1. Hayvan Konut ve Aklimatizasyon Prosedürleri <ol><li> Vivaryum geldikten anda 300-325 gr ağırlığında Bay Uzun Evans sıçan, su şişeleri ve gıda karşılamak için tel ızgara kapaklar, geri dönüştürülmüş kağıt pelet yataklar içeren standart plastik kafeslerde ayrı ayrı yerleştirilmiştir. </li><li> Sıçanlar, sıcaklık ve nem kontrollü vivaryum, ışık-karanlık bir ters programı (19:00 - 07:00 üzerinde ışıklar) tutulur. </li><li> Gıda ve su ad libitum deney boyunca kafeslerde. </li><li> Sıçanlar, ameliyat öncesinde bir hafta boyunca vivaryum ve konut koşulları iklime alıştırmak için izin verilir. Sıçanlarda bu süre içinde beslenme, rutin temizlik haricinde rahatsız bırakılır ve ağırlık izlenmesi. </li></ol> 2. İntravenöz Kateterizasyon Cerrahisi <ol><li> Isofluran gaz anestezi altında ve standart aseptik cerrahi teknikler kullanarak, sıçan, sağ juguler ven silastik kateterler ile hazırlanır. Kafatası yüzeyi modifiye edilmiş bir kanül (Plastik One) ve kanül içine kateter çıkar kuyumcular &#39;vida ve diş çimento ile kafatasına monte edilir. Cerrahi prosedürlerinin ayrıntılı bilgi için, 8, 7 &#39;den bakınız. </li><li> Ameliyat sonunda, kateter yaklaşık 0.2 ml,% 50 heparin (1000 IU) ve% 50 dekstroz (25 g/50 ml) içeren bir solüsyon ile temizlendi. Bir plastik bloker kateter dış enkaz korumak için ve kateter açıklığını korumak için kanül açılması üzerine yerleştirilir. </li><li> Ameliyat sırasında ve ameliyattan bir gün sonra tekrar, sıçanlarda analjezik Ketoprofen 5 mg / kg SC, yönetilmektedir. </li><li> Sıçanlar, deney başlamadan önce cerrahi kurtarmak için en az yedi gün izin verilir. Bu süre zarfında rutin temizlik ve beslenme hariç, ağırlık ve genel sağlık günlük olarak izlenmesi, fareler, ev kafeslerde rahatsız bırakılır. Iyileşme döneminin son gününde, kateter, kateter açıklık doğrulamak için heparin / dekstroz solüsyonu (Bölüm 2.2) ile temizlendi. </li></ol> 3. Davranış Usulleri Tüm davranışsal prosedürleri Med Associates Inc (St Albans, VT) tarafından sağlanan ekipman kullanılarak yürütülmektedir. Özel bir odada ev sahipliği cihaz, standart edimsel odaları, ses azaltıcı bir muhafaza içinde yer alan her bir kümesi içerir. Her edimsel odasına iki geri çekilebilir kolları, paslanmaz çelik çubuk yerden hem yükseltilmiş 6.5 cm ile donatılmıştır. Beyaz bir uyarı ışığı sadece bir kolu üzerinde bulunan ve o kolunu (sözde &quot;aktif&quot; bir kolu) eşzamanlı bir infüzyon pompası (RAZEL Scientific Instruments, St Albans uyaran ışık ve aktivasyon aydınlatma sonuç yanıtları, VT). Pompa edimsel odasının hemen dışında bir raf üzerinde bulunan, ancak ses azaltıcı bir muhafaza içinde. Diğer kolu (sözde &quot;aktif değil&quot; kolu) deneysel tüm prosedürler boyunca odasında bırakılır; Bu kolu yanıt sonucu olmadan. Son olarak, her iki meclisin de sabit akım, aralıklı, kaçınılmaz, elektrik footshock çelik çubuk zemin karıştırma yoluyla sunmak için donatılmıştır. Tüm deneysel koşullar (örneğin, uyaran sunumları, ilaç infüzyonları, şok teslim) yanı sıra verilerin kaydedilmesi ve konsolidasyon, test odaları ve merkezi bir bilgisayar işletim Med Associates yazılım (MED-IV) arasındaki arabirimler aracılığıyla gerçekleştirilir. 5 aşamalarında deney yapılır: 1) alışma; 2) Kokain SA, 3) İlaç ücretsiz dönemi; 4) Extinction, ve 5) iadesi için test. Tüm aşamalarında (ilaçsız dönemi için hariç), sıçan, günlük oturumları için konut oda edimsel test odalarına transfer edilir. Hayvanlar, küçük plastik kaplarda, ayrı ayrı aktarılır. Gıda ve su edimsel odaları mevcut değildir. <ol><li> Alışma <ol><li> Ilk kokain SA oturumu (bkz. Bölüm 3.2) önceki yirmi dört saat, sıçanlarda 2 saat tek bir oturum sırasında edimsel odaları alışmakta izin verilir, bu oturum sırasında aktif kolu geri çekilir. </li></ol></li><li> Kokain SA Eğitimi <ol><li> Her bir günlük eğitim oturumundan önce, fareler konut oda tartılır. Daha sonra onlar edimsel odalarına transfer edilir. </li><li> Edimsel odaları, bir bahar ve boru montaj (ilaç infüzyon pompası uzanan) konuyor üzerine kafatası monte kanül bağlıdır. </li><li> Sıçanlar günlük izin sırasında kokain HCl kendi kendini yönetmek 3 saat 8-10 gün toplam oturumları, (ya da ardışık olarak ya da 5 ve 6 oturumları arasında iki müdahale &quot;gün kapalı&quot;). </li><li> (9:00-12:00) sabah ve öğleden sonra (13:00-16:00) arasında alternatif SA oturumları. T hem de sonraki aşamalarında (yani yok ve test) deney prosedürleri denk gelmesi nedeniyle, SA seans zamanlama dönüşümlü olaraktüm hayvanlar için günün IME&#39;ler (bkz. Bölüm 3.4 ve 3.5); bu nedenle, bu düzenleme sonraki ilaç arama davranışı, günün herhangi bir karıştırıcı etkilerini önler. </li><li> Her eğitim oturumu sırasında hayvanlar aktif kolu retrakte edimsel odalarına yerleştirilmiş, 5 dakikalık bir iklimlendirme süre önce gelmelidir. </li><li> Eğitimin başında aktif kolu odasına uzatılır ve uyaran ışık (aktif kolu üzerinde bulunan) 30 aydınlatılmış s Buna ek olarak, evde ışık şu anda aktif ve oturum boyunca aydınlatılmış kalır. Birlikte, bu olaylar kokain durumu sinyali. </li><li> Oturumu sırasında, aktif kolu yanıtları donatı sabit-oran-1 programı kokain 3-infüzyonu (0.23 mg/65 mcL, iv) ile takviye edilmiştir. Infüzyon pompası ve ilaç dağıtım aktivasyonu ile eş zamanlı olarak aktif kolu üzerinde uyaran ışık 20-s aktivasyon. Bu 20-ışık sunum ek aktif kolu yanıtları kaydedildi, ancak takviye sırasında bir &quot;zaman aşımı&quot; dönemi tekabül eder. </li><li> Hayvanlar en fazla 3 saatlik seans başına 50 infüzyonları bir izin verilir. Biz rutin olarak çalışmalarımızı bu kriteri dayatmak ve deneyim, büyük ölçüde ortadan kaldıran değil, aşırı doz nedeniyle ölüm olayları azalttığını buldular. </li><li> Her günlük oturumun sonunda, sıçanlar &#39;kateter 0.2-0.3 ml heparin dekstroz solüsyonu ile temizlendi (bkz. Bölüm 2.2) ve fareler, evlerine kafes döndü. </li></ol></li><li> Uyuşturucuya süresi <ol><li> Son kokain SA seanstan sonra en az yedi gün evlerine kafeste, sıçan (beslenme, rutin temizlik haricinde, ağırlık izleme) rahatsız bırakılır. </li></ol></li><li> Kokain eğitimli davranış ve hayvanların neslinin <ol><li> Sıçanlar nesli eğitim 9:00-10:00 arasında edimsel odalarına transfer edilir. </li><li> İlkbahar ve boru montaj kafatası monte kanül bağlıdır. </li><li> SA eğitim koşulları ile tutarlı, nesli her geçen gün eğitim sırasında hayvanlar aktif kolu retrakte edimsel odalarına yerleştirilmiş, 5 dakikalık bir iklimlendirme dönemi öncesinde. </li><li> Sıçanlar sonra 30 dakika aralıklarla ayrılmış 60 dakika, dört nesli seans verilmiştir. Her 60 dakikalık seans eğitim oturumlarının başlangıç ​​(yani, evin ışığı aydınlatma, aktif kolu uzatılması, ve aktif kolu üzerinde uyaran ışık 30 saniye aydınlatma) meydana gelen aynı olaylar başlatılır. SA eğitim sırasında mevcut olan tüm oturumlar boyunca bu aktif kolu yanıtları hariç, (yani, 20 sn ve infüzyon pompası 3-s aktivasyon için uyaran ışık yanıt şarta aydınlatma) korunur artık kokain infüzyonları ile takviye edilmiştir . Aktif kolu, her 60 dakika yok oturumda ayrı 30 dakika aralıklarla sırasında, geri çekilir ve evin ışığı söner. </li><li> Son 60 dakikalık oturumun sonunda, sıçan, evlerine kafes döndü. </li><li> Adımlar 3.4.1. 