Name: deep vein thrombosis induced by stasis in mice monitored by high frequency ultrasonography
Uploaded: 2018-04-13T14:00:00.000+00:00
Duration: 6 min 44 s
Description: Watch this Scientific Journal Video about Deep Vein Thrombosis Induced by Stasis in Mice Monitored by High Frequency Ultrasonography at JoVE.com

Bu eser kalp ve inme Vakfı Kanada bir hibe ve Morris ve Bella Fainman Aile Vakfı tarafından desteklenmiştir. Yazarlar Veronique Michaud VEVO770 ultrason görüntüleme sistemi ile onun teknik yardım için teşekkür etmek istiyorum.

Tüm yordamları kurumsal hayvan bakımı Komitesi, McGill Üniversitesi Montréal, QC, Kanada tarafından kabul edildi. Gerekli tüm ekipman tabloda listelenen ben.
1. antikorundan (C57BL/6J) IVC Staz Protokolü
<ol><li>Ameliyat hazırlığı Not: Bu bir hayatta kalma ameliyat olduğunu ve bu nedenle, uygun aseptik tekniği her zaman takip edilmesi gerekiyor. Bu tüm malzemeler el altında olduğundan emin yapma, temizlik ve önce arasında kullanım aletleri sterilize ve tüm steril malzeme için çalışma yüzeyinde steril bölge belirleme içerir.<ol>
<li>Tüm cerrahi aletler ve malzemeler otoklav tarafından sterilize. Cam boncuk sterilizasyon araç ipuçları arasında birden fazla işlem aynı anda yapılır eğer hayvanlar, sterilize etmek yeterlidir.</li>
		<li>8-10 hafta eski C57Bl/6 erkek fareler % 100 oksijen ve % 2.5 isoflurane karışımı ile anestezi. Not: oksijen ve gerektiği gibi isoflurane akışını ayarlayın.</li>
		<li>Anesthetization hayvan Forseps ile ayak parmakları arasında arka pençe pinching tarafından onaylayın. Hayır yanıt--dan tutam hayvan anestezi gösterir.</li>
		<li>Yavaş salınımlı analjezik (buprenorfin) subkutan enjeksiyon yoluyla yönetmek. Fareler analjezik 1 kg vücut ağırlığı (1 mg/kg) başına 1 mg doz ver.</li>
		<li>Her iki gözün kornea hiçbir kuruma süresi boyunca yordamı sağlamak için hayvan göz merhem yerleştirin.</li>
		<li>0.2 - 0.5 mL izotonik sıvı vücut ağırlığının 10 g başına subkutan yönetmek.</li>
		<li>Cerrahi bant kullanarak ameliyat masasına yerde hayvan düzeltmek. Hayvanın karın ortaya çıkarmak için sırtüstü pozisyonda yerleştirin. Hipotermi önlemek için bir Isıtma yastığı ameliyatı.</li>
		<li>Saç fare karından 1-2 dk. karın bölgesi gazlı bez ile temiz ve distile su, temizleme işlemi için krem epilasyon uygulaması gerekirse çıkarın.</li>
		<li>Alternatif olarak, saç küçük bir elektrikli ustura ile tıraş karından çıkarın.</li>
		<li>Karin Baxedin (klorheksidin glukonat BP çözüm) ile herhangi bir insizyon vermeden önce sterilize. Etanol ile hafifçe gazlı bez alkol buharlaşma tarafından neden olduğu aşırı ısı kaybını önlemek için geçerlidir.</li>
	</ol></li>
	<li>Maruz kalma Inferior Vena kava (IVC)
	<ol>
<li>Cerrahi makas kullanırken, karın boşluğu açmak için laparatomi gerçekleştirin.<ol>
<li>Alt karın, Forseps ile cilt kaldırın ve bir dikey kesi linea her iki tarafına paralel yapmak alba. Sola veya sağa linea ilk kesi yapmak alba, operatörün el kullanımı bağlı olarak. Belgili tanımlık kesme uzak orta hat ultrason daha sonra Imaging'de yardımcı olmak için yapılır.</li>
			<li>Karın üstündeki ikinci, yatay bir kesi yapmak. Not: karın içine nüfuz kas olmalı "tented" ve herhangi bir zarar için karın organları önlemek için Cerrahi makas ile nüfuz.</li>
			<li>Hayvanın karın kas tabakası üzerinde dikey ve Yatay kesikler yineleyin. Karın altında organlara zarar içine penetrasyon sırasında kas çadır emin olun. Dikkat: cilt ve kas bağırsaklar ve diğer iç organlara onları delmek değil insizyon yaparken kaldır.</li>
		</ol>
</li>
		<li>Cilt ve kas karın boşluğu ortaya çıkarmak için belgili tanımlık kesme uzak katlayın.</li>
		<li>Yara açılış kenarlarına izotonik solüsyonu ile ıslatılmış gazlı bez uygulayın ve bağırsak yansıtmak. Karın bağırsak dışa yardımcı olmak için her iki taraf için basınç uygulayın. Nazik hareketleri bir pamuk uç aplikatör ile bağırsak taşımak için kullanın. Gazlı bez izotonik çözümde ıslatın ve externalized bağırsak yerleştirin.<ol>
<li>Gazlı bez doku yerleşimde önce önceden nemlendirilmiş.</li>
		</ol>
</li>
		<li>Kenara çekilin Periton herhangi bir yağ ve böbrek ve İliak damarları arasında IVC bulaşmasına neden.</li>
		<li>Açık yan dalları ilk bir kimlik olun. Bir yan dal olarak daha küçük görünür, ancak böbrek ve iliyak arasında IVC uzak dalları önemli damar damarlar. Damarlara büyük fareler arasında değişiklik gösterebilir. Fareler yan dalları mevcut IVC bir veya her iki tarafta olabilir.</li>
	</ol></li>
	<li>Tüp ligasyonu yan dalı Not: yan dallar varsa, aşağıdaki yordamı her biri için gelir. Yok, adım 4'e devam edin: ilk dikiş yerleştirme IVC altında. IVC ligasyonu yer-ecek var olmak hemen yan dallar varlığı ne olursa olsun sol renal ven distal.<ol>
<li>Künt diseksiyon yan dal her tarafında gerçekleştirmek. Künt diseksiyon art arda ile çevresindeki damarları zarar vermeden fasya ile kırmak için hafif basınç, künt forseps açma işlemidir. Uyarı: Delme veya zarar ven kaçının.</li>
		<li>Şube kaldırın ve 6-0 ipek sütür ven altında bir bölümünü geçmek. Her zaman kaldırma veya gemiler taşırken dikkat. Gemilerin çevresinde yağ kapmak en iyisi, aksi takdirde gemi zarar riski.</li>
