Başlamak için, hücre yapışmasını iyileştirmek için monte edilmiş yeniden yapılandırılabilir hücre kültürü platformunun zarını oda sıcaklığında bir saat boyunca santimetre kare başına beş mikrogram fibronektin ile kaplayın. Ardından, bir p200 pipeti kullanarak kaplama solüsyonunu aspire edin. Desen şablonunu çekirdek modüle yerleştirin.
Cihazın kuyusuna ve alt kanalına hücre ortamı ekleyin. İnsan göbek damarı endotel hücrelerini kuyuya tohumlayın. Cihazı bir Petri kabına yerleştirin.
Yerel nemi korumak için Petri kabına deiyonize su içeren 15 mililitrelik bir konik tüp kapağı ekleyin. Petri kabı kurulumunu inkübatöre aktarın. Akış altındaki hücreleri kültürlemek için, platformu açık kuyudan mikroakışkan moda yeniden yapılandırmaya devam edin.
Bunu yapmak için, rezervuarları ve tüpleri endotel hücre büyüme ortamı ile doldurun. Alt muhafazayı s'ye yerleştirinamptage. Açık kuyu çekirdek modülünü alt muhafazaya yerleştirin, ardından şablonu çıkarın, hücre ortamını modülün kuyusundan aspire edin ve akış modülünü kuyuya yerleştirin.
Ardından, akış modülünü çekirdek modül kuyusuna sızdırmaz hale getirmek için üst muhafazayı yerleştirin. Giriş ve çıkış dağıtım uçlarını akış modülü bağlantı noktalarına bağlayın. Sisteme sıvı akışı sağlamak için peristaltik pompayı çalıştırın.
Saf akışa maruz kalma için istenen süreye ulaşıldığında pompayı durdurun. Giriş ve çıkış dağıtım uçlarını çıkarın, ardından üst muhafazayı çıkarın. Akış modülünü cımbız kullanarak kuyudan yavaşça çıkarın.
Son olarak, istenen tahlili yapmadan önce kuyuya 100 mikrolitre hücre ortamı ekleyin. Akış altında kültürlenen hücreler, akış yönü boyunca hizalanırken, akış olmadan kültürlenen hücreler rastgele yönlendirilmiş olarak kaldı. Hücrelerin katıksız strese maruz kalması, sağlıklı kan damarlarında kritik rol oynayan Kruppel benzeri faktör 2 ve endotelyal nitrik oksit sentazın yukarı regülasyonuna neden oldu.