3.4.5 için. 3 gün üst üste tekrarlanır. </li></ol></li><li> Footshock stres kokain eğitimli davranış Yürürlüğe Girmesi <ol><li> Sıçanlar 9:00-10:00 arasında edimsel odalarına transfer edilir </li><li> Edimsel odaları konuyor üzerine, ilkbahar ve boru montaj kafatası monte kanül bağlıdır. </li><li> Eğitim ve nesli için gerekli koşulları ile uyumlu olarak, sıçanlarda aktif kolu ile edimsel odaları yerleştirilmiştir sırasında, 5 dakikalık bir iklimlendirme süre, retrakte sağlanmaktadır. </li><li> Sıçanlar sonra nesillerinin tükenme aşamasında verilen bu aynı 30 dakika arayla ayrılmış iki 60 dakika yok oturumları (bakınız 3.4.4) verilmiştir. </li><li> 60 dakikalık ikinci seanstan sonra daha önce aktif bir kolu üzerinde yanıtların toplam sayısı 15 den az ise, hayvanlar ek bir 30 dakika aradan sonra iade için bir test verilmiştir. Bu 30 dakika arayla footshock veya sahte footshock (yani, hiçbir footshock), (3.5.6.) Uygulanır. 15 veya daha az aktif kolu yanıtların bir kriter ikinci seanstan sonra elde değil ise, iade için, ek bir nesli seans (lar) Test öncesinde verilir. </li><li> On dakika sonra 60 dakikalık ikinci nesli oturumu (veya 15 ya da daha az yanıtları yok kriter kurmak için gerekli 60 dakika herhangi bir ek yok seans (lar) sonra), hayvanlar 20 dakika (veya sahte aralıklı elektrik footshock stres maruz edimsel odasında footshock). Footshock aktif kolu geri çekilir ve ev ve uyarı ışıkları sönmüş bir süre içinde verilir. Footshock ortalama 40 sn (10-70 s aralık) aralıklarla değişken bir zaman çizelgesine göre teslim edilir. Her şok bir yoğunluk 0.9 mA teslim süresi 0.5 sn. Footshock Bu parametreler kapsamlı bir pilot çalışma dayanmaktadırkokain isteyen güvenilir iade kurmak için minimum footshock maruz kalmanın yoğunluğu ve süresi, laboratuarımızda gerçekleştirilmektedir. Bu parametreler altında, hayvan 0,5 s şok yansıtıcı atlama yanıt sergileyen ve zaman zaman kısa bir seslendirme yayarlar. Hayvanlar şok dönemi boyunca gözlenen olmasına rağmen, şok yoğunluğu sıkıntı daha belirgin işaretler ikna etmek için yeterli büyüklükte değildir. </li><li> Yok olma koşulları (yani hemen altında aşağıdaki footshock oturumun sona ermesi, aktif kolu uzatılır ve sıçanlarda kola basın izin verilen yanıtlar kokain takviye değildir, ancak, infüzyon pompası, uyarıcı ışık ve aktivasyon aydınlatma sonucu devam? .) Bu süre, iade için bir test olarak tanımlanır ve genellikle süresi 1-3 saattir. En yanıt test seansının başlarında (ilk 30 dakika-1 saat) oluşur ve daha sonra, daha genişletilmiş bir test süre söndürmüştür. Böylece, 1 saat test uzun test dönemleri etkisi daha tam nesli profili ile iade etkiyi yakalamak için yeterli olacaktır. </li><li> Tekrarlayan ölçümler tasarımı istihdam, her sıçan footshock ve sahte footshock koşullar altında test edilir. Adımlar 3.5.1. için 3.5.8, bir sonraki test gününde tekrarlanır ve iade (footshock veya sahte footshock) için alternatif bir test uygulanır. </li></ol></li></ol> 4. Temsilcisi Sonuçlar: <img src="/files/ftp_upload/2265/2265fig1.jpg" alt="Şekil 1" /> Şekil 1, öz-yönetim, eğitim, yok olma, ve tekrar test sırasında aktif ve inaktif kollarını faaliyeti için Stilize tepki profilleri. Şekil 1 Burada açıklanan deney protokolünde çeşitli aşamalarında elde edilen tipik stilize edimsel tepki profilleri sunar. 1. Aktif kolu yanıtları <ol><li> Kokain SA eğitim Şekil 1 (sol panel), haşlama ve aktif kolu presleri toplam sayısı sayısı hem de içeren tipik bir kokain SA eğitim eğrisi gösterir . Sıçanlar davranış kurulduktan sonra, sonraki oturumda ilaç alımının istikrarlı bir oranı (genellikle% 20 daha az-session arası varyans) korumak, genellikle 1-3 seans içinde kokain SA kazanmak ve. </li><li> Kokain eğitimli davranış Extinction Extinction Gün 1 yanıtları ilk kez takviyeli olmayan, aktif kolu yanıtlarının toplam sayısı, başlangıçta daha yüksek olduğunu (orta panel) Şekil 1&#39;de görüleceği eğitim aşamasında (sözde &quot;yok patlama&quot; ne karşılık gelen) sonunda; yavaş yavaş nesli dört oturumda, yanıt azalır. Tükenme Günlük 2 ve 3, bazı kurtarma yanıt (bir önceki günün son oturumu sırasında gözlenen göreli) gözlenebilir; Ancak, cevaplar genellikle genellikle tükenme önceki gün başında daha az ve nesli o gün için dört seans içinde daha hızlı ilerler. </li><li> Kokain Yürürlüğe Girmesi aramaktadır. Şekil 1 (sağ panel) görülebilir aralıklı footshock maruz kalma 20 dakika, takviyeli olmayan bir önceki nesli oturumun sonunda gözlenen göreli aktif kolu yanıt bir artışa neden olur . Footshock sahte footshock uygulandığında hangi koşullar altında gözlenen göreli yanıt da bir artışa neden olur. Böylece, footshock stres arayarak kokain iade olarak ifade edilebilir: 1) yok oturumda yanıtlara göre footshock için maruz kaldıktan sonra güçlendirilmiş olmayan yanıtların artan sayıda footshock önce veya 2) non-takviyeli artan sayıda sahte footshock footshock akrabası sonra karşılıklar. </li></ol> 2. İnaktif kolu yanıtları Bu deneysel tüm aşamalarında, inaktif bir kolu ile ilişkili çok düşük tepki düzeyleri vardır, Şekil 1 (kırmızı çizgi) görülebilir. Ancak, bu kolu yanıt mütevazı bir artış bazen footshock strese maruz kalınmasının ardından görülmektedir. Yanıt böyle bir artış meydana geldiği durumlarda bile, aktif kolu yanıt artış orantılı olarak çok daha büyük olma eğilimindedir.

