Epimedii Folyum koyun eti yağı işleme teknolojisinin optimizasyonu ve zebra balığı embriyonik gelişimi üzerindeki etkisinin test edilmesi

Özet

Bu protokolde, Epimedii folium'un (EF) koyun eti yağı işleme teknolojisi, bir Box-Behnken deneysel tasarım-tepki yüzey metodolojisi uygulanarak optimize edildi ve ham ve optimize edilmiş su ekstrakte edilen EF'nin zebra balığı embriyonik gelişimi üzerindeki etkisi önceden araştırıldı.

Özet

Geleneksel bir Çin tıbbı (TCM) olan Epimedii folium'un (EF), tıp ve gıdada > 2.000 yıllık bir geçmişi vardır. Klinik olarak, koyun eti yağı ile işlenmiş EF genellikle bir ilaç olarak kullanılır. Son yıllarda, EF'yi hammadde olarak kullanan ürünlerin güvenlik riskleri ve advers reaksiyonlarına ilişkin raporlar giderek artmıştır. İşleme, TCM'nin güvenliğini etkili bir şekilde artırabilir. TCM teorisine göre, koyun eti yağı işleme, EF'nin toksisitesini azaltabilir ve böbrekler üzerindeki tonlama etkisini artırabilir. Bununla birlikte, EF koyun eti yağı işleme teknolojisinin sistematik araştırma ve değerlendirme eksikliği vardır. Bu çalışmada, birden fazla bileşenin içeriğini değerlendirerek işleme teknolojisinin temel parametrelerini optimize etmek için Box-Behnken deneysel tasarım-tepki yüzey metodolojisini kullandık. Sonuçlar, EF'nin optimum koyun eti yağı işleme teknolojisinin şu şekilde olduğunu göstermiştir: koyun eti yağını 120 ° C'de 10 ° C'± ısıtmak, ham EF'yi eklemek, eşit derecede parlak olana kadar hafifçe 189 ° C'ye ± 10 ° C'ye kızartmak ve sonra çıkarmak ve soğutmak. Her 100 kg EF için 15 kg koyun eti yağı kullanılmalıdır. Sulu bir ham ve koyun eti yağı işlenmiş EF ekstraktının toksisiteleri ve teratojeniteleri, zebra balığı embriyo gelişim modelinde karşılaştırılmıştır. Sonuçlar, ham bitki grubunun zebra balığı deformitelerine neden olma olasılığının daha yüksek olduğunu ve yarı maksimal ölümcül EF konsantrasyonunun daha düşük olduğunu gösterdi. Sonuç olarak, optimize edilmiş koyun eti yağı işleme teknolojisi, iyi tekrarlanabilirlik ile istikrarlı ve güvenilirdi. Belirli bir dozda, EF'nin sulu ekstraktı zebra balığı embriyolarının gelişimi için toksikti ve toksisite, ham ilaç için işlenmiş ilaçtan daha güçlüydü. Sonuçlar, koyun eti yağı işlemenin ham EF'nin toksisitesini azalttığını göstermiştir. Bu bulgular, koyun eti yağı ile işlenmiş EF'nin kalitesini, homojenliğini ve klinik güvenliğini artırmak için kullanılabilir.

Giriş

Epimedii folium (EF), Epimedium brevicornu Maxim., Epimedium sagittatum'un (Sieb. et Zucc.) kurutulmuş yapraklarıdır. Maxim., Epimedium pubescens Maxim. veya Epimedium koreanum Nakai. EF, osteoporoz, menopoz sendromu, meme topakları, hipertansiyon, koroner kalp hastalığı ve diğer hastalıkların tedavisinde kullanılabilir¹. Geleneksel bir Çin tıbbı (TCM) olarak EF, tıp ve gıda alanında 2.000 yıldan fazla bir geçmişe sahiptir. Düşük fiyatı ve böbrekleri tonlamanın dikkat çekici etkisi nedeniyle, ilaçlarda ve sağlık gıdalarında yaygın olarak kullanılmaktadır. EF, koyun eti yağı ile karıştırılarak kızartılarak işl....

Protokol

Hayvanlarla ilgili tüm deneyler, TCM Chongqing Enstitüsü Deney Etik Komitesi'nin onayı ile gerçekleştirilmiştir (laboratuvar hayvanları etik inceleme sertifikası numarası: ZJS2022-03).

