Başlamak için, domuz akciğer dokusunu 48 saat boyunca oda sıcaklığında% 4 paraformaldehit içinde sabitleyin. Daha sonra akciğer dokusunu% 0.01 Sodyum Azid içeren 30 mililitre PBS içeren 50 mililitrelik konik bir tüpe aktarın. Plastik bir kap, ince forseps ve steril makası hazır bulundurun.
Agarozu kaynama noktasına ulaşana kadar mikrodalgada ısıtın. Daha sonra bir su banyosunda 42 santigrat dereceye kadar soğutun. Kullanıma hazır olana kadar su banyosunda saklayın.
Akciğer biyopsisini PBS Azide solüsyonundan çıkarın. Akciğer loblarını dikkatlice daha küçük bloklara ayırmak için ince forseps ve steril makas kullanın. Sonra, plastik bir bardağın ortasını kesin.
Bardağın dibine az miktarda agaroz dökün. 50 mililitrelik konik bir tüpün kapağını, kenarı çıkarılmış olarak agaro yüzeyine yerleştirin. Agarozun katılaşmasını sağlamak için bu kurulumu beş dakika boyunca dört santigrat derecede saklayın.
Agaroz katılaştıktan sonra plastik kabı buzdolabından çıkarın. Şimdi kapağın üzerine yaklaşık bir mililitre sıvı agaroz dökün. Ardından akciğer dokusu bloğunu yavaşça kapağa yerleştirin.
Agaroz semis katılaştıktan sonra, akciğer dokusunu yavaşça sıvı agaroza batırın. Kurulumu dört santigrat derecede agaroz katılaşana kadar yaklaşık 15 dakika soğutun. Akciğer dokusunu çevreleyen fazla agarozu dikkatlice çıkarmak için keskin bir bıçak kullanın.