<ol>
	<li>Shaham, Y. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=The+reinstatement+model+of+drug+relapse:+history,+methodology+and+major+findings.">The reinstatement model of drug relapse: history, methodology and major findings.</a> Psychopharmacology. 168 (1-2), 3-20 (2003).</li><li>de Wit, H. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Priming+effects+with+drugs+and+other+reinforcers.">Priming effects with drugs and other reinforcers.</a> Experimental and Clinical Psychopharmacology. 4, 5-10 (1996).</li><li>Bossert, J. M. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Neurobiology+of+relapse+to+heroin+and+cocaine+seeking:+An+update+and+clinical+implications.">Neurobiology of relapse to heroin and cocaine seeking: An update and clinical implications.</a> Eur J Pharmacol. 526 (1-3), 36-50 (2005).</li><li>Shalev, U., Grimm, J. W., Shaham, Y. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Neurobiology+of+relapse+to+heroin+and+cocaine+seeking:+a+review.">Neurobiology of relapse to heroin and cocaine seeking: a review.</a> Pharmacol Rev. 54 (1), 1-42 (2002).</li><li>Shaham, Y., Stewart, J. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Stress+reinstates+heroin-seeking+in+drug-free+animals:+an+effect+mimicking+heroin,+not+withdrawal.">Stress reinstates heroin-seeking in drug-free animals: an effect mimicking heroin, not withdrawal.</a> Psychopharmacology. 119, 334-341 (1995).</li><li>Shaham, Y., Erb, S., Stewart, J. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Stress-induced+relapse+to+heroin+and+cocaine+seeking+in+rats:+a+review.">Stress-induced relapse to heroin and cocaine seeking in rats: a review.</a> Brain Res Brain Res Rev. 33 (1), 13-33 (2000).</li><li>Erb, S. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Central+injections+of+CRF+reinstate+cocaine+seeking+in+rats+after+postinjection+delays+of+up+to+3+h:+an+influence+of+time+and+environmental+context.">Central injections of CRF reinstate cocaine seeking in rats after postinjection delays of up to 3 h: an influence of time and environmental context.</a> Psychopharmacology (Berl). 187 (1), 112-120 (2006).</li><li>Erb, S., Shaham, Y., Stewart, J. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Stress+reinstates+cocaine-seeking+behavior+after+prolonged+extinction+and+a+drug-free+period.">Stress reinstates cocaine-seeking behavior after prolonged extinction and a drug-free period.</a> Psychopharmacology. 128, 408-412 (1996).</li><li>Tran-Nguyen, L. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Time-dependent+changes+in+cocaine-seeking+behavior+and+extracellular+dopamine+levels+in+the+amygdala+during+cocaine+withdrawal.">Time-dependent changes in cocaine-seeking behavior and extracellular dopamine levels in the amygdala during cocaine withdrawal.</a> Neuropsychopharmacology. 19, 48-59 (1998).</li><li>Stretch, R., Gerber, G. J., Wood, S. M. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Factors+affecting+behavior+maintained+by+response-contingent+intravenous+infusions+of+amphetamine+in+squirrel+monkeys.">Factors affecting behavior maintained by response-contingent intravenous infusions of amphetamine in squirrel monkeys.</a> Canadian Journal of Physiology and Pharmacology. 49, 581-589 (1971).</li><li>Shaham, Y., Rodaros, D., Stewart, J. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Reinstatement+of+heroin-reinforced+behavior+following+long-term+extinction+Implications+for+the+treatment+of+relapse+to+drug-taking.">Reinstatement of heroin-reinforced behavior following long-term extinction Implications for the treatment of relapse to drug-taking.</a> Behavioural Pharmacology. 5, 360-364 (1994).</li><li>Wit, H. d. e., Stewart, J. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Reinstatement+of+cocaine-reinforced+responding+in+the+rat.">Reinstatement of cocaine-reinforced responding in the rat.</a> Psychopharmacology. 75, 134-143 (1981).</li><li>Erb, S. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Alpha-2+adrenergic+receptor+agonists+block+stress-induced+reinstatement+of+cocaine+seeking.">Alpha-2 adrenergic receptor agonists block stress-induced reinstatement of cocaine seeking.</a> Neuropsychopharmacology. 23 (2), 138-150 (2000).</li><li>Shalev, U. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Stress+and+relapse+to+drug+seeking+in+rats:+studies+on+the+generality+of+the+effect.">Stress and relapse to drug seeking in rats: studies on the generality of the effect.</a> Psychopharmacology (Berl). 150, 337-346 (2000).</li></ol>

