23
TruWave disposable pressure transducer	Edwards Lifesciences	PX600I	http://www.edwards.com/products/pressuremonitoring/Pages/truwavemodels.aspx?truwave=1
Type-T thermocouple	Physitemp Instruments	IT-18	http://www.physitemp.com/products/probesandwire/flexprobes.html
Central venous pediatric catheter	Cook Medical	C-PUM-301J	https://www.cookmedical.com/product/-/catalog/display?ds=cc_pum1lp_webds
Abbocath-T subclavian I.V. catheter (14g x 5 1/2")	Hospira	453527	http://www.hospira.com/products_and_services/iv_sets/045350427
Novametrix Medical Systems, Infrared CO2 monitor	Soma Technology, Inc.	7100 CO2SMO	http://www.somatechnology.com/MedicalProducts/novametrix_respironics_co2smo_ 7100.asp
Harvard Model 683 small animal ventilator	Harvard Apparatus	555282	http://www.harvardapparatus.com/webapp/wcs/stores/servlet/haisku2_10001_11051_44453_-1_ HAI_ProductDetail_N_37322_37323
Double-flexible tipped wire guides	Cook Medical	C-DOC-15-40-0-2	https://www.cookmedical.com/product/-/catalog/display?ds=cc_doc_webds
High accuracy AC LVDT displacement sensor	Omega Engineering	LD320-25	http://www.omega.com/pptst/LD320.html
HeartStart XL defibrillator/monitor	Phillips Medical Systems	M4735A	http://www.healthcare.philips.com/main/products/resuscitation/products/xl/
Graefe micro dissection forceps 4 inches	Roboz	RS-5135	http://shopping.roboz.com/Surgical-Instrument-Online-Shopping?search=RS-5135
Graefe micro dissection forceps 4 inches with teeth	Roboz	RS-5157	http://shopping.roboz.com/Surgical-Instrument-Online-Shopping?search=RS-5157
Extra fine micro dissection scissors 4 inches	Roboz	RS-5882	http://shopping.roboz.com/micro-scissors-micro-forceps-groups/micro-dissecting-scissors/Micro-Dissecting-Scissors-4-Straight-Sharp-Sharp
Heiss tissue retractor	Fine Science Tools	17011-10	http://www.finescience.com/Special-Pages/Products.aspx?ProductId=321&CategoryId=134& lang=en-US
Crile curve tip hemostats	Fine Science Tools	13005-14	http://www.finescience.com/Special-Pages/Products.aspx?ProductId=372
Visistat skin stapler	Teleflex Incorporated	528135	http://www.teleflexsurgicalcatalog.com/weck/products/9936
Braided silk suture, 3-0	Harvard Apparatus	517706	http://www.harvardapparatus.com/webapp/wcs/stores/servlet/haisku2_10001_11051_43051_-1_ HAI_ProductDetail_N_37916_37936
Betadine solution	Butler Schein	3660	https://www.henryscheinvet.com/
Sterile saline, 250 ml bags	Fisher	50-700-069	http://www.fishersci.com/ecomm/servlet/itemdetail?catnum=50700069&storeId=10652
Heparin sodium injection, USP	Fresenius Kabi	504201	http://fkusa-products-catalog.com/files/assets/basic-html/page25.html
Loxicom (meloxicam)	Butler Schein	045-321	https://www.henryscheinvet.com/
Thermodilution cardiac output computer for small animals	N/A	N/A	Custom-developed at the Resuscitation Institute using National Instruments hardware and LabVIEW software
Analog-to-digital data acquisition and analysis system	N/A	N/A	Custom-developed at the Resuscitation Institute using National Instruments hardware and LabVIEW software
Pneumatically-driven and electronically controlled piston device for chest compression in small animals	N/A	N/A	Custom-developed at the Weil Institute of Critical Care Medicine
60 Hz alternating current generator	N/A	N/A	Custom-developed at the Weil Institute of Critical Care Medicine