1. Biyoaktif bileşenlerin belirlenmesi

NOT: Bu araştırmada kullanılan türler Epimedium sagittatum idi ve örnekler Chongqing, Fengdu County'de toplandı. Örneklem, E. sagittatum'un (Sieb. et Zucc.) kuru bir toprak üstü kısmı olarak tanımlandı. Atasözü. Biyolojik Tıp Enstitüsü, Chongqing Geleneksel Çin Tıbbı Enstitüsü araştırmacıları tarafından.

1. Elektronik analitik terazi kullanarak icariin....

Sonuçlar

Metodolojik araştırma sonuçları
Icariin, EA, EB, EC, BI konsantrasyonları ile kromatografik tepe alanları arasında doğrusal bir ilişki gözlenmiştir (bakınız Tablo 3). ICARIIN, EA, EB, EC ve BI'nın kromatografik tepe alanlarının RSD% değerleri (n = 6) sırasıyla% 0.28,% 1.22,% 0.65,% 1.67 ve% 1.06 idi ve HPLC ölçümlerinin hassasiyetinin iyi olduğunu gösterdi. ICARIIN, EA, EB, EC ve BI içeriklerinin RSD% değerleri (n = 6) sırasıyla %1.59, %1.46, %1.86, %2.29 v.......

Tartışmalar

Bağımsız değişkenler ve seviyelerinin belirlenmesi
EF işleme teknolojisi yalnızca Çin Farmakopesinin 2020 baskısında ve ülke genelinde 26 il, belediye ve özerk bölge tarafından yayınlanan yerel Çin tıbbı işleme spesifikasyonlarında açıklanmıştır¹. Açıklama aşağıdaki adımları içerir: koyun eti yağı almak ve eritmek için ısıtmak, EF parçaları eklemek, düzgün ve parlak olana kadar yavaş bir ateşle kızartmak, çıkarmak ve soğumaya bır.......

Malzemeler

Name	Company	Catalog Number	Comments
Acetonitrile	Fisher	197164
Baohuoside (B )	Chengdu Manst Biotechnology Co., Ltd.	MUST-20042402
Chromatographic column	Waters Corporation	Symmetry C18
Design Expert software	Stat- Ease Inc., Minneapolis, MN	Trial Version8.0.6.1
Detector	Waters Corporation	2998
Disintegrator	Hefei Rongshida Small Household Appliance Co., Ltd.	S-FS553
Electronic analytical balance	Mettler-Toledo International Inc.	MS205DU
Epimedin A (EA)	Chengdu Manst Biotechnology Co., Ltd.	MUST-21112118
Epimedin B (EB)	Chengdu Manst Biotechnology Co., Ltd.	MUST-20080403
Epimedin C (EC)	Chengdu Manst Biotechnology Co., Ltd.	MUST-20080310
Ethanol	Chongqing Chuandong Chemical ( Group ) Co., Ltd.	20180801
Graphpad software	GraphPad Software Inc., San Diego, CA, USA	6.02
High Performance Liquid Chromatography (HPLC)	Waters Corporation	2695
Icariin	Chengdu Glip Biotechnology Co., Ltd.	21091401
Methanol	Chongqing Chuandong Chemical (Group) Co., Ltd.	20171101
Microporous membrane	Tianjin Jinteng Experimental Equipment Co., Ltd.	0.22μm
Mutton oil	Kuoshan Zhiniu Fresh Food Store	20211106
Office Excel office software	Microsoft	Office Excel 2021
Pharmacopoeia sieve	Shaoxing Shangyu Huafeng Hardware Instrument Co., Ltd.	R40/3
Pure water machine	Chongqing Andersen Environmental Protection Equipment Co., Ltd.	AT Sro 10A
Qualitative filter paper	Shanghai Leigu Instrument Co., Ltd.	18cm
Stereomicroscope	Carl Zeiss, Oberkochen, Germany	Stemi 2000
Ultrasonic cleaner	Branson Ultrasonics (Shanghai) Co.,Ltd.	BUG25-12
Zebrafish	China Zebrafish Resource Center (CZRC)	The AB strain