		<li>Dikiş forseps kullanarak, bir cerrahi ligasyonu standart cerrahi düğüm bağlama tekniği kullanarak yan dal çevresinde bulunurlar. Tam ligasyonu % 100 tıkanıklığı damarın sağlamak için yapılır. En az üç uygulamakla atar ligasyonu güvenli olduğundan emin olmak için kullanın.</li>
		<li>1.3 için kalan herhangi bir yan dalları arasındaki adımları yineleyin.</li>
	</ol></li>
	<li>IVC üzerinden abdominal aort diseksiyon
	<ol>
<li>Hemen distal IVC çevresinde künt diseksiyon sol renal ven gerçekleştirin. Abdominal aort IVC fasya ile bağlı olduğu, bu nedenle ilk künt diseksiyon IVC ve abdominal aort gerçekleştirin. Dikkat: Delme veya zarar ven kaçının. Rüptürü veya her iki gemi delik değil. Bu yordam, gemi hasar için yüksek risk taşıyan en önemli parçasıdır.</li>
		<li>Açık bir pencere aort ile IVC arasında yapılana kadar künt diseksiyon ile hafif basınç uygulamaya devam.</li>
	</ol></li>
	<li>Dikiş yerleştirme ve IVC ligasyonu
	<ol>
<li>6-0 ipek sütür IVC ve abdominal aort altında bir bölümünü geçmek.</li>
		<li>IVC ve aort arasında oluşturulan pencereden dikişi bulun. Forseps dikişi çekin ve abdominal aort ile IVC arasında iş parçacığı için kullanın. Dikiş aracılığıyla dikkatle, çekme/abdominal aort ve IVC ponksiyon değil için iş parçacığı.</li>
		<li>Cerrahi ligasyonu IVC çevresinde toplam tıkanıklığı damarın sağlanması dikiş Forseps ile olun. Yine, tüp ligasyonu hemen sol renal ven üzerinden distal olun.</li>
		<li>Tüp ligasyonu güvenliğini sağlamak için üç dikiş atar olun. Not: İki alternatif bir seçenek olarak ayıran önce aort ve IVC altında dikiş geçmek mümkündür. Alternatif olarak, 7-0 Prolene sütür yan şube ve IVC ligasyonu için kullanılabilir.</li>
	</ol></li>
	<li>Yaranın kapanması ve ameliyat sonrası bakım
	<ol>
<li>Abdominal aort kesintisiz bırakıldı ve tüm yan dalları bakmaksızın doğrulayın. IVC dilate görünür distal ligasyonu siteden ve kan akışı görünür olacaktır.</li>
		<li>Tüm Periton yağ ve bağırsak karın boşluğunda yerleştirin.</li>
		<li>Yaranın dikiş forseps ve 6-0 ipek sütür kullanarak kapatın. Çalışan dikiş (basit sürekli) kullanın ve dikiş çok sıkı olmayacak. Ne zaman hayvan uyanır ve onun kafes taşır sıkı dikiş rüptürü.<ol>
<li>Alternatif olarak, PDS, Ethilon, Vicryl, Dexon veya paslanmaz çelik klipleri yara kapatma için kullanabilir.</li>
		</ol>
</li>
		<li>Dikiş önce uygun dikiş tekniği bağlama kullanarak karın kas tabakası.</li>
		<li>Dikiş tekniği cilt için yineleyin ve yara kapatma yeterli olduğunu doğrulayın. Not: aynı dikiş iğne ve iplik birden çok hayvanlar için kullanılıyorsa, ikisinde % 70 etanol her kullanımdan önce sterilize.</li>
		<li>Hayvan anestezik gaz kaldırmak ve en az 30 dakika 34 ° C kuluçka makinesine koyun.</li>
		<li>Yine, 0.2 - 0.5 mL izotonik sıvı vücut ağırlığının 10 g başına subkutan yönetmek. Sıvı takip eden günlerde pre-operative vücut ağırlığı korumak için gerekirse verilebilir.</li>
		<li>Hayvan Kurtarma kadar başarılı ameliyat olun ve hayvan genel sağlık değerlendirmek için izleyin. Uyarı: Hafif Kambur duruş bu gibi invaziv bir işlem için bekliyoruz, ama hayvan 30 dakika sonrası işlemi normalde erken davranacaktır.</li>
		<li>Hayvan kendi kafesin içine yerleştirin ve tamamen iyileşti kadar diğer hayvanlarla koymayın.</li>
		<li>Analjezik günlük en çok 48 s postop için yeniden yönetmek.</li>
		<li>Gıda kafesin zemininde kurtarma hayvan süre yerleştirin. Diğer özel bakım genellikle gerekli değildir.</li>
		<li>Kızarıklık, şişlik, ya da basma ve herhangi bir diğer işaret-in hastalık yara sitesine inceleyin.</li>
		<li>Gerekirse, dikişler 7-10 gün sonra kaldırın.</li>
		<li>Ötenazi gerçekleştirdikten hemen ameliyat başarısız olursa (Örneğin, önemli gemi hasar ve/veya kan kaybı) veya hayvan ile ameliyat sonrası bakım geliştirmek değil. Ötenazi genellikle 48 h postop gerçekleştirilir. Daha uzun deneyler için 7-0 Prolene yan dallar ve IVC ve 5-0 Vicryl sütür karın boşluğu kapatmak için ligate kullanmak.<ol>
<li>Ötenazi anesthetization bir indüksiyon daha önce açıklandığı gibi dışında % 5 isoflurane hayvan yerine getirilir. Bu boğulma anestezi iken % 100 CO2 tarafından takip ediyor.</li>
			<li>Ötenazi boğulma (kalp atışı ve nefes kaybı) tarafından onay sonra tam ötenazi sağlamak için servikal çıkığı gerçekleştirin.</li>
		</ol>
</li>
	</ol></li>
</ol>2. yüksek frekans ultrason Protokolü
Not: Bu bayan Davis Enstitüsü kemirgen fenotipleme çekirdek SOP yüksek frekans ultrason görüntüleme için gelen adapte iletişim kuralıdır. Bu iletişim kuralı 24 h post operatif taşıdı ama hayvan de ameliyat için yanıt olarak daha önce yapılabilir. Protokol sağlıklı fareler üzerinde herhangi bir zamanda yapılabilir ve genellikle öncesi ve ameliyat sonrası karşılaştırmak için yapılır.
<ol><li>
Hayvan hazırlanması
	<ol>
<li>Hayvan bir indüksiyon odasında yerleştirin ve % 100 oksijen ve % 2.5 isoflurane karışımı ile hayvan anestezi.</li>
		<li>Kalp hızı ve sıcaklık monitörünüzü açınız. Hayvan işlem sırasında sıcak tutmak için tablonun üst pozisyon ısı lamba.</li>