Hayvan Bakım ve Toronto hayvan bakım komitesi Üniversitesi, Kanada Konseyi tarafından belirlenen kurallara ve yönetmeliklere uygun olarak hayvanlar üzerinde deneyler yapıldı. Bu video üretimi bu yazıda kullanılan alet üreten Med Associates, Inc tarafından sponsor oldu.

Geçen birkaç on yıl içinde, üç varyasyon SA iade prosedürünün laboratuvar sıçan ve maymunlarda uyuşturucu arayan iade çalışma geliştirilmiştir. Prosedürel varyasyonlar farklılıkları tanımlamak, öncelikle ilaç SA, yok, ve test oturumları, aynı gün içinde 1 ya da farklı günlerde oluşup oluşmadığına ilişkindir. Bu yazıda anlatılan prosedür yok ve test oturumları ayrı &quot;içinde arasındaki&quot; oturum varyasyon, ilaç SA günlük oturumları sırasında nedeniyle oluşur (yani arasında oturumda şekilde) olarak adlandırılan, ancak yok ve test, aynı gün içinde (yani, içinde oturumda şekilde) [örneğin, 7, 9] ortaya çıkar . Alternatif olarak, oturumlar arasında &quot;sözde&quot; prosedürleri, deney tüm aşamaları sırayla meydana gelen SA, nesli ve test oturumları (yani, tüm aşamalarında oturumları arasında) farklı günlerde verilmiştir [örneğin, 8, 10, 11]. Buna karşılık, &quot;oturumları içinde&quot; tam prosedürler, SA eğitim, yok, ve test oturumları, aynı gün içinde [örneğin, 12] ortaya çıkar. Iade prosedürünün farklı varyasyonlarını kullanarak arayan ilaç footshock indüklenen iade raporları var yayınlanmış olmasına rağmen, biz yok ve test aynı meydana geldiğinde bu stres (kokain SA öyküsü olan hayvanların en az) en etkili olabilmesi için bulduk gün (yani, &quot;içinde&quot; oturumları şekilde). Alternatif olarak, &quot;oturumları arasında&quot; tamamen kullanarak işlem arayan kokain güvenilir footshock indüklenen iade alma başarı vardı, ancak sadece hayvanların nesli ve test deneme sırasında 8, ya da en azından boyunca SA odaları ev sahipliği hangi koşullar altında 13. Bu arasında oturum yaklaşım, mevcut protokol açıklanan üzerinde dezavantajı, eğitimli ve bir kerede test edilebilir konuların sayısını sınırlayan ve böylece, veri toplama etkinliği azaldığı. İşbu Protokol şartlar altında yalnızca bir grup hayvan söndürüldü ve belirli bir zamanda test rağmen bir hafta iki grup sıçan SA eğitim aşamasının başlangıç ​​zamanı inanılmaz, daha fazla verim elde edilebilir. Bu senaryoda, ikinci grup SA eğitim 2 Hafta girerken birinci grup sıçanlarda bir uyuşturucu ücretsiz faz girebilirsiniz ve daha sonra, ikinci grup ilaç ise ilk grup yok ve test yürütülmektedir olabilir -ücretsiz faz. Bu yaklaşım, kaynakların daha verimli kullanılmasına izin verir ve çok etkili ve güvenilir footshock indüklenen iade liderlik ederken, veri toplama oranını hızlandırır. Önemlisi, bizim prosedürü, iade için önceden ilaç takviyeli davranış ve test yok uyuşturucu ile ilişkili ipuçlarının varlığında oluşur. Ilaç ilişkili ipuçları yokluğunda yok eğitim veya test yürütülen hiçbir zaman olmasına rağmen, (test söndürüldü ipuçlarının yokluğunda oluştuğunda stres aslında iade inducing etkisiz olabilir, kişisel iletişim dayalı anlayış kokain SA tarihinin en az hayvanların durumda). Bu değişkenin sistematik bir inceleme ve pozlar teorik etkileri, gelecekteki araştırmalar için önemli bir soru. Son bir usul faktör olmadığını garanti Yorum iade footshock stres etkisi bağlam manipülasyonlara son derece hassas görünüyor. Örneğin, footshock stres, ilaç, ilaç SA ve nesli ortaya çıktığı bir ortamda uygulandığında eğer arayan iade inducing tek etkili olduğunu, bir roman bağlamında footshock stres maruz oluşursa arayan ilaç eski haline gelmez, 14 iade üzerindeki etkileri stres ve ilaç ortamı arasında önemli bir etkileşim göstermektedir. Sonuç olarak, footshock iade işlemleri, bu yazıda anlatılan gibi, stres ve ilaç nüks arasındaki ilişkiyi düzenleyen temel davranış ve nörobiyolojik mekanizmaları aydınlatmak için hatırı sayılır bir başarı ile kullanılır olmuştur. Gerçekten, bu işlemler, farmakolojik ön işlemleri ya da belirli nöronal substratlar hedef nörokimyasal manipülasyonları içerecek şekilde değişiklik olduğunda, stres ile arayan ilaç iade nörobiyoloji karakterize için güçlü bir araç olarak hizmet edebilir.

<!DOCTYPE html PUBLIC "-//W3C//DTD XHTML 1.0 Transitional//EN" "http://www.w3.org/TR/xhtml1/DTD/xhtml1-transitional.dtd">
<html xmlns="http://www.w3.org/1999/xhtml" xml:lang="en" lang="en">	
		
		<div>
		<table border="1">
		<thead>
		<tr>
		<th>Material Name</th>
		<th>Type</th>
		<th>Company</th>
		<th>Catalogue Number</th>
		<th>Comment</th>
		</tr>
		</thead>
		<tbody>
		
