Chris Kassotis ve bu yazının eleştiri Audrey Bailey ve Dr. Scott Korte, Joseph Beeman, Alison Curfman, Paul Kimball, Bridget Neibreggue, Jacob Redel, Amy Schroder Maija Steinberg, ve Stacey Winkeler optimizasyonu onların yardım için özel bir teşekkür Laboratuvarımızda bu modelin. Finansman Klinik Biodetectives Eğitim Grant (NIH T90) (KEP), Missouri Yaşam Bilimleri Üniversitesi Lisans Araştırma Olanakları Programı, MU Araştırma Konseyi, MU Araştırma Kurulu hibe ve NIH R21HD056441 (SCN) tarafından sağlandı.

1. Canlı hayvan cerrahisi için Planlama <ol><li> Laboratuvar hayvanları ile çalışmak için uygun onayı alındıktan emin olun. </li><li> Sipariş fareler ve yeni bir çevre aklimasyonundan en az bir hafta izin. </li><li> Erkek feromonlar maruz kalma yokluğunda ev sahipliği Dişi fareler bisiklet durdurmak, bir fenomen Whitten etkisi 15,16 olarak anılacaktır. Fareler bisiklet transferi idrarda batırılmış erkek yataklar, her beş günde bir kadın kafes tutmak için. Alternatif olarak, üstü açık kafesler kullanılması halinde, iki erkek kafesleri arasında kadın düzenli olarak bisiklet tutmak için dişi kafes yerleştirin. </li><li> Bu farelerin (Tablo 1) ameliyat öncesinde en az bir hafta için günlük vajinal sitoloji analiz ederek 17 bisiklet vardır emin olun. <ol><li> Böylece birden fazla farelerden alınan vajinal smear toplanan bir cam slayt sekiz bölüm oluşturmak için bir mum kalem kullanın. </li><li> Vajina bir damlalık kullanarak 0,2-0,25 mL serum fizyolojik veya distile su ile yıkayın. Be sdamlalık ile servikal stimülasyon, sadece vajinal orifis damlalık ure yere pseudopregnancy neden olabilir. Hücre tiplerinin analizi için cam slayt vajinal lavaj yerleştirin. Slaytlar taze okuma (ıslak) veya alternatif olarak sabit bir dizi yöntem ve standart bir ışık mikroskobu 17 kullanılarak tespit edilebilir. </li></ol></li><li> Başarılı bir aseptik cerrahi için gerekli tüm cerrahi ekipman (bkz: Malzeme Bölüm) 18 temiz ve sterilize toplayın . </li><li> PBS içinde analjezi 0.2 mg / kg son doz sunmak için steril tekniği kullanarak buprenorfin çözüm hazırlayın. Buprenorfin çözüm konsantrasyonu 0,0333 mg / ml ortalama yetişkin C57BL / 6 fare, yaklaşık 0.025 kg ve fare başına 0.15 ml subkutan enjeksiyon hacmi ağırlığında olduğunu varsayarak olmalıdır. Buprenorfin vaktinden önce hazırlanmış ve alikot olarak saklanabilir. Buprenorfin DEA lisans ve detaylı envanter günlük gerektiren bir zamanlama III kontrollü bir madde olduğunu unutmayın. </li><li> Penisilin (100 U / ml) ve streptomisin (100 mg / ml) ile steril PBS hazırlayın. </li><li> Indüksiyon 15 kadın kafeslerde 72 saat önce idrar batırılmış erkek yataklar aktararak östrus döngülerini senkronize edin. </li></ol> 2. Cerrahi alanda canlı hayvan ameliyatı için hazırlayın <ol><li> Cerrahi alanda daha önce 18 açıklandığı gibi hazırlayın. </li><li> Elektrik kesme makineleri, oftalmik merhem ve cerrahi scrubs ortaya koyan hazırlık alanı hazırlayın. </li><li> Cerrahi alanında ameliyat boyunca vücut ısısını korumak için cerrahi alanında bir devir daim sıcak su ısıtma pedi koyarak hazırlayın. Devir daim sıcak su ısıtma pedi üzerinde steril su geçirmez bir yastık yerleştirin. Cerrahi aletler, dikiş, steril cam petri kabı, biyopsi yumruk, steril gazlı bez, yara klipleri ve yara klip aplikatörü steril cerrahi alanında düzenleyin. </li><li> Devir daim sıcak su ısıtma pedleri yarım und koyarak kurtarma alanında hazırlayıner istenirse fareler ısı uzaklaşmaya izin vermek için boş bir kafes. </li></ol> 3. Anestezi ve cerrahi için fare hazırlamak <ol><li> Farenin ağırlığını kaydedin ve vajinal sitoloji değerlendirerek östrus evresini belirlemek. </li><li> Anestezi indüksiyonu için, boş bir anestezi odası (izofluran için portal içeren katı kapaklı boş kafes) fare yerleştirin. Izofluran olmayan solunmasına anestezi sistemi açın ve izofluran% 4 (0.5 ila 1 L / dk oksijen debisi) buharlaştırıcı. </li><li> Fare hazırlık masaya koni izofluran bir koni akışı (30-60 ml şırınga kılıf) ve yerde farenin burun ve ağız geçiş anestezi altında olduğunda. Yeterli anestezi, cerrahi (~% 2.5-3.5 izofluran) geri kalanı boyunca izofluran daha düşük bir konsantrasyon ile korunabilir. Yeterli anestezi derinliği ayak tutam uyarana karşı olumsuz bir tepki ile tespit edilmelidir. </li><li> T oftalmik merhem uygulayıno Ameliyat sırasında gözleri kurutulması kaçının. </li><li> Küçük elektrik kesme makineleri kullanarak, cerrahi sitesi tıraş. </li><li> Dezenfekte ve klorheksidin fırçalayın üç alternatif bira ve% 70 etanol ile cerrahi sitesi hazırlamak. </li><li> Örtü steril bir alan ile hayvan. </li></ol> 4. Rahim ligasyonu <ol><li> 1.0 cm vajinal açılış için rostral kullanarak küçük bir makas veya 0.5 biten bir neşter bıçak ya da küçük bir (~ 1 cm) orta hat kesi olun. </li><li> Kapalı makas bıçakları vücut duvarı ve karın duvarı arasında olduğu gibi ağzına yerleştirin. Yavaşça kesi etrafındaki alanı yavaş yavaş karın duvarı cilt yeterince kopuk olduğu gibi makas açılış ve kapanış teşrih künt. Kesi site çevresinde karın duvarı ve cilt arasında kalan görünür yapışıklıklar dikkatle snipped olabilir. Kesi yeterince disseke künt takdirde, karın duvarı daha zor kapanış yapacaktır. </li><li> Küçük forceps, yavaşça sol uterin horn bulun. Rahim, bağırsak, dorsal, ilk kesi sitesine girdikten sonra ne göreceğiz. Bazı durumlarda ilk yumurtalık ve ilişkili over yağ yastığı bulmak için en kolay yoldur. Uterin horn hafifçe yukarı çekin ve bir retraktörü olarak hizmet vermeye altında açık bir forseps slayt. İsterseniz, yumurtalıklar ve rahim östrus indüksiyon aşamasında (Tablo 1) ile ilgili ek bilgi için şu anda görünümünü dikkat edin. </li><li> 5-0 siyah örgü ipek sütür 6-8 cm&#39;lik iki adet (bir iğne olmadan) gergin uterin horn altında yavaşça kaydırın. </li><li> Güvenli utero-tubual kavşağı (fallop tüpüne sadece kaudal) ve kare bir düğüm, her yerde kullanarak utero-servikal bileşke (serviks sadece rostral) boynuz Arter. Şu an için sütür uçları bırakın. </li><li> Iki ligasyonu arasında uterin horn bölümü kesip ve