		<li>Hayvan indüksiyon odasından kaldırın ve kornea kuruma önlemek için göz yağ uygulayın. Hayvan analiz platformu üzerinde konumlandırın ve hayvanın ağız/burun anestezik tüp yapıştırmayın.</li>
		<li>Sıcak ultrason 37 ° C-jel ve jel hayvanın karın bölgesinde yer. Ultrason jeli pompalar su jel şişe sarılı rulo ile sıcak su ısıtma sistemi kullanılarak ısıttı.</li>
		<li>Kalp hızı ölçümleri, (gerekirse) için elektrot jel üzerinde analiz platformun elektrotlar 4 koymak ve belgili tanımlık paws platformu/elektrotlar için hayvanın cerrahi bant ile düzeltmek. Hayvan sırtüstü pozisyonunda IVC görüntüleme için yerleştirin. Görüntüleme sistemi ultrason sıcak ve elektrotlar hayvan izleme içeren bir çözümleme platform içerir.</li>
		<li>Sıcaklık ölçüleri, elektrot jel termometre üzerinde koymak ve hayvan rektum yerleştirin.</li>
		<li>Isı lamba ve isoflurane o hayvanı rahat, 30-70 bpm arasında bir solunum vardır ve 37 ° C'de tutulur emin olmak gerektiği gibi ayarlayın</li>
		<li>Gerekirse, hayvanın karın tıraş veya saç dökücü krem saç kaldırma. 1-2 dakika boyunca uygulayın ve temiz gazlı bez ve distile su ile silin. Not: Çok fazla saç görüntü kalitesini etkileyebilir.</li>
		<li>Gazlı bez altında veya herhangi bir aşırı ultrason jeli yakalamak için hayvan tarafına yerleştirin.</li>
	</ol>
</li>
	<li>
Düşsel IVC ve Trombus olgusu
	<ol>
<li>Görüntüleme yazılımını açın ve yeni bir çalışma başlar.</li>
		<li>Görüntüleme için uygun bir scanhead seçin. Burada kullanılan scanhead için karın organları olduğunu (frekans: 35 MHz, odak uzaklığı: 12.8 mm).</li>
		<li>Hayvan ilgili herhangi bir ilgili bilgileri kaydeder. Bu hayvan içerebilir kimliği, seks, ağırlık, Doğum tarihi, soy, vb.</li>
		<li>Ultrason jeli hayvan dokunuyor kadar scanhead indirin.</li>
		<li>2-B görüntüleme hayvan başlamak için scanhead sonda başlatın. Bu modda, görüntüleri iki boyutlu, değişen grinin olarak sunulmaktadır.</li>
		<li>IVC ve abdominal aort scanhead z uçağın üzerinden de hareket ederken fare platform x - ve y-uçak, boyunca taşıyarak bulun. Not: kan damarları onların duvarlar beyaz ve kan içinde neredeyse-ecek gözükmek ile siyah. Abdominal aort yoğun atmak ve daha kalın duvarlar var, süre IVC ince duvarlar ve sıkıştırma genişletin/kolayca üzerinde görüntü ekran scanhead hareket ettiğinde ve aşağı. Tüp ligasyonu sitesi damarı genişlemiş ve damar duvar bir noktasına gelecek kadar belirgin olacaktır. İçinde oluşan herhangi bir trombüsü ultrason görüntüleme altında katı olacak ve damar duvar gibi kolayca sıkıştırır değil. Damar-ecek basmak sadece ligasyonu nerede yok trombüsü oluşturulur.</li>
		<li>IVC ve ligasyonu site bulma üzerine, onları en doğru görüntü elde etmek için ultrason, odak noktası üzerinde ortalayın.<ol>
<li>Görüntü net görmek, jel ayarlamak ve herhangi bir hava kabarcıkları pamuk uç aplikatör ile kaldırmak için çok karanlık ise.</li>
			<li>Gerekirse, scanhead 45 ° sola veya sağa doğru eğin ve damar açıkça görmek için hayvan platformu yeniden ayarlayabilirsiniz. Scanhead ile girişim ise bu yapılır. Bu senaryoda, damar bir yan-dikişi önlemek için bir açıyla yansıması gerekir. Not: Görüntü paraziti en sık deri hayvan, zavallı yaranın dikiş yerleştirme veya ultrason jel kabarcıkları karanlık yamalar neden olur.</li>
		</ol>
</li>
		<li>Yazılımı kullanarak, istenen herhangi bir yapı fotoğraf çekmek ve herhangi bir ölçüm araçları kullanarak ölçüleri yapın. Ortak ölçümler kesiti trombüsü veya ligasyonu sayfanın genişliğini içerir.</li>
		<li>Kan akışı ölçümleri yapmak için nabız dalga Doppler görüntüleme modunu değiştirmek. Bu mod, vasküler kan akımı görüntüleme ve diğer değişkenler arasındaki akış hızı ölçümü sağlar.</li>
		<li>Hayvan arka sonu düşürmek için analiz platformu eğ.</li>
		<li>Hayvan posterior ucundan yaklaşık 30 ° açılı jel başvuracağım scanhead açısı/konumunu değiştirin.</li>
		<li>Hayvan platformu ve scanhead yeniden konumlandırın. IVC ve ligasyonu gerekirse yerini değiştirin.</li>
		<li>Kan akışı ölçümleri Staz onaylamak ve istenen herhangi bir fotoğraf çekmek için ligasyonu site yapmak. Ortalama hız, en yüksek hız veya medyan hız kan akımı ortak ölçümler.</li>
		<li>Herhangi bir ölçüm veya çekilen görüntüleri kaydedin.</li>
	</ol>
</li>
	<li>
Temizlik ve hayvan kurtarma
	<ol>
<li>Pozisyon ilk ve hayvan platformu ilk konumuna de yeniden konumlandırmak için scanhead kaldırın.</li>
		<li>Gazlı bez hayvanla kapalı aşırı jel kaldırın. Yaranın dikiş değil yırtıldı yavaşça yapmak bu.</li>
		<li>Termometre hayvanın rektum kaldır ve hayvan platform kapalı alır.</li>
		<li>Hayvan onun kafes ve 34 ° C kuluçka makinesi yerleştirin.</li>
		<li>Hayvan Kurtarma kadar izlemek. Çok küçük ve non-invaziv bir yöntemdir. Hayvan hızla uyanacaksın. Şu günlerde bölümü 1,6 Bu protokol uyarınca hayvan izleme devam edin.</li>
		<li>Gazlı bez ve dezenfektan hayvan platformuyla temiz.</li>
		<li>Silme temiz gazlı bez ve distile su ile scanhead. Uyarı: Çok yavaşça scanhead temiz ve sadece distile su ile.</li>
		<li>2 sonraki hayvan için yineleyin.<ol>
<li>Tüm konular ile yapılırsa, tüm resimler ve kayıtları kaydedildiğini doğrulayın. O zaman tüm ekipman ve yazılım kapatın.</li>
		</ol>
</li>
	</ol>
</li>
</ol>