<tr>
<td>Basic Drug Self-Administration Test Package for Rat Package</td>
<td>&nbsp;</td>
<td><a href="http://www.med-associates.com/">Med Associates, Inc</a></td>
<td>MED-008-CT-B1</td>
<td>&nbsp;</td>
<tr>
<td>Deep extra tall MDF sound attenuating cubicle</td>
<td>Basic Drug Self-Administration Test Package for Rat Package Component</td>
<td><a href="http://www.med-associates.com/">Med Associates, Inc</a></td>
<td>ENV-018MD</td>
<td>&nbsp;</td>
<tr>
<td>Standard modular test chamber with drug infusion top and waste pan</td>
<td>Basic Drug Self-Administration Test Package for Rat Package Component</td>
<td><a href="http://www.med-associates.com/">Med Associates, Inc</a></td>
<td>ENV-008CT</td>
<td>&nbsp;</td>
<tr>
<td>Stainless steel grid floor</td>
<td>Basic Drug Self-Administration Test Package for Rat Package Component</td>
<td><a href="http://www.med-associates.com/">Med Associates, Inc</a></td>
<td>ENV-005</td>
<td>&nbsp;</td>
<tr>
<td>House light, hooded, 28V</td>
<td>Basic Drug Self-Administration Test Package for Rat Package Component</td>
<td><a href="http://www.med-associates.com/">Med Associates, Inc</a></td>
<td>ENV-215M</td>
<td>&nbsp;</td>
<tr>
<td>Stimulus light 1&#x201D; white lens</td>
<td>Basic Drug Self-Administration Test Package for Rat Package Component</td>
<td><a href="http://www.med-associates.com/">Med Associates, Inc</a></td>
<td>ENV-221M</td>
<td>&nbsp;</td>
<tr>
<td>Low profile retractable response lever</td>
<td>Basic Drug Self-Administration Test Package for Rat Package Component</td>
<td><a href="http://www.med-associates.com/">Med Associates, Inc</a></td>
<td>ENV-112CM</td>
<td>&nbsp;</td>
<tr>
<td>SmartCtrl 8 Input/16 output package</td>
<td>Basic Drug Self-Administration Test Package for Rat Package Component</td>
<td><a href="http://www.med-associates.com/">Med Associates, Inc</a></td>
<td>DIG-716P2</td>
<td>&nbsp;</td>
<tr>
<td>Single speed syringe pump, 3.33 RPM</td>
<td>Basic Drug Self-Administration Test Package for Rat Package Component</td>
<td><a href="http://www.med-associates.com/">Med Associates, Inc</a></td>
<td>PHM-100</td>
<td>&nbsp;</td>
<tr>
<td>Rat self infusion package</td>
<td>Basic Drug Self-Administration Test Package for Rat Package Component</td>
<td><a href="http://www.med-associates.com/">Med Associates, Inc</a></td>
<td>PHM-119B-23-D</td>
<td>&nbsp;</td>
<tr>
<td>Drug Delivery, Arm assembly </td>
<td>Basic Drug Self-Administration Test Package for Rat Package Component</td>
<td><a href="http://www.med-associates.com/">Med Associates, Inc</a></td>
<td>PHM-110-SAI</td>
<td>&nbsp;</td>
<tr>
<td>Square wave aversive stimulator</td>
<td>Footshock Stress Component</td>
<td><a href="http://www.med-associates.com/">Med Associates, Inc</a></td>
<td>ENV-414S</td>
<td>&nbsp;</td>
<tr>
<td>Patented quick disconnect harness for stainless steel grid floor</td>
<td>Footshock Stress Component</td>
<td><a href="http://www.med-associates.com/">Med Associates, Inc</a></td>
<td>ENV-005-QD</td>
<td>&nbsp;</td>
<tr>
<td>Shock output cable</td>
<td>Footshock Stress Component</td>
<td><a href="http://www.med-associates.com/">Med Associates, Inc</a></td>
<td>SG-219G-10</td>
<td>&nbsp;</td>
<tr>
<td>MED-PC IV Software</td>
<td>Software</td>
<td><a href="http://www.med-associates.com/">Med Associates, Inc</a></td>
<td>SOF-735</td>
<td>&nbsp;</td>		</tbody>
		</table>
		</div>

a procedure for studying the footshock-induced reinstatement of cocaine seeking in laboratory rats

Uyuşturucu bağımlılığı en sinsi yönü yüksek nüks eğilimi. Iade prosedürleri olarak bilinen nüks Hayvan modelleri, nörobiyoloji ve fenomenoloji, uyuşturucu kullanımı relaps çalışma yaygın olarak kullanılmaktadır. Usul varyasyonları, son birkaç on yılda ortaya çıkmış olsa da, en geleneksel iade işlemleri ilaç öz-yönetim (SA) modeli dayanır. Bu modelde, bir hayvanın, ilaç elde etmek için bir edimsel tepki gerçekleştirmek için eğitilmiştir. Daha sonra, davranış stopaj yanıt şarta takviye tarafından söndürüldü. Ilaç arayan Yürürlüğe Girmesi sonra ayrı bir olay, örneğin eğitim, ilaç, ilaç-ilişkili ipuçları tekrar maruz kalma, ya da bir stres 1 maruz enjeksiyon olarak tetiklenir. Yürürlüğe Girmesi prosedürleri başlangıçta sıçan ve maymunlar 1, 2 uyuşturucu arayan yeniden eğitim ilaç akut olmayan şarta maruz kalma yeteneği incelemek için geliştirilmiştir. Yürürlüğe Girmesi prosedürler bu yana, 1, 3, 4 arayan ilaç relaps, ilaç ilişkili ipuçları ve çeşitli stres formlarına maruz kalma gibi çevresel uyaranlara, rol çalışma modifiye edilmiştir. Geçtiğimiz 15 yıl içinde, iade edebiyatının önemli bir odak noktası ilaç relaps stresin rolü olmuştur. Bu ilişkiyi çalışmak için stres en sık kullanılan formlar biri hafif, aralıklı, elektrik footshocks akut maruz kalma. Footshock stres yeteneği arayan ilaç iade ikna etmek için intravenöz eroin SA 5 öyküsü olan sıçanlarda Shaham ve arkadaşları (1995) tarafından gösterilmiştir. Daha sonra, intravenöz kokain, metamfetamin ve nikotin SA yanı sıra sözlü etanol SA 3, 6 geçmişleri olan fareler jeneralize etkisi oldu. Ilaç arayan footshock indüklenen iade güvenilir ve sağlam olarak elde edilebilmesine rağmen, bazı parametrik değişkenler için duyarlı olma eğilimindedir bir sonucudur. Bunlar yok ve tekrar test oturumların düzenlenmesi, footshock stres yoğunluğu ve süresi, ve nesli ve iade için test sırasında uyuşturucu ile ilişkili ipuçlarının varlığı. Burada stres ve arayan kokain arasındaki ilişkiyi incelemek için tutarlı bir başarı ile kullanmış olduğunuz arayan kokain footshock indüklenen iadesi için bir protokol mevcut.

Watch this Scientific Journal Video about A Procedure for Studying the Footshock-Induced Reinstatement of Cocaine Seeking in Laboratory Rats at JoVE.com

A Procedure for Studying the Footshock-Induced Reinstatement of Cocaine Seeking in Laboratory Rats

Iade prosedürleri olarak bilinen nüks Hayvan modelleri, ilaç arayan kötüleşen stresin rolü incelemek için yaygın olarak kullanılmaktadır. Burada, hafif, aralıklı elektrik footshock akut maruz kalma yoluyla laboratuvar sıçanlarda arayan kokain iade inducing için bir yöntem raporu.

