Başlamak için, polidimetilsiloksan veya PDMS'nin A ve B bileşenlerini 10'a bir oranında karıştırın. Karışımı iyice karıştırdıktan sonra, karışımı bir ana kalıba dökün. Hava kabarcıklarını gidermek için PDMS kalıbını 15 dakika boyunca inç kare başına bir pound basınç altına yerleştirin.
PDMS kalıbını iki saat boyunca 60 santigrat derecede sertleştirin. Mikroiğnenin üretim kalıbını elde etmek için kalıptan çıkarın. Ardından, kullanmadan önce üretim kalıbını ultra saf su ile temizleyin.
Bir BCA test kiti kullanarak hazırlanan eksozom çözeltisinin protein içeriğini ölçün. Eksozom çözeltisine uygun miktarda DPBS ekleyin. Şimdi, çözücü olarak DPBS kullanarak mililitre trehaloz başına 200 miligramlık bir çözelti hazırlayın.
Tam çözünmeyi sağlamak için 20 dakika karıştırın. Daha sonra, çözücü olarak sırasıyla DPBS ve etanol kullanarak bir hyaluronik asit ve polivinilpirolidon veya PVP çözeltisi hazırlayın. Tam çözünmeyi sağlamak için gece boyunca karıştırın.
Eksozom çözeltisini ve trehaloz çözeltisini eşit oranda karıştırın. Eşit hacimde hyaluronik asit çözeltisi ekleyin ve uç çözeltisini elde etmek için iyice karıştırın. Bir plazma temizleyici kullanarak, hidrofilikliğini arttırmak için PDMS kalıbının yüzeyini 30 saniye boyunca düşük bir dereceyle işleyin.
PDMS kalıbına 40 mikrolitre uç çözeltisi ekleyin. Sıvının kalıbın iğne tabakasını doldurduğundan emin olmak için oda sıcaklığında üç dakika boyunca 3.000G'de santrifüjleyin. Fazla sıvıyı kalıptan çıkarın ve oda sıcaklığında bir gün vakumlu kurutma fırınında kurutun.
Ardından, PDMS kalıbına 200 mikrolitre PVP çözeltisi ekleyin. Sıvının kalıbın destek tabakasını doldurduğundan emin olmak için oda sıcaklığında üç dakika boyunca 3.000G'de santrifüjleyin. Kalıbı bir gün kuruttuktan sonra, eksozom yüklü mikroiğne yamasını elde etmek için kalıptan çıkarın.