<ol>
	<li>Fowkes, F. J., Price, J. F., Fowkes, F. G. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Incidence+of+diagnosed+deep+vein+thrombosis+in+the+general+population:+systematic+review.">Incidence of diagnosed deep vein thrombosis in the general population: systematic review.</a> Eur J Vasc Endovasc Surg. 25 (1), 1-5 (2003).</li><li>McGuinness, C. L., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Recruitment+of+labelled+monocytes+by+experimental+venous+thrombi.">Recruitment of labelled monocytes by experimental venous thrombi.</a> Thromb Haemost. 85 (6), 1018-1024 (2001).</li><li>Singh, I., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Failure+of+thrombus+to+resolve+in+urokinase-type+plasminogen+activator+gene-knockout+mice:+rescue+by+normal+bone+marrow-derived+cells.">Failure of thrombus to resolve in urokinase-type plasminogen activator gene-knockout mice: rescue by normal bone marrow-derived cells.</a> Circulation. 107 (6), 869-875 (2003).</li><li>Itoh, K., Ieko, M., Hiraguchi, E., Kitayama, H., Tsukamoto, E. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=In+vivo+kinetics+of+99mTc+labeled+recombinant+tissue+plasminogen+activator+in+rabbits.">In vivo kinetics of 99mTc labeled recombinant tissue plasminogen activator in rabbits.</a> Ann Nucl Med. 8 (3), 193-199 (1994).</li><li>Kang, C., Bonneau, M., Brouland, J. P., Bal dit Sollier, C., Drouet, L. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=In+vivo+pig+models+of+venous+thrombosis+mimicking+human+disease.">In vivo pig models of venous thrombosis mimicking human disease.</a> Thromb Haemost. 89 (2), 256-263 (2003).</li><li>Knight, L. C., Baidoo, K. E., Romano, J. E., Gabriel, J. L., Maurer, A. H. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Imaging+pulmonary+emboli+and+deep+venous+thrombi+with+99mTc-bitistatin,+a+platelet-binding+polypeptide+from+viper+venom.">Imaging pulmonary emboli and deep venous thrombi with 99mTc-bitistatin, a platelet-binding polypeptide from viper venom.</a> J Nucl Med. 41 (6), 1056-1064 (2000).</li><li>Wakefield, T. W., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Venous+thrombosis+prophylaxis+by+inflammatory+inhibition+without+anticoagulation+therapy.">Venous thrombosis prophylaxis by inflammatory inhibition without anticoagulation therapy.</a> J Vasc Surg. 31 (2), 309-324 (2000).</li><li>Robins, R. S., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Vascular+Gas6+contributes+to+thrombogenesis+and+promotes+tissue+factor+up-regulation+after+vessel+injury+in+mice.">Vascular Gas6 contributes to thrombogenesis and promotes tissue factor up-regulation after vessel injury in mice.</a> Blood. 121 (4), 692-699 (2013).</li><li>Aghourian, M. N., Lemarie, C. A., Bertin, F. R., Blostein, M. D. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Prostaglandin+E+synthase+is+upregulated+by+Gas6+during+cancer-induced+venous+thrombosis.">Prostaglandin E synthase is upregulated by Gas6 during cancer-induced venous thrombosis.</a> Blood. 127 (6), 769-777 (2016).</li><li>Laurance, S., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Gas6+(Growth+Arrest-Specific+6)+Promotes+Inflammatory+(CCR2hiCX3CR1lo)+Monocyte+Recruitment+in+Venous+Thrombosis.">Gas6 (Growth Arrest-Specific 6) Promotes Inflammatory (CCR2hiCX3CR1lo) Monocyte Recruitment in Venous Thrombosis.</a> Arterioscler Thromb Vasc Biol. , (2017).</li><li>Diaz, J. A., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Critical+review+of+mouse+models+of+venous+thrombosis.">Critical review of mouse models of venous thrombosis.</a> Arterioscler Thromb Vasc Biol. 32 (3), 556-562 (2012).</li><li>Aghourian, M. N., Lemarie, C. A., Blostein, M. D. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=In+vivo+monitoring+of+venous+thrombosis+in+mice.">In vivo monitoring of venous thrombosis in mice.</a> J Thromb Haemost. 10 (3), 447-452 (2012).</li><li>Brandt, M., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Deep+vein+thrombus+formation+induced+by+flow+reduction+in+mice+is+determined+by+venous+side+branches.">Deep vein thrombus formation induced by flow reduction in mice is determined by venous side branches.</a> Clin Hemorheol Microcirc. 56 (2), 145-152 (2014).</li><li>Diaz, J. A., Farris, D. M., Wrobleski, S. K., Myers, D. D., Wakefield, T. W. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Inferior+vena+cava+branch+variations+in+C57BL/6+mice+have+an+impact+on+thrombus+size+in+an+IVC+ligation+(stasis)+model.">Inferior vena cava branch variations in C57BL/6 mice have an impact on thrombus size in an IVC ligation (stasis) model.</a> J Thromb Haemost. 13 (4), 660-664 (2015).</li><li>Luther, N., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Innate+Effector-Memory+T+Cell+Activation+Regulates+Post-Thrombotic+Vein+Wall+Inflammation+and+Thrombus+Resolution.">Innate Effector-Memory T Cell Activation Regulates Post-Thrombotic Vein Wall Inflammation and Thrombus Resolution.</a> Circ Res. , (2016).</li><li>Subramaniam, S., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Distinct+contributions+of+complement+factors+to+platelet+activation+and+fibrin+formation+in+venous+thrombus+development.">Distinct contributions of complement factors to platelet activation and fibrin formation in venous thrombus development.</a> Blood. 129 (16), 2291-2302 (2017).</li><li>Diaz, J. A., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Thrombogenesis+with+continuous+blood+flow+in+the+inferior+vena+cava.+A+novel+mouse+model.">Thrombogenesis with continuous blood flow in the inferior vena cava. A novel mouse model.</a> Thromb Haemost. 104 (2), 366-375 (2010).</li></ol>