Laboratuar Farelerinde Aradığınız Kokain Footshock Bağlı Yürürlüğe Girmesi incelenmesi için Usulü

The most insidious aspect of drug addiction is the high propensity for relapse.  Animal models of relapse, known as reinstatement procedures, have been ...

a-procedure-for-studying-footshock-induced-reinstatement-cocaine

Research

JoVE Journal

Neuroscience

20.7K Görüntüleme.  University of Toronto Scarborough. Iade prosedürleri olarak bilinen nüks Hayvan modelleri, ilaç arayan kötüleşen stresin rolü incelemek için yaygın olarak kullanılmaktadır. Burada, hafif, aralıklı elektrik footshock akut maruz kalma yoluyla laboratuvar sıçanlarda arayan kokain iade inducing için bir yöntem raporu.

Video: A Procedure for Studying the Footshock-Induced Reinstatement of Cocaine Seeking in Laboratory Rats

Operant Sensation Seeking in the Mouse

Operant methods are powerful behavioral tools for the study of motivated behavior. These 'self-administration' methods have been used extensively in drug addiction research due to their high construct validity. Operant studies provide researchers a tool for preclinical investigation of several aspects of the addiction process. For example, mechanisms of acute reinforcement (both drug and non-drug) can be tested using pharmacological or genetic tools to determine the ability of a molecular target to influence self-administration behavior1-6. Additionally, drug or food seeking behaviors can be studied in the absence of the primary reinforcer, and the ability of pharmacological compounds to disrupt this process is a preclinical model for discovery of molecular targets and compounds that may be useful for the treatment of addiction3,7-9. One problem with performing intravenous drug self-administration studies in the mouse is the technical difficulty of maintaining catheter patency. Attrition rates in these experiments are high and can reach 40% or higher10-15. Another general problem with drug self-administration is discerning which pharmacologically-induced effects of the reinforcer produce specific behaviors. For example, measurement of the reinforcing and neurological effects of psychostimulants can be confounded by their psychomotor effects. Operant methods using food reinforcement can avoid these pitfalls, although their utility in studying drug addiction is limited by the fact that some manipulations that alter drug self-administration have a minimal impact on food self-administration. For example, mesolimbic dopamine lesion or knockout of the D1 dopamine receptor reduce cocaine self-administration without having a significant impact on food self-administration 12,16. 
Sensory stimuli have been described for their ability to support operant responding as primary reinforcers (i.e. not conditioned reinforcers)17-22. Auditory and visual stimuli are self-administered by several species18,21,23, although surprisingly little is known about the neural mechanisms underlying this reinforcement. The operant sensation seeking (OSS) model is a robust model for obtaining sensory self-administration in the mouse, allowing the study of neural mechanisms important in sensory reinforcement24. An additional advantage of OSS is the ability to screen mutant mice for differences in operant behavior that may be relevant to addiction. We have reported that dopamine D1 receptor knockout mice, previously shown to be deficient in psychostimulant self-administration, also fail to acquire OSS24. This is a unique finding in that these mice are capable of learning an operant task when food is used as a reinforcer. While operant studies using food reinforcement can be useful in the study of general motivated behavior and the mechanisms underlying food reinforcement, as mentioned above, these studies are limited in their application to studying molecular mechanisms of drug addiction. Thus, there may be similar neural substrates mediating sensory and psychostimulant reinforcement that are distinct from food reinforcement, which would make OSS a particularly attractive model for the study of drug addiction processes. The degree of overlap between other molecular targets of OSS and drug reinforcers is unclear, but is a topic that we are currently pursuing. While some aspects of addiction such as resistance to extinction may be observed with OSS, we have found that escalation 25 is not observed in this model24. Interestingly, escalation of intake and some other aspects of addiction are observed with self-administration of sucrose26. Thus, when non-drug operant procedures are desired to study addiction-related processes, food or sensory reinforcers can be chosen to best fit the particular question being asked. 
In conclusion, both food self-administration and OSS in the mouse have the advantage of not requiring an intravenous catheter, which allows a higher throughput means to study the effects of pharmacological or genetic manipulation of neural targets involved in motivation. While operant testing using food as a reinforcer is particularly useful in the study of the regulation of food intake, OSS is particularly apt for studying reinforcement mechanisms of sensory stimuli and may have broad applicability to novelty seeking and addiction.

In this protocol we describe a method of operant learning using sensory stimuli as a reinforcer in the mouse. It requires no prior training or food restriction, and it allows the study of motivated behavior without the use of a pharmacological or natural reinforcer such as food.

Fare Aradığınız Edimsel Sensation

Operant methods are powerful behavioral tools for the study of motivated behavior.  These 'self-administration' methods have been used extensively in drug ...

Nörobilim

Muscle Receptor Organs in the Crayfish Abdomen: A Student Laboratory Exercise in Proprioception

The primary purpose of this experiment is to demonstrate primary sensory neurons conveying information of joint movements and positions as proprioceptive information for an animal. An additional objective of this experiment is to learn anatomy of the preparation by staining, dissection and viewing of neurons and sensory structures under a dissecting microscope. This is performed by using basic neurophysiological equipment to record the electrical activity from a joint receptor organ and staining techniques. The muscle receptor organ (MRO) system in the crayfish is analogous to the intrafusal muscle spindle in mammals, which aids in serving as a comparative model that is more readily accessible for electrophysiological recordings. In addition, these are identifiable sensory neurons among preparations. The preparation is viable in a minimal saline for hours which is amenable for student laboratory exercises. The MRO is also susceptible to neuromodulation which encourages intriguing questions in the sites of modulatory action and integration of dynamic signals of movements and static position along with a gain that can be changed in the system.

The primary purpose of this experiment is to understand how primary sensory neurons convey information of joint movements and positions as proprioceptive information for an animal. An additional objective of this report is present the anatomy of the preparation by dissection and viewing of neurons under a dissecting microscope.

Kerevit Karın kas Reseptör Organlar: Propriyoseptör Öğrenci Laboratuvar Egzersiz

The primary purpose of this experiment is to demonstrate primary sensory neurons conveying information of joint movements and positions as proprioceptive ...