steril bir cam petri kabı conta doku~ 100 mcL PBS içeren penisilin (100 U / ml) ve streptomisin (100 mg / ml) ining. Ipek sütür son uçlarını kesin. Sütür gevşek ya da kanama olduğunda gelirse, güdük ve başka bir düğüm. </li></ol> 5. Endometriotik implantlar eksize rahim hazırlayın <ol><li> Eksize rahim manipüle edilirken, steril gazlı bez ile karın kapağı ve steril PBS içeren penisilin ve streptomisin gerektiği gibi hidrasyon korumak. </li><li> Yağ eksize uterin horn soyun. </li><li> İsterseniz, eksize uterin horn tartın. </li><li> Forseps ile boynuz tutarak lümen içine küçük makas bıçak (14 mm bıçak uzunluğu) ekleme ve uterin boynuz yavaşça aşağı makas sürgülü uterin horn açın. </li><li> Cam Petri kabı, üç eşit büyüklükteki implantlar kesip 2 mm biyopsi yumruk kullanın. </li></ol> 6. Periton boşluğuna endometriotik implantlar sütür <ol><li> Yeri sterilhemen yukarıdaki e kesi yeri ve steril PBS içeren penisilin ve streptomisin ile iyice ıslak gazlı bez. </li><li> Ile küçük, yumuşak forseps yavaşça çekum bulmak ve ince bağırsakta boyunca rostrally hareket. Bağırsak mezenter arter kaskad açıkça görülebilecek şekilde çekum en az iki arter ve önceden ıslatılmış gazlı bez üzerine bir fan gibi düzenleyebilirsiniz bağırsağın bir küçük (4-5 cm) bölümünde dışarı çekin. Steril serum fizyolojik ile bağırsak nemli tutmak için her zaman emin olun. Not: bağırsak işleme sırasında sıçan dişli forseps kullanmayın. </li><li> Bağırsak yaklaşık 0.5 cm&#39;lik bir arterin hafifçe bir implant sütür kesici iğne tersine, P-1, 11 mm, 3 / 8 daire, 6-0 siyah ethilon sütür kullanın. </li><li> Not: bağırsak mezenter periton ince bir tabaka ile kaplıdır. Arter etrafında dikilmesi ise bu katman aracılığıyla temiz bir geçiş yapmak için dikkatli olun. Periton veya rüptürü gözyaşı olarak değil yavaş ve dikkatli bir şekilde dikiş çekinarter. </li><li> Böylece kan akışı ve bağırsak ve ölüm sonraki nekroz kaybına neden olabilir gibi bir tam iki knot, dikiş çok sert sıkmak için değil dikkatli olmak, her atmak. Implant 2 mm içinde dikiş kesin. Islak bağırsak sonraki implant geçmeden önce hidrasyon korumak için tekrar devam edin. </li><li> Rostral yönde taşıma, bağırsak önümüzdeki 3-4 cm çekin ve yavaşça zaten bir implant içeren bölümün değiştirin. Önceki implant sitesinden bir veya iki arter geç ve sonraki implant sütür. Üçüncü implant için tekrarlayın. </li><li> Bağırsak karın boşluğuna değiştirin. </li></ol> 7. Şam ameliyatları <ol><li> Şam ameliyatlar dışında hiçbir doku bağırsak mezentere sütüre olduğunu endometriozis ameliyatları aynı adımları kullanarak yapılmaktadır. </li><li> Vergi 4. adımda sol uterin boynuz. </li><li> Sham Endometriyotik implantlar (adım 5) hazır değildir.istenirse eksize uterin horn atılır ya da başka amaçlar için kullanılabilir. </li><li> Dikişler, ama herhangi bir doku, 6. adımda barsak mezenter arter kaskad üç arterlerin etrafında yerleştirilmiştir. </li></ol> 8. Kapanış cerrahi yara <ol><li> Tüm organların anatomik pozisyonda yaklaşık arka emin olun. </li><li> 5-0 kaplı olmayan bir kilitleme sürekli dikiş Vicryl dikiş, karın duvarı kapatmak için kullanın. </li><li> 9 mm yara klipleri cilt kapatmak için kullanın. </li></ol> 9 - Hayvan kurtarma <ol><li> 0.2 mg / kg doz subkütan enjeksiyon yoluyla, 0,15 ml/25 g fare, 0,33 mg / ml buprenorfin yönetin. Buprenorfin ameliyat sonrası iyileşme sürecini uzatabilir kardiyovasküler / solunum depresyonu önlemek için uygulanır. </li><li> Fare, ameliyat sırasında ıslak kazanılmış varsa Kimwipes ya da kağıt havlu ile hafifçe kurulayın. </li><li> Kafes p aşağı gelecek şekilde yerleştirin hayvan ventral taraftaKısmen hayvan kurtarıldı ve sternal yatma (anestezi hızla kapalı giyer uçucu olarak beş dakika içinde) kazanmış kadar devir daim sıcak su yastığı tepesinde. </li></ol> 10. Post-operatif bakım <ol><li> Sternal yatma, sonra saatlik cerrahi sonrası normal bir davranış geri kazanana kadar korumak için mümkün olana kadar her 15 dakikada bir Fare dikkat edilmelidir. </li><li> Fare ameliyat 24 saat içinde normal görünmelidir. Fare kurtarma ve sağlık işaretleri için yedi ila on gün boyunca günlük olarak takip edilmelidir. <ol><li> , Bir hayvan, kötü sağlık, ağrı veya sıkıntı olduğunu endikasyonları, azalmış aktivite, kendini yaralama, ungroomed görünüm, ya da hunched duruş içerir. </li><li> 24 saat içinde cerrahi bir hayvan sağlık durumunun iyi görünmüyorsa, buprenorfin (0.2 mg / kg) yönetmek veya hayvan euthanize. Hayvan, ek buprenorfin yönetiminin hayvanın omuz 8 saat içinde düzelmezsebağırsak nekrozu olasılıkla d ötenazi. </li></ol></li><li> Indüksiyon sonrası 7-10 gün yara klipleri çıkarın. </li><li> Vajinal sitoloji muayene ile östrus döngüselliğin deney süresi boyunca izlemeye devam edin. 72 saat önce toplama adım 1.3 &#39;de anlatıldığı gibi dişi kafesleri idrar batırılmış erkek yataklar aktararak östrüs döngüleri senkronize edin. </li></ol> 11. Otopsi ve doku eksizyonu <ol><li> Nekropsi zamanlaması belirli bir araştırma sorusu bağlıdır ve daha temsili sonuçlar ve tartışma olarak ele alınmıştır. </li><li> Karbondioksit boğulma fare Euthanize. </li><li> (Istenirse) 1 cc şırınga, 23 gauge iğne kullanılarak kalp ponksiyonu ile kan toplayın. </li><li> Toplama 17 kez östrus evresini belirlemek için yukarıda açıklandığı gibi bir vajinal sitoloji yayma toplayın. </li><li> Utero-tubal kavşakta kalan uterin horn kesin ve serviks, yağ çıkarmak tartmak ve süreçİstenen (11.14 ve 11.15 &#39;e bakınız). </li><li> Endometriotik lezyonların etrafında siyah dikişlerle bulun. Fotoğraf bozulmamış endometriotik lezyonlar eğer istenilen. </li><li> Dikkatlice namlusu lezyonlar için dikkatli olmak, küçük bir makas ve forseps ile endometriotik lezyonları çevreleyen yapışıklıklar teşrih. RNA bozulmasını önlemek için hızlı ve dikkatli bir şekilde çalışın. </li><li> Ölçü ve kaliperler kullanarak endometriotik lezyonların uzunluk ve genişlik kaydetmek. </li><li> Vergi PBS ile ıslatılmış kağıt havlu üzerine endometriotik lezyonlar ve yer. Lezyonlar endometriotik olmayan herhangi bir doku