Yazarlar ifşa gerek yok.

Staz modelini kullanarak başarılı Venöz trombüsü oluşumu için birkaç önemli adım vardır. Ven Trombozu indüksiyon daha inferior vena kava ve aort damarı çevreleyen yağ birikimi nedeniyle eski farelerde zordur. İdeal olarak, bu yordamı geçiren fareler 8 - 10 hafta çocuk olmalıdır. Büyük değil ikna etmek IVC endotel hasarı künt diseksiyon ve bağ sırasında için özen gösterilmelidir. Buna ek olarak, bu ameliyattan sonra en az 30 dakika 34 ° C kuluçka makinesine hayvan tutmak için ve yalnız...

Derin Venöz trombozu (DVT) ve pulmoner emboli oluşur, Venöz tromboemboli (VTE), miyokard enfarktüsü ve inme sonra kardiyovasküler ölüm üçüncü önde gelen nedenidir. Nüfusun % 1-2 1 5001yıllık insidansı ile etkileyen yaygın bir durumdur. Download VTE için yol açabilir: 1) ölümün ötesine pulmoner emboli; 2) sonrası trombotik sendromu, kronik bacak ağrı, şişlik ve ülserasyon ile karakterize; ya da 3) önemli Kronik solunum uzlaşma içinde kaynaklanan Kronik Pulmoner Hipertansiyon. Download VTE çok faktöriyel bir hastalıktır ve yüz yıl önce açıklandığı Staz kan akımı, gemi duvarları ve/veya pıhtılaşma Birleşik koagülasyon ve fibrinolitik sistem arasındaki dengeyi bir bozulma nedeniyle zarar neden olabilir Virchow tarafından ve Virchow'ın Üçlü bilinir.
Çoğu zaman insan DVT örnekleri elde edebilmek mümkün değildir çünkü, araştırmacılar DVT deneysel hayvan modelleri geliştirdi. Sıçan2, fare3, tavşan4, domuz5, köpek6ve insan dışı primat7 de dahil olmak üzere çeşitli hayvanlar kullanılmıştır. Fare genetiği değiştirilmiş ve DVT eğitim için en sık kullanılan hayvan vardır. Ancak, Bütün hayvanlar gibi farelerde spontan DVT gözlenen değil. Böylece, fiziksel veya kimyasal değişiklikler damar duvarının trombozu farelerde oluşturmak için kullanılır. Biz daha önce biatriyal Trombus fareler8,9,10inferior vena kava (IVC) ikna etmek için ferrik klorid modeli kullandık. Bu model güvenilir birkaç dakika içinde tıkayıcı olu_umu üreten avantajı ve anti-koagulant ve anti-trombosit uyuşturucu rol sırasında akut DVT araştırmak için kullanılır. Ancak, bu terminal bir işlemdir. Böylece, akut ve kronik DVT çalışmaya, staz modeli daha uygundur. Bu modelde, trombüsü oluşumu IVC Virchow'ın Üçlü DVT gelişimi için faktörlerin kan akımı tam kesintiye indüklenen. Bu model DVT oluşumu ve FeCl3 model11' e göre bir avantajdır çözünürlük çalışma için kullanılabilir.
Trombüsü oluşumu ve çözünürlük bir mikro-görüntüleme yüksek frekanslı ultrason sistemi12kullanarak zaman içinde takip etmek non-invaziv bir yöntem geliştirdik. Biz daha önce ultrason tarafından Venöz tromboz ölçümü olumlu patolojik olarak elde edilen olu_umu ile ilişkili olan göstermiştir. Biz iki sonraki çalışmalarda ölçümleri ultrason ilişkili trombüsü ağırlık ve histochemistry9,10tarafından sayısal trombüsü alanı ile elde edilen doğruladı. Daha da önemlisi, yüksek frekans ultrason fareler12derin Venöz tromboz oluşumunu izlemek için kullanılan göstermiştir. Trombüsü çözünürlük non-invaziv bir şekilde ölçmek için de kullanılabilir.
Burada, staz kaynaklı trombozu fare modeli ve nasıl trombüsü formasyonu olmayan invaziv yüksek frekans ultrason kullanarak zaman içinde izlenebilir kullanarak trombüsü oluşumu izin iletişim kuralı anlatacağım.

<table><tbody><tr><td>6-0 perma-hand silk suture</td><td>Ethicon</td><td>706G</td><td></td></tr><tr><td>Surgical Scissors</td><td>Fine Science Tools</td><td>20830-00</td><td></td></tr><tr><td>Suture tying forceps</td><td>Fine Science Tools</td><td>20830-00</td><td></td></tr><tr><td>blunt forceps (straight and curved)</td><td>Fine Science Tools</td><td>20830-00</td><td></td></tr><tr><td>Needle Driver</td><td>Fine Science Tools</td><td>13002-10</td><td></td></tr><tr><td>Moria Spring Scissors</td><td>Fine Science Tools</td><td>15396-00</td><td></td></tr><tr><td>1ml syringes</td><td>BD Biosciences</td><td></td><td></td></tr><tr><td>26G needles</td><td>Becton Dickinson &amp;amp; Co.</td><td></td><td></td></tr><tr><td>VEVO 770 High Resolution Imaging System</td><td>Visualsonics</td><td>No longer sold</td><td></td></tr><tr><td>SR Buprenorphine</td><td>ZooPharm</td><td></td><td>Given to LDI by Vet</td></tr><tr><td>Surgery Microscope</td><td>Leica</td><td>Leica M651</td><td></td></tr><tr><td>Systan eye oinment</td><td>Alcon</td><td>288/28062-0</td><td></td></tr><tr><td>2x2 sterile Gauze</td><td>CDMV</td><td>#104148</td><td></td></tr><tr><td>Cotton Tip Applicators</td><td></td><td></td><td>from JGH</td></tr><tr><td>Transpore hypoallergenic surgical tape</td><td>CDMV</td><td>#7411</td><td></td></tr><tr><td>Ultrasound gel (Aquasonic-100)</td><td>Dufort &amp;amp; Lavigne</td><td>#AKEN4061</td><td></td></tr><tr><td>Incubator</td><td></td><td></td><td>From JGH</td></tr><tr><td>Isoflurane</td><td>Dispomed</td><td></td><td></td></tr><tr><td>Anesthetic chamber,hoses, and adminstration equipment</td><td>Dispomed</td><td></td><td></td></tr><tr><td>Hair remover</td><td>Nair</td><td></td><td></td></tr><tr><td>Water heated hard pad</td><td>Braintree Scientific, Inc.</td><td>#HHP-2</td><td></td></tr><tr><td>Gaymar heater water pump TP500</td><td>MATVET Inc.</td><td>#R-500305</td><td></td></tr><tr><td>Infra-red heating lamp</td><td>electrimat inc.</td><td>#1R175R-PAR</td><td></td></tr><tr><td>Mouse rectal temperature prope</td><td>emkaTECHNOLOGIES</td><td></td><td></td></tr><tr><td>Sterile water</td><td></td><td></td><td>From JGH</td></tr></tbody></table>

deep vein thrombosis induced by stasis in mice monitored by high frequency ultrasonography

Venöz tromboz nüfusun % 1-2 1 500 yıllık insidansı ile etkileyen yaygın bir durumdur. Venöz tromboz, pulmoner emboli veya sonuçlar sonrası trombotik sendromu, kronik bacak ağrı, şişlik ve ülserasyon ile karakterize veya önemli kronik kaynaklanan Kronik Pulmoner Hipertansiyon ölüme açabilir solunum uzlaşma. Bu en yaygın kardiyovasküler hastalık akut miyokard infarktüsü ve iskemik inme sonrası ve kanser, sistemik hastalığı, cerrahi ve büyük travma gibi diğer bozuklukları seyri karmaşık hale getirebilir gibi tüm tıp disiplinleri için klinik bir mücadeledir.
Deneysel modeller bu mekanizmaların çalışması gereklidir. Staz modeli tutarlı trombüsü boyutu ve trombüsü ölçülebilir miktarda neden olmaktadır. Ancak, sistematik olarak ligate yan dalları inferior vena kava trombüsü boyutları değişkenlik ve herhangi bir hatalı veri yorum önlemek için gereklidir. Ultrasonografi kullanarak trombüsü boyutunu ölçmek için non-invaziv bir yöntem geliştirdik. Bu tekniği kullanarak, biz trombüsü geliştirme ve çözünürlük zaman içinde aynı hayvan değerlendirebilir. Bu yaklaşım Venöz tromboz değiştirme, azaltma ve araştırma hayvanlarda arıtma prensibi ile tutarlı miktar için gerekli fare sayısını sınırlar. Ultrasonografi ile elde trombüsü ağırlık ve histolojik trombüsü boyut ilişkili ile ölçüm analizi göstermiştir. Bu nedenle, çalışmada Derin Ven Trombozu inferior vena kava Staz modelini kullanarak farelerde ikna etmek ve yüksek frekans ultrason kullanarak izlemek anlatılmaktadır.

Staz Venöz tromboz modeli
Staz modelindeki fareler anestezi ve inferior vena kava (IVC) ortaya çıkarmak için bir kesi yapılır. Sol veya sağ tarafına fare orta hat laparatomi ultrason sonda ile müdahale olmaz bir şekilde yerine belgili tanımlık kesme yapılır. Karın kasları ve cilt kat vardır geri IVC (şekil 1) ortaya çıkarmak için. İlk olarak, yan dallar bir 6-0...

Watch this Scientific Journal Video about Deep Vein Thrombosis Induced by Stasis in Mice Monitored by High Frequency Ultrasonography at JoVE.com

Deep Vein Thrombosis Induced by Stasis in Mice Monitored by High Frequency Ultrasonography

Mevcut Protokolü Venöz tromboz Staz modelini kullanarak elde etmek için gereken adımları açıklar. Buna ek olarak, biz trombüsü oluşumu ve çözünürlük zamanla ölçmek için non-invaziv bir yöntem kullanarak.

Derin Ven Trombozu Staz farelerde yüksek frekans Ultrasonografi tarafından izlenen tarafından indüklenen

Venous thrombosis is a common condition affecting 1 - 2% of the population, with an annual incidence of 1 in 500. Venous thrombosis can lead to death ...

deep-vein-thrombosis-induced-stasis-mice-monitored-high-frequency

Research

JoVE Journal

Immunology and Infection

9.8K Görüntüleme.  McGill University. Mevcut Protokolü Venöz tromboz Staz modelini kullanarak elde etmek için gereken adımları açıklar. Buna ek olarak, biz trombüsü oluşumu ve çözünürlük zamanla ölçmek için non-invaziv bir yöntem kullanarak.

Video: Deep Vein Thrombosis Induced by Stasis in Mice Monitored by High Frequency Ultrasonography

Electrolytic Inferior Vena Cava Model (EIM) of Venous Thrombosis

Animal models serve a vital role in deep venous thrombosis (DVT) research in order to study thrombus formation, thrombus resolution and to test potential therapeutic compounds (1). New compounds to be utilized in the treatment and prevention of DVT are currently being developed. The delivery of potential therapeutic antagonist compounds to an affected thrombosed vein has been problematic. In the context of therapeutic applications, a model that uses partial stasis and consistently generates thrombi within a major vein has been recently established. The Electrolytic Inferior vena cava Model (EIM) is mouse model of DVT that permits thrombus formation in the presence of continuous blood flow. This model allows therapeutic agents to be in contact with the thrombus in a dynamic fashion, and is more sensitive than other models of DVT (1). In addition, this thrombosis model closely simulates clinical situations of thrombus formation and is ideal to study venous endothelial cell activation, leukocyte migration, venous thrombogenesis, and to test therapeutic applications (1). The EIM model is technically simple, easily reproducible, creates consistent thrombi sizes and allows for a large sample (i.e. thrombus and vein wall) which is required for analytical purposes.

Electrolytic Inferior Vena Cava Model EIM of Venous Thrombosis

The electrolytic induction of endothelial activation to the internal surface of the Inferior Vena Cava results in venous type thrombus formation due to endothelial activation and partial blood stasis, two components of Virchow's triad.

Ven Trombozu Elektrolitik inferior vena kava Modeli (EIM)

Animal models serve a vital role in deep venous thrombosis (DVT) research in order to study thrombus formation, thrombus resolution and to test potential ...

Tıp

Mouse Complete Stasis Model of Inferior Vena Cava Thrombosis

Venous thromboembolism (VTE) includes both deep vein thrombosis (DVT) and pulmonary embolism (PE). In the United States (U.S.), the high morbidity and mortality rates make VTE a serious health concern 1-2. After heart disease and stroke, VTE is the third most common vascular disease 3. In the U.S. alone, there is an estimated 900,000 people affected each year, with 300,000 deaths occurring annually 3. A reliable in vivo animal model to study the mechanisms of this disease is necessary.
The advantages of using the mouse complete stasis model of inferior vena cava thrombosis are several. The mouse model allows for the administration of very small volumes of limited availability test agents, reducing costs dramatically. Most promising is the potential for mice with gene knockouts that allow specific inflammatory and coagulation factor functions to be delineated. Current molecular assays allow for the quantitation of vein wall, thrombus, whole blood, and plasma for assays. However, a major concern involving this model is the operative size constraints and the friability of the vessels. Also, due to the small IVC sample weight (mean 0.005 grams) it is necessary to increase animal numbers for accurate statistical analysis for tissue, thrombus, and blood assays such as real-time polymerase chain reaction (RT-PCR), western blot, enzyme-linked immunosorbent (ELISA), zymography, vein wall and thrombus cellular analysis, and whole blood and plasma assays 4-8.
The major disadvantage with the stasis model is that the lack of blood flow inhibits the maximal effect of administered systemic therapeutic agents on the thrombus and vein wall.

The mouse complete stasis model of inferior vena cava thrombosis yields quantifiable amounts of vein wall tissue and thrombus. It has proven useful for evaluating interactions between the vein wall and the occlusive thrombus and in assessing the progression from acute to chronic inflammation.

İnferior Vena Kava Trombozu Fare Komple Durağanlık Model

Venous thromboembolism (VTE) includes both deep vein thrombosis (DVT) and pulmonary embolism (PE).  In the United States (U.S.), the high morbidity and ...

Non-Invasive Ultrasound Assessment of Endometrial Cancer Progression in Pax8-Directed Deletion of the Tumor Suppressors Arid1a and Pten in Mice

Uterine cancers can be studied in mice due to the ease of handling and genetic manipulation in these models. However, these studies are often limited to assessing pathology post-mortem in animals euthanized at multiple time points in different cohorts, which increases the number of mice needed for a study. Imaging mice in longitudinal studies can track the progression of disease in individual animals, reducing the number of mice needed. Advances in ultrasound technology have allowed for the detection of micrometer-level changes in tissues. Ultrasound has been used to study follicle maturation in ovaries and xenograft growth but has not been applied to morphological changes in the mouse uterus. This protocol examines the juxtaposition of pathology with in vivo imaging comparisons in an induced endometrial cancer mouse model. The features observed by ultrasound were consistent with the degree of change seen by gross pathology and histology. Ultrasound was found to be highly predictive of the observed pathology, supporting the incorporation of ultrasonography into longitudinal studies of uterine diseases such as cancer in mice.

Non-Invasive Ultrasound Assessment of Endometrial Cancer Progression in Pax8-Directed Deletion of the Tumor Suppressors Arid1a and Pten in Mice

This protocol describes a method for monitoring the progression of morphological changes over time in the uterus in an inducible mouse model of endometrial cancer using ultrasound imaging with correlation to gross and histological changes.

Farelerde Tümör Baskılayıcıları Arid1a ve Pten'in Pax8'e Yönelik Delesyonunda Endometriyal Kanser Progresyonunun Non-İnvaziv Ultrason Değerlendirmesi

Uterine cancers can be studied in mice due to the ease of handling and genetic manipulation in these models. However, these studies are often limited to ...

Kanser Araştırmaları

Vasküler Klipsler Kullanılarak Bir Fare Kanser Modelinde Optimize Edilmiş Venöz Tromboz Testi

Venous Thrombosis Assay in a Mouse Model of Cancer

This methodology paper highlights the surgical nuances of a rodent model of venous thrombosis, specifically in the context of cancer-associated thrombosis (CAT). Deep venous thrombosis is a common complication in cancer survivors and can be potentially fatal. The current murine venous thrombosis models typically involve a complete or partial mechanical occlusion of the inferior vena cava (IVC) using a suture. This procedure induces a total or partial stasis of blood and endothelial damage, triggering thrombogenesis. The current models have limitations such as higher variability in clot weights, significant mortality rate, and prolonged learning curve. This report introduces surgical refinements using vascular clips to address some of these limitations. Using a syngeneic colon cancer xenograft mouse model, we employed customized vascular clips to ligate the infrarenal vena cava. These clips allow residual lip space similar to a 5-0 polypropylene suture after IVC ligations. Mice with the suture method served as controls. The vascular clip method resulted in a consistent reproducible partial vascular occlusion and greater clot weights with less variability than the suture method. The larger clot weights, greater clot mass, and clot to the IVC luminal surface area were expected due to the higher pressure profile of the vascular clips compared to a 6-0 polypropylene suture. The approach was validated by gray scale ultrasonography, which revealed consistently greater clot mass in the infrarenal vena cava with vascular clips compared to the suture method. These observations were further substantiated with the immunofluorescence staining. This study offers an improved method to generate a venous thrombosis model in mice, which can be employed to deepen the mechanistic understanding of CAT and in translational research such as drug discovery.

Yazar Spotlight: Kemirgen Modellerinde Kanserle İlişkili Tromboz Araştırmalarını İlerletmek 

This article aims to present an optimized method for assessing venous thrombosis in a mouse cancer model, using vascular clips to achieve venous ligation. Optimization minimizes variability in thrombosis-related measurements and enhances relevance to human cancer-associated venous thrombosis.

Bir Fare Kanser Modelinde Venöz Tromboz Testi

This methodology paper highlights the surgical nuances of a rodent model of venous thrombosis, specifically in the context of cancer-associated thrombosis ...

Stenosis of the Inferior Vena Cava: A Murine Model of Deep Vein Thrombosis

Deep vein thrombosis (DVT) and its devastating complication, pulmonary embolism, are a severe health problem with high mortality. Mechanisms of thrombus formation in veins remain obscure. Lack of mobility (e.g., after surgery or long-haul flights) is one of the main factors leading to DVT. The pathophysiological consequence of the lack of mobility is blood flow stagnation in venous valves. Here, a model is described that mimics such flow disturbance as a thrombosis-driving factor. In this model, partial flow restriction (stenosis) in the inferior vena cava (IVC) is created. Closure of about 90% of the IVC lumen for 48 h results in development of thrombi structurally similar to those in humans. The similarities are: i) most of the thrombus volume is red, i.e., consists of red blood cells and fibrin, ii) presence of a white part (lines of Zahn), iii) non-denuded endothelial monolayer, iv) elevated plasma D-Dimer levels, and v) possibility to prevent thrombosis by low molecular weight heparin. Limitations include variable size of thrombi and the fact that a certain percentage of wild-type mice (0 - 35%) may not produce a thrombus. In addition to visual observation and measurement, thrombi may be visualized by non-invasive technologies, such as ultrasonography, which allows for monitoring the dynamics of thrombus development. At shorter time points (1 - 6 h), intravital microscopy may be applied to directly observe events (e.g., recruitment of cells to the vessel wall) preceding thrombus formation. Use of this method by several teams around the world has made it possible to uncover basic mechanisms of DVT initiation and identify potential targets that might be beneficial for its prevention.

We describe here stenosis in the inferior vena cava as a murine model of deep vein thrombosis. This model recapitulates blood flow restriction, one of the major triggers of venous thrombosis in humans.

Inferior Vena kava stenozu: Derin Ven Trombozu fare modeli

Deep vein thrombosis (DVT) and its devastating complication, pulmonary embolism, are a severe health problem with high mortality. Mechanisms of thrombus ...

İmmünoloji ve Enfeksiyon

Murine Model of Central Venous Stenosis using Aortocaval Fistula with an Outflow Stenosis

Central venous stenosis is an important entity contributing to arteriovenous fistula (AVF) failure. A murine AVF model was modified to create a partial ligation of the inferior vena cava (IVC) in the outflow of the fistula, mimicking central venous stenosis. Technical aspects of this model are introduced. The aorta and IVC are exposed, following an abdominal incision. The infra-renal aorta and IVC are dissected for proximal clamping, and the distal aorta is exposed for puncture. The IVC at the midpoint between the left renal vein and the aortic bifurcation is carefully dissected to place an 8-0 suture beneath the IVC. After clamping the aorta and IVC, an AVF is created by puncturing the infra-renal aorta through both walls into the IVC with a 25 G needle, followed by ligating a 22 G intra-venous (IV) catheter and IVC together. The catheter is then removed, creating a reproducible venous stenosis without occlusion. The aorta and IVC are unclamped after confirming primary hemostasis. This novel model of central vein stenosis is easy to perform, reproducible, and will facilitate studies on AVF failure.

An aortocaval fistula was created by puncturing the murine infra-renal aorta through both walls into the inferior vena cava and was followed by creation of a stenosis in its outflow via partial ligation of the inferior vena cava. This reproducible model can be used to study central venous stenosis.

Bir outflow stenozu ile Aokaval fistül kullanarak Merkezi venöz stenozis murine modeli

Central venous stenosis is an important entity contributing to arteriovenous fistula (AVF) failure. A murine AVF model was modified to create a partial ...

Analysis of Cerebral Vasospasm in a Murine Model of Subarachnoid Hemorrhage with High Frequency Transcranial Duplex Ultrasound

Cerebral vasospasm that occurs in the weeks after subarachnoid hemorrhage, a type of hemorrhagic stroke, contributes to delayed cerebral ischemia. A problem encountered in experimental studies using murine models of SAH is that methods for in vivo monitoring of cerebral vasospasm in mice are lacking. Here, we demonstrate the application of high frequency ultrasound to perform transcranial Duplex sonography examinations on mice. Using the method, the internal carotid arteries (ICA) could be identified. The blood flow velocities in the intracranial ICAs were accelerated significantly after induction of SAH, while blood flow velocities in the extracranial ICAs remained low, indicating cerebral vasospasm. In conclusion, the method demonstrated here allows functional, noninvasive in vivo monitoring of cerebral vasospasm in a murine SAH model.

The aim of this manuscript is to present a sonography-based method that allows in vivo imaging of blood flow in cerebral arteries in mice. We demonstrate its application to determine changes in blood flow velocities associated with vasospasm in murine models of subarachnoid hemorrhage (SAH).

Yüksek Frekanslı Transkraniyal Dubleks Ultrason ile Subaraknoid Kanamanın Murine Modelinde Serebral Vazospazm Analizi

Cerebral vasospasm that occurs in the weeks after subarachnoid hemorrhage, a type of hemorrhagic stroke, contributes to delayed cerebral ischemia. A ...

Nörobilim

Multiphoton Intravital Imaging for Monitoring Leukocyte Recruitment during Arteriogenesis in a Murine Hindlimb Model

Arteriogenesis strongly depends on leukocyte and platelet recruitment to the perivascular space of growing collateral vessels. The standard approach for analyzing collateral arteries and leukocytes in arteriogenesis is ex vivo (immuno-) histological methodology. However, this technique does not allow the measurement of dynamic processes such as blood flow, shear stress, cell-cell interactions, and particle velocity. This paper presents a protocol to monitor in vivo processes in growing collateral arteries during arteriogenesis utilizing intravital imaging. The method described here is a reliable tool for dynamics measurement and offers a high-contrast analysis with minimal photo-cytotoxicity, provided by multiphoton excitation microscopy. Prior to analyzing growing collateral arteries, arteriogenesis was induced in the adductor muscle of mice by unilateral ligation of the femoral artery.
After the ligation, the preexisting collateral arteries started to grow due to increased shear stress. Twenty-four hours after surgery, the skin and subcutaneous fat above the collateral arteries were removed, constructing a pocket for further analyses. To visualize blood flow and immune cells during in vivo imaging, CD41-fluorescein isothiocyanate (FITC) (platelets) and CD45-phycoerythrin (PE) (leukocytes) antibodies were injected intravenously (i.v.) via a catheter placed in the tail vein of a mouse. This article introduces intravital multiphoton imaging as an alternative or in vivo complementation to the commonly used static ex vivo (immuno-) histological analyses to study processes relevant for arteriogenesis. In summary, this paper describes a novel and dynamic in vivo method to investigate immune cell trafficking, blood flow, and shear stress in a hindlimb model of arteriogenesis, which enhances evaluation possibilities notably.

The recruitment of leukocytes and platelets constitutes an essential component necessary for the effective growth of collateral arteries during arteriogenesis. Multiphoton microscopy is an efficient tool for tracking cell dynamics with high spatio-temporal resolution in vivo and less photo-toxicity to study leukocyte recruitment and extravasation during arteriogenesis.

Bir Murin Arka Bacak Modelinde Arteriyogenez Sırasında Lökosit Alımını İzlemek için Multifoton İntravital Görüntüleme

Arteriogenesis strongly depends on leukocyte and platelet recruitment to the perivascular space of growing collateral vessels. The standard approach for ...

Derin Ven Trombozu Staz farelerde yüksek frekans Ultrasonografi tarafından izlenen tarafından indüklenen

Özet

Daha Fazla Video Keşfet

Bu videodaki bölümler

Ven Trombozu Elektrolitik inferior vena kava Modeli (EIM)

İnferior Vena Kava Trombozu Fare Komple Durağanlık Model

Farelerde Tümör Baskılayıcıları Arid1a ve Pten'in Pax8'e Yönelik Delesyonunda Endometriyal Kanser Progresyonunun Non-İnvaziv Ultrason Değerlendirmesi

Bir Fare Kanser Modelinde Venöz Tromboz Testi

Bir Fare Kanser Modelinde Venöz Tromboz Testi

Bir Fare Kanser Modelinde Venöz Tromboz Testi

Inferior Vena kava stenozu: Derin Ven Trombozu fare modeli

Bir outflow stenozu ile Aokaval fistül kullanarak Merkezi venöz stenozis murine modeli

Yüksek Frekanslı Transkraniyal Dubleks Ultrason ile Subaraknoid Kanamanın Murine Modelinde Serebral Vazospazm Analizi

Bir Murin Arka Bacak Modelinde Arteriyogenez Sırasında Lökosit Alımını İzlemek için Multifoton İntravital Görüntüleme