A General Method for Evaluating Incubation of Sucrose Craving in Rats

For someone on a food-restricted diet, food craving in response to food-paired cues may serve as a key behavioral transition point between abstinence and relapse to food taking 1. Food craving conceptualized in this way is akin to drug craving in response to drug-paired cues. A rich literature has been developed around understanding the behavioral and neurobiological determinants of drug craving; we and others have been focusing recently on translating techniques from basic addiction research to better understand addiction-like behaviors related to food 2-4.
As done in previous studies of drug craving, we examine sucrose craving behavior by utilizing a rat model of relapse. In this model, rats self-administer either drug or food in sessions over several days. In a session, lever responding delivers the reward along with a tone+light stimulus. Craving behavior is then operationally defined as responding in a subsequent session where the reward is not available. Rats will reliably respond for the tone+light stimulus, likely due to its acquired conditioned reinforcing properties 5. This behavior is sometimes referred to as sucrose seeking or cue reactivity. In the present discussion we will use the term "sucrose craving" to subsume both of these constructs.
In the past decade, we have focused on how the length of time following reward self-administration influences reward craving. Interestingly, rats increase responding for the reward-paired cue over the course of several weeks of a period of forced-abstinence. This "incubation of craving" is observed in rats that have self-administered either food or drugs of abuse 4,6. This time-dependent increase in craving we have identified in the animal model may have great potential relevance to human drug and food addiction behaviors.
Here we present a protocol for assessing incubation of sucrose craving in rats. Variants of the procedure will be indicated where craving is assessed as responding for a discrete sucrose-paired cue following extinction of lever pressing within the sucrose self-administration context (Extinction without cues) or as responding for sucrose-paired cues in a general extinction context (Extinction with cues).

Responding for food or drug-paired cues increases over the course of a period of abstinence and this may relate to an increased susceptibility to relapse behaviors. Here we detail a procedure for evaluating this "incubation of craving" in rats that have self-administered sucrose.

Sıçanlarda Sakkaroz Craving Kuluçka değerlendirilmesi için Genel Bir Yöntem

For someone on a food-restricted diet, food craving in response to food-paired cues may serve as a key behavioral transition point between abstinence and ...

Rapid Determination of the Thermal Nociceptive Threshold in Diabetic Rats

Painful diabetic neuropathy (PDN) is characterized by hyperalgesia i.e., increased sensitivity to noxious stimulus, and allodynia i.e., hypersensitivity to normally innocuous stimuli1. Hyperalgesia and allodynia have been studied in many different rodent models of diabetes mellitus2. However, as stated by B&ouml;lcskei et al, determination of "pain" in animal models is challenging due to its subjective nature3. Moreover, the traditional methods used to determine behavioral responses to noxious thermal stimuli usually lack reproducibility and pharmacological sensitivity3. For instance, by using the hot-plate method of Ankier4, flinch, withdrawal and/or licking of either hind- and/or fore-paws is quantified as reflex latencies at constant high thermal stimuli (52-55 &deg;C). However, animals that are hyperalgesic to thermal stimulus do not reproducibly show differences in reflex latencies using those supra-threshold temperatures3,5. As the recently described method of B&ouml;lcskei et al.6, the procedures described here allows for the rapid, sensitive and reproducible determination of thermal nociceptive thresholds (TNTs) in mice and rats. The method uses slowly increasing thermal stimulus applied mostly to the skin of mouse/rat plantar surface. The method is particularly sensitive to study anti-nociception during hyperalgesic states such as PDN. The procedures described bellow are based on the ones published in detail by Alm&aacute;si et al 5 and B&ouml;lcskei et al 3. The procedures described here have been approved the Laboratory Animal Care and Use Committee (LACUC), Wright State University.

Here, we describe a rapid reliable and simple procedure to determine the lowest temperature at which rats or mice show nocifensive behavior, i.e. the thermal nociceptive threshold (TNT). This method applies a slowly increasing thermal stimulus allowing precise and reproducible estimation of TNTs with minimum, if any, stress to the animals.

Diyabetik Sıçanlarda Termal Nosiseptif Eşik Hızlı Belirlenmesinde

Painful diabetic neuropathy (PDN) is characterized by hyperalgesia i.e., increased sensitivity to noxious stimulus, and allodynia i.e., hypersensitivity ...

Methods for Studying the Mechanisms of Action of Antipsychotic Drugs in Caenorhabditis elegans

Caenorhabditis elegans is a simple genetic organism amenable to large-scale forward and reverse genetic screens and chemical genetic screens. The C. elegans genome includes potential antipsychotic drug (APD) targets conserved in humans, including genes encoding proteins required for neurotransmitter synthesis and for synaptic structure and function. APD exposure produces developmental delay and/or lethality in nematodes in a concentration-dependent manner. These phenotypes are caused, in part, by APD-induced inhibition of pharyngeal pumping1,2. Thus, the developmental phenotype has a neuromuscular basis, making it useful for pharmacogenetic studies of neuroleptics. Here we demonstrate detailed procedures for testing APD effects on nematode development and pharyngeal pumping. For the developmental assay, synchronized embryos are placed on nematode growth medium (NGM) plates containing APDs, and the stages of developing animals are then scored daily. For the pharyngeal pumping rate assay, staged young adult animals are tested on NGM plates containing APDs. The number of pharyngeal pumps per unit time is recorded, and the pumping rate is calculated. These assays can be used for studying many other types of small molecules or even large molecules.

Methods for Studying the Mechanisms of Action of Antipsychotic Drugs in Caenorhabditis elegans

Approaches for testing the effects of antipsychotic drugs (APDs) in Caenorhabditis elegans are demonstrated. Assays are described for testing drug effects on development and viability and on pharyngeal pumping rate. These methods are also applicable for pharmacogenetic experiments with drug classes other than APDs.

Antipsikotik İlaçların Etki Mekanizmaları incelenmesi için Yöntemleri<em&gt; Caenorhabditis elegans</em

Caenorhabditis elegans is a simple genetic organism amenable to  large-scale forward and reverse genetic screens and chemical genetic screens. The C.  ...

An In Vitro Adult Mouse Muscle-nerve Preparation for Studying the Firing Properties of Muscle Afferents

Muscle sensory neurons innervating muscle spindles and Golgi tendon organs encode length and force changes essential to proprioception. Additional afferent fibers monitor other characteristics of the muscle environment, including metabolite buildup, temperature, and nociceptive stimuli. Overall, abnormal activation of sensory neurons can lead to movement disorders or chronic pain syndromes. We describe the isolation of the extensor digitorum longus (EDL) muscle and nerve for in vitro study of stretch-evoked afferent responses in the adult mouse. Sensory activity is recorded from the nerve with a suction electrode and individual afferents can be analyzed using spike sorting software. In vitro preparations allow for well controlled studies on sensory afferents without the potential confounds of anesthesia or altered muscle perfusion. Here we describe a protocol to identify and test the response of muscle spindle afferents to stretch. Importantly, this preparation also supports the study of other subtypes of muscle afferents, response properties following drug application and the incorporation of powerful genetic approaches and disease models in mice.

An In Vitro Adult Mouse Muscle-nerve Preparation for Studying the Firing Properties of Muscle Afferents

Muscle sensory neurons are involved in proprioceptor signaling and also report on metabolic state and injury related events. We describe an adult mouse in vitro muscle-nerve preparation for studies on stretch-activated muscle afferents.