çıkarın. Bir kesme mikroskop ya da büyüteç standı diseksiyonu yardımcı olmak için kullanılabilir. </li><li> Üç sıvı dolu endometriotik lezyonlar dikiş çıkarmadan önce tartılır. </li><li> Endometriotik lezyonlar dikiş yavaşça çıkarın. </li><li> Histoloji için, formalin düzeltme sıvısı, üç otuz dakika PBS yıkar ve nihai depolama takip iki saat için endometriotik bir lezyon dolu In% 70 etanol. Dehydrate ve parafin gömün. </li><li> Endometriotik lezyonların Lance iki. Yine bu tartılır. Siklik hormonal değişiklikler, kist sıvısı miktarını değiştirebilir, bu kistin ağırlığı artı 11.10 olarak ölçülen sıvı yanı sıra, doku ıslak ağırlık bir ölçü verir. </li><li> RNA izolasyonu ve gen ekspresyon çalışmaları için, hemen -80 lizis bağlayıcı çözüm ve mağaza fırlattı endometriotik lezyonlar (ya da ~ 20 mg rahim dokusu) ° C RNAqueous kiti (Ambion) ya da diğer bir yöntem ile gelecekteki RNA izolasyonu için homojenize İstenen. </li><li> , RNA, DNA veya protein gelecek izolasyonu için, hemen ikinci fırlattı endometriotik lezyon snap-dondurma (veya ~ 20 mg rahim dokusu) -80 ° C sıvı nitrojen ve mağaza </li></ol> Temsilcisi Sonuçlar Fare modelinde, cerrahi olarak uyarılan endometriozis Endometriyotik lezyonlarının gözlenen morfolojik ve histolojik olarak çok benzemektedirkadınlar. Kadın ve fare modelinde hem de endometriozis histolojik analiz endometriotik lezyonlar endometrial bezler ve stroma (Şekil 2A) içerdiğini gösterir. Farelerde Endometriyotik lezyonlar aynı zamanda kadınlarda endometriozis ortak bir hallmark (Şekil 2B) 19 hemosiderin yüklü makrofajlar, içerir . Fareler kaldırılır Endometriyotik lezyonlar üç gün sonrası indüksiyon iltihaplı ve hemorajik (Şekil 3A) görünür. Fare modelinde büyüme endometriotik lezyonların 2-4 hafta sonra kist gibi peritoneal yapışıklıklar, sıvı dolu ve çevrilidir (Şekil 3B ve 3C). Indüksiyon lezyon ağırlığı ile karşılaştırıldığında, sıvı dolu lezyonlar 306% 862% daha büyük ve iki ay sonrası indüksiyon ve fırlattı lezyonlar sırasıyla% 51 ve% 172 daha büyük, (Şekil 4A ve 4B) ve. Biz beş farklı deneylerde (Şekil 5) üzerinden bir ay sonrası indüksiyon dolu ve tutarlı bir sıvı fırlattı endometriotik lezyon ağırlıkları elde edilmiştir. Bir ay sonrası,duction sıvı dolu (7.44 ± 3.75 mg) ve fırlattı (2.92 ± 1.23 mg) endometriotik lezyon ağırlığı önemli ölçüde korele idi (Pearson korelasyon katsayısı = 0,669, p &lt;0,001) . Fare Yaş, üç yaş ve on ay arasında fareler için lezyon büyüklüğü etkilemedi. Ne bir ay dolu ya da endometriotik lezyonun ağırlık fırlattı sıvı-indüksiyon sonrası önemli ölçüde hayvanın yaşı ile korelasyon (r = -0,136, p = 0.380 ve r = -0,063, p = 0.698, sırasıyla ). Fare rahim östrus döngüsü sırasında steroid hormonlarının etkisi nedeniyle boyutu değişir, sıvı retansiyonu, hücre çoğalması ve görünüm uğrar. Biz farklı östrus evrelerinde hayvanlardan elde kalan sağlam uterin horn ağırlığı endometriotik lezyon ağırlığı karşılaştırıldı. Biz uterus ağırlığı ve sıvı dolu veya fırlattı endometriotik l arasında anlamlı bir korelasyon bulamadıkbir aylık Mesaj indüksiyon (sırasıyla r = -0,046, p = 0.765 ve r = 0.232, p = 0.155) esion ağırlık. , Farelerin endometriotik lezyonlar gözlenen gen ekspresyonu desen yakından 5 hastalık kadınlarda bildirilen aynalar . Üç gün-indüksiyon sonrası ekstrasellüler matriks remodeling, hücre adezyon ve anjiyogenez düzenleyen genler yüksek upregüle ve büyüme bir ay boyunca bu genlerin çoğu upregüle kalır. Şekiller ve Tablolar <img alt="Şekil 1" src="/files/ftp_upload/3396/3396fig1.jpg" /> Şekil 1. fare otolog rahim dokusu transferi ile endometriozis cerrahi indüksiyon. Sol uterin boynuz, bağlandı eksize ve endometrium maruz boyuna açtı. Üç 2 mm 2 biyopsileri bağırsak mesente arteriyel kaskad hazırlanır ve her bir arter sütürery. By-indüksiyon sonrası bir ay endometriotik lezyonlar sıvı dolu ve yapışıklıklar ile çevrilidir. <img alt="Şekil 2" src="/files/ftp_upload/3396/3396fig2.jpg" /> Şekil 2, bir ay sonrası indüksiyon endometriozis fare modelinde bir endometrial lezyon Hematoksilen ve eosin ile boyanan bölümünde gösteren (A) endometriyal bezler ve varlığı stromada; ölçek çubuğu = 50 mm ve (B) hemosiderin yüklü makrofajlar , bazıları oklarla gösterilen; ölçekli bar = 20 mikron. <img alt="Şekil 3" src="/files/ftp_upload/3396/3396fig3.jpg" /> Şekil 3 ötenazi aşağıdaki fare modeli Endometriyotik lezyonlar, ya üç gün-indüksiyon sonrası (A) veya bir ay sonrası indüksiyon (B ve C). <img alt="Şekil 4" src="/files/ftp_upload/3396/3396fig4.jpg" /> Şekil 4 Endometriyotik lezyonlar cerrahi tr ikna farelerdedometriosis bir ya da iki ay sonrası indüksiyon eksize ve tartıldı. Veriler ortalama ± SEM. Veri dönüştürülmüş giriş ve farklı harf, tek taraflı Fisher En Önemli Fark mulitple Karşılaştırmalar takip tek yönlü ANOVA her panelin içinde önemi gösterir. (A), sıvı dolu endometriotik lezyonlar, Kist (N = indüksiyon, bir ay, iki ay sonrası indüksiyon, sırasıyla 10, 7 veya 5). (B) fırlattı endometriotik lezyonlar (n = indüksiyon, bir ay veya iki ay-indüksiyon sonrası sırasıyla 10, 8 ya da 7). <img alt="Şekil 5" src="/files/ftp_upload/3396/3396fig5.jpg" /> Şekil 5 Endometriyotik lezyon ıslak ağırlık ve sıvı ile bir ay beş ayrı deney sonrası indüksiyon fırlattı. Veriler ortalama ± SEM. Fareler N = 10, 6, 8, 7 ve sıvı dolu lezyonlar ve 0, 7 için 7, 10, 8 ve fırlattı lezyonlar için sırasıyla deney 1, 2, 3, 4, 5, 8. <img alt="Tablo 1" src = &quot;/ files/ftp_upload/3396/3396table1.jpg&quot; /&gt; Tablo 1. Yumurtalıklar ve Rahim ve İndüksiyon Vajinal Sitoloji ve Görsel Görünüm östrus Sahne Gözlem. Yumurtalık ve rahim Görünüm zamana bağlı olacak. Aşağıdaki her bir döngüsü gün sabah saat 08:00 civarında kurban dayanmaktadır. Dahası, gözlemler subjektif ve yumurtalık ve rahim boynuzları karşılaştırırken sadece rahim boynuzları daha iyi bir tahmin olacaktır. Bu gözlemler, günlük vajinal sitoloji okumalarından elde edilen bilgilere ek içindir. <img alt="Tablo 2" src="/files/ftp_upload/3396/3396table2.jpg" /> Tablo 2. Fare ve sıçan cerrahinin karşılaştırılması.

<ol>
	<li>Simoens, S., Hummelshoj, L., D'Hooghe, T. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Endometriosis:+cost+estimates+and+methodological+perspective.">Endometriosis: cost estimates and methodological perspective.</a> Hum. Reprod. Update. 13, 395-404 (2007).</li><li>Grummer, R. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Animal+models+in+endometriosis+research.">Animal models in endometriosis research.</a> Hum. Reprod. Update. 12, 641-649 (2006).</li><li>Vernon, M. W., Wilson, E. A. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Studies+on+the+surgical+induction+of+endometriosis+in+the+rat.">Studies on the surgical induction of endometriosis in the rat.</a> Fertil. Steril. 44, 684-694 (1985).</li><li>Cummings, A. M., Metcalf, J. L. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Induction+of+endometriosis+in+mice:+a+new+model+sensitive+to+estrogen.">Induction of endometriosis in mice: a new model sensitive to estrogen.</a> Reprod. Toxicol. 9, 233-238 (1995).</li><li>Pelch, K. E. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Aberrant+gene+expression+profile+in+a+mouse+model+of+endometriosis+mirrors+that+observed+in+women.">Aberrant gene expression profile in a mouse model of endometriosis mirrors that observed in women.</a> Fertil. Steril. 93, 1615-1627 (2010).</li><li>Flores, I. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Molecular+profiling+of+experimental+endometriosis+identified+gene+expression+patterns+in+common+with+human+disease.">Molecular profiling of experimental endometriosis identified gene expression patterns in common with human disease.</a> Fertil. Steril. 87, 1180-1199 (2007).</li><li>Giudice, L. C., Kao, L. C. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Endometriosis.">Endometriosis.</a> Lancet. 364, 1789-1799 (2004).</li><li>Lin, Y. J., Lai, L. e. i., Y, H., Wing, L. Y. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Neutrophils+and+macrophages+promote+angiogenesis+in+the+early+stage+of+endometriosis+in+a+mouse+model.">Neutrophils and macrophages promote angiogenesis in the early stage of endometriosis in a mouse model.</a> Endocrinology. 147, 1278-1286 (2006).</li><li>Fang, Z. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Intact+progesterone+receptors+are+essential+to+counteract+the+proliferative+effect+of+estradiol+in+a+genetically+engineered+mouse+model+of+endometriosis.">Intact progesterone receptors are essential to counteract the proliferative effect of estradiol in a genetically engineered mouse model of endometriosis.</a> Fertil. Steril. 82, 673-678 (2004).</li><li>Fang, Z. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Genetic+or+enzymatic+disruption+of+aromatase+inhibits+the+growth+of+ectopic+uterine+tissue.">Genetic or enzymatic disruption of aromatase inhibits the growth of ectopic uterine tissue.</a> J. Clin. Endocrinol. Metab. 87, 3460-3466 (2002).</li><li>Cummings, A. M., Metcalf, J. L., Birnbaum, L. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Promotion+of+endometriosis+by+2,3,7,8-tetrachlorodibenzo-p-dioxin+in+rats+and+mice:+time-dose+dependence+and+species+comparison.">Promotion of endometriosis by 2,3,7,8-tetrachlorodibenzo-p-dioxin in rats and mice: time-dose dependence and species comparison.</a> Toxicol. Appl. Pharmacol. 138, 131-139 (1996).</li><li>Foster, W. G. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Morphologic+characteristics+of+endometriosis+in+the+mouse+model:+application+to+toxicology.">Morphologic characteristics of endometriosis in the mouse model: application to toxicology.</a> Can. J. Physiol. Pharmacol. 75, 1188-1196 (1997).</li><li>Cummings, A. M., Metcalf, J. L. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Effect+of+surgically+induced+endometriosis+on+pregnancy+and+effect+of+pregnancy+and+lactation+on+endometriosis+in+mice.">Effect of surgically induced endometriosis on pregnancy and effect of pregnancy and lactation on endometriosis in mice.</a> Proc. Soc. Exp. Biol. Med. 212, 332-337 (1996).</li><li>Lu, Y., Nie, J., Liu, X., Zheng, Y., Guo, S. W. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Trichostatin+A,+a+histone+deacetylase+inhibitor,+reduces+lesion+growth+and+hyperalgesia+in+experimentally+induced+endometriosis+in+mice.">Trichostatin A, a histone deacetylase inhibitor, reduces lesion growth and hyperalgesia in experimentally induced endometriosis in mice.</a> Hum. Reprod. 25, 1014-1025 (2010).</li><li>Whitten, W. K. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Modification+of+the+oestrous+cycle+of+the+mouse+by+external+stimuli+associated+with+the+male.">Modification of the oestrous cycle of the mouse by external stimuli associated with the male.</a> J. Endocrinol. 13, 399-404 (1956).</li><li>Whitten, W. K., Bronson, F. H., Greenstein, J. A. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Estrus-inducing+pheromone+of+male+mice:+transport+by+movement+of+air.">Estrus-inducing pheromone of male mice: transport by movement of air.</a> Science. 161, 584-585 (1968).</li><li>Goldman, J. M., Murr, A. S., Cooper, R. L. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=The+rodent+estrous+cycle:+characterization+of+vaginal+cytology+and+its+utility+in+toxicological+studies.">The rodent estrous cycle: characterization of vaginal cytology and its utility in toxicological studies.</a> Birth. Defects. Res. B. Dev. Reprod. Toxicol. 80, 84-97 (2007).</li><li>Pritchett-Corning, K. R., Mulder, G. B., Luo, Y., White, W. J. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Principles+of+Rodent+Surgery+for+the+New+Surgeon.">Principles of Rodent Surgery for the New Surgeon.</a> J. Vis. Exp. (47), e2586-e2586 (2011).</li><li>Moen, M. H., Halvorsen, T. B. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Histologic+confirmation+of+endometriosis+in+different+peritoneal+lesions.">Histologic confirmation of endometriosis in different peritoneal lesions.</a> Acta. Obstet. Gynecol. Scand. 71, 337-342 (1992).</li><li>Cummings, A. M. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Methoxychlor+as+a+model+for+environmental+estrogens.">Methoxychlor as a model for environmental estrogens.</a> Crit. Rev. Toxicol. 27, 367-379 (1997).</li><li>Fowler, R. E., Edwards, R. G. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Induction+of+superovulation+and+pregnancy+in+mature+mice+by+gonadotrophins.">Induction of superovulation and pregnancy in mature mice by gonadotrophins.</a> J. Endocrinol. 15, 374-384 (1957).</li><li>Wilson, E. D., Zarrow, M. X. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Comparison+of+superovulation+in+the+immature+mouse+and+rat.">Comparison of superovulation in the immature mouse and rat.</a> J. Reprod. Fertil. 3, 148-158 (1962).</li><li>Lee, B., Du, H., Taylor, H. S. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Experimental+murine+endometriosis+induces+DNA+methylation+and+altered+gene+expression+in+eutopic+endometrium.">Experimental murine endometriosis induces DNA methylation and altered gene expression in eutopic endometrium.</a> Biol. Reprod. 80, 79-85 (2009).</li><li>Somigliana, E. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Endometrial+ability+to+implant+in+ectopic+sites+can+be+prevented+by+interleukin-12+in+a+murine+model+of+endometriosis.">Endometrial ability to implant in ectopic sites can be prevented by interleukin-12 in a murine model of endometriosis.</a> Hum. Reprod. 14, 2944-2950 (1999).</li><li>Hirata, T. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Development+of+an+experimental+model+of+endometriosis+using+mice+that+ubiquitously+express+green+fluorescent+protein.">Development of an experimental model of endometriosis using mice that ubiquitously express green fluorescent protein.</a> Hum. Reprod. 20, 2092-2096 (2005).</li><li>Story, L., Kennedy, S. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Animal+studies+in+endometriosis:+a+review.">Animal studies in endometriosis: a review.</a> Ilar. J. 45, 132-138 (2004).</li><li>Cummings, A. M., Hedge, J. M., Birnbaum, L. S. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Effect+of+prenatal+exposure+to+TCDD+on+the+promotion+of+endometriotic+lesion+growth+by+TCDD+in+adult+female+rats+and+mice.">Effect of prenatal exposure to TCDD on the promotion of endometriotic lesion growth by TCDD in adult female rats and mice.</a> Toxicol. Sci. 52, 45-49 (1999).</li><li>Cummings, A. M., Metcalf, J. L. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Effects+of+estrogen,+progesterone,+and+methoxychlor+on+surgically+induced+endometriosis+in+rats.">Effects of estrogen, progesterone, and methoxychlor on surgically induced endometriosis in rats.</a> Fundam. Appl. Toxicol. 27, 287-290 (1995).</li><li>Sharpe-Timms, K. L. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Endometriotic+lesions+synthesize+and+secrete+a+haptoglobin-like+protein.">Endometriotic lesions synthesize and secrete a haptoglobin-like protein.</a> Biol. Reprod. 58, 988-994 (1998).</li><li>Yavuz, E., Oktem, M., Esinler, I., Toru, S. A., Zeyneloglu, H. B. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Genistein+causes+regression+of+endometriotic+implants+in+the+rat+model.">Genistein causes regression of endometriotic implants in the rat model.</a> Fertil. Steril. 88, 1129-1134 (2007).</li><li>Dmitrieva, N. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Endocannabinoid+involvement+in+endometriosis.">Endocannabinoid involvement in endometriosis.</a> Pain. 151, 703-710 (2010).</li><li>Efstathiou, J. A. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Nonsteroidal+antiinflammatory+drugs+differentially+suppress+endometriosis+in+a+murine+model.">Nonsteroidal antiinflammatory drugs differentially suppress endometriosis in a murine model.</a> Fertil. Steril. 83, 171-181 (2005).</li><li>Becker, C. M. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Endostatin+inhibits+the+growth+of+endometriotic+lesions+but+does+not+affect+fertility.">Endostatin inhibits the growth of endometriotic lesions but does not affect fertility.</a> Fertil. Steril. 84, 1144-1155 (2005).</li><li>Becker, C. M. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Short+synthetic+endostatin+peptides+inhibit+endothelial+migration+in+vitro+and+endometriosis+in+a+mouse+model.">Short synthetic endostatin peptides inhibit endothelial migration in vitro and endometriosis in a mouse model.</a> Fertil. Steril. 85, 71-77 (2006).</li><li>Sharpe-Timms, K. L. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Using+rats+as+a+research+model+for+the+study+of+endometriosis.">Using rats as a research model for the study of endometriosis.</a> Ann. N.Y. Acad. Sci. 955, 318-327 (2002).</li><li>Stilley, J. A., Woods-Marshall, R., Sutovsky, M., Sutovsky, P., Sharpe-Timms, K. L. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Reduced+Fecundity+in+Female+Rats+with+Surgically+Induced+Endometriosis+and+in+Their+Daughters:+A+Potential+Role+for+Tissue+Inhibitors+of+Metalloproteinase+1.">Reduced Fecundity in Female Rats with Surgically Induced Endometriosis and in Their Daughters: A Potential Role for Tissue Inhibitors of Metalloproteinase 1.</a> Biol. Reprod. 80, (2009).</li></ol>

Çıkar çatışması ilan etti.

Farelerde endometriozis cerrahi indüksiyon yaparken dikkat edilmelidir birçok kritik parametre vardır. İlk olarak, endometriozis östrojen bağımlı bir hastalıktır ve sağlam hayvanların veya alternatif östrojenler 20 ile desteklenmiş ovarektomize hayvanlar gibi bu cerrahi olarak yapılmalıdır. İkinci olarak, arteryel kaskad endometriyal biyopsiler dikilmesi çok dikkatli yapılmalıdır. Biz biriyle sadece iki nispeten gevşek knot kullanarak, bağırsak ve sonraki doku nekrozu ve hayvan ölüm...

<table border="1"><tbody><tr><td> Reaktif / ekipman Adı </td><td> Şirket </td><td> Katalog numarası </td></tr><tr><td> Wax kalem </td><td> Balıkçı </td><td> NC9954135 </td></tr><tr><td> Cam slayt </td><td> Balıkçı </td><td> 12-550-433 </td></tr><tr><td> Damlalık </td><td> Balıkçı </td><td> S79383 </td></tr><tr><td> Vajinal sitoloji smear değerlendirilmesi için standart ışık mikroskobu </td><td></td><td></td></tr><tr><td> Buprenorfin HCL c3 (CARJET) 10X1ml </td><td> Butler Hayvan Sağlık Kaynağı </td><td> 022891 </td></tr><tr><td> Steril fosfat tamponlu salin (PBS) </td><td> Gibco </td><td> 14040-117 </td></tr><tr><td> 10.000 U / ml penisilin,% 0.85 NaCl içinde 10.000 mg / ml Streptomisin </td><td> Hyclone </td><td> SV30010 </td></tr><tr><td> İsofluranın </td><td> AbbottHayvan Sağlığı </td><td> 05260-05 </td></tr><tr><td> İsofluranın olmayan solunmasına anestezi sistemi </td><td></td><td></td></tr><tr><td> Devridaim sıcak su ısıtma pedi </td><td></td><td></td></tr><tr><td> 30 ml şırınga kılıf </td><td> Balıkçı </td><td> 14-823-16G </td></tr><tr><td> Toz ücretsiz steril eldiven </td><td> Fisherbrand </td><td> 19020558 </td></tr><tr><td> Oftalmik merhem </td><td> Binbaşı İlaç </td><td> 10033691 </td></tr><tr><td> Küçük elektrik kesme makineleri </td><td> Wahl </td><td> 9861-600 </td></tr><tr><td> Klorheksidin fırçalayın </td><td> Balıkçı </td><td> NC9863042 </td></tr><tr><td> % 70 Etanol </td><td></td><td></td></tr><tr><td> Polylined steril alan </td><td> Busse Hastanesi Tek </td><td> 696 </td></tr><tr><td> Boyut 3 neşter </td><td> Balıkçı </td><td> 22-079-657 </td></tr><tr><td> Number 10 bisturi ağızları </td><td> Balıkçı </td><td> 22-079-681 </td></tr><tr><td> Küçük cerrahi makas </td><td> Roboz </td><td> RS-5850 </td></tr><tr><td> Küçük tırtıklı yarı kavisli bir forseps </td><td> Roboz </td><td> RS-5135 </td></tr><tr><td> 5-0 siyah örgü ipek sütür </td><td> Ethicon </td><td> K870H </td></tr><tr><td> Sterilize pyrex cam Petri kapları </td><td> Corning </td><td> 70160-101 </td></tr><tr><td> 2 mm punch biyopsi </td><td> Miltex </td><td> 33-31 </td></tr><tr><td> Steril gazlı bez </td><td> Kendall </td><td> 1806 </td></tr><tr><td> 6-0 siyah monofilament ethilon naylon sütür </td><td> Ethicon </td><td> 697G </td></tr><tr><td> İğne sürücüleri (isteğe bağlı) </td><td> Dünya Hassas Aletler </td><td> 500023 </td></tr><tr><td> 5-0 boyasız örgülü kaplı vicryl sütür </td><td> Ethicon </td><td> J490G </td></tr><tr><td> 9mm AutoCLIP klipleri yara </td><td> Becton Dickinson </td><td> 427631 </td></tr><tr><td> AutoCLIP uygulayıcısı ve sökücü </td><td> Becton Dickinson </td><td> 427630 </td></tr><tr><td> 23G iğne </td><td> Becton Dickinson </td><td> 305193 </td></tr><tr><td> 1 cc şırınga </td><td> Becton Dickson </td><td> 301025 </td></tr><tr><td> 5X büyüteç standı (isteğe bağlı) </td><td> Balıkçı </td><td> 14-648-23 </td></tr><tr><td> % 10 formalin Tamponlu </td><td> Balıkçı </td><td> SF100-4 </td></tr><tr><td> Kumpaslar </td><td> Roboz </td><td> RS-6466 </td></tr><tr><td> İşleme / gömme kasetleri </td><td> Balıkçı </td><td> 15-197-700A </td></tr><tr><td> Biyopsi köpük pedler </td><td> Balıkçı </td><td> 22-038-222 </td></tr><tr><td> RNAqueous RNA izolasyon kiti </td><td>Ambion </td><td> AM1912 </td></tr><tr><td> Sıvı azot </td><td></td><td></td></tr><tr><td> Snap kap mikrosantrifüj düz üst boru </td><td> Balıkçı </td><td> 02-681-240 </td></tr><tr><td> Ketamin (isteğe bağlı) </td><td> Simga </td><td> K4138 </td></tr><tr><td> Domitor (medetomidine hidroklorür) (isteğe bağlı) </td><td> Tocris </td><td> 2023 </td></tr><tr><td> Antisedan (atipamezole) (isteğe bağlı) </td><td> Sigma </td><td> A9611 </td></tr></tbody></table>

mouse model of surgically-induced endometriosis by auto-transplantation of uterine tissue

Endometriozis, etyolojisi bilinmemektedir, ağrılı, kronik bir hastalık. Ayrıca, tedavi endometriozis lezyonlarının laparoskopik çıkarılması ve / veya kronik ağrı ve kısırlık belirtileri, ilaç yönetimi gerektirebilir. Endometriozis ile ilişkili maliyet Amerika Birleşik Devletleri 1 yılda 22 milyar dolar olarak tahmin edilmiştir. Anlayışımız bu gizemli hastalığın altında yatan mekanizmaları daha için, hayvan modelleri istihdam edilmiştir. Primatlar kendiliğinden endometriozis geliştirmek ve bu nedenle primat modelleri en yakın kadınlarda hastalık benzer. Kemirgen modelleri Ancak, daha uygun maliyetli ve 2 hazır. Burada tarif modeli, rahim dokusunun (Şekil 1) bağırsak mezenter otolog transfer içerir ve ilk 3 sıçan geliştirilen ve daha sonra fare 4 transfer edildi . Amaç, cerrahi ile indüklenen endometriozis otolog kemirgen modeli taklit etmek.kadınlarda hastalık. Biz ve diğerleri daha önce değişmiş gen ekspresyonu desen fare ya da hastalığı 5,6 ile kadınlarda gözlenen sıçanlarda aynalar endometriotik lezyonlar gözlenen olduğunu göstermiştir . Fare ameliyat yerine bir avantajı mevcut transgenik fare suşlarının bolluğu endometriozis kurulması ve büyüme önemli rolü belirli bileşenleri belirleyen araştırmacılar yardımcı olabilir. Eksize insan endometrium parçaları immün sistemi baskılanmış farelerin periton tanıtıldı olduğu alternatif bir model de yaygın olarak kullanılan ancak 2,7 endometriozis önemli olduğu düşünülmektedir normal bir bağışıklık sistemi eksikliği ile sınırlıdır. Daha da önemlisi, cerrahi olarak uyarılan endometriozis fare modelinde, bağışıklık sistemi, 8, 9,10 ve çevresel faktörler 11,12 hormonların yanı sıra endometriozis etkileri Fert üzerinde endometriozis nasıl etkilediğini incelemek için kullanılan bir çok yönlü bir model.ility 13 ve ağrı 14.

Watch this Scientific Journal Video about Mouse Model of Surgically-induced Endometriosis by Auto-transplantation of Uterine Tissue at JoVE.com

Mouse Model of Surgically-induced Endometriosis by Auto-transplantation of Uterine Tissue

Fare ve sıçanlarda barsak mezenter arter kaskad rahim dokusundaki otomatik nakli endometriozis cerrahi indüksiyon açıklaması.

Uterus Doku Otomatik nakli Cerrahi indüklenen Endometriozis Fare Modeli

Endometriosis is a chronic, painful disease whose etiology remains unknown. Furthermore, treatment of endometriosis can require laparoscopic removal of ...

mouse-model-surgically-induced-endometriosis-auto-transplantation

Research

JoVE Journal

Medicine

28.5K Görüntüleme.  University of Missouri. Fare ve sıçanlarda barsak mezenter arter kaskad rahim dokusundaki otomatik nakli endometriozis cerrahi indüksiyon açıklaması.

Video: Mouse Model of Surgically-induced Endometriosis by Auto-transplantation of Uterine Tissue

Mouse Model of Intraluminal MCAO: Cerebral Infarct Evaluation by Cresyl Violet Staining

Stroke is the third cause of mortality and the leading cause of disability in the World. Ischemic stroke accounts for approximately 80% of all strokes. However, the thrombolytic tissue plasminogen activator (tPA) is the only treatment of acute ischemic stroke that exists. This led researchers to develop several ischemic stroke models in a variety of species. Two major types of rodent models have been developed: models of global cerebral ischemia or focal cerebral ischemia. To mimic ischemic stroke in patients, in whom approximately 80% thrombotic or embolic strokes occur in the territory of the middle cerebral artery (MCA), the intraluminal middle cerebral artery occlusion (MCAO) model is quite relevant for stroke studies. This model was first developed in rats by Koizumi et al. in 1986 1. Because of the ease of genetic manipulation in mice, these models have also been developed in this species 2-3.
	Herein, we present the transient MCA occlusion procedure in C57/Bl6 mice. Previous studies have reported that physical properties of the occluder such as tip diameter, length, shape, and flexibility are critical for the reproducibility of the infarct volume 4. Herein, a commercial silicon coated monofilaments (Doccol Corporation) have been used. Another great advantage is that this monofilament reduces the risk to induce subarachnoid hemorrhages. Using the Zeiss stereo-microscope Stemi 2000, the silicon coated monofilament was introduced into the internal carotid artery (ICA) via a cut in the external carotid artery (ECA) until the monofilament occludes the base of the MCA. Blood flow was restored 1 hour later by removal of the monofilament to mimic the restoration of blood flow after lysis of a thromboembolic clot in humans. The extent of cerebral infarct may be evaluated first by a neurologic score and by the measurement of the infarct volume. Ischemic mice were thus analyzed for their neurologic score at different post-reperfusion times. To evaluate the infarct volume, staining with 2,3,5-triphenyltetrazolium chloride (TTC) was usually performed. Herein, we used cresyl violet staining since it offers the opportunity to test many critical markers by immunohistochemistry. In this video, we report the MCAO procedure; neurological scores and the evaluation of the infarct volume by cresyl violet staining.

The intraluminal middle cerebral occlusion model in mice is herein presented. The extent of cerebral infarct is evaluated by a neurologic score and cresyl violet staining, an alternative staining to TTC, offering the great advantage to test in parallel many interest markers.

Intraluminar MCAO Mouse Model: kresil Violet Boyama tarafından Serebral İnfarktı Değerlendirilmesi

Stroke is the third  cause of mortality and the leading cause of disability in the World. Ischemic  stroke accounts for approximately 80% of all strokes. ...

Tıp

Implantation of Inferior Vena Cava Interposition Graft in Mouse Model

Biodegradable scaffolds seeded with bone marrow mononuclear cells (BMCs) are often used for reconstructive surgery to treat congenital cardiac anomalies. The long-term clinical results showed excellent patency rates, however, with significant incidence of stenosis. To investigate the cellular and molecular mechanisms of vascular neotissue formation and prevent stenosis development in tissue engineered vascular grafts (TEVGs), we developed a mouse model of the graft with approximately 1 mm internal diameter. First, the TEVGs were assembled from biodegradable tubular scaffolds fabricated from a polyglycolic acid nonwoven felt mesh coated with &#949;-caprolactone and L-lactide copolymer. The scaffolds were then placed in a lyophilizer, vacuumed for 24 hr, and stored in a desiccator until cell seeding. Second, bone marrow was collected from donor mice and mononuclear cells were isolated by density gradient centrifugation. Third, approximately one million cells were seeded on a scaffold and incubated O/N. Finally, the seeded scaffolds were then implanted as infrarenal vena cava interposition grafts in C57BL/6 mice. The implanted grafts demonstrated excellent patency (&#62;90%) without evidence of thromboembolic complications or aneurysmal formation. This murine model will aid us in understanding and quantifying the cellular and molecular mechanisms of neotissue formation in the TEVG.

To improve our knowledge of cellular and molecular neotissue formation, a murine model of the TEVG was recently developed. The grafts were implanted as infrarenal vena cava interposition grafts in C57BL/6 mice. This model achieves similar results to those achieved in our clinical investigation, but over a far shortened time-course.

Fare Modeli Inferior Vena Cava İnterpozisyon Greft İmplantasyonu

Biodegradable scaffolds seeded with bone marrow mononuclear cells (BMCs) are often used for reconstructive surgery to treat congenital cardiac anomalies. ...

Transplantation of Pulmonary Valve Using a Mouse Model of Heterotopic Heart Transplantation

Tissue engineered heart valves, especially decellularized valves, are starting to gain momentum in clinical use of reconstructive surgery with mixed results. However, the cellular and molecular mechanisms of the neotissue development, valve thickening, and stenosis development are not researched extensively. To answer the above questions, we developed a murine heterotopic heart valve transplantation model. A heart valve was harvested from a valve donor mouse and transplanted to a heart donor mouse. The heart with a new valve was transplanted heterotopically to a recipient mouse. The transplanted heart showed its own heartbeat, independent of the recipient&#8217;s heartbeat. The blood flow was quantified using a high frequency ultrasound system with a pulsed wave Doppler. The flow through the implanted pulmonary valve showed forward flow with minimal regurgitation and the peak flow was close to 100 mm/sec. This murine model of heart valve transplantation is highly versatile, so it can be modified and adapted to provide different hemodynamic environments and/or can be used with various transgenic mice to study neotissue development in a tissue engineered heart valve.

In order to understand the cellular and molecular mechanisms underlying neotissue formation and stenosis development in tissue engineered heart valves, a murine model of heterotopic heart valve transplantation was developed. A pulmonary heart valve was transplanted to recipient using the heterotopic heart transplantation technique.

Heterotopik Kalp Nakli bir Fare Modeli Kullanarak Pulmoner Vana Nakli

Tissue engineered heart valves, especially decellularized valves, are starting to gain momentum in clinical use of reconstructive surgery with mixed ...

Rose Bengal Photothrombosis by Confocal Optical Imaging In Vivo: A Model of Single Vessel Stroke

In vivo imaging techniques have increased in utilization due to recent advances in imaging dyes and optical technologies, allowing for the ability to image cellular events in an intact animal. Additionally, the ability to induce physiological disease states such as stroke in vivo increases its utility. The technique described herein allows for physiological assessment of cellular responses within the CNS following a stroke and can be adapted for other pathological conditions being studied. The technique presented uses laser excitation of the photosensitive dye Rose Bengal in vivo to induce a focal ischemic event in a single blood vessel. 
The video protocol demonstrates the preparation of a thin-skulled cranial window over the somatosensory cortex in a mouse for the induction of a Rose Bengal photothrombotic event keeping injury to the underlying dura matter and brain at a minimum. Surgical preparation is initially performed under a dissecting microscope with a custom-made surgical/imaging platform, which is then transferred to a confocal microscope equipped with an inverted objective adaptor. Representative images acquired utilizing this protocol are presented as well as time-lapse sequences of stroke induction. This technique is powerful in that the same area can be imaged repeatedly on subsequent days facilitating longitudinal in vivo studies of pathological processes following stroke.

Rose Bengal Photothrombosis by Confocal Optical Imaging In Vivo:  A Model of Single Vessel Stroke

Here, we describe a semi-invasive optical microscopy approach for the induction of a Rose Bengal photothrombotic clot in the somatosensory cortex of a mouse in vivo. The technical aspects of the imaging procedure are described from induction of a photothrombotic event to application and data collection.

Konfokal Optik Görüntüleme ile Rose Bengal Fototromboz<em&gt; In Vivo</em&gt;: Tek Gemi İnme Bir Model

In vivo imaging techniques have increased in utilization due to recent advances in imaging dyes and optical technologies, allowing for the ability to ...

Creation of a Rodent Model of Abdominal Aortic Aneurysm by Blocking Adventitial Vasa Vasorum Perfusion

The adventitial vasa vasorum (VV) provides oxygen and nourishment to the aortic wall. Hypoxia in the aortic wall can cause enlarged abdominal aortic aneurysms (AAAs). This article introduces and describes a standard protocol used to induce AAAs through adventitial VV hypoperfusion created with a combination of polyurethane catheter insertion into the aortic lumen and suture ligation of the infrarenal abdominal aorta.
The protocol involves the use of male rats weighing 300-400 g, which are provided food and water ad libitum. After laparotomy with a ventral midline abdominal incision, exfoliation of the aorta is performed, which blocks blood flow from the perivascular tissue. Aortotomy involving a small incision adjacent to the renal artery branches is performed, and a polyurethane catheter is inserted using an 18-gauge indwelling needle. After repairing the incision, tight ligation of the aorta over the catheter blocks VV blood flow from the proximal direction through the aortic wall without disturbing the aortic blood flow. This technique can induce an AAA with progressive aortic dilatation.
The greatest benefit of this model is that VV hypoperfusion causes tissue hypoxia and the development of an infrarenal AAA, which has morphological and pathological characteristics similar to those of a human AAA.

Polyurethane catheter insertion into the aortic lumen and suture ligation of the aorta induce chronic hypoxia due to hypoperfusion of the adventitial vasa vasorum. This article describes a novel animal model of abdominal aortic aneurysm (AAA) with characteristics similar to those of AAA in humans.

Abdominal aort anevrizması Adventitial Vasa Vasorum perfüzyon engelleyerek kemirgen bir Model oluşturulması

The adventitial vasa vasorum (VV) provides oxygen and nourishment to the aortic wall. Hypoxia in the aortic wall can cause enlarged abdominal aortic ...

Contractility Measurements of Human Uterine Smooth Muscle to Aid Drug Development

Discovery and characterization of novel pharmaceutical compounds or biochemical probes rely on robust and physiologically relevant assay systems. We describe methods to measure ex vivo myometrium contractility. This assay can be used to investigate factors and molecules involved in the modulation of myometrial contraction and to determine their excitatory or inhibitory actions, and hence their therapeutic potential in vivo. Biopsies are obtained from women undergoing cesarean section delivery with informed consent. Fine strips of myometrium are dissected, clipped and attached to a force transducer within 1 mL organ baths superfused with physiological saline solution at 37 &#176;C. Strips develop spontaneous contractions within 2&#8211;3 h under set tension and remain stable for many hours (&#62;6 h). Strips can also be stimulated to contract such as by the endogenous hormones, oxytocin and vasopressin, which cause concentration-dependent modulation of contraction frequency, force and duration, to more closely resemble contractions in labor. Hence, the effect of known and novel drug leads can be tested on spontaneous and agonist-induced contractions.
This protocol specifically details how this assay can be used to determine the potency of known and novel agents by measuring their effects on various parameters of human myometrial contraction. We use the oxytocin- and V1a receptor antagonists, atosiban and SR49059 as examples of known compounds which inhibit oxytocin- and vasopressin-induced contractions, and demonstrate how this method can be used to complement and validate pharmacological data obtained from cell-based assays to aid drug development. The effects of novel agonists in comparison to oxytocin and vasopressin can also be characterized. Whilst we use the example of the oxytocin/ vasopressin system, this method can also be used to study other receptors and ion channels that play a role in uterine contraction and relaxation to advance the understanding of human uterine physiology and pathophysiology.

This article describes experimental protocols to study ex vivo contractions of human myometrium and their application in drug discovery. This technique is used to improve the understanding of myometrial physiology and pathophysiology as well as to validate pharmacological data from novel research probes or drug leads.

İnsan rahim düz kas yardım ilaç geliştirme için contractility ölçümleri

Discovery and characterization of novel pharmaceutical compounds or biochemical probes rely on robust and physiologically relevant assay systems. We ...

A Mouse Model of Orthopedic Surgery to Study Postoperative Cognitive Dysfunction and Tissue Regeneration

Surgery is commonly used to improve and maintain quality of life. Unfortunately, in vulnerable patients such as the elderly, complications may occur and significantly diminish the outcome. Indeed, after routine orthopedic surgery to repair a fracture, as many as 50% of elderly patients suffer from neurologic complications like delirium. Also, the capacity to heal and regenerate tissue after surgery decreases with age, and can impact the quality of fracture repair and even osseous integration of implants. Thus, a better understanding of mechanisms that drive these age-dependent changes could provide strategic targets to minimize risk for such complications and optimize outcomes. Here, we introduce a clinically relevant mouse model of tibial fracture. The postoperative changes in these mice mimic some of the cognitive impairments commonly observed after routine orthopedic surgery in humans. Briefly, an incision is performed in the right hind limb under strictly aseptic conditions. Muscles are disassociated, and a 0.38-mm stainless steel pin is inserted into the upper crest of the tibia, inside the intramedullary canal. Osteotomy is then performed, and the wound is stapled. We have used this model to investigate the effects of surgical trauma on postoperative neuroinflammation and behavioral changes. By applying this fracture model in combination with parabiosis, a surgical model in which 2 mice are anastomosed, we have studied cells and secreted factors that systemically rejuvenate organ function and tissue regeneration after injury. By following our step-by-step protocol, these models can be reproduced with high fidelity, and can be adapted to interrogate many biologic pathways that are altered by surgical trauma.

This protocol describes a mouse model of orthopedic surgery that has been used to study mechanisms of postoperative neuroinflammation and behavioral changes, and when combined with parabiosis, to study tissue regeneration during aging.

Ameliyat sonrası bilişsel işlev bozukluğu ve doku rejenerasyonu çalışmaya ortopedik cerrahi bir fare modeli

Surgery is commonly used to improve and maintain quality of life. Unfortunately, in vulnerable patients such as the elderly, complications may occur and ...

Improvement of a Closed Chest Porcine Myocardial Infarction Model by Standardization of Tissue and Blood Sampling Procedures

Myocardial ischemia reperfusion (I/R) injury contributes to almost half of the necrotic area after myocardial infarction. To date there is no approved drug to prevent or reduce myocardial I/R injury. The study and understanding of the pathophysiological mechanisms of myocardial I/R injury is essential to develop successful treatments. Large animal experiments are an important step in translational methods. The porcine model of acute myocardial infarction has been established and described by ourselves and others. We aimed to further improve the value of the model by focusing in detail on the sampling techniques for use in future experiments. Furthermore, we emphasize small but important steps that can affect the quality of the final results. To mimic the clinical situation of myocardial I/R injury, a percutaneous coronary intervention (PCI) catheter was inserted into the left anterior descending coronary artery (LAD) of an anesthetized pig. &#176;&#176;&#176;This model mimics acute myocardial infarction and PCI treatment in humans with the possibility of accurately determining the area at risk as well as the necrotic- and viable ischemic tissue. Here the model was used to investigate the effect of a bicyclic peptide inhibitor of FXIIa. The model can also be modified to allow longer reperfusion times to study later effects of myocardial infarction.

Here we demonstrate a protocol to standardize sampling procedures of an established porcine model of acute myocardial infarction in order to increase its translational value in the understanding of the pathophysiology of myocardial ischemia/reperfusion injury and to test novel drug candidates.

Kapalı göğüs domuz miyokard infarktüsü manken standardizasyon doku ve kan örnekleme prosedürleri tarafından geliştirilmesi

Myocardial ischemia reperfusion (I/R) injury contributes to almost half of the necrotic area after myocardial infarction. To date there is no approved ...

Isometric Contractility Measurement of the Mouse Mesenteric Artery Using Wire Myography

The wire myograph technique is used to assess the contractility of vascular smooth muscles in response to depolarization, GPCR agonists/inhibitors and drugs. It is widely used in many studies on the physiological functions of vascular smooth muscle, the pathogenesis of vascular diseases such as hypertension, and the development of smooth muscle relaxant drugs. The mouse is a widely used model animal with a large pool of disease models and genetically modified strains. We introduced this method to measure the isometric contraction of mouse mesenteric artery in detail. A 1.4-mm segment of mouse mesenteric resistance artery was isolated and mounted on a myograph chamber by passing two steel wires through its lumen. After equilibration and normalization steps, the vessel segment was potentiated by a high-K+ solution twice prior to the contraction assay. As an example of the application of this method in drug development, we measured the relaxant effect of a novel natural substance, neoliensinine, isolated from a Chinese herb, embryos of the lotus seed (Nelumbo nucifera Gaertn.) on mouse mesenteric arteries. The vessel segments mounted on the myograph chamber were stimulated with a high-K+ solution. When the force tension reached a stable sustained phase, cumulative doses of neoliensinine were added to the chamber. We found that neoliensinine had a dose-dependent relaxant effect on smooth muscle contraction, thus suggesting that it bears potential activity against hypertension. In addition, as the vessel segment can survive at least 4 hours after mounting and maintain contractility induced by the high-K+ solution for many times, we suggest that the wire myograph system may be used for the time-consuming process of drug screening.

The wire myograph technique is used to investigate vascular smooth muscle functions and screen new drugs. We report a detailed protocol for measuring the isometric contractility of the mouse mesenteric artery and for screening new relaxants of vascular smooth muscle.

İzometrik Contractility ölçüm tel Myography kullanarak fare mezenterik arter

The wire myograph technique is used to assess the contractility of vascular smooth muscles in response to depolarization, GPCR agonists/inhibitors and ...

A Mouse Model of Incompletely Resected Soft Tissue Sarcoma for Testing (Neo)adjuvant Therapies

Surgery is often the first treatment for many solid tumors. However, local relapses frequently occur following primary tumor resection, despite adjuvant or neo-adjuvant therapies. This occurs when surgical margins are insufficiently tumor-free, resulting in residual cancer cells. From a biological and immunological perspective, surgery is not a null event; the wound healing environment is known to induce both pro- and anti-tumorigenic pathways. As a consequence, preclinical models for drug development aimed at preventing local relapse should incorporate surgical resection when testing new (neo)adjuvant therapies, to model the clinical settings in patients treated with surgery.
Here, we describe a mouse model of incomplete surgical resection of WEHI 164 soft tissue sarcoma that allows testing of (neo)adjuvant therapies in the setting of a wound healing response. In this model, 50% or 75% of the tumor is removed, leaving behind some cancer tissue in situ to model gross residual disease after surgery in the clinical setting. This model allows testing therapies in the context of surgery while also considering the wound healing response, which may affect the efficacy of (neo)adjuvant treatments. The incomplete surgical resection results in reproducible regrowth of the tumor in all mice in the absence of adjuvant therapy. Adjuvant treatment with checkpoint blockade results in reduced tumor regrowth. This model is thus appropriate for testing therapies in the context of debulking surgery and its associated wound healing response and can be extended to other types of solid cancer.

A Mouse Model of Incompletely Resected Soft Tissue Sarcoma for Testing Neoadjuvant Therapies

In this protocol, we describe a mouse model of incomplete surgical resection of soft tissue sarcoma for testing (neo)adjuvant therapies.

Test (Neo) adjuvan Tedaviler için İntam Rezeke Yumuşak Doku Sarkomu Bir Fare Modeli

Surgery is often the first treatment for many solid tumors. However, local relapses frequently occur following primary tumor resection, despite adjuvant ...