Bir<em&gt; İn Vitro</emKas afferentlerin tahrik Properties incelenmesi için&gt; Yetişkin Fare kas-sinir Hazırlık

Muscle sensory neurons innervating muscle spindles and Golgi tendon organs encode length and force changes essential to proprioception. Additional ...

A Simple Way to Measure Alterations in Reward-seeking Behavior Using Drosophila melanogaster

We describe a protocol for measuring ethanol self-administration in fruit flies (Drosophila melanogaster) as a proxy for changes in reward states. We demonstrate a simple way to tap into the fly reward system, modify experiences related to natural reward, and use voluntary ethanol consumption as a measure for changes in reward states. The approach serves as a relevant tool to study the neurons and genes that play a role in experience-mediated changes of internal state. The protocol is composed of two discrete parts: exposing the flies to rewarding and nonrewarding experiences, and assaying voluntary ethanol consumption as a measure of the motivation to obtain a drug reward. The two parts can be used independently to induce the modulation of experience as an initial step for further downstream assays or as an independent two-choice feeding assay, respectively. The protocol does not require a complicated setup and can therefore be applied in any laboratory with basic fly culture tools.

A Simple Way to Measure Alterations in Reward-seeking Behavior Using Drosophila melanogaster

We describe a protocol for inducing rewarding and nonrewarding experiences in fruit flies (Drosophila melanogaster) using voluntary ethanol consumption as a measure for changes in reward states.

Kullanımı Ödül arayan davranış değişiklikleri Tedbir Basit Yolu<em&gt; Drosophila melanogaster</em

We describe a protocol for measuring ethanol self-administration in fruit flies (Drosophila melanogaster) as a proxy for changes in reward states. We ...

A Protocol for Measuring Cue Reactivity in a Rat Model of Cocaine Use Disorder

Cocaine use disorder (CUD) follows a trajectory of repetitive self-administration during which previously neutral stimuli gain incentive value. Cue reactivity, the sensitivity to cues previously linked with the drug-taking experience, plays a prominent role in human craving during abstinence. Cue reactivity can be assessed as the attentional orientation toward drug-associated cues that is measurable as appetitive approach behavior in both preclinical and human studies. Herein describes an assessment of cue reactivity in rats trained to self-administer cocaine. Cocaine self-administration is paired with the presentation of discrete cues that act as conditioned reinforcers (i.e., house light, stimulus light, infusion pump sounds). Following a period of abstinence, lever presses in the cocaine self-administration context accompanied by the discrete cues previously paired with cocaine infusion are measured as cue reactivity. This model is useful to explore neurobiological mechanisms underlying cue reactivity processes as well as to assess pharmacotherapies to suppress cue reactivity and therefore, modify relapse vulnerability. Advantages of the model include its translational relevance, and its face and predictive validities.&#160;The primary limitation of the model is that the cue reactivity task can only be performed infrequently and must only be used in short duration (e.g., 1 hour), otherwise rats will begin to extinguish the pairing of the discrete cues with the cocaine stimulus. The model is extendable to any positively reinforcing stimulus paired with discrete cues; though particularly applicable to drugs of abuse, this model may hold future applications in fields such as obesity, where palatable food rewards can act as positively reinforcing stimuli.

Cue reactivity is conceptualized as sensitivity to cues linked with drug-taking experiences that contribute to craving and relapse in abstinent humans. Cue reactivity is modeled in rats by measuring attentional orientation toward drug-associated cues that results in appetitive approach behavior in a cue reactivity test following self-administration and forced abstinence.

Cue reaktivite kokain kullanımı bozukluğu bir sıçan modelinde ölçmek için bir protokol

Cocaine use disorder (CUD) follows a trajectory of repetitive self-administration during which previously neutral stimuli gain incentive value. Cue ...

A Microbiomechanical System for Studying Varicosity Formation and Recovery in Central Neuron Axons

Axonal varicosities are enlarged structures along the shafts of axons with a high degree of heterogeneity. They are present not only in brains with neurodegenerative diseases or injuries, but also in the normal brain. Here, we describe a newly-established micromechanical system to rapidly, reliably, and reversibly induce axonal varicosities, allowing us to understand the mechanisms governing varicosity formation and heterogeneous protein composition. This system represents a novel means to evaluate the effects of compression and shear stress on different subcellular compartments of neurons, different from other in vitro systems that mainly focus on the effect of stretching. Importantly, owing to the unique features of our system, we recently made a novel discovery showing that the application of pressurized fluid can rapidly and reversibly induce axonal varicosities through the activation of a transient receptor potential channel. Our biomechanical system can be utilized conveniently in combination with drug perfusion, live cell imaging, calcium imaging, and patch clamp recording. Therefore, this method can be adopted for studying mechanosensitive ion channels, axonal transport regulation, axonal cytoskeleton dynamics, calcium signaling, and morphological changes related to traumatic brain injury.

This protocol describes a physiologically relevant, pressurized fluid approach for rapid and reversible induction of varicosities in neurons.

Varisler oluşumu ve kurtarma merkezi nöron aksonlar içinde çalışmak için bir Microbiomechanical sistemi

Axonal varicosities are enlarged structures along the shafts of axons with a high degree of heterogeneity. They are present not only in brains with ...

Preparation of Peripheral Nerve Stimulation Electrodes for Chronic Implantation in Rats

Peripheral nerve cuff electrodes have long been used in the neurosciences and related fields for stimulation of, for example, vagus or sciatic nerves. Several recent studies have demonstrated the effectiveness of chronic VNS in enhancing central nervous system plasticity to improve motor rehabilitation, extinction learning, and sensory discrimination. Construction of chronically implantable devices for use in such studies is challenging due to rats&#8217; small size, and typical protocols require extensive training of personnel and time-consuming microfabrication methods. Alternatively, commercially available implantable cuff electrodes can be purchased at a significantly higher cost. In this protocol, we present a simple, low-cost method for construction of small, chronically implantable peripheral nerve cuff electrodes for use in rats. We validate the short and long-term reliability of our cuff electrodes by demonstrating that VNS in ketamine/xylazine anesthetized rats produces decreases in breathing rate consistent with activation of the Hering-Breuer reflex, both at the time of implantation and up to 10 weeks after device implantation. We further demonstrate the suitability of the cuff electrodes for use in chronic stimulation studies by pairing VNS with skilled lever press performance to induce motor cortical map plasticity.

Existing approaches for constructing chronically implantable peripheral nerve cuff electrodes for use in small rodents often require specialized equipment and/or highly trained personnel. In this protocol we demonstrate a simple, low-cost approach for fabricating chronically implantable cuff electrodes, and demonstrate their effectiveness for vagus nerve stimulation (VNS) in rats.

Sıçanlarda Kronik İmplantasyon için Periferik Sinir Stimülasyon Elektrotlarının Hazırlanması

Peripheral nerve cuff electrodes have long been used in the neurosciences and related fields for stimulation of, for example, vagus or sciatic